Mi a PCR elemzés és a vírusterhelés?

Share Tweet Pin it

A polimeráz láncreakció (PCR) egy laboratóriumi módszer a DNS és RNS meghatározására. Az első alkalommal az amerikai Cary Mullis csaknem fél évszázaddal ezelőtt tesztelte. Ez a túlérzékenységi vizsgálat képes meghatározni a genom hordozóját a vérben, nyálban vagy bőrben található egyik forrásmolekulából.

A PCR-módszer nagyszerű kilátásokkal rendelkezik, nemcsak az orvostudományban, hanem a géntechnológiában és a kriminalisztika területén is. Segítségével klónokat hoznak létre és új típusú DNS-eket hoznak létre, meghatározzák a rokonság mértékét. A bűncselekményen talált epitéliumon bűncselekményt hozzon létre.

A hepatitis PCR elemzése - mi ez és miért csinálják?

Miért szükséges a PCR elemzés a hepatitis C gyanúja esetén, mi ez?

Hepatitis C vírus - Vírust tartalmazó RNS 6 genotípust és legfeljebb 500 altípust tartalmaz. A májgyulladás közül a vírusnak van a legmagasabb mutációs képessége, és leküzdeni az immunrendszer védő gátját. A hepatitis esetek összes számából a C-vírus okozta a krónikus esetek 70% -át és a májcukor és májrák 30% -át.

A módszer lényege: a vizsgált génnek a speciális enzimek és körülmények hatására történő kiváltására egy tesztcsőben van szükség. A PCR analízis lehetővé teszi a vírus törzsének meghatározását, amely nélkül nem lehet hatékony kezelést végrehajtani: minden genotípus másképpen érzékeny az antivirális szerekre. Kétféle PCR létezik:

A vírusellenes terápia folyamatos ellenőrzést igényel a kezelés megfelelő időben történő kijavítása érdekében, polimeráz láncreakciót is alkalmaznak erre a célra.

Minőségi és mennyiségi PCR

PCR kvalitatív a hepatitis C-re adott válasz: van-e a vírus C-törzse a beteg vérében, és melyik. A genotipizálás szükséges a betegség diagnózisának, prognózisának tisztázásához és a kezelés időzítésének meghatározásához.

Az elfogadott osztályozás szerint a gént egy szám jelöli, és az altípust egy kis latin betű jelöli.

A természetes anyagokon alapuló speciális gyógyszer

A gyógyszer ára

Visszajelzés a kezelésről

Az első eredmények egy hét múlva érkeznek

További információ a készítményről

Naponta egyszer, 3 cseppenként

Használati utasítások

A C vírus genotípusai táblázatának dekódolása:

  • Az 1a, 1b, 1c genotípus
  • 2a, 2b, 2c, 2d genotípus
  • A 3a, 3b, 3c, 3d, 3e, 3f genotípus
  • 4a, 4b, 4c, 4d, 4e, 4f, 4g, 4h, 4j, 4j genotípus
  • Genotípus 5 a
  • Genotípus 6 a

A leggyakoribb genotípusok 1,2,3. Oroszországban a vírus 1a, 1b, 2 és 3 törzsei.

Az 1b vírus genotípusa nehezebb kezelni, mint mások, 90% -ában krónikus formába juttat, amelyből 30% regenerálódik a máj daganatos vagy májzsugorodásaként.

A 2a és 3a genotípusok 33-50% -os fokú chronizációs fokkal reagálnak az antivirális terápiára.

A vírus jelenlétének igazolásakor a PCR-t számszerűsíteni kell a hepatitis C-re, amely kiszámítja az RNS-molekulák számát a beteg laboratóriumi mintájában.

Az elemzés magyarázata

Minőségi PCR az elemzésnek két válasza van:

PCR negatív azt jelenti, hogy a kórokozót a vérmintákban nem észlelik.
pozitív a válasz az ellenkezőjét sugallja: a vírus egyik vagy másik genotípusának RNS-je.

Az eredmény megbízhatóságának valószínűsége 95%. A fennmaradó 5% hiba az ember hibája miatt. Ez a lehetőség a kutatás elvégzésének magas követelményei miatt megengedett:

  • a reagensek tárolására vonatkozó szabályok;
  • az orvosi személyzet megfelelő képzettsége;
  • a bioméret tisztasága.

A PCR készlet 100% -os diagnosztikai pontossággal rendelkezik.

Kvantitatív PCR A hepatitis C RNS-je lehetővé teszi a vírus terhelésének meghatározását a páciens testén. Használata:

  • a betegség állapota (akut, krónikus);
  • meghatározzák az antivirális kezelés hatékonyságát;
  • a májbiopszia szükségességét tisztázzák.

Bizonyos esetekben a beteg nem érez semmi jelét a betegségről, míg a PCR módszere HCV-fertőzést mutat. Ez azt jelenti, hogy a betegség a fejlődés korai szakaszában vagy krónikus formában van. A diagnózis tisztázása érdekében több kutatásra van szükség a vírusellenes kezelés lehető legrövidebb időn belül történő elindításához.

Vírusterhelés a hepatitis C-ben

A vírus terhelés mutatja a máj vírus aktivitását, milyen mértékben aktív a reprodukciója.

Mi ez?

A mennyiségi hepatitis C PCR-t Nemzetközi Egységben mérjük ml / IU / ml-enként, ami azt jelenti, hogy a C-vírus egy adott törzsének ribonukleinsavának hány példányát 1 ml vizsgálati vérben találtuk.

Mi tekinthető magasnak, milyen alacsony?

A vírusterhelés elemzése lehetővé teszi a vírus RNS jelenlétét 50 NE / ml koncentrációban. A vírus terhelése normális - ebben az esetben nem mutatható ki egyetlen HCV RNS molekula sem PCR-rel.

Vírus terhelés táblázat:

  • alacsony koncentráció 600 NE / ml 3 * 104 NE / ml;
  • átlagos - koncentráció 3 * 104 NE / ml-től 8 * 105Mm-ig;
  • Magas - több mint 8 * 105 NE / ml.

Alacsony vírus terhelés - ez jelzi, hogy a terápiás kezelés helyesen van megválasztva, és a hepatitis C gyógyulásának prognózisa kedvező.

Nagy koncentrációjú vírusos sejtek azt jelzi, hogy a betegség akut fázisban van. A páciens vér veszélyes fertőzésforrás.

A vírusterhelés, amelynek mutatói átlagos szinten jellemzik a melegvíz krónikus szakaszát, vagy két fejlődési tendenciája lehet: növelni vagy csökkenteni.

A végén - 6 hónap alatt ellenőrzési PCR-t végzünk.

A PCR-diagnosztika költsége

A következő tünetek aggodalomra adhatnak okot:

  • általános gyengeség;
  • a bőrszín megváltozása, a szem sclera, a mentesítés;
  • hányinger;
  • csökkent étvágy;
  • fájdalom az izmokban és az ízületekben;
  • súlyos a jó hipokondriumban;
  • emelkedett AST és ALT vérszintje.

A fertőzött betegekkel való érintkezés során a preoperatív periódus alatt a hemodialízis vizsgálatra is ajánlott.

Az állami klinikák vérvizsgálatot végeznek a PCR ingyenesen, ha fertőzéses betegségre vagy hepatológushoz fordulnak.

A PCR-diagnosztikára fizetett szolgáltatások minden nagyobb orosz városban rendelkezésre állnak. A költség függ a teszt típusától, az elérhető berendezésektől, az időzítéstől és egyéb tényezőktől.

A kvalitatív PCR elemzés Moszkvában és Szentpéterváron 600 és 900 rubel között lesz. A régiókban - 300-800 rubel.

A hepatitis C virális terhelés meghatározása 17,000-22,000 rubel lesz. Egyéb fertőzéstípusok esetében a mennyiségi vizsgálat ára 1200-10000 rub.

A PCR módszer előnyei és hátrányai

Milyen előnyei vannak a polimeráz láncreakciónak más diagnosztikai módszerekkel szemben?

  1. Széleskörű alkalmazások. A PCR használatával szabványos berendezés segítségével bármilyen vírust azonosíthat.
  2. A kórokozó kimutatásának pontossága. Az enzimek és analitikai módszerek különböző kombinációi alkalmazásával a megjelölt fertőzés 100% -os specifikus vizsgálata valósul meg.
  3. Nagy érzékenység. A technika lehetővé teszi a vírus egy molekula jelenlétének kimutatását a vérben.
  4. hatékonyság. Minőségi elemzés készen áll néhány óra alatt, mennyiségi - két nap múlva.
  5. A vírus diagnózisa az inkubációs időszakban. A PCR-ben a kórokozót nem az antitestek jelenléte határozza meg, hanem akkor is, ha már létezik a szervezet immunválasztja, de a kóros folyamat kezdete előtt, ami megkönnyíti a kezelést.

A PCR hátrányai az előnyei:

  • A vizsgálat tisztasága a legmagasabb tisztaságot igényli, beleértve a levegőt a laboratóriumban, úgyhogy "idegen" DNS nem lép be a mintába;
  • magas személyzeti követelmények, a bioméret mintavételének és elemzésének elvégzése.

A hepatitis PCR elemzése

PCR ON HEPATITIS C

  1. A hepatitis C RNS-je ( „PCR-minőség”) - a felismerés az elemzés során a vér a bizonyíték az akut vagy krónikus hepatitis C határozzuk meg a 2. hét a fertőzés, jelenik meg, mielőtt az anti-HCV, amely lehetővé teszi, hogy diagnosztizálják a betegség korai szakaszában. Meghatározása RNS betegeken végzett klinikai akut hepatitis B és a betegek pozitív teszt hepatitis.
  2. A hepatitis C RNS-je ("PCR quantitative") - vírus terhelés - az antivirális terápia hatékonyságának egyik mutatója és annak értékelése (a kezdeti érték szintjének megváltoztatásával). A hepatitis C RNS tartalmának mennyiségi jellemzése fontos az antivirális terápia hatékonyságának értékeléséhez, és prognosztikai jelentőséggel bír a krónikus állapot meghatározásához. A magas vírus terhelésnek kitett betegek (nagy mennyiségű RNS) a kezelés előtt rosszabbul reagálnak a kezelésre.
  3. A hepatitis C RNS (1., 2., 3. genotípus) - A kezelés típusa függ a típusától és hatékonyságától. Az 1. genotípus vírus által okozott betegség a legkedvezőtlenebb a terápia hatékonyságának prognózisa szempontjából. A jelenlegi ajánlások szerint a vírusellenes kezelés megkezdése előtt vérvizsgálatot kell végezni a hepatitis C genotipizálására.
  4. HCV-RNS (kiterjesztett genotipizálás 1a, 1b, 2, 3a, 4, 5, 6) - Oroszország területén 1a, 1b, 2a, 2c, 2k, 3a altípusokat keringenek. Az 1. és 4. genotípus vírus által okozott hepatitis C a prognózissal szemben a legkedvezőtlenebb.
  5. Ultraszűrő PCR hepatitis C-re (kvalitatív módszer) - analízist alkalmazunk diagnosztizálni a betegséget a fertőzés korai szakaszában optimális vizsgálati vér és értékelése válasz antivirális kezelést. Ez a tanulmány akkor is, ha nem észlelt ellenanyagokat hepatitis C, ajánlott, hogy végezzen májbetegségben szenvedő betegeknél meghatározatlan okok miatt, c szerzett immunhiányos, vagy immunszuppresszív terápiában részesülő.
  6. Ultraszűrő PCR hepatitis C-hez (kvantitatív módszer) - egyedülálló analízis nagy érzékenységgel (10 NE / ml) a hepatitis C vírus RNS mennyiségi meghatározására. A tanulmány a terápia hatékonyságának monitorozására szolgál.

PCR ON HEPATITIS B

  1. Hepatitis B DNS (minőségi analízis) - a hepatitis B vírus reprodukciójának indexe, először a fertőzést követő 1 hónapban átlagosan először a vérben jelenik meg. Bizonyos esetekben ez a latens HBV fertőzés egyetlen markerje. Meghatározása vírus DNS diagnosztizálni hepatitis B okozta mutáns törzsek, amelyekben más markerek nem észlelt fertőzéseket.
  2. Hepatitis B DNS (kvantitatív analízis) - A DNS koncentrációját (vírusterhelés) - az egyik vizsgálatokban, hogy meghatározzuk a szakaszában a krónikus hepatitisz B és az eredményesség kritériuma az antivirális terápia. Az elemzést a kezelés előtt és alatt végezzük.
  3. A hepatitis B genotipizálása - a vírus különböző genotípusai által okozott betegségek eltérhetnek a klinikai folyamatban és a kimenetelben. A C genotípusú vírus által okozott Hepatitis B gyakran krónikusan kezel, és nagy a kockázata a máj vagy májsejtes karcinóma cirrhosisának. Az A genotípusú vírussal fertőzött betegek jobban reagálnak a kezelésre.
  4. A hepatitis B ultrahangos DNS-PCR (kvalitatív módszer) - lemondja őket a betegség korai felismerésére. Nagyon informatív a donorvér vizsgálatában. A vírus spontán vagy kezelés által kiváltott eltávolításának megerősítésére alkalmazható az emberi szervezetből.
  5. Ultraszűrő PCR hepatitis C-hez (kvantitatív módszer) - mennyiségi szempontból a hepatitis B vírus DNS diagnózisa. Az elemzés a terápia hatékonyságának értékelésére szolgál.
  6. A vírusellenes szerekkel szembeni rezisztencia mutációinak meghatározása lamivudin, telbivudin, entekavir, adefovir, tenofovir (együtt adva a "hepatitis B kvantitatív DNS" analízisével). Az analízis átadásához a krónikus hepatitis B-ben szenvedő betegeknek szükséges a vírusellenes terápia megkezdése és a gyógyszerek beadása előtt. Az eredmény tájékoztatást nyújt a vírusölő gyógyszerek hepatitis B vírus ellenállásának elérhetőségéről:
    • R - a vírus rezisztens a vírusellenes hatóanyaggal szemben (ennek a gyógyszernek az ellenállóképességét mutatták ki);
    • S - a hepatitis B vírus érzékeny a gyógyszerre (a norális értéket, az ellenállás mutációit nem észlelik);
    • I - a fertőzés kórokozója ellenállhat a gyógyszerrel szemben.

PCR diagnosztika használata

A polimeráz láncreakciót (PCR) a molekuláris biológiában a víruskeresés kísérleti módszerének nevezik. Lehetővé teszi a nukleinsav (DNS) bizonyos fragmenseinek koncentrációjának jelentős növelését a biológiai anyag mintáiban, ami lehetővé teszi számukra a felismerés és számlálást.

Az elemzés az alábbiak szerint történik. A genetikai anyagot (vérmintát), amely potenciálisan tartalmazhatja a kívánt gént, egy kémcsőbe kerül. Ezenkívül a primereket a kémiai úton szintetizáltuk a kívánt gén kis hosszán.

A DNS-hez vagy RNS-polimerázt is hozzáadják az edényhez, képes egy olyan nukleinsavláncot létrehozni, amely teljesen azonos az eredetivel. A kapott kompozícióba négy szabad nukleotidot, egy RNS-hez vagy DNS-hez speciális építőanyagot helyezünk, amelyek közül az egyik a foszfor radioaktív részecskéit tartalmazza.

A kapott elegyet 95-96 ° C-ra melegítjük, aminek következtében a szokásos állapotban összefonódott két DNS-helikát feloldjuk. Ezután a készítményt lehűtjük, ebben az időben a primerek a vírusgenom kívánt régiójához kötődnek anélkül, hogy az RNS (vagy DNS) kettős hélixet állítana elő ismét.

Hűtés közben a polimeráz egy nukleotidok szabad láncolatát keresi. Ennek az enzimnek a működéséhez egyetlen lánc nukleotidra van szükség. Mivel a polimeráz a DNS-szalag mentén csúszik (mint egy gyűrű egy kötélen), nem működhet kettős spirállal.

Ezután ismétlődő ciklusú melegítést végzünk, ami miatt a nukleotidláncokat elválasztjuk. Mindegyik PCR ciklus esetében a mintában lévő kívánt hepatitis gén mennyisége növekszik a geometriai progresszióban, és a genetikai anyag többi része lineárisan keletkezik.

A nukleotidmaradékok oldatának tisztítása és a DNS-szálak elektroforézissel történő molekulasúly-paraméterével történő elválasztása után könnyen meghatározható, hogy a kívánt gén létezik-e a vizsgálati mintában, vagy sem.

A PCR előnyei

A PCR módszerrel végzett laboratóriumi vizsgálat lehetővé teszi, hogy még több információt szerezzen, mint az RNS vírus jelenlétét. A radioaktív sugárzás szintjének meghatározásakor meghatározható, hogy a vizsgált mintában mely genetikai anyagot kezdetben tartalmaznak. Hepatitis esetén határozza meg a vírusterhelés szintjét.

Ennek a módszernek egy másik előnye a CR reakció nagyon nagy érzékenysége. Sokkal magasabb, mint a vírusok észlelésének klasszikus módszerei. Ideális esetben a kívánt gén azonosítása céljából csak egy mintában lévő vírus elegendő a PCR-hez.

Emellett a PCR teljesen specifikus. A primereket olyan módon hozták létre, hogy teljesen megfeleljenek a kívánt gének egyedülálló részeinek, amelyeknek nincs más szekvenciája. Mindkét ujjlenyomat egyedülálló, és minden génben egyedi nukleotidszekvenciák vannak.

Minõségi PCR analízis

A kvalitatív analízis csak a vírus jelenlétét mutatja a vérben. Ezt a vizsgálatot minden olyan betegnél el kell végezni, akikről kimutatták, hogy vérükben a hepatitis C elleni antitestek eredményei csak két érték közül választhatnak: "észleltek" vagy "nem észleltek". Egészséges ember esetében a normát (referenciaérték) "nem szabad észlelni".

Az elvégzett kvalitatív kutatás ilyen eredményeinek speciális értelmezése is van:

  • Az eredmény "felfedezett". Ez azt jelenti, hogy a mintában a biológiai anyagot hozott találtak egy olyan RNS-fragmens, amely specifikus a hepatitis C-vírus Következésképpen, ott van a tény, a beteg hepatitis B vírus fertőzés C. Ha az eredmény a kvalitatív PCR „felfedezte”, ez azt jelzi, hogy a vírus ismétlésben és ebben az időben új májsejteket fertőz meg a szervezetben.
  • Az eredmény "nem észlelhető". Az ilyen döntés azt jelzi, hogy a mintában a biológiai anyag kapott RNS-fragmentum nem mutatható ki a laboratóriumban, amely specifikus vagy HCV RNS azonos koncentrációban a patogén fertőzés a mintában határ alatt volt az a teszt érzékenységét.

A hepatitis C vírus RNS akut fázisában a PCR technikát alkalmazó kvalitatív vizsgálatok 1-2 hét után azonnal felfedezhetik a szervezet fertőzését, vagyis röviddel a hepatitis elleni antitestek megjelenését megelőzően.

Az ilyen vizsgálatok analízisének megbízhatatlan eredményei a következőkkel érhetők el:

  • szennyezett biomassza;
  • heparin jelenléte a beteg vérében;
  • a mintában lévő vegyi vagy fehérjeanyagok (inhibitorok) jelenléte, amelyek befolyásolják a PCR különböző komponenseit.

A PCR minőségi analíziséhez nem szükséges a beteg speciális preparálása a vizsgálat elvégzéséhez. A vénás vért anyagként használják.

Az eredmények értékelése

A kvalitatív PCR-tesztek bizonyos fokú érzékenységgel rendelkeznek, és a laboratóriumi pontosságtól és a laboratóriumi felszerelés mértékétől függően 10 és 500 NE / ml között változhatnak.

Ez azt jelenti, hogy ha a vírus a vérmintában nagyon alacsony koncentrációban van jelen (kevesebb, mint az adott laboratórium érzékenységi küszöbe), akkor a beteg páciensét "nem detektálják". Ennek következtében, ha minőségi PCR-elemzést végeznek alacsony vírusszinttel (vírus alacsony koncentrációja), például antivirális terápiában részesülő betegeknél, nagyon fontos tudni a diagnosztikai rendszer érzékenységi küszöbét.

Diagnosztikai rendszerek változatai

A virológiai válasz szabályozására ajánlott az antivirális kezelés legalább 50 NE / ml érzékenységi küszöbértékű diagnosztikai rendszerek alkalmazása. Ezek a kritériumok teljesülnek, például: Cobas Ampicolor VGS-teszt elemzők (50 IU / ml pontossággal), valamint RealBest HCV RNS (15 IU / ml érzékenységgel).

A WHO szerint ajánlásokat létrehozó végleges diagnózist a hepatitis C, meg kell kizárólag alapján hármas kimutatására RNS-vírus szérummintákon szenvedő beteg nincs más hepatitis marker faj.

A PCR-eljárások mellett TMA-vizsgálatot (transzkripciós amplifikációs módszert) is alkalmaznak HCV RNS kimutatására betegekben. A legjobb érzékenység küszöbérték (5-10 NE / ml), de hazánkban ez a tesztelési módszer még nem túl gyakori.

A vírusok észlelt módosításainak hatóköre

Ez a kvalitatív meghatározás a hepatitis C vírus RNS jelenlétében szérumban lehetővé teszi számos vírus genotípusának meghatározását. Jelenleg a tudomány több mint hat genotípust ismeri a vírusról, valamint a betegség mintegy 10 altípusairól.

Az 1, 2, 3 genotípusú vírusok gyakoriak országunkban. Laboratories képes észlelni a következő genotípusok: 1a, 1b, 2a, 2b és 2c és 3, 4, 5a és 6. függetlenül altípus. Minden vírusmódosítás esetében a detektálás sajátossága 100%.

PCR mennyiségi elemzése

Kvantitatív PCR-teszt segítségével megállapítják a vérminták hepatitis vírusának koncentrációját (vírus terhelés). Ez a viremia-teszt (a vírus koncentrációja) lehetővé teszi egy meghatározott genetikai anyag (a leginkább vírusos RNS) egységek számának meghatározását, amelyet egy bizonyos mennyiségben észlelnek. Ebben az esetben határozza meg a koncentrációját 1 ml-ben, ami megfelel 1 cu. cm.

Az analízis mennyiségi paramétereit számokban fejezzük ki, ezt a mérést nemzetközi egységegységként (IU) milliliterenként (ml), ME / ml-ként jelöljük. Néhány laboratóriumban a vírus mennyisége más egységekben is meghatározható: a példányok számát ml-enként, másolatként / ml-nek.

  • Időzítés A hepatitis C esetében a PCR ilyen kvantitatív analízise a terápia megkezdése előtt történik. Aztán az 1., 4., 12. és 24. hetet. A 12. héten végzett értékelés indikatív, lehetővé teszi a terápia hatékonyságának meghatározását.
  • Elemzés előkészítése. A PCR mennyiségi elemzéséhez nem szükséges a beteg speciális felkészítése a vizsgálathoz. A mintavétel előtt fél órával nem szabad dohányozni. Vénás vért használnak laboratóriumi anyagként.

Az eredmények értékelése

Különböző laboratóriumi vizsgálati rendszerek esetében ez a mutató különböző konverziós tényezőket mutat be IU / ml-ben. Átlagosan egy konverziós paramétert alkalmaznak, amelyben 4 kópia / ml = 1 NE / ml. Ez például, ha a laboratórium 2,4 * 10 6 kópia / ml PCR-analízist eredményez, akkor ezt a paramétert 4-gyel kell osztani, és 6 * 10 5 NE / ml-t kapunk.

A 800 000 NE / ml magas terhelési szint magasnak tekinthető, ami megközelítőleg 3 000 000 példány / ml index. Az alacsony viremia egyes szerzők szerint a kvantitatív PCR 400 000 NE / ml alatti paramétereinek felel meg.

A kvantitatív teszt eredményeként a végeredmény nem digitális érték formájában jeleníthető meg, hanem: "a mérési tartomány alatt" vagy "nem detektálható".

  • Értékelés: "a mérési tartomány alatt". Ez azt jelzi, hogy a mennyiségi vizsgálat nem tudta kimutatni a hepatitis C virális RNS-t, de maga a vírus igen kis koncentrációban jelen van a szervezetben. Ezt egy további kvalitatív vizsgálat is jelzi, amely igazolja a vírus jelenlétének tényét.
  • Értékelés: "nem észlelt". Ez az eredmény azt jelzi, hogy a mennyiségi vizsgálat nem észlelt vírust az RNS mintában.

A vírusterhelés paramétere elsősorban a betegség fertőzőképességének mértékét, a beteg fertőzőképességének mértékét határozza meg. Minél magasabb a páciens koncentrációja a vírusnak, annál nagyobb a valószínűsége annak, hogy más emberekre átruházzák. Például, amikor szexuális kapcsolatban áll egy beteg vagy egy függőleges út. Az ilyen mennyiségi mutató segít a páciens kezelésének hatékonyságának meghatározásában.

A PCC mennyiségi elemzésének elvégzése fontos az antivirális terápiához, értékeli sikerét és ütemezi a tanfolyam időtartamát. Tehát a test gyors reakciója a kezelés és alacsony mértékű viremia esetén a terápia időtartama csökkenthető.

A mennyiségi PCR paraméter lassú csökkenésével az antivirális terápiát ki kell terjeszteni vagy módosítani. Ha a vírusterhelés szintje alacsony, akkor ez a terápia kedvező tényezője, ha magas, akkor az alkalmazott kezelési módszer hatástalan, és a gyógyszereknek vagy azok használatának módszereit módosítani kell.

PCR-vizsgálat a hepatitis C-re: típusok, indikációk, átirat

A vírusos hepatitis C súlyos betegség, amely májkárosodással jár. A betegek nyolcvan százalékában krónikus formában jár. A vírus szaporodik a májsejtekben - májsejtekben - és halálát okozza. A halott szövetet kötőszöveti foci váltja fel, a fibrózis kialakul.

A fejlesztés a máj fibrózis képtelen ellátni a funkcióját, kezdődik cirrhosis, ami veszélyes szövődményei: egyre nagyobb nyomás nehezedik a kapuvénában, gyomor-bélrendszeri vérzés, károsodott véralvadás mentális változások miatt kárt agyi magok mérgező termékeket.

A betegség oka a Flaviviridae családból származó vírusfertőzés, amely RNS-vírus egy típusa. Ez azt jelenti, hogy a genetikai anyag, amellyel a patogén fehérjéit szintetizálják, egy ribonukleinsav molekulában kódoljuk. A fertőzés a vérben, szexuális úton történik, és terhes nőtől a magzatig. Sajnos a fertőzés és az antitestek termelésének kezdete meglehetősen nagy mennyiségű időtartamot eredményezhet - két hétről hat hónapra. Ez nem teszi lehetővé a fertőzés meghatározását az enzim immunvizsgálat módszerével és a kezdeti kezelést a korai stádiumban.

Mi a PCR elemzés?

A PCR molekuláris analízis olyan módszere, amely lehetővé teszi a kórokozó genetikai anyagának kimutatását a fertőzés utáni első héten polimeráz láncreakcióval. A tanulmány nagyfokú specifitást, pontosságot és nem csak a vírus jelenlétének vagy hiányának meghatározását, hanem koncentrációját és genotípusát is meghatározza.

A vizsgálat elvégzéséhez vegye be a páciens vérét, amelyben potenciálisan megtalálható a vírus RNS-je. A vérben a primereket hozzáadjuk mesterségesen szintetizált részecskékhez, a kívánt gén kis hossza, és az RNS polimeráz egy speciális enzim, amely sokszorozza a kórokozó genetikai anyagának mennyiségét. Egy speciális berendezés segítségével több fűtési és hűtési ciklust hajtanak végre. Az anyagot ezután elemezzük és összehasonlítjuk az ismert vírusgénekkel, amelyek alapján következtetés születik a fertőzés jelenlétéről vagy hiányáról.

A hepatitis C PCR analízis típusai

A PCR-elemzés három típusa létezik:

  1. Minõségi PCR analízis. A tanulmány első szakasza. Lehetővé teszi a vírus genetikai anyagának azonosítását a vérben.

  • PCR mennyiségi elemzése. Lehetővé teszi a vírus terhelésének meghatározását - a patogén genetikai anyagának koncentrációját egy milliliter vérben. Ezt a vizsgálatot a terápia megkezdése előtt végezzük, majd az első, negyedik, tizenkettedik és (ha a tanfolyam hosszú) a kezelés huszonnegyedik hete annak hatékonyságának értékelésére.

  • genotipizáláshoz. A hepatitis C kórokozója gyakran és gyorsan mutál. A bolygón a vírus genotípusának hét variánsát találtam. Oroszországban az első, a második és a harmadik típus gyakori. A genotípusok mindegyike eltérő terápiás ellenállással rendelkezik, például az első típusú kezelés hatékonysága hatvan százalék, a második és a harmadik pedig nyolcvanöt. Ezért megfelelő gyógyszerek kiválasztása és megfelelő időtartamú kezelési eljárás meghatározása érdekében pontosan meg kell határozni, hogy a beteg milyen típusú vírussal fertőzött.
  • Javallatok a hepatitis C PCR analízishez

    PCR-vizsgálatot írnak elő a következő esetekben:

    • érintkezés egy beteg emberrel, ami fertőzéshez vezethet;
    • pozitív enzimkapcsolt immunvizsgálat;
    • a májcirrózis jelei: a májméret megváltozása, a megnagyobbodott lép, a szubkután vénás plexus megjelenése a hasra;
    • a májkárosodás tüneteinek megjelenése: fájdalom a hasüreg jobb oldalán, a bőr sárgulása;
    • az ALT és az AST fokozott aktivitása a biokémiai vérvizsgálatban;
    • a kezelés megkezdése előtt a vírusterhelés meghatározására;
    • az antivirális terápia hatékonyságának monitorozása;
    • a kezelés befejezése után a relapszus nyomon követése;
    • a diagnosztizált hepatitisz B jelenlétében, kizárva a vegyes májkárosodást.

    A hepatitis C PCR-vizsgálat dekódolása

    A hepatitis C-re vonatkozó PCR-analízis és enzim immunvizsgálat dekódolását egy hepatológus vagy fertőző betegség szakembernek kell foglalkoznia. A PCR eredményeinek elemzése biokémiai vérvizsgálattal, biopsziával és ultrahanggal kombinálva szükséges. Csak szakképzett orvos képes lesz elemezni a vizsgálatok eredményeit, és ezek alapján meghatározza a megfelelő kezelést.

    Minőségi elemzés dekódolása.

    A kórokozó genetikai anyagát az elemzett biológiai anyag tartalmazza. A fertőzés megerősítést nyert.

    Nincs fertőzés, vagy a patogén RNS mennyisége az érzékenységi határ alatt van.

    Kvantitatív elemzés dekódolása.

    Egészséges emberek számára normális szám. Ez azt jelenti, hogy nincs a hepatitis C RNS a vizsgálati anyagban, vagy koncentrációja a vizsgálat érzékenységi küszöb alatt van.

    Az RNS koncentrációja a mennyiségi tartomány alatt van. Az ilyen eredményeket nagyon óvatosan értelmezik, korrelálják más tanulmányok adataival, gyakran végeznek egy második vizsgálatot.

    A vírusterhelés szintje egy adott koncentrációban alacsony. Általában a vírus mennyiségének csökkenése azt jelenti, hogy a kezelés sikeres.

    Több mint 8 * 10 ^ 5 NE / ml

    A vírusterhelés szintje egy adott koncentrációban magasnak tekinthető.

    Több mint 2,4 * 10 ^ 7 NE / ml

    Az RNS mennyisége meghaladja a számszerűsítés tartományának felső határát. Lehetséges következtetéseket levonni a vírusterhelés mértéke miatt. Általában ilyen esetekben a tesztet megismétlik a vérminta hígításával.

    A genotipizálás dekódolása.

    Egy adott genotípus RNS-ét detektáltuk

    A biomateriában a hepatitisz C vírust kimutatják egy adott genotípus és altípus. Az eredmény latin számokkal és latin betűkkel van kódolva, például - 1a, 2b. Jelenleg hét genotípus és hatvanhét altípus van, de Oroszországban csak három első típus van.

    Hepatitis C vírus RNS-t detektáltunk

    A vérben az RNS egy ritka genotípust talál Oroszország számára, amely nem tulajdonítható az első, második vagy harmadik típusnak. Több kutatásra van szükség.

    Ez az eredmény azt jelzi, hogy a beteg egészséges vagy a kórokozó RNS szintje túl kicsi.

    Lehetséges a helyzet, ha a hepatitis C PCR-analízise negatív, és az enzim immunvizsgálat kimutatja a vírus ellenes antitesteket. Ez azt jelenti, hogy a beteg acut formában hepatitis C-t kapott és meggyógyult. Körülbelül húsz fertőzés esedékessé teszi a spontán gyógyulást, ha a páciens testének elegendő rezisztenciája van a fertőzésre.

    Annak ellenére, hogy a PCR nagyon pontos elemzés, annak eredménye az alábbi esetekben torzulhat:

    • a vért nem megfelelő körülmények között a laboratóriumba szállították, a hőmérsékleti rendszert megsértették;
    • a bioméret mintája szennyezett;
    • a vérben maradt nyomokban a heparin és más antikoagulánsok;
    • A vizsgált anyagban gátlók voltak - olyan anyagok, amelyek lassítják vagy leállítják a polimeráz láncreakciót.

    A PCR előnyei más módszerekkel szemben

    1. Diagnózis a korai szakaszban. A PCR detektálja a betegség kórokozójának genetikai anyagát. Az immunfluoreszcencia analízis segítségével csak immunglobulinokat lehet meghatározni, amelyeket a szervezet a fertőzésre adott válaszként termel. Hepatitis C fertőzés esetén a fertőzés és az immunválasz kialakulása között eltelt idő több hét és hónap lehet, mely időpontban az ELISA hatástalanná válik. A PCR már a fertőzés utáni első héten ad választ.

  • Alacsony hibalehetőség. A vizsgált anyagban meghatározzuk a genetikai anyagot, amely csak egyfajta kórokozóra jellemző. Ez lehetővé teszi a hamis eredmények kizárását. Az ELISA-val hibák léphetnek fel, mivel ugyanazok az antitestek felszabadulhatnak különböző vírusok ellen - ilyen antitesteket keresztreaktivitásnak neveznek.

  • Nagy érzékenység. A PCR a minimális mennyiségben is képes kimutatni a patogén RNS-ét. Ez lehetővé teszi a rejtett fertőzések azonosítását.
  • Hogyan készítsünk elő vérrátadást PCR kutatásra

    PCR analízis esetén a vénás vért gyűjtjük a hepatitis C-re. Általában két adag vért veszünk egyszerre a páciens vénájából: az első PCR-hez, a második az ELISA-hoz. Ez azért van így, hogy pontosabban felmérjük, mennyire rossz a páciensnek a vírussal fertőzött, és hogyan védekezik az immunitás.

    Általában az alábbi szabályok szükségesek a beteg számára:

    • reggel vérvizsgálatot végeznek;
    • az utolsó étkezés és a vérszállítás közötti szünetnek nyolc-tíz óra;
    • két vagy három nappal az elemzés előtt meg kell adni sült és zsíros ételeket, valamint alkoholt;
    • az elemzést megelőzően huszonnégy órával a betegnek kerülnie kell a fizikai erőfeszítést: ne hordjon súlyokat, ne vegyen részt edzőteremben vagy medencében.

    A vérvizsgálat költsége és a hepatitisz C esetében a PCR

    A hepatitis C gyulladásos patológia, melyben a májsejtek érintettek. A betegség a hepatitis C vírus (HVC) emberi testbe való behatolása miatt alakul ki.

    A betegség formája lehet akut vagy krónikus.

    Leggyakrabban, tünetei akut formái betegség, a betegek többsége nem áll rendelkezésre, néha a betegség kíséri hasi fájdalom, csökkent teljesítményt, nagyobb fáradtságot, étkezési rendellenesség, sötét árnyalatú vizelet elszíneződése széklet, sárgulási a bőr és a nyálkahártyák, ízületi fájdalom. A tünetek általában 6-8 héttel a fertőzés után vannak, de hat hónap elteltével jelentkezhetnek.

    Az ilyen jelenségek kialakulásához egészségügyi intézményre van szükség, és átfogó vizsgálatot kell végezni az egész szervezeten. Az orvosi vizsgálat részeként a hepatitis C vérvizsgálatát végezzük.

    Napjainkban a korszerű diagnosztikai technikák segítségével a kórképet a fejlődés kezdeti szakaszában lehet azonosítani, ami jelentősen megnöveli a betegség teljes kúrájának esélyeit.

    A hepatitis C vizsgálata kötelező a következő embercsoportok esetében:

    • nők a gyermek viselésének időszakában;
    • a hepatitis jelei;
    • egészségügyi intézmények alkalmazottai;
    • a szervek és a vér potenciális adományozói;
    • a kábítószerfüggők, a HIV-fertőzöttek, a rendezetlen intim életet végző személyek.

    A szükséges tanulmányok listája

    Milyen vizsgálatokat kell alkalmazni a hepatitis C-vel? A betegség pontos diagnosztizálásához, az okok azonosításához és a máj parenchyma állapotának meghatározásához a következő vizsgálatokat kell elvégezni:

    • a vizelet és a vér általános analízise;
    • biokémiai vérvizsgálat;
    • PCR analízis;
    • vérvizsgálat a HVC elleni antitestek kimutatására;
    • a saját májsejtjeire rendelkezésre álló antitestek vérvizsgálata;
    • egy máj biopszia.

    A hepatitis C vérvizsgálatának értelmezését szakember végzi. Nézzük meg részletesebben a kutatás minden módját, és meg fogjuk érteni, hogy a hepatitis C-re vonatkozó elemzés a legpontosabb.

    Általános elemzés

    A hepatitis C általános vérvizsgálatának elvégzése során felmérheti a beteg állapotát. A vérkép változása nem tekinthető a hepatitis sajátos tüneteinek, de ennek a betegségnek a következményei vannak:

    • a hemoglobin, a vérlemezkék és a leukociták koncentrációja csökken;
    • a limfociták tartalma nő;
    • a vér koagulálódása megszakad;
    • az eritrocitaszedés (ESR) aránya nő.

    A vizelet általános analízise lehetővé teszi az urobelin összetételének detektálását - a májműködési zavara miatt a vizeletben megjelenő epefesték.

    Biokémiai analízis

    A hepatitis C vérének biokémiai analízise lehetővé teszi számunkra, hogy azonosítsuk a következő eseteket:

    • növelte a májenzimek (alanin transzamináz - ALT és aszpartát aminotranszferáz - AST) tartalmát, amely a hepatocyták károsodásával jár a véráramba. Normális állapotban ezek a mutatók nem lehetnek 37 NE / l-nél, a nőknél - legfeljebb 31 NE / l. Az ALT és az AST fokozott koncentrációja a hepatitis C-ben, amely tünetmentes, gyakran az egyetlen tünete ennek a betegségnek. Ezenkívül a vérszint növeli a glutamil-transzpeptidáz alkalikus foszfatáz szintjét (általában nem több, mint 150 NE / l).
    • a bilirubin (teljes és közvetlen) mennyisége meghaladja a vérben. Ha a szint a sárga pigment a szérumban haladja 27-34 umol / L, sárgaság fordul elő (akár 80 mol / l egyszerű módon, 86-169 pmol / L - mérsékelt, a fenti 170 mmol / l - súlyos formája).
    • Csökkentette az albuminszintet, a gamma-globulinok koncentrációja ellenkezőleg, megnőtt. A gamma globulinok immunglobulinokból állnak - antitestek, amelyek védik a szervezetet a kórokozókból.
    • a trigliceridek koncentrációja a vérben.

    PCR vizsgálat

    A PCR technikával lehet kórokozót diagnosztizálni. Az elemzés elvégzése lehetővé teszi a vírus kimutatását a vérben, még akkor is, ha annak mennyisége minimális. A hepatitisz C PCR elemzése lehetővé teszi, hogy a fertőzés időpontjától számított 5 nap elteltével azonosítsa a meglévő fertőzést a vérben, vagyis az antitestek megjelenése előtt.

    Ha a hepatitis C vérvizsgálat eredménye a PCR módszerrel pozitív, ez azt jelzi, hogy a szervezetben aktív fertőzés van. Ezzel a módszerrel elvégezhető a HVC RNS kvalitatív és kvantitatív vizsgálata.

    A hepatitis C-re vonatkozó PCR minőségi analízise során lehetséges az emberi szervezetben meglévő vírus kimutatása.

    Ezt a diagnosztikai eljárást akkor kell elvégezni, ha anti-HVC-t észlel a vérben.

    A hepatitis C elemzésének transzkripciója azt jelenti, hogy a szervezetben a fertőzést észlelték vagy észlelték. Normális állapotban a vérben lévő patológiás anyagokat nem észlelték.

    Ha a hepatitis C analízise pozitív eredményt ad, akkor azt jelzi, hogy a patogén mikroorganizmus folyamatosan osztódik és befolyásolja a májsejteket.

    Az ilyen elemzés eredményei megbízhatatlanok lehetnek, az alábbi esetekben lehetséges:

    • az alkalmazott bioméret szennyezése;
    • ha heparin van a vérben;
    • a vizsgált bioméretnél lévő vegyi vagy fehérjeanyagok (inhibitorok) jelenlétében, amelyek befolyásolják a PCR elemeit.

    A hepatitis C mennyiségi analízise tájékoztatást ad a vérben lévő vírus mennyiségéről, vagyis meghatározza a vírus terhelését. Ez a kifejezés a HVC RNS mennyiségét jelenti a vérben (pl. 1 ml). A hepatitis C mennyiségi elemzésének értelmezésében ez az érték digitális IUU-ban kifejezve, IU / ml-ben mérve.

    A hepatitis C-ben lévő PCR-véra a terápiás intézkedések előtt kerül sor. Az elemzést az 1., 4., 12. és 24. héten végezzük. A 12. héten végzett vizsgálat indikatív, és a folyamatban lévő kezelési eljárások hatékonyságának értékelésére kerül sor.

    Ha a hepatitis C terhességi vizsgálata pozitív, és a vírusterhelés túllépett, a kórokozóknak a beteg anyától a gyermekig történő továbbításának kockázata többször megnőtt. Továbbá a megnövekedett vírusterhelési értékekkel a terápiás intézkedések végrehajtása nehéz.

    A hepatitis C elemzése alapján, ha a vírusterhelés meghaladja a 800 000 NE / ml-t, akkor magas. Ha a számok 400 000 NE / ml alatt vannak, akkor a vírusterhelés szintje alacsony.

    A hepatitis C PCR-módszerrel végzett elemzését a legpontosabbnak tekintik, és számos előnnyel rendelkezik, mint más kutatási lehetőségek:

    • a kórokozó közvetlen diagnosztizálása. A hagyományos vizsgálatok során meghatározzák a fehérje markerek jelenlétét, amelyek a kórokozók lényeges aktivitásának termékei. Csak azt mondja, hogy a fertőzés jelen van a vérben. Ha a hepatitis C elemzését a PCR módszerrel végezzük, akkor meg lehet határozni a veszélyes patológiás kórokozók típusát.
    • a módszertan sajátossága. Ez alatt az eljárás során egy egyedi DNS-régiót azonosítunk a bioméretben, amely csak egyfajta kórokozónak felel meg. Ez lehetővé teszi a megbízhatatlan eredmények megszerzésének valószínűségének minimalizálását.
    • nagy érzékenység. A PCR elemzés során minimális mennyiségű vírust lehet kimutatni. Ez akkor fontos, ha feltételesen patogén anyagokat azonosítanak, amelyek csak akkor jelentkeznek veszélyben, ha azok szintje emelkedik.
    • ha ezt a technikát alkalmazzuk, több patogén kimutatható egy biomassza mintában.
    • rejtett fertőzések felismerésére. Ezenkívül az elemzés lehetővé teszi a sejtekben élő kórokozók diagnosztizálását és magas antigén variabilitást.

    Ha a vizsgálat eredményei pozitívak, akkor a vírus nyomai megtalálhatók a biométernél, akkor a szervezetben található hálózat fertőzést okoz.

    A hepatitis C-re vonatkozó PCR negatív elemzése azt jelenti, hogy a bioméretben nincs fertőzés nyoma.

    Immunológiai vizsgálat

    Ez a módszer lehetővé teszi, hogy azonosítsa az antitesteket a hepatitis vírus minden típusához, valamint a szervezet májsejtjeinek antitestéhez, amit az autoimmun hepatitis kialakulásának köszönhet.

    A vizsgálat során kapott eredmények 3 hónapig relevánsak, akkor újra kell adni vért a hepatitis C-re.

    Lehetőség van expressz kutatásra speciális tesztcsíkok használatával is. Ez az elemzés lehetővé teszi a vér és a nyál vírus elleni antitestek meghatározását, melyeket önállóan, otthon végezhetünk el.

    Máj biopszia

    Az ilyen elemzés elvégzéséhez a máj parenchyma elemét veszi, és a kapott bioméret szövettani vizsgálata megtörténik. Ez lehetővé teszi számunkra, hogy felmérjük a szerv állapotát: a gyulladásos, nekrotikus fókuszok, a fibrózis stádiuma és hasonlók azonosítására.

    Ma olyan vizsgálatokat alkalmaznak, amelyek helyettesítik a máj parenchyma szövettani elemzését.

    A májkárosodás és a gyulladásos folyamat intenzitásának felmérése érdekében használjon vénás vér specifikus biomarkert. A Fibrotest segítségével fel lehet mérni a szálas szöveti proliferáció mértékét.

    Az Actitest elvégzése során információt kaphat a kóros folyamatok intenzitásáról a máj parenchyma során. A Steatotest segítségével diagnosztizálni lehet a májszövet zsíros degenerációját és felmérni a folyamat mértékeit. A Fibromax az összes fenti vizsgálatból áll, és tartalmazhat néhány más vizsgálatot is.

    A tanulmány elkészítése

    Milyen teszteket végeztek a hepatitis C-re és hogyan végezték ezt a típust vagy azt a fajta kutatást? Ugyanilyen fontos tudni, hogyan kell felkészülni az elemzésre.

    A megbízható eredmények elérése érdekében ajánlatos betartani a következő követelményeket:

    • A hepatitis C-re vonatkozó vizsgálatokat reggel, üres gyomorban kell bevenni. Legutóbb, ha legalább 8 órával a vizsgálat előtt ételt kell fogyasztania.
    • Biomateriális mintavétel nappal vagy este is elvégezhető. Ilyen esetben fontos, hogy az utolsó étkezés és az elemzés között legalább 5-6 óra haladjon át.
    • A hepatitis C vérének átadása előtt a teát, kávét, gyümölcslevet vagy más italokat el kell dobni, csak a víz megengedett.
    • A vizsgálat előtt 48 órával ki kell zárni a zsíros, sült ételek és az alkoholtartalmú italok fogyasztását.
    • Legalább egy órával a vizsgálat elvégzése előtt tilos a dohányzás.
    • Ne végezzen analízist közvetlenül az ultrahang, az instrumentális, a radiológiai vizsgálat, a masszázs vagy a fizioterápia után.
    • egy nappal a vizsgálat előtt, hogy kizárják a gyógyszeres kezelést és az intenzív fizikai aktivitást. Az érzelmi feszültségek ellenjavallt is.
    • 15 perccel a vizsgálat előtt csendes állapotban kell tartani.

    Vérmintavételi eljárás

    Hol jár a hepatitis C teszt? A biotermék gyűjtését további kutatásokra az orvosi intézmény laboratóriumában vagy a beteg otthonában végzik.

    A vénából vett vért a következőképpen vettük:

    • A páciens alkarján körbevett speciális köteg segítségével a vénás véráramlást felfüggesztik. Az ilyen manipulációknak köszönhetően a vénák vérré válnak és észrevehetőbbek lesznek, ami nagyban megkönnyíti a tű behelyezésének folyamatát.
    • A bőrt, ahol a tűt bejuttatják, gondosan kezeljük alkohollal vagy alkohol tartalmú folyadékkal.
    • A tűt alaposan behelyezzük a vénába, majd ehhez csatoljuk a vér gyűjtésére tervezett kémcsövet.
    • közvetlenül a tűt a vénába illesztve, a szorítógyűrűt eltávolítják a beteg kezéből.
    • miután a szükséges vérmennyiséget összegyűjtöttük az elemzéshez, a tűt fokozatosan eltávolítjuk a vénából.
    • az injekció beadásának helyére egy steril, nedves gőzzel vagy gézzel töltött tollat ​​kell alkalmazni.
    • A hematoma kialakulásának megakadályozásához a tampont néhány erőfeszítéssel le kell nyomni a tű behelyezésének területére, a karját könyökölni kell a könyökízületen és tartani néhány percig. Az ilyen intézkedések segítik a vér gyors leállítását is.

    A belső beavatkozás jó technikája miatt ez az eljárás teljesen biztonságos, és az olvasás nem okoz fájdalmas érzeteket.

    Ritka esetekben vérminták után a vénák duzzanata lehetséges. Ezt a jelenséget "flebititisnek" hívják. A problémát enyhíti a tömörítés (nem forró), naponta többször fel kell használni a duzzadt bőrterületekre.

    Bizonyos problémák is lehetnek, ha vérzési rendellenesség alakul ki. Az aszpirin, a warfarin és egyéb vérhígító gyógyszerek szedése vérzést okozhat. Ezért az elemzés elvégzése előtt el kell utasítanunk minden gyógyszert. Ha a kezelést nem lehet visszavonni, tájékoztassa erről a szakembert.

    Feltételek és árak

    Mennyi vizsgálatot végeztek a hepatitis C-ben? A hepatitis vérvizsgálatának eredményei néhány óra alatt, néhány nap alatt (általában legfeljebb 8 napig) készen állhatnak. Az eredmények elkészítésének időtartama a vírus típusától és a választott elemzési technikától függ. A PCR módszerrel végzett kutatás gyorsabb. Az eredmények ebben az esetben pár órán belül készen állnak.

    Mennyibe kerül a hepatitis C elemzés? A klinikától és a vizsgálat összetettségétől függően az eljárás ára 400 és 11 000 rubel között változhat.

    Megjegyzendő, hogy a HVC-hez elegendő mennyiségű antitest létrehozása több hétig is eltarthat. Ezért a patológia kialakulásának korai szakaszában a vizsgálat eredménye hamis-negatív lehet.

    Ezen túlmenően, a hibás adatok is lehetséges olyan rossz minőségű az elemzés és a kapott bioanyag kezelésére szállítási feltételek (mintákat kell szállítani a laboratóriumba után maximum 2 órán belül vérvételre).

    Ha a vizsgálat eredménye pozitív, azonnal konzultálnia kell egy fertőző betegség orvosával. A szakember további vizsgálatot végez, és előírja a megfelelő kezelést.

    Hogyan lehet visszaszerezni a hepatitis C-ből 97% -os valószínűséggel?

    Ma, a modern gyógyszerek és az új generációs sofosbuvir Daklatasvir a 97-100% valószínűséggel örökre fog gyógyítani hepatitis C. A legújabb gyógyszeres kapható orosz a hivatalos képviselője az indiai farmgiganta ZYDUS Heptiza. A megrendelt termékeket a futár a kézhezvételt követő 4 napon belül kézbesíti. Ingyenes konzultáció a modern drogok használatáról, valamint a vásárlás módjáról a Zydus beszállítójának hivatalos honlapján, Oroszországban.

    A hepatitis C PCR kvalitatív és kvantitatív elemzése: negatív, pozitív, dekódolás

    A hepatitis C a máj vírusos megbetegedése, amelyet a flavonavírus HCV (angol hepatitisz C vírus) okoz, amely ribonukleinsav (RNS) molekulát tartalmaz. Az RNS hordozza a vírus genetikai kódját. Jelenléte lehetővé teszi a hepatitisz C-re vonatkozó PCR-analízist.

    Az emberre nézve a HCV veszélye az, hogy az úgynevezett szerológiai ablak (a fertőzés és az immunrendszer reakciója megjelenése közötti időintervallum) nagyon hosszú lehet - több héttől hat hónapig.

    Ez nem tárja fel a fertőzést és időben elkezdi a kezelést.

    A gazdaszervezet sajátosságaitól függően a HCV akut formában jelenhet meg, és krónikus betegségként is kialakulhat, amely hosszú távú és drága kezelést igényel. A HCV elleni antitestek kimutatásakor számos laboratóriumi vizsgálatot végeznek, beleértve a hepatitisz C-re vonatkozó PCR-t is. Ez a vizsgálat minden olyan személy esetében történik, amelynek vérében a HCV ellenanyagok találhatók.

    Mi a PCR elemzés?

    PCR hepatitis C laboratóriumi elemzése - biológiai anyag vizsgálata a flavavirus jelenlétének azonosítására.

    A polimeráz láncreakció (a rövidítéssel megfejtve) a szervezet vírusos károsodásának mennyiségi értékét, minőségi jellemzőit és az RNS-t tartalmazó vírus genotípusait mutatja.

    Alapul véve, valamint további elemzések alapján meghatározták a terápia módját és időtartamát, valamint a járványtani tényezőt (a másik fuvarozó számára történő átvitel kockázata).

    Mi az RNS analízis a hepatitis C-re?

    A hepatitis C PCR-t RNS-analízisnek is nevezik (HCV RNS), mert nem ismert. A Flavavirus 30-60 nm virion méretű RNS részecskét tartalmaz. Ennek a mikroorganizmusnak az egyik jellemzője a mutációk nagy hajlama.

    A vírus minden alfajának (genotípusai) eltérő rezisztenciát mutatnak, ami különböző kezelési módszereket és a beteg további prognózisának jellegét okozza.

    Biológiai anyag (vénás vér) foglalkozik éhomi és általában tesztelték Real-Time PCR (nagyon érzékeny valós idejű diagnosztika, hogy meghatározzuk az alsó határ a 15 NE / ml-automatizált zárt rendszer módban).

    Vannak más vizsgálatok is, például COBAS AMPLICOR, amelynek érzékenysége 50-100 NE / ml. Bármely laboratóriumi vizsgálat esetében az érzékenységi küszöb fontos, azaz a reagens képes a vírus minimális koncentrációjának kimutatására a biológiai anyagban.

    A hepatitis C analízis típusai a PCR módszer alkalmazásával

    A hepatitis C PCR-je három fontos elemet tartalmaz:

    • minőségi elemzés;
    • kvantitatív elemzés;
    • genotipizáláshoz.

    Ezek a vizsgálatok meghatározhatják a viremia jellegét, valamint a kórokozó genetikai jeleit. A diagnosztikai rendszer érzékenységétől függően a tesztet egyszer elvégzik, és néha egy második vizsgálatot végeznek érzékenyebb reagenssel az eredmények megerősítésére vagy finomítására.

    Kiváló minőségű hepatitis C PCR

    A hepatitis C-re vonatkozó PCR-analízis a polimeráz-láncreakciós vizsgálat másik gyakori elnevezése. A vizsgálat standard érzékenysége, amely lehetővé teszi a vírusos elváltozás kimutatását, a 10-500 NE / ml tartományban van.

    A hepatitis C-re vonatkozó PCR negatív elemzése azt mutatja, hogy a vírus koncentrációja a beteg vérében a diagnosztikai rendszer érzékenységének küszöbértékénél alacsonyabb.

    Ha a minőségi PCR "nem észlelt" választ adott, akkor a későbbi kezeléshez fontos tudni a reagens érzékenységi küszöbértékét.

    A proteinfrakciók a flavavirushoz sokkal később jelentkeznek.

    Quantitative Hepatitis C PCR

    A PCR hepatitis C mennyiségi mutatója a vírusterhelés, amely tükrözi a flavavirus RNS koncentrációjának szintjét a szervezetben. Ez egy mutató, amely megmutatja, hogy hány darab vírus RNS-t tartalmaz egy köbcentiméter vér. A hepatitis C PCR RNS eredményeit egy hagyományos rendszerben nemzetközi egységben (IU / ml) nevezik ki, és különböző módokon rögzíthetők, például 1,7 millió vagy 1,7 millió NE / ml.

    A hepatitis C mennyiségi PCR-diagnózisát a vírusellenes terápia megkezdése előtt, a kezelés 12. hetében pedig a HCV elleni küzdelem kiválasztott módszerének eredményeinek értékelésére adják. A vírus terhelés lehetővé teszi a betegség három fontos mutatójának azonosítását:

    • fertőzőképesség, azaz a vírus egyik hordozótól a másikig terjedő kockázatának mértéke (minél nagyobb a flavavirus RNS koncentrációja, annál nagyobb a valószínűsége egy másik személy fertőzésére, például szexuális érintkezés esetén);
    • a kezelés módszere és hatékonysága;
    • időtartamát és prognózisát (minél nagyobb a vírusterhelés, annál hosszabb a kezelés).

    A hepatitis C mennyiségi PCR-diagnózisa a laboratóriumi vizsgálat típusától és az érzékenység küszöbétől függ. A norma alsó határa rendszerint 600 000 NE / ml, az átlagérték 600.000-700.000 NE / ml. A 800 000 NE / ml és annál magasabb értékeket magas szintű RNS-tartalmú vírusnak tekintik.

    genotipizáláshoz

    Tekintettel a HCV magas mutációs aktivitására, fontos, hogy a vizsgálati stádiumban meghatározzuk, hogy a vírus genotípusa a beteg vérében van-e. Összesen 11 hepatitis C vírus genotípust jegyeztek fel a bolygón, amely számos alfajot tartalmaz. Az Orosz Föderáció területén 1,2-es és 3-as gyakoriak.

    A hepatitis C PCR RNS-je a genotipizálással együtt nagyon fontos eleme az elemzésnek, mert lehetővé teszi az orvos számára a vírus rezisztenciájának (rezisztencia) meghatározását, megfelelő gyógyszerek kiválasztását és a kezelés lefolyását.

    A genotipizálás lehetővé teszi a máj állapotának közvetett meghatározását is. Például a HCV 3 genotípusát gyakran steatosis kísérli, amelyben a zsír felhalmozódik a test sejtjeibe.

    A PCR-nek a hepatitis C-ben végzett vérvizsgálatának olyan számot kell adnia, amely meghatározza a genotípust. A laboratóriumi válaszokban írható "nem gépelt" - ez azt jelenti, hogy az emberi vérben olyan vírus van, amelyet a tesztrendszer nem határoz meg. Ez azt jelezheti, hogy a genotípus egy adott földrajzi területen nem jellemző. Ebben az esetben szükség van az elemzés újbóli átadására a diagnosztikai rendszer nagyobb érzékenységével.

    PCR analízis dekódolása hepatitis C-re

    A hepatitis C PCR vizsgálatát a fenti adatok alapján számszerűsíthetjük. A laboratóriumi vizsgálatok eredményeinek átvételekor általában a következő adatokat írják fel:

    • "Found" / "not found" (magas minõségû PCR a hepatitis C esetében);
    • az RNS-t tartalmazó frakciók mennyisége, például 831.680 IU / ml (kvantitatív PCR-vizsgálat);
    • az a szám, amely meghatározza a HCV genotípust, például - 1, 2, 3, 4;
    • a teszt neve leginkább Real-time.

    A legfontosabb a hepatitis C PCR-elemzésének megfejtéséhez a második tétel, amely a vírusterhelést mutatja a prognózis, a módszer és a kezelés időtartamának meghatározása céljából.

    Ha a hepatitis C-re vonatkozó PCR-analízis negatív, és ELISA pozitív - mit jelent ez?

    A laboratóriumi tesztek megfejtéséhez fontos, hogy kapcsolatba lépjen egy hepatológussal vagy fertőző betegséggel foglalkozó szakemberrel, aki megmagyarázza a kapott információkat a diagnosztikai rendszer típusának és az érzékenység küszöbének megfelelően. Az orvosi gyakorlatban sok vérvizsgálati adat van, amelyek az orvosi nevelés nélküli embert zavartsággá teszik.

    Például, ha a vizsgálati HCV PCR negatív és pozitív ELISA, azt jelezheti, hogy ebben az időben a beteg vérében nem HCV, de mielőtt szenvedett akut formában a hepatitis C Úgy ​​tekinthető, hogy a pozitív-linked immunosorbent assay (ELISA) azt mutatja, hogy a vérben vannak olyan antitestek, amelyeket a múltban a vírus inváziója után állítottak elő. De a modern orvosi gyakorlatban ELISA elemzés nem eléggé megbízható, és gyakran ad szokatlan eredményeket, így az orvosok használni, mint egy elsődleges szűrés. A betegség diagnosztizálásakor a szakemberek pontosan PCR-tesztek segítségével irányulnak.

    Hasznos videó

    A következő videóban nagyon részletes és érdekes megmondani, hogy mi a lényege a PCR módszernek, hogyan történik az elemzés:

    következtetés

    A vénás vér általában a hepatitis C PCR analízisére vonatkozik. Leggyakrabban kettős mintavétel egy biológiai anyagból - ELISA-hoz, és közvetlenül egy PCR-teszthez. A helyes teszteredményekhez a biológiai anyag laboratóriumi mintavételének legfontosabb szabályainak betartása szükséges:

    • a vér az analízishez reggel egy üres gyomorban van;
    • az evés és a vérvétel között legalább 8 óra legyen;
    • A vizsgálat megkezdése előtt kizárnia kell az alkoholt és a sült ételeket is;
    • A vért megelőző napon a fizikai erőfeszítést elkerülni kell.

    A vérvizsgálat eredményei általában másnap készen állnak.


    Kapcsolódó Cikkek Hepatitis