A hepatitisz C-re vonatkozó PCR elemzése

Share Tweet Pin it

A hepatitis diagnosztizálása magában foglal egy egész vizsgálati komplexet, amely meghatározza a vírus jelenlétét a vérben. A betegség kimutatásának egyik módja a hepatitis C-hez hasonló PCR-módszer alkalmazása. Mi ez az oka, miért fontos a hepatitis PCR-elemzése, hogyan történik és dekódolja?

Mi ez?

A polimeráz láncreakciót vagy a PCR-t gyomorfekély, vastagbélgyulladás, bélgyulladás diagnosztizálására használják. De a fő előnye, hogy segít a szervezetnek, hogy észleli a vírus maga a C hepatitis, és antitesteket is, amelyek képesek nem okoz reakciót az immunrendszer azon képessége miatt, hogy mutálódik.

A vizsgálat és annak lényege, hogy bizonyos feltételeket teremt, amelyek során a hepatitis RNS láncreakció lép fel. Ha a hepatitis C vírus nukleotidszekvenciájához viszonyítva véletlen egybeesést észlel, ez azt jelzi, hogy vannak vírusos részecskék a vérben, és a bomlás a májban történik. Ha a vírus mennyisége egy bizonyos szint alá esik, negatív diagnózis történik, ha magasabb - pozitív.

A hepatitis PCR-módszerrel kétféle vérvizsgálat létezik: mennyiségi elemzés és minőségi elemzés.

A mennyiségi PCR, ahogy fent említettük, meghatározza a hepatitis vírus RNS-koncentrációját. Ezenkívül képes információt szolgáltatni arról, hogy milyen intenzitású a patológia és az előírt kezelés hatékonysága. A hepatitis C mennyiségi elemzése rendkívül fontos, mivel ellenáll az antivirális hatóanyagok hatásának, és lehetővé teszi a terápia módosítását.

Miután a páciens egy kezelésen átment, a PCR segít meghatározni a receptek további sorrendjét. Bizonyos esetekben további felmérésekre van szükség. Például, ha a szint az ALP emelkedett (de nem több, mint 2-szer hat hónapon belül), és elemzése transzkriptum kifejezés egy vírusterhelés feletti 105 NE / ml, a beteg van rendelve biopszia. Ha a PCR mennyiségi analízise erős gyulladást és fibrózist mutat, akkor a pácienst vírusellenes gyógyszerek kezelésére írják fel.

Olyan esetekben, amikor nagyszámú vírusrészecskét kombinálnak magas ALT-értékkel, a beteget azonnal további diagnosztikai intézkedések nélkül kell kezelni.

Vegye ezt a tesztet, és megtudja, ha májproblémái vannak.

A hepatitis vérének mennyiségi elemzésére szolgáló mutatók minőségi értelmezése csak képzett és tapasztalt szakember lehet, és a modern technológia segít a vírus alacsony koncentrációjában a vérben.

A kvalitatív PCR-analízis célja a vírus tényleges jelenlétének meghatározása és megerősítése a szervezetben. Ez a vér hepatitis elleni antitestek kimutatásával történik. Ez egy minőségi teszt hepatitis garantálja a pontosságát az eredmény 100% -kal, és lehetővé teszi, hogy diagnosztizálni a korai szakaszában a betegség, ami lehetővé teszi, hogy a harcot a hepatitis B az első héttel a fertőzés után, és növeli annak az esélyét, teljes gyógyulás (abban az esetben, B típusú betegség).

A PCR előnyei

A PCR-módszer vizsgálata és a hepatitis vérvizsgálatának megfejtése érdekében lehetőség van a betegség kórokozójának genotípusának meghatározására is. A vírus 6 genotípusa és számos altípusa létezik, de a régióban az 1, 2 és 3 genotípus eloszlása.

Az ilyen típusú diagnózis további előnyei:

  • A vett indikátorok nagy pontossága és alacsony a hibák valószínűsége;
  • magas a vírus részecskékre való érzékenysége a vérben;
  • több kórokozó kimutatásának lehetősége;
  • a magas antigén variabilitású patogén intracelluláris mikroorganizmusok diagnosztikája;
  • a hepatitisz analízisének dekódolásával végzett munka lehetővé teszi a látens áramfertőzések felfedezését.

Kinek nevezzen

A hepatitiszre vonatkozó PCR-vizsgálat szükségszerűen a következő embercsoportokat veszi figyelembe:

  • terhes nők;
  • az egészségügyi intézmények alkalmazottai;
  • a vér és a szervek lehetséges adományozói;
  • azok, akiknek a betegség jellegzetes jelei vannak;
  • HIV-fertőzöttek;
  • drogfüggők;
  • a szexuális életet átélt személyek.

Hogyan történik az elemzés és a képzés szükséges?

Vérvételezést végzünk a vénából. Jellemző, hogy ez előtti reggel előfordul, mielőtt az ember evett, mert az étkezés után legalább 8 órát kell eltelnie. Szélsőséges esetekben nap vagy esti vérvizsgálat végezhető, de az analízis és az élelmiszerfelvétel között eltelt idő legalább 5 óra.

Az emberi tényezõ mennyiségi hatást fejthet ki az eredményekben: pontosságuk egyes esetekben 100% -ról 95% -ra csökken, ezért elõkészíteni kell a vér elõállítását. Az analitikai bioméret minősége megfelelő, ha a beteg az alábbi szabályokat követi:

  • Mielőtt vért adna, csak tiszta vizet inni;
  • két nappal a vizsgálat előtt el kell utasítani a sült és zsíros élelmiszerek bevitelét, valamint az alkoholtartalmú italokat;
  • egy nappal a laboratóriumi látogatás előtt hagyja abba a gyógyszeres kezelést. Abban az esetben, ha ez nem lehetséges, feltétlenül figyelmeztetni kell a laboratóriumi asszisztenst és a kezelőorvost;
  • a stresszes helyzetek és a fizikai erőfeszítések előestéjén;
  • Ne végezzünk ultrahangot, radiológiát és instrumentális vizsgálatokat röviddel a véradás előtt;
  • egy órával az elemzés előtt tartózkodnia kell a dohányzástól;
  • 20 perccel a vér szállítása előtt meg kell zavarni, nyugtatni és még lélegezni.

Ha a vizsgálatot egy 5 évesnél fiatalabb gyermek végzi, a szülőknek gondoskodniuk kell arról, hogy a bioméret mintavétele előtt fél órával 10 percenként inni is forralt vizet.

A kapott adatok magyarázata

Az elemzés szöveges formában (kvalitatív kutatás esetén), például "nem található" vagy "a változtatások alatti" lehet. Az első esetben ez azt jelzi, hogy a fertőzést nem észlelték. A második -, hogy a vírus jelen van, de kis mennyiségben. Ez a helyzet újbóli vizsgálatot igényel.

A vírusterhelést a fertőző RNS mennyisége határozza meg, és ME / ml-nek vagy másolatoknak felel meg.

A hepatitis C mennyiségi analízisének normál indikátora (normája) a 1,8x102 és 2,4x107 NE / ml tartományba esik.

A vírus koncentrációja a vérben lehet:

  • alacsony: 600 NE / ml-ről 3x104 / ml-re;
  • átlag: 3 óra 4 NE / ml-től 8 óráig 5 NE / ml;
  • magas: több mint 8 óra 10 NE / ml.

A hepatitis PCR mennyiségi és minőségi elemzése lehetővé teszi a vírus jelenlétének meghatározását a testben és koncentrációjának szintjét. A polidizált láncreakció korai stádiumban képes diagnosztizálni a betegséget, de ehhez szükség van arra, hogy a betegek a lehető leghamarabb forduljanak orvoshoz segítségért és szigorúan kövessék a kezelőorvos ajánlásait.

PCR diagnosztika használata

A polimeráz láncreakciót (PCR) a molekuláris biológiában a víruskeresés kísérleti módszerének nevezik. Lehetővé teszi a nukleinsav (DNS) bizonyos fragmenseinek koncentrációjának jelentős növelését a biológiai anyag mintáiban, ami lehetővé teszi számukra a felismerés és számlálást.

Az elemzés az alábbiak szerint történik. A genetikai anyagot (vérmintát), amely potenciálisan tartalmazhatja a kívánt gént, egy kémcsőbe kerül. Ezenkívül a primereket a kémiai úton szintetizáltuk a kívánt gén kis hosszán.

A DNS-hez vagy RNS-polimerázt is hozzáadják az edényhez, képes egy olyan nukleinsavláncot létrehozni, amely teljesen azonos az eredetivel. A kapott kompozícióba négy szabad nukleotidot, egy RNS-hez vagy DNS-hez speciális építőanyagot helyezünk, amelyek közül az egyik a foszfor radioaktív részecskéit tartalmazza.

A kapott elegyet 95-96 ° C-ra melegítjük, aminek következtében a szokásos állapotban összefonódott két DNS-helikát feloldjuk. Ezután a készítményt lehűtjük, ebben az időben a primerek a vírusgenom kívánt régiójához kötődnek anélkül, hogy az RNS (vagy DNS) kettős hélixet állítana elő ismét.

Hűtés közben a polimeráz egy nukleotidok szabad láncolatát keresi. Ennek az enzimnek a működéséhez egyetlen lánc nukleotidra van szükség. Mivel a polimeráz a DNS-szalag mentén csúszik (mint egy gyűrű egy kötélen), nem működhet kettős spirállal.

Ezután ismétlődő ciklusú melegítést végzünk, ami miatt a nukleotidláncokat elválasztjuk. Mindegyik PCR ciklus esetében a mintában lévő kívánt hepatitis gén mennyisége növekszik a geometriai progresszióban, és a genetikai anyag többi része lineárisan keletkezik.

A nukleotidmaradékok oldatának tisztítása és a DNS-szálak elektroforézissel történő molekulasúly-paraméterével történő elválasztása után könnyen meghatározható, hogy a kívánt gén létezik-e a vizsgálati mintában, vagy sem.

A PCR előnyei

A PCR módszerrel végzett laboratóriumi vizsgálat lehetővé teszi, hogy még több információt szerezzen, mint az RNS vírus jelenlétét. A radioaktív sugárzás szintjének meghatározásakor meghatározható, hogy a vizsgált mintában mely genetikai anyagot kezdetben tartalmaznak. Hepatitis esetén határozza meg a vírusterhelés szintjét.

Ennek a módszernek egy másik előnye a CR reakció nagyon nagy érzékenysége. Sokkal magasabb, mint a vírusok észlelésének klasszikus módszerei. Ideális esetben a kívánt gén azonosítása céljából csak egy mintában lévő vírus elegendő a PCR-hez.

Emellett a PCR teljesen specifikus. A primereket olyan módon hozták létre, hogy teljesen megfeleljenek a kívánt gének egyedülálló részeinek, amelyeknek nincs más szekvenciája. Mindkét ujjlenyomat egyedülálló, és minden génben egyedi nukleotidszekvenciák vannak.

Minõségi PCR analízis

A kvalitatív analízis csak a vírus jelenlétét mutatja a vérben. Ezt a vizsgálatot minden olyan betegnél el kell végezni, akikről kimutatták, hogy vérükben a hepatitis C elleni antitestek eredményei csak két érték közül választhatnak: "észleltek" vagy "nem észleltek". Egészséges ember esetében a normát (referenciaérték) "nem szabad észlelni".

Az elvégzett kvalitatív kutatás ilyen eredményeinek speciális értelmezése is van:

  • Az eredmény "felfedezett". Ez azt jelenti, hogy a mintában a biológiai anyagot hozott találtak egy olyan RNS-fragmens, amely specifikus a hepatitis C-vírus Következésképpen, ott van a tény, a beteg hepatitis B vírus fertőzés C. Ha az eredmény a kvalitatív PCR „felfedezte”, ez azt jelzi, hogy a vírus ismétlésben és ebben az időben új májsejteket fertőz meg a szervezetben.
  • Az eredmény "nem észlelhető". Az ilyen döntés azt jelzi, hogy a mintában a biológiai anyag kapott RNS-fragmentum nem mutatható ki a laboratóriumban, amely specifikus vagy HCV RNS azonos koncentrációban a patogén fertőzés a mintában határ alatt volt az a teszt érzékenységét.

A hepatitis C vírus RNS akut fázisában a PCR technikát alkalmazó kvalitatív vizsgálatok 1-2 hét után azonnal felfedezhetik a szervezet fertőzését, vagyis röviddel a hepatitis elleni antitestek megjelenését megelőzően.

Az ilyen vizsgálatok analízisének megbízhatatlan eredményei a következőkkel érhetők el:

  • szennyezett biomassza;
  • heparin jelenléte a beteg vérében;
  • a mintában lévő vegyi vagy fehérjeanyagok (inhibitorok) jelenléte, amelyek befolyásolják a PCR különböző komponenseit.

A PCR minőségi analíziséhez nem szükséges a beteg speciális preparálása a vizsgálat elvégzéséhez. A vénás vért anyagként használják.

Az eredmények értékelése

A kvalitatív PCR-tesztek bizonyos fokú érzékenységgel rendelkeznek, és a laboratóriumi pontosságtól és a laboratóriumi felszerelés mértékétől függően 10 és 500 NE / ml között változhatnak.

Ez azt jelenti, hogy ha a vírus a vérmintában nagyon alacsony koncentrációban van jelen (kevesebb, mint az adott laboratórium érzékenységi küszöbe), akkor a beteg páciensét "nem detektálják". Ennek következtében, ha minőségi PCR-elemzést végeznek alacsony vírusszinttel (vírus alacsony koncentrációja), például antivirális terápiában részesülő betegeknél, nagyon fontos tudni a diagnosztikai rendszer érzékenységi küszöbét.

Diagnosztikai rendszerek változatai

A virológiai válasz szabályozására ajánlott az antivirális kezelés legalább 50 NE / ml érzékenységi küszöbértékű diagnosztikai rendszerek alkalmazása. Ezek a kritériumok teljesülnek, például: Cobas Ampicolor VGS-teszt elemzők (50 IU / ml pontossággal), valamint RealBest HCV RNS (15 IU / ml érzékenységgel).

A WHO szerint ajánlásokat létrehozó végleges diagnózist a hepatitis C, meg kell kizárólag alapján hármas kimutatására RNS-vírus szérummintákon szenvedő beteg nincs más hepatitis marker faj.

A PCR-eljárások mellett TMA-vizsgálatot (transzkripciós amplifikációs módszert) is alkalmaznak HCV RNS kimutatására betegekben. A legjobb érzékenység küszöbérték (5-10 NE / ml), de hazánkban ez a tesztelési módszer még nem túl gyakori.

A vírusok észlelt módosításainak hatóköre

Ez a kvalitatív meghatározás a hepatitis C vírus RNS jelenlétében szérumban lehetővé teszi számos vírus genotípusának meghatározását. Jelenleg a tudomány több mint hat genotípust ismeri a vírusról, valamint a betegség mintegy 10 altípusairól.

Az 1, 2, 3 genotípusú vírusok gyakoriak országunkban. Laboratories képes észlelni a következő genotípusok: 1a, 1b, 2a, 2b és 2c és 3, 4, 5a és 6. függetlenül altípus. Minden vírusmódosítás esetében a detektálás sajátossága 100%.

PCR mennyiségi elemzése

Kvantitatív PCR-teszt segítségével megállapítják a vérminták hepatitis vírusának koncentrációját (vírus terhelés). Ez a viremia-teszt (a vírus koncentrációja) lehetővé teszi egy meghatározott genetikai anyag (a leginkább vírusos RNS) egységek számának meghatározását, amelyet egy bizonyos mennyiségben észlelnek. Ebben az esetben határozza meg a koncentrációját 1 ml-ben, ami megfelel 1 cu. cm.

Az analízis mennyiségi paramétereit számokban fejezzük ki, ezt a mérést nemzetközi egységegységként (IU) milliliterenként (ml), ME / ml-ként jelöljük. Néhány laboratóriumban a vírus mennyisége más egységekben is meghatározható: a példányok számát ml-enként, másolatként / ml-nek.

  • Időzítés A hepatitis C esetében a PCR ilyen kvantitatív analízise a terápia megkezdése előtt történik. Aztán az 1., 4., 12. és 24. hetet. A 12. héten végzett értékelés indikatív, lehetővé teszi a terápia hatékonyságának meghatározását.
  • Elemzés előkészítése. A PCR mennyiségi elemzéséhez nem szükséges a beteg speciális felkészítése a vizsgálathoz. A mintavétel előtt fél órával nem szabad dohányozni. Vénás vért használnak laboratóriumi anyagként.

Az eredmények értékelése

Különböző laboratóriumi vizsgálati rendszerek esetében ez a mutató különböző konverziós tényezőket mutat be IU / ml-ben. Átlagosan egy konverziós paramétert alkalmaznak, amelyben 4 kópia / ml = 1 NE / ml. Ez például, ha a laboratórium 2,4 * 10 6 kópia / ml PCR-analízist eredményez, akkor ezt a paramétert 4-gyel kell osztani, és 6 * 10 5 NE / ml-t kapunk.

A 800 000 NE / ml magas terhelési szint magasnak tekinthető, ami megközelítőleg 3 000 000 példány / ml index. Az alacsony viremia egyes szerzők szerint a kvantitatív PCR 400 000 NE / ml alatti paramétereinek felel meg.

A kvantitatív teszt eredményeként a végeredmény nem digitális érték formájában jeleníthető meg, hanem: "a mérési tartomány alatt" vagy "nem detektálható".

  • Értékelés: "a mérési tartomány alatt". Ez azt jelzi, hogy a mennyiségi vizsgálat nem tudta kimutatni a hepatitis C virális RNS-t, de maga a vírus igen kis koncentrációban jelen van a szervezetben. Ezt egy további kvalitatív vizsgálat is jelzi, amely igazolja a vírus jelenlétének tényét.
  • Értékelés: "nem észlelt". Ez az eredmény azt jelzi, hogy a mennyiségi vizsgálat nem észlelt vírust az RNS mintában.

A vírusterhelés paramétere elsősorban a betegség fertőzőképességének mértékét, a beteg fertőzőképességének mértékét határozza meg. Minél magasabb a páciens koncentrációja a vírusnak, annál nagyobb a valószínűsége annak, hogy más emberekre átruházzák. Például, amikor szexuális kapcsolatban áll egy beteg vagy egy függőleges út. Az ilyen mennyiségi mutató segít a páciens kezelésének hatékonyságának meghatározásában.

A PCC mennyiségi elemzésének elvégzése fontos az antivirális terápiához, értékeli sikerét és ütemezi a tanfolyam időtartamát. Tehát a test gyors reakciója a kezelés és alacsony mértékű viremia esetén a terápia időtartama csökkenthető.

A mennyiségi PCR paraméter lassú csökkenésével az antivirális terápiát ki kell terjeszteni vagy módosítani. Ha a vírusterhelés szintje alacsony, akkor ez a terápia kedvező tényezője, ha magas, akkor az alkalmazott kezelési módszer hatástalan, és a gyógyszereknek vagy azok használatának módszereit módosítani kell.

A hepatitis C-vel végzett PCR diagnosztizálása

Nem mindenki tudja, hogy mi a hepatitis C PCR diagnosztikai módszere. A betegségek egyik legelterjedtebb csoportja a gyomor-bél traktus fertőző betegsége. Leggyakrabban gyomor (fekélyek), belek (colitis, enteritis) és máj (hepatitis) szenvednek.

A fent említett szervek között a májra a legnagyobb terhet rendelik. A szervezetben a máj szerepe rendkívül fontos:

  1. Szinte minden metabolikus reakció a májban fordul elő (itt minden olyan létfontosságú komponens, amely lehetővé teszi a test működését).
  2. A máj a fő szerv, amely elvégzi a méregtelenítő funkciót. Segítségével (különösen epével) számos szubsztrátot eltávolítanak, ami mérgezést okozhat, és súlyos következményekhez vezethet.

Sajnos sokan nem követik az egészségüket, mert a máj szenved. Általában különböző etiológiájú hepatitis alakul ki (vírusos, mérgező).

A hepatitis meghatározása

A vírusos hepatitis fontos helyet foglal el a májbetegségek között. A betegség lefolyásának súlyossága, a kezelés bonyolultsága miatt ezek az elsőek a szerv másik természetének kórtörténetében.

Minden hepatitis akut és krónikus. Akut hordozó A és B hepatitis. A krónikus az első helyen a hepatitis C.

Ezt a betegséget a hepatitisz C vírus okozza, amely jellemzője, hogy a betegség hosszú távon kóros klinikai tünetek nélkül is fennállhat.

Főleg a vér által közvetített. A véráramlással a vírus belép a májba, ahol a sejtjeiben szaporodni kezd. A virionok felhalmozódása következtében a fertőzött hepatocita elpusztul. Válaszul az antitestek kezdődnek, amelyek megtámadják a hepatocyták maradványait. Emiatt idővel egy medence épül a májsejtek ellen, ami súlyosbítja a betegség lefolyását.

Mivel a betegség tünetmentes vagy tünetmentes, és a klinikai tünetek csak a sejtek jelentős károsodásával járnak, ez a betegség diagnosztikai módszerek létrehozását igényli a jelenlétének azonosítása és a megfelelő intézkedések megtétele érdekében.

A hepatitis C diagnózisa: kvalitatív és kvantitatív elemzések

Jelenleg olyan módszereket alkalmaznak, mint a máj biopszia, immunogram a hepatitis C diagnosztizálására.

Lehetővé teszik az érintett májsejtek (májbiopsziás vizsgálat) vagy a fertőzött sejtekkel szembeni specifikus antitestek (immunogram) közvetlen meghatározását. Van azonban egy olyan módszer, amely megbízhatóan meghatározza a vírus jelenlétét. Ez a PCR egy polimeráz láncreakció.

Ennek a módszernek az a lényege, hogy bizonyos körülmények között az RNS láncok kialakulása bekövetkezik. Ez annak a ténynek tudható be, hogy a vírusrészecskék fragmentumai vannak a vérben vagy a biopsziás mintában. Ha a táptalajban egyes molekulákkal kombinálódnak, a vírus RNS-szel komplementer láncok szintézise megtörténik. A hepatitis C vírus ismert nukleotidszekvenciájával végzett későbbi elemzésük és összehasonlításuk alapján megállapítható, hogy van-e vírus a szervezetben és van-e májkárosodás.

A PCR-t a vér hepatitis vírusával szembeni specifikus antitestek detektálása után végezzük. A teszt után az eredmény megjelenik - RNS "észlelt" vagy "nem észlelt". Esetenként azt mondja, hogy "nem elég anyag" - ebben az esetben a hepatitis C ismételt elemzésére.

Ha a vírusrészecskék száma kevesebb, mint a szükséges minimális összeget, akkor beszélhetünk az a tény, hogy a hepatitis B nincs jelen, és a minimális mennyiségű genetikai anyag lehet „zavaros”, mert a mimikri a genetikai anyag, vagy bizonyos szekvenciák nukleotidok az esély egybeeshetne, hogy a vírus.

  1. PCR-negatív eredményt adhat, ha valójában van vírusrészecskék a vérben, de ezek olyan kicsi (fertőzés történt a közelmúltban, vagy az elemzés előzte meg hosszú és intenzív antivirális terápia), hogy a vizsgálati rendszer egyszerűen nem volt képes megfelelően meghatározni azok koncentrációjától. RNS - "nem észlelt".
  2. Ha a PCR-nek pozitív eredménye van, akkor a vérben olyan sok vírusrészecske van, hogy számuk meghaladja a tesztrendszer érzékenységének alacsonyabb küszöbét. Ebben az esetben a fertőző folyamat kialakulásának kockázata magas (vagy már eléggé elhanyagolt állapotban van). Általában a vírus nagy mennyisége már jelzi a kezelést és a későbbi májtranszplantációt.

Néha a teszt hamis-pozitív vagy hamis-negatív lehet.

A hepatitis PCR hamis negatív eredményét akkor lehet megfigyelni, ha a reakcióközegben olyan komponensek vannak, amelyek gátolják a vírusrészecskék másolatainak képződését. Emiatt nem lehet valós képet kapni a vér állapotáról, ami hozzájárul a vírus átadásához és a betegség progressziójához. A reakciót befolyásolhatja a heparin jelenléte a vérben (a vér relatív viszkozitásának csökkenése miatt). Az analízis téves értelmezése akkor is lehetséges, ha a vizsgálati anyag szállításának és tárolásának feltételei nem teljesülnek.

Hamis pozitív eredmények, amikor a hepatitis C-t diagnosztizálják, a PCR-t leggyakrabban akkor adják meg, amikor a kémcső vagy a munkaközeg szennyezett. Emellett pozitív eredmények figyelhetők meg a többi csoport hepatitisz jelenlétében és vírusainál (keresztreakció miatt).

A PCR kimutatása a hepatitis C kimutatására

A nagyszámú krioglobulin vérben való jelenléte szintén közvetlenül befolyásolja a PCR viselkedését. Emiatt a vizsgálat előtt a hepatitis C szükség, hogy meghatározzuk azok koncentrációja a vérben kimutatására torzítása az eredményt előre, és megakadályozzák azt.

A meghatározott vizsgálatok elvégzése után világossá válik, hogy van-e vérvírus-részecskék. Amikor meghatározásra kerülnek, azonnal ajánlott azonnali vírusellenes terápiát kezdeni a folyamat progressziójának lassítása érdekében. A hepatitis B-vel ellentétben a hepatitis C-re nincs komplett gyógymód; a betegség csak látens szakaszba kerül, és lassabban indul. A máj veresége elkerülhetetlen. A folyamat utolsó szakaszában, amikor a máj már nem képes megbirkózni a funkciójával, szükség lehet átültetésre.

A kezelést elsősorban két gyógyszerrel - interferonnal és ribavirinnel végzik.

Hatékonyságuk a májsejtek elváltozásainak lelassításában bizonyított. Időközben infúziós terápiát kell alkalmazni a máj munkájának megkönnyítése érdekében.

Minden olyan beteg, aki a vérben lévő vírusrészecskék számának növekedését látta, feltétlenül a hepatológus számláján van. Évente több alkalommal ajánlott megelőző vizsgálatot végezni a folyamat előrehaladásának és a transzplantációra utaló jelek időben történő kimutatásának meghatározására. Ezen kívül használhatsz és májvédőket is, bár az orvosok véleménye némiképp eltér. Egyesek úgy vélik, hogy ezek a gyógyszerek leállíthatják a folyamatot, és megóvhatják a nem gyógyult májsejteket; Mások meg vannak győződve arról, hogy nincs értelme elfogadni őket, és hogy intenzív antivirális terápiát kell végrehajtani.

Így a hepatitis C a betegségek kategóriájába tartozik, amelynek észlelése nehézségeket okoz. A diagnosztikai módszerek javítása, valamint az időben történő megelőző vizsgálatok csökkenti a betegség előfordulását. Fontos a betegség megelőzése is. Óvatosan kerülni kell a vérrel való érintkezést, és meg kell tagadni a kábítószert, csak akkor, ha ez a betegség megszűnik. A megelőzésben és a kezelésben a páciens tudatos hozzáállása az egészségéhez.

PCR analízis dekódolása hepatitis C-re

Egy speciális laboratóriumi vizsgálat - a hepatitis C ptsr elemzése - jelentősen leegyszerűsíti a vírusos betegség diagnózisát. Kivételtől eltekintve nem, és hepatitisz C. Kis mennyiségű vér ellenőrizhető az RNS és a vírusellenes szer egyéb genetikai anyagának tartalma. A PCR-sel végzett elemzést minden olyan személy végzi, aki a vérplazmában keringő hepatitis C ellenanyagokkal rendelkezik, amelyek jelenléte megerősítette a minőségi detektálást.

Az eredmények értelmezését a kutatási forma grafikonaként "pozitív" vagy "negatív" elemzésként értelmezzük. Ezenkívül a PCR segítségével nemcsak a vírus minimális tartalmának minőségi meghatározása, hanem a részecskék számának a meghatározása is lehetséges. Így meghatározható a becsült vírusterhelés és a lehető legpontosabban meghatározható a kezelés orvosi taktikája.

A máj vírusos károsodása

A máj mint az emésztőrendszer eleme hatalmas terhelést jelent. A sejtjeiben az anyagcsere-folyamatok többségének metabolikus reakciói zajlanak, ami minden szerv és rendszer optimális működését biztosítja. Ugyanakkor a méregtelenítő tulajdonsága nagyszerű a salakok és az anyagcsere termékek eltávolítására fermentatív epével.

A máj különféle jellegű vírusok általi veresége rendkívül veszélyes a szerv számára. Számos klinikai kép és a májgyulladás kezelésének be nem tartása az egészségügy szempontjából első helyen áll. A hepatitis C krónikus, és hosszú ideig negatív eredményt ad, lassan parazitálja az emberi testet. A vírus átjut a biológiai folyadékokon keresztül: a vér és ritkábban a spermiumon keresztül. A nem steril fecskendők, a fertőzött nők természetes átadása, a véletlen sérülések vagy az egészségügyi dolgozók részaránya miatt a vírusnak az egészséges emberre történő átviteléhez vezethet.

A betegség időben történő diagnosztizálását rejtett klinikai kép és nem szisztematikus patológia gátolja. A pozitív eredményt egyszerűen elszalasztja a rossz minőségi vizsgálatok. Csak a májsejtek jelentős sérülése okoz bizonyos tüneteket, azonban a viremia negatív hatása addigra nem hagyja a szerv helyreállítását.

A modern orvoslás speciális módszereket fejlesztett ki a vírus legkisebb nyomainak felismerésére. A PCR, az ifa, a máj biopszia a legkisebb károsodást észleli a májban, és a vírus elleni antitestek minimális szintjét. A PCR segítségével végzett elemzés a legegyszerűbb és megbízhatóbb a diagnosztikai gyakorlatban.

Minőségi elemzés

A polimeráz reakció lényege az RNS szekvencia kifejlesztése. A reakciót akkor hajtjuk végre, amikor ugyanazon vírusfehérjék vannak a vérplazmában.

Speciális katalizátorok lehetővé teszik egy hasonló víruslánc-szekvencia szintézisét, amelyet a virális RNS ismert nukleotidjaival hasonlítanak össze. Ennek alapján meghatározzák a vírusterhelést és a májkárosodást.

A PCR képes kimutatni a kívánt gén jelenlétét a vérben. Ez a diagnosztikus láncreakció szintén nagyon specifikus. A nukleotidláncok szekvenciája minden egyes lény számára egyedülálló, így az enzimatikus láncindítók létrehozzák a kívánt genetikai információ azonos szekvenciáit. Így bármilyen vírus kimutatható legkevesebb pontossággal, még akkor is, ha kvantitatív indexe rendkívül kicsi.

Azoknál a betegeknél, akiknél a vírusos hepatitis elleni kifejlesztett ellenanyagok találhatók, kvalitatív vizsgálatot végeznek a ptsr vagy az ifa esetében. Az elemzés eredménye lehet pozitív vagy negatív, ami mindkét esetben kezelést igényel.

A láncreakció pozitív reakciójának megfejtése a hepatitis vírus RNS-fragmenseinek jelenléte vagy a fertőzés jelensége miatt következik be.

A vérplazmában a vírus aktívan szaporodik és parazitálja a májsejteket. A PCR-diagnosztika negatív választ adhat, ha a vírus RNS részecskéi kis mértékben, a teszt érzékenységének szintjén vagy egyáltalán nem jelen vannak a plazmában. Közvetlen fertőzés után a vírus mennyisége viszonylag lassan növekszik, és csak 1-2 hetes ifa vagy más kvalitatív kutatás megkülönbözteti őket.

Negatív elemzés nyerhető a következő esetekben:

  1. Ha az anyagot helytelen körülmények között veszik fel, vérmintát vesz fel szennyezettséggel;
  2. A páciens korábbi heparin injekcióival.
  3. Ha más enzimek és szubsztrátok vannak jelen a mintákban, amelyek megzavarják a láncreakció folyamatát.

Mennyiségi elemzés

A mikrobiológiai diagnózis mennyiségi vizsgálata a vírus terhelésének meghatározására szolgál. A viremia megerősített minőségi analízise alapja a genetikai anyag mennyiségének és koncentrációjának meghatározására. A detektált vírus RNS számát a vér térfogategységében, általában 1 milliliterben határozzuk meg. A szükséges anyagokat nemzetközi egységekben fejezzük ki, néhány laboratórium az ifa analízisében a példányszámot használja.

Általában bármely terápiás kezelés előtt a PCR mennyiségi elemzését végezzük. A vírusos RNS-eket elég gyakran számolják: egy, négy, tizenkét és huszonnégy hét után. A 12. hét indikatívnak tekinthető, mivel ebben az időszakban végzett elemzés alapján az orvosi intézkedések hatékonyságának dekódolására kerül sor.

A PCR-vel vagy az IFA-val végzett mennyiségi analízis során véna mintákat veszünk.

Az eredmények magas virális terhelésként történő értelmezése 800 000 NE / ml értékről indul. Az ilyen pozitív eredmény a hepatitis C esetében egy millió milliliter vérben legalább 3000 millió példányt tükröz. A viremia alacsony szintje megáll 400 000 NE / ml értéknél. A vizsgálat eredményei lehetnek negatív válaszok, valamint "a mérési tartomány alatt".

A "mérési tartomány alatti" becsléssel végzett kvantitatív teszt azt mondja, hogy a reakció nem tudta kiszámítani az RNS-t. A vírus a szervezetben kering, amit pozitív minőségi teszt mutat. A ptsr vagy ifa mennyiségi analízisének negatív mutatója azt jelzi, hogy nincs jelen RNS ebben a vérmintában.

Annak ellenére, hogy korlátozott a vírus átvitelének módja a véren keresztül, a vírusnak az anya és gyermek közötti titkain keresztül történő átvitelének kockázata nő.

A kvantitatív elemzés jelentős segítséget nyújt a terápiás beavatkozások értékelésében. Az Ifa és a ptsr a vírusellenes gyógyszerek hatását tükrözi, segíti a terápia időzítését és a betegek immunitásának felmérését. A laboratóriumi vizsgálatok korai negatív válasza a sikeres kezelést és a kezelés időtartamának lerövidítésének szükségességét jelzi. A viremia ráták lassú csökkenését meg lehet határozni, mivel szükség van a terápiás kurzus módosítására. A vírusterhelés szintje határozza meg a betegség prognózisát. Az alacsony arányú hepatitis valószínűleg egyszerűen kezelhető, és teljesen eltávolíthatja a vírust a szervezetből. A vírus jelenléte a vérben nagy figyelmet igényel, és sokoldalú kezelést igényel.

Minőségi analízis a hepatitis C esetében

Hagy egy válasz

A polimeráz láncreakció kvalitatív elemzése - a hepatitis C-re vonatkozó PCR meghatározza a HCV jelenlétét vagy hiányát a szervezetben. A laboratóriumban megvizsgálják az RNS szerkezetét, amelyben a vírus található. Ha a C-vírus kimutatható, szükségessé válik a kezelés folyamata, mivel az elhanyagolt májbetegség komoly következményekkel jár. A kinyerés után kvalitatív PCR-t végzünk, hogy megerősítsük az antitestek hiányát. Kinevezett és megelőző vizsgálat. A vér kórokozója alacsony koncentrációban a PCR (kvalitatív) nem képes észlelni semmit, mert a diagnosztikai rendszernek érzékenységi küszöbe van. A betegség kezdeti szakaszában vagy enyhe formában a PCR-t végül ultrahangos berendezéssel diagnosztizálják.

Mi az RNS vírus?

A hepatitis C vírus (vagy a hepatitis C vírus RNS) RNS-ről nevezik magát májbetegségnek. A C vírus egy egészséges sejthez kötődik, és behatol. Idővel elterjedt az egész testben, csak a vérbe jut. Ennek eredményeképpen a kórokozó behatol a májba, megolvasztja sejtjeit és keményen dolgozik. A májsejtek (hepatociták) a hatása alatt, változásokon át, és ebből a veszteségből dolgoznak. Minél hosszabb a C vírus a májban, annál több sejt hal meg. Idővel veszélyes betegségek alakulnak ki, amelyek rosszindulatú degenerációhoz és halálhoz vezetnek.

A máj fertőzése ilyen típusú vírussal semmilyen módon nem nyilvánulhat meg külsőleg. Sok éven át vagy több tucat évig a fertőzött személy egészségesnek érzi magát, és csak egy véletlen vizsgálat leggyakrabban patológiát tár fel. A hepatitis vérének adományozásakor az emberi gén (DNS) részét képező RNS (ribonukleinsav) lánc egy részét vizsgáljuk. A laboratóriumi kutatások eredményeit nem szabad az öngyógyításra használni, mert ez csak indikátor. Az orvos meghatározza a pontos képet és további diagnózist.

Ha kész: a tanulmány tanúsága

A HCV megerősítésére PCR-analízist (polimeráz láncreakció) rendelünk. A PCR vizsgálatok segítenek megtalálni a kórokozó anyagot az RNS szerkezetében, és hatékony terápiát írnak le. A következő esetekben kinevezett:

  • a májgyulladás jeleinek azonosítása;
  • megelőző szűrővizsgálatok;
  • kapcsolattartó személyek vizsgálata;
  • a vegyes eredetű hepatitis diagnózisa (a fő kórokozó meghatározása);
  • A vírus szaporodásának aktivitási szintjének meghatározása krónikus formában;
  • a máj cirrhosis;
  • hogy meghatározzák az előírt kezelés hatékonyságát.
A PCR-vizsgálatokat orvos határozza meg a hepatitis kezelésének hatékonyságának meghatározására.

A PCR minőségi és mennyiségi analízise is van. A kvantitatív PCR mutatja az RNS százalékát a vírus hordozóival a vérben, és a minőségi PCR vírus jelenlétét vagy hiányát jelzi. A minőségi pozitív mutató (a hepatitis C RNS jelenléte) szintén kvantitatív vizsgálatot igényel. A hepatitis C kórokozójának magas koncentrációja az átvitel kockázatával jár együtt, azaz mások fertőzésével. Az alacsony mennyiségeket jobban kezelik. A vérben található RNS vírusok mennyisége nem kapcsolódik a betegség intenzitásához. A PCR-analízist az interferon terápia esetében is végezzük, annak érdekében, hogy meghatározzuk a kezelés folyamatának időtartamát és összetettségét.

A hepatitis C minőségi PCR analízisének jellemzői

A polimeráz-láncreakció-indexhez kvalitatív analízist rendelünk minden olyan beteghez, akik vércukorszint-ellenes antitesttel rendelkeznek, és akik visszanyerték és gyógyultak, újra kell vizsgálni. Javasoljuk, hogy a vizsgálatot elvégezni a hepatitis B és, majd abban az esetben pozitív következtetés, és a hepatitis D. minőségileg is analizáltuk reakatsiya kell elvégezni együtt más vérvizsgálat. Az elemzések teljes képet adnak a vírus terjedésének.

A vizsgálati eredmények közül csak pozitív, hepatitis C vagy negatív teszt, azaz a vírus jelenléte vagy hiánya látható. Ha a következtetést "észlelik", akkor a vírus aktívan cselekszik és folytatja tevékenységét. A "nem található" megnevezés azt jelzi, hogy nincs vírus vagy kis mennyisége. Ezzel a mutatóval figyelembe kell venni azt a tényt, hogy a diagnosztikai rendszerek analitikai érzékenysége eltérő, és az RNS hepatitis C még mindig a vérben maradhat, de nem mutatható ki az elemzésben.

A PCR ultra-hepatitis C különösen érzékeny módszere még kis mennyiségben is feltárul. Egy hibridizációs-fluoreszcens vizsgálatot alkalmaznak, amely sokszor magasabb, mint a standard PCR rendszerek. A módszert több esetben használják:

  • a hepatitis C gyanús rejtett formái;
  • A PCR diagnózisát a kórokozó nem igazolta, de vannak antitestek;
  • visszanyerés esetén;
  • hogy azonosítsa a fertőzés korai szakaszát.
Vissza a tartalomhoz

Az elemzés magyarázata

A diagnózis végső döntését a HCV PCR dekódolásának hatása befolyásolja, különösen az ultramethod módszerrel. Ennek a kutatásnak a fő hátránya a minta és az anyagok steril körülmények közötti szigorú betartása. A kis eltérés néha az elemző pontatlan következtetéseit mutatja, bonyolítja a diagnózist és a későbbi kezelést. A PCR analízise a hepatitis vírus RNS meghatározására nem mindig mutatja a betegség képét bizalommal, néha pontatlanságok is be vannak engedve, mindkét irányban.

A hepatitisz-vírus diagnosztizálására ajánlott átfogó vizsgálatot alkalmazni.

A mutatók normája

A vírusos hepatitis C-ben található RNS-sel szembeni JgM antitestek hiányát a polimeráz láncreakció analízisének tekintik. Ugyanakkor a szerológiai analízis eredményei azt mutatják, hogy a C-vírus antitestjei jelen vannak, és ez a norma határain belül is fennáll. A minőségi meghatározás nem mutatja a betegség intenzitását, csak a hepatitis C okozó ágensét mutatja az RNS-ben. Az ilyen elemzést a kezelés után meg kell ismételni a tényleges gyógyulás megerősítése érdekében.

eltérések

Ha a HCV RNS-nek megfelelő JgM ellenanyagok vannak jelen, ez egy fejlődő fertőzésre utal. A betegség akut vagy krónikus, különböző szakaszokban manifesztálódik. Ha az antitestek számának csökkenését rögzítik, az elemzés a kezelés során elért eredmények elérését jelzi. Rendkívül ritkán előfordulnak a hamis pozitív eredmények a diagnózisban. A nőknél a terhesség alatt és más fertőző betegségekben szenvedőknél fordulnak elő.

PCR-vizsgálat a hepatitis C-re: típusok, indikációk, átirat

A vírusos hepatitis C súlyos betegség, amely májkárosodással jár. A betegek nyolcvan százalékában krónikus formában jár. A vírus szaporodik a májsejtekben - májsejtekben - és halálát okozza. A halott szövetet kötőszöveti foci váltja fel, a fibrózis kialakul.

A fejlesztés a máj fibrózis képtelen ellátni a funkcióját, kezdődik cirrhosis, ami veszélyes szövődményei: egyre nagyobb nyomás nehezedik a kapuvénában, gyomor-bélrendszeri vérzés, károsodott véralvadás mentális változások miatt kárt agyi magok mérgező termékeket.

A betegség oka a Flaviviridae családból származó vírusfertőzés, amely RNS-vírus egy típusa. Ez azt jelenti, hogy a genetikai anyag, amellyel a patogén fehérjéit szintetizálják, egy ribonukleinsav molekulában kódoljuk. A fertőzés a vérben, szexuális úton történik, és terhes nőtől a magzatig. Sajnos a fertőzés és az antitestek termelésének kezdete meglehetősen nagy mennyiségű időtartamot eredményezhet - két hétről hat hónapra. Ez nem teszi lehetővé a fertőzés meghatározását az enzim immunvizsgálat módszerével és a kezdeti kezelést a korai stádiumban.

Mi a PCR elemzés?

A PCR molekuláris analízis olyan módszere, amely lehetővé teszi a kórokozó genetikai anyagának kimutatását a fertőzés utáni első héten polimeráz láncreakcióval. A tanulmány nagyfokú specifitást, pontosságot és nem csak a vírus jelenlétének vagy hiányának meghatározását, hanem koncentrációját és genotípusát is meghatározza.

A vizsgálat elvégzéséhez vegye be a páciens vérét, amelyben potenciálisan megtalálható a vírus RNS-je. A vérben a primereket hozzáadjuk mesterségesen szintetizált részecskékhez, a kívánt gén kis hossza, és az RNS polimeráz egy speciális enzim, amely sokszorozza a kórokozó genetikai anyagának mennyiségét. Egy speciális berendezés segítségével több fűtési és hűtési ciklust hajtanak végre. Az anyagot ezután elemezzük és összehasonlítjuk az ismert vírusgénekkel, amelyek alapján következtetés születik a fertőzés jelenlétéről vagy hiányáról.

A hepatitis C PCR analízis típusai

A PCR-elemzés három típusa létezik:

  1. Minõségi PCR analízis. A tanulmány első szakasza. Lehetővé teszi a vírus genetikai anyagának azonosítását a vérben.

  • PCR mennyiségi elemzése. Lehetővé teszi a vírus terhelésének meghatározását - a patogén genetikai anyagának koncentrációját egy milliliter vérben. Ezt a vizsgálatot a terápia megkezdése előtt végezzük, majd az első, negyedik, tizenkettedik és (ha a tanfolyam hosszú) a kezelés huszonnegyedik hete annak hatékonyságának értékelésére.

  • genotipizáláshoz. A hepatitis C kórokozója gyakran és gyorsan mutál. A bolygón a vírus genotípusának hét variánsát találtam. Oroszországban az első, a második és a harmadik típus gyakori. A genotípusok mindegyike eltérő terápiás ellenállással rendelkezik, például az első típusú kezelés hatékonysága hatvan százalék, a második és a harmadik pedig nyolcvanöt. Ezért megfelelő gyógyszerek kiválasztása és megfelelő időtartamú kezelési eljárás meghatározása érdekében pontosan meg kell határozni, hogy a beteg milyen típusú vírussal fertőzött.
  • Javallatok a hepatitis C PCR analízishez

    PCR-vizsgálatot írnak elő a következő esetekben:

    • érintkezés egy beteg emberrel, ami fertőzéshez vezethet;
    • pozitív enzimkapcsolt immunvizsgálat;
    • a májcirrózis jelei: a májméret megváltozása, a megnagyobbodott lép, a szubkután vénás plexus megjelenése a hasra;
    • a májkárosodás tüneteinek megjelenése: fájdalom a hasüreg jobb oldalán, a bőr sárgulása;
    • az ALT és az AST fokozott aktivitása a biokémiai vérvizsgálatban;
    • a kezelés megkezdése előtt a vírusterhelés meghatározására;
    • az antivirális terápia hatékonyságának monitorozása;
    • a kezelés befejezése után a relapszus nyomon követése;
    • a diagnosztizált hepatitisz B jelenlétében, kizárva a vegyes májkárosodást.

    A hepatitis C PCR-vizsgálat dekódolása

    A hepatitis C-re vonatkozó PCR-analízis és enzim immunvizsgálat dekódolását egy hepatológus vagy fertőző betegség szakembernek kell foglalkoznia. A PCR eredményeinek elemzése biokémiai vérvizsgálattal, biopsziával és ultrahanggal kombinálva szükséges. Csak szakképzett orvos képes lesz elemezni a vizsgálatok eredményeit, és ezek alapján meghatározza a megfelelő kezelést.

    Minőségi elemzés dekódolása.

    A kórokozó genetikai anyagát az elemzett biológiai anyag tartalmazza. A fertőzés megerősítést nyert.

    Nincs fertőzés, vagy a patogén RNS mennyisége az érzékenységi határ alatt van.

    Kvantitatív elemzés dekódolása.

    Egészséges emberek számára normális szám. Ez azt jelenti, hogy nincs a hepatitis C RNS a vizsgálati anyagban, vagy koncentrációja a vizsgálat érzékenységi küszöb alatt van.

    Az RNS koncentrációja a mennyiségi tartomány alatt van. Az ilyen eredményeket nagyon óvatosan értelmezik, korrelálják más tanulmányok adataival, gyakran végeznek egy második vizsgálatot.

    A vírusterhelés szintje egy adott koncentrációban alacsony. Általában a vírus mennyiségének csökkenése azt jelenti, hogy a kezelés sikeres.

    Több mint 8 * 10 ^ 5 NE / ml

    A vírusterhelés szintje egy adott koncentrációban magasnak tekinthető.

    Több mint 2,4 * 10 ^ 7 NE / ml

    Az RNS mennyisége meghaladja a számszerűsítés tartományának felső határát. Lehetséges következtetéseket levonni a vírusterhelés mértéke miatt. Általában ilyen esetekben a tesztet megismétlik a vérminta hígításával.

    A genotipizálás dekódolása.

    Egy adott genotípus RNS-ét detektáltuk

    A biomateriában a hepatitisz C vírust kimutatják egy adott genotípus és altípus. Az eredmény latin számokkal és latin betűkkel van kódolva, például - 1a, 2b. Jelenleg hét genotípus és hatvanhét altípus van, de Oroszországban csak három első típus van.

    Hepatitis C vírus RNS-t detektáltunk

    A vérben az RNS egy ritka genotípust talál Oroszország számára, amely nem tulajdonítható az első, második vagy harmadik típusnak. Több kutatásra van szükség.

    Ez az eredmény azt jelzi, hogy a beteg egészséges vagy a kórokozó RNS szintje túl kicsi.

    Lehetséges a helyzet, ha a hepatitis C PCR-analízise negatív, és az enzim immunvizsgálat kimutatja a vírus ellenes antitesteket. Ez azt jelenti, hogy a beteg acut formában hepatitis C-t kapott és meggyógyult. Körülbelül húsz fertőzés esedékessé teszi a spontán gyógyulást, ha a páciens testének elegendő rezisztenciája van a fertőzésre.

    Annak ellenére, hogy a PCR nagyon pontos elemzés, annak eredménye az alábbi esetekben torzulhat:

    • a vért nem megfelelő körülmények között a laboratóriumba szállították, a hőmérsékleti rendszert megsértették;
    • a bioméret mintája szennyezett;
    • a vérben maradt nyomokban a heparin és más antikoagulánsok;
    • A vizsgált anyagban gátlók voltak - olyan anyagok, amelyek lassítják vagy leállítják a polimeráz láncreakciót.

    A PCR előnyei más módszerekkel szemben

    1. Diagnózis a korai szakaszban. A PCR detektálja a betegség kórokozójának genetikai anyagát. Az immunfluoreszcencia analízis segítségével csak immunglobulinokat lehet meghatározni, amelyeket a szervezet a fertőzésre adott válaszként termel. Hepatitis C fertőzés esetén a fertőzés és az immunválasz kialakulása között eltelt idő több hét és hónap lehet, mely időpontban az ELISA hatástalanná válik. A PCR már a fertőzés utáni első héten ad választ.

  • Alacsony hibalehetőség. A vizsgált anyagban meghatározzuk a genetikai anyagot, amely csak egyfajta kórokozóra jellemző. Ez lehetővé teszi a hamis eredmények kizárását. Az ELISA-val hibák léphetnek fel, mivel ugyanazok az antitestek felszabadulhatnak különböző vírusok ellen - ilyen antitesteket keresztreaktivitásnak neveznek.

  • Nagy érzékenység. A PCR a minimális mennyiségben is képes kimutatni a patogén RNS-ét. Ez lehetővé teszi a rejtett fertőzések azonosítását.
  • Hogyan készítsünk elő vérrátadást PCR kutatásra

    PCR analízis esetén a vénás vért gyűjtjük a hepatitis C-re. Általában két adag vért veszünk egyszerre a páciens vénájából: az első PCR-hez, a második az ELISA-hoz. Ez azért van így, hogy pontosabban felmérjük, mennyire rossz a páciensnek a vírussal fertőzött, és hogyan védekezik az immunitás.

    Általában az alábbi szabályok szükségesek a beteg számára:

    • reggel vérvizsgálatot végeznek;
    • az utolsó étkezés és a vérszállítás közötti szünetnek nyolc-tíz óra;
    • két vagy három nappal az elemzés előtt meg kell adni sült és zsíros ételeket, valamint alkoholt;
    • az elemzést megelőzően huszonnégy órával a betegnek kerülnie kell a fizikai erőfeszítést: ne hordjon súlyokat, ne vegyen részt edzőteremben vagy medencében.

    A hepatitis C PCR kvalitatív és kvantitatív elemzése: negatív, pozitív, dekódolás

    A hepatitis C a máj vírusos megbetegedése, amelyet a flavonavírus HCV (angol hepatitisz C vírus) okoz, amely ribonukleinsav (RNS) molekulát tartalmaz. Az RNS hordozza a vírus genetikai kódját. Jelenléte lehetővé teszi a hepatitisz C-re vonatkozó PCR-analízist.

    Az emberre nézve a HCV veszélye az, hogy az úgynevezett szerológiai ablak (a fertőzés és az immunrendszer reakciója megjelenése közötti időintervallum) nagyon hosszú lehet - több héttől hat hónapig.

    Ez nem tárja fel a fertőzést és időben elkezdi a kezelést.

    A gazdaszervezet sajátosságaitól függően a HCV akut formában jelenhet meg, és krónikus betegségként is kialakulhat, amely hosszú távú és drága kezelést igényel. A HCV elleni antitestek kimutatásakor számos laboratóriumi vizsgálatot végeznek, beleértve a hepatitisz C-re vonatkozó PCR-t is. Ez a vizsgálat minden olyan személy esetében történik, amelynek vérében a HCV ellenanyagok találhatók.

    Mi a PCR elemzés?

    PCR hepatitis C laboratóriumi elemzése - biológiai anyag vizsgálata a flavavirus jelenlétének azonosítására.

    A polimeráz láncreakció (a rövidítéssel megfejtve) a szervezet vírusos károsodásának mennyiségi értékét, minőségi jellemzőit és az RNS-t tartalmazó vírus genotípusait mutatja.

    Alapul véve, valamint további elemzések alapján meghatározták a terápia módját és időtartamát, valamint a járványtani tényezőt (a másik fuvarozó számára történő átvitel kockázata).

    Mi az RNS analízis a hepatitis C-re?

    A hepatitis C PCR-t RNS-analízisnek is nevezik (HCV RNS), mert nem ismert. A Flavavirus 30-60 nm virion méretű RNS részecskét tartalmaz. Ennek a mikroorganizmusnak az egyik jellemzője a mutációk nagy hajlama.

    A vírus minden alfajának (genotípusai) eltérő rezisztenciát mutatnak, ami különböző kezelési módszereket és a beteg további prognózisának jellegét okozza.

    Biológiai anyag (vénás vér) foglalkozik éhomi és általában tesztelték Real-Time PCR (nagyon érzékeny valós idejű diagnosztika, hogy meghatározzuk az alsó határ a 15 NE / ml-automatizált zárt rendszer módban).

    Vannak más vizsgálatok is, például COBAS AMPLICOR, amelynek érzékenysége 50-100 NE / ml. Bármely laboratóriumi vizsgálat esetében az érzékenységi küszöb fontos, azaz a reagens képes a vírus minimális koncentrációjának kimutatására a biológiai anyagban.

    A hepatitis C analízis típusai a PCR módszer alkalmazásával

    A hepatitis C PCR-je három fontos elemet tartalmaz:

    • minőségi elemzés;
    • kvantitatív elemzés;
    • genotipizáláshoz.

    Ezek a vizsgálatok meghatározhatják a viremia jellegét, valamint a kórokozó genetikai jeleit. A diagnosztikai rendszer érzékenységétől függően a tesztet egyszer elvégzik, és néha egy második vizsgálatot végeznek érzékenyebb reagenssel az eredmények megerősítésére vagy finomítására.

    Kiváló minőségű hepatitis C PCR

    A hepatitis C-re vonatkozó PCR-analízis a polimeráz-láncreakciós vizsgálat másik gyakori elnevezése. A vizsgálat standard érzékenysége, amely lehetővé teszi a vírusos elváltozás kimutatását, a 10-500 NE / ml tartományban van.

    A hepatitis C-re vonatkozó PCR negatív elemzése azt mutatja, hogy a vírus koncentrációja a beteg vérében a diagnosztikai rendszer érzékenységének küszöbértékénél alacsonyabb.

    Ha a minőségi PCR "nem észlelt" választ adott, akkor a későbbi kezeléshez fontos tudni a reagens érzékenységi küszöbértékét.

    A proteinfrakciók a flavavirushoz sokkal később jelentkeznek.

    Quantitative Hepatitis C PCR

    A PCR hepatitis C mennyiségi mutatója a vírusterhelés, amely tükrözi a flavavirus RNS koncentrációjának szintjét a szervezetben. Ez egy mutató, amely megmutatja, hogy hány darab vírus RNS-t tartalmaz egy köbcentiméter vér. A hepatitis C PCR RNS eredményeit egy hagyományos rendszerben nemzetközi egységben (IU / ml) nevezik ki, és különböző módokon rögzíthetők, például 1,7 millió vagy 1,7 millió NE / ml.

    A hepatitis C mennyiségi PCR-diagnózisát a vírusellenes terápia megkezdése előtt, a kezelés 12. hetében pedig a HCV elleni küzdelem kiválasztott módszerének eredményeinek értékelésére adják. A vírus terhelés lehetővé teszi a betegség három fontos mutatójának azonosítását:

    • fertőzőképesség, azaz a vírus egyik hordozótól a másikig terjedő kockázatának mértéke (minél nagyobb a flavavirus RNS koncentrációja, annál nagyobb a valószínűsége egy másik személy fertőzésére, például szexuális érintkezés esetén);
    • a kezelés módszere és hatékonysága;
    • időtartamát és prognózisát (minél nagyobb a vírusterhelés, annál hosszabb a kezelés).

    A hepatitis C mennyiségi PCR-diagnózisa a laboratóriumi vizsgálat típusától és az érzékenység küszöbétől függ. A norma alsó határa rendszerint 600 000 NE / ml, az átlagérték 600.000-700.000 NE / ml. A 800 000 NE / ml és annál magasabb értékeket magas szintű RNS-tartalmú vírusnak tekintik.

    genotipizáláshoz

    Tekintettel a HCV magas mutációs aktivitására, fontos, hogy a vizsgálati stádiumban meghatározzuk, hogy a vírus genotípusa a beteg vérében van-e. Összesen 11 hepatitis C vírus genotípust jegyeztek fel a bolygón, amely számos alfajot tartalmaz. Az Orosz Föderáció területén 1,2-es és 3-as gyakoriak.

    A hepatitis C PCR RNS-je a genotipizálással együtt nagyon fontos eleme az elemzésnek, mert lehetővé teszi az orvos számára a vírus rezisztenciájának (rezisztencia) meghatározását, megfelelő gyógyszerek kiválasztását és a kezelés lefolyását.

    A genotipizálás lehetővé teszi a máj állapotának közvetett meghatározását is. Például a HCV 3 genotípusát gyakran steatosis kísérli, amelyben a zsír felhalmozódik a test sejtjeibe.

    A PCR-nek a hepatitis C-ben végzett vérvizsgálatának olyan számot kell adnia, amely meghatározza a genotípust. A laboratóriumi válaszokban írható "nem gépelt" - ez azt jelenti, hogy az emberi vérben olyan vírus van, amelyet a tesztrendszer nem határoz meg. Ez azt jelezheti, hogy a genotípus egy adott földrajzi területen nem jellemző. Ebben az esetben szükség van az elemzés újbóli átadására a diagnosztikai rendszer nagyobb érzékenységével.

    PCR analízis dekódolása hepatitis C-re

    A hepatitis C PCR vizsgálatát a fenti adatok alapján számszerűsíthetjük. A laboratóriumi vizsgálatok eredményeinek átvételekor általában a következő adatokat írják fel:

    • "Found" / "not found" (magas minõségû PCR a hepatitis C esetében);
    • az RNS-t tartalmazó frakciók mennyisége, például 831.680 IU / ml (kvantitatív PCR-vizsgálat);
    • az a szám, amely meghatározza a HCV genotípust, például - 1, 2, 3, 4;
    • a teszt neve leginkább Real-time.

    A legfontosabb a hepatitis C PCR-elemzésének megfejtéséhez a második tétel, amely a vírusterhelést mutatja a prognózis, a módszer és a kezelés időtartamának meghatározása céljából.

    Ha a hepatitis C-re vonatkozó PCR-analízis negatív, és ELISA pozitív - mit jelent ez?

    A laboratóriumi tesztek megfejtéséhez fontos, hogy kapcsolatba lépjen egy hepatológussal vagy fertőző betegséggel foglalkozó szakemberrel, aki megmagyarázza a kapott információkat a diagnosztikai rendszer típusának és az érzékenység küszöbének megfelelően. Az orvosi gyakorlatban sok vérvizsgálati adat van, amelyek az orvosi nevelés nélküli embert zavartsággá teszik.

    Például, ha a vizsgálati HCV PCR negatív és pozitív ELISA, azt jelezheti, hogy ebben az időben a beteg vérében nem HCV, de mielőtt szenvedett akut formában a hepatitis C Úgy ​​tekinthető, hogy a pozitív-linked immunosorbent assay (ELISA) azt mutatja, hogy a vérben vannak olyan antitestek, amelyeket a múltban a vírus inváziója után állítottak elő. De a modern orvosi gyakorlatban ELISA elemzés nem eléggé megbízható, és gyakran ad szokatlan eredményeket, így az orvosok használni, mint egy elsődleges szűrés. A betegség diagnosztizálásakor a szakemberek pontosan PCR-tesztek segítségével irányulnak.

    Hasznos videó

    A következő videóban nagyon részletes és érdekes megmondani, hogy mi a lényege a PCR módszernek, hogyan történik az elemzés:

    következtetés

    A vénás vér általában a hepatitis C PCR analízisére vonatkozik. Leggyakrabban kettős mintavétel egy biológiai anyagból - ELISA-hoz, és közvetlenül egy PCR-teszthez. A helyes teszteredményekhez a biológiai anyag laboratóriumi mintavételének legfontosabb szabályainak betartása szükséges:

    • a vér az analízishez reggel egy üres gyomorban van;
    • az evés és a vérvétel között legalább 8 óra legyen;
    • A vizsgálat megkezdése előtt kizárnia kell az alkoholt és a sült ételeket is;
    • A vért megelőző napon a fizikai erőfeszítést elkerülni kell.

    A vérvizsgálat eredményei általában másnap készen állnak.


    Kapcsolódó Cikkek Hepatitis