A hepatitis C PCR kvalitatív és kvantitatív elemzése: negatív, pozitív, dekódolás

Share Tweet Pin it

A hepatitis C a máj vírusos megbetegedése, amelyet a flavonavírus HCV (angol hepatitisz C vírus) okoz, amely ribonukleinsav (RNS) molekulát tartalmaz. Az RNS hordozza a vírus genetikai kódját. Jelenléte lehetővé teszi a hepatitisz C-re vonatkozó PCR-analízist.

Az emberre nézve a HCV veszélye az, hogy az úgynevezett szerológiai ablak (a fertőzés és az immunrendszer reakciója megjelenése közötti időintervallum) nagyon hosszú lehet - több héttől hat hónapig.

Ez nem tárja fel a fertőzést és időben elkezdi a kezelést.

A gazdaszervezet sajátosságaitól függően a HCV akut formában jelenhet meg, és krónikus betegségként is kialakulhat, amely hosszú távú és drága kezelést igényel. A HCV elleni antitestek kimutatásakor számos laboratóriumi vizsgálatot végeznek, beleértve a hepatitisz C-re vonatkozó PCR-t is. Ez a vizsgálat minden olyan személy esetében történik, amelynek vérében a HCV ellenanyagok találhatók.

Mi a PCR elemzés?

PCR hepatitis C laboratóriumi elemzése - biológiai anyag vizsgálata a flavavirus jelenlétének azonosítására.

A polimeráz láncreakció (a rövidítéssel megfejtve) a szervezet vírusos károsodásának mennyiségi értékét, minőségi jellemzőit és az RNS-t tartalmazó vírus genotípusait mutatja.

Alapul véve, valamint további elemzések alapján meghatározták a terápia módját és időtartamát, valamint a járványtani tényezőt (a másik fuvarozó számára történő átvitel kockázata).

Mi az RNS analízis a hepatitis C-re?

A hepatitis C PCR-t RNS-analízisnek is nevezik (HCV RNS), mert nem ismert. A Flavavirus 30-60 nm virion méretű RNS részecskét tartalmaz. Ennek a mikroorganizmusnak az egyik jellemzője a mutációk nagy hajlama.

A vírus minden alfajának (genotípusai) eltérő rezisztenciát mutatnak, ami különböző kezelési módszereket és a beteg további prognózisának jellegét okozza.

Biológiai anyag (vénás vér) foglalkozik éhomi és általában tesztelték Real-Time PCR (nagyon érzékeny valós idejű diagnosztika, hogy meghatározzuk az alsó határ a 15 NE / ml-automatizált zárt rendszer módban).

Vannak más vizsgálatok is, például COBAS AMPLICOR, amelynek érzékenysége 50-100 NE / ml. Bármely laboratóriumi vizsgálat esetében az érzékenységi küszöb fontos, azaz a reagens képes a vírus minimális koncentrációjának kimutatására a biológiai anyagban.

A hepatitis C analízis típusai a PCR módszer alkalmazásával

A hepatitis C PCR-je három fontos elemet tartalmaz:

  • minőségi elemzés;
  • kvantitatív elemzés;
  • genotipizáláshoz.

Ezek a vizsgálatok meghatározhatják a viremia jellegét, valamint a kórokozó genetikai jeleit. A diagnosztikai rendszer érzékenységétől függően a tesztet egyszer elvégzik, és néha egy második vizsgálatot végeznek érzékenyebb reagenssel az eredmények megerősítésére vagy finomítására.

Kiváló minőségű hepatitis C PCR

A hepatitis C-re vonatkozó PCR-analízis a polimeráz-láncreakciós vizsgálat másik gyakori elnevezése. A vizsgálat standard érzékenysége, amely lehetővé teszi a vírusos elváltozás kimutatását, a 10-500 NE / ml tartományban van.

A hepatitis C-re vonatkozó PCR negatív elemzése azt mutatja, hogy a vírus koncentrációja a beteg vérében a diagnosztikai rendszer érzékenységének küszöbértékénél alacsonyabb.

Ha a minőségi PCR "nem észlelt" választ adott, akkor a későbbi kezeléshez fontos tudni a reagens érzékenységi küszöbértékét.

A proteinfrakciók a flavavirushoz sokkal később jelentkeznek.

Quantitative Hepatitis C PCR

A PCR hepatitis C mennyiségi mutatója a vírusterhelés, amely tükrözi a flavavirus RNS koncentrációjának szintjét a szervezetben. Ez egy mutató, amely megmutatja, hogy hány darab vírus RNS-t tartalmaz egy köbcentiméter vér. A hepatitis C PCR RNS eredményeit egy hagyományos rendszerben nemzetközi egységben (IU / ml) nevezik ki, és különböző módokon rögzíthetők, például 1,7 millió vagy 1,7 millió NE / ml.

A hepatitis C mennyiségi PCR-diagnózisát a vírusellenes terápia megkezdése előtt, a kezelés 12. hetében pedig a HCV elleni küzdelem kiválasztott módszerének eredményeinek értékelésére adják. A vírus terhelés lehetővé teszi a betegség három fontos mutatójának azonosítását:

  • fertőzőképesség, azaz a vírus egyik hordozótól a másikig terjedő kockázatának mértéke (minél nagyobb a flavavirus RNS koncentrációja, annál nagyobb a valószínűsége egy másik személy fertőzésére, például szexuális érintkezés esetén);
  • a kezelés módszere és hatékonysága;
  • időtartamát és prognózisát (minél nagyobb a vírusterhelés, annál hosszabb a kezelés).

A hepatitis C mennyiségi PCR-diagnózisa a laboratóriumi vizsgálat típusától és az érzékenység küszöbétől függ. A norma alsó határa rendszerint 600 000 NE / ml, az átlagérték 600.000-700.000 NE / ml. A 800 000 NE / ml és annál magasabb értékeket magas szintű RNS-tartalmú vírusnak tekintik.

genotipizáláshoz

Tekintettel a HCV magas mutációs aktivitására, fontos, hogy a vizsgálati stádiumban meghatározzuk, hogy a vírus genotípusa a beteg vérében van-e. Összesen 11 hepatitis C vírus genotípust jegyeztek fel a bolygón, amely számos alfajot tartalmaz. Az Orosz Föderáció területén 1,2-es és 3-as gyakoriak.

A hepatitis C PCR RNS-je a genotipizálással együtt nagyon fontos eleme az elemzésnek, mert lehetővé teszi az orvos számára a vírus rezisztenciájának (rezisztencia) meghatározását, megfelelő gyógyszerek kiválasztását és a kezelés lefolyását.

A genotipizálás lehetővé teszi a máj állapotának közvetett meghatározását is. Például a HCV 3 genotípusát gyakran steatosis kísérli, amelyben a zsír felhalmozódik a test sejtjeibe.

A PCR-nek a hepatitis C-ben végzett vérvizsgálatának olyan számot kell adnia, amely meghatározza a genotípust. A laboratóriumi válaszokban írható "nem gépelt" - ez azt jelenti, hogy az emberi vérben olyan vírus van, amelyet a tesztrendszer nem határoz meg. Ez azt jelezheti, hogy a genotípus egy adott földrajzi területen nem jellemző. Ebben az esetben szükség van az elemzés újbóli átadására a diagnosztikai rendszer nagyobb érzékenységével.

PCR analízis dekódolása hepatitis C-re

A hepatitis C PCR vizsgálatát a fenti adatok alapján számszerűsíthetjük. A laboratóriumi vizsgálatok eredményeinek átvételekor általában a következő adatokat írják fel:

  • "Found" / "not found" (magas minõségû PCR a hepatitis C esetében);
  • az RNS-t tartalmazó frakciók mennyisége, például 831.680 IU / ml (kvantitatív PCR-vizsgálat);
  • az a szám, amely meghatározza a HCV genotípust, például - 1, 2, 3, 4;
  • a teszt neve leginkább Real-time.

A legfontosabb a hepatitis C PCR-elemzésének megfejtéséhez a második tétel, amely a vírusterhelést mutatja a prognózis, a módszer és a kezelés időtartamának meghatározása céljából.

Ha a hepatitis C-re vonatkozó PCR-analízis negatív, és ELISA pozitív - mit jelent ez?

A laboratóriumi tesztek megfejtéséhez fontos, hogy kapcsolatba lépjen egy hepatológussal vagy fertőző betegséggel foglalkozó szakemberrel, aki megmagyarázza a kapott információkat a diagnosztikai rendszer típusának és az érzékenység küszöbének megfelelően. Az orvosi gyakorlatban sok vérvizsgálati adat van, amelyek az orvosi nevelés nélküli embert zavartsággá teszik.

Például, ha a vizsgálati HCV PCR negatív és pozitív ELISA, azt jelezheti, hogy ebben az időben a beteg vérében nem HCV, de mielőtt szenvedett akut formában a hepatitis C Úgy ​​tekinthető, hogy a pozitív-linked immunosorbent assay (ELISA) azt mutatja, hogy a vérben vannak olyan antitestek, amelyeket a múltban a vírus inváziója után állítottak elő. De a modern orvosi gyakorlatban ELISA elemzés nem eléggé megbízható, és gyakran ad szokatlan eredményeket, így az orvosok használni, mint egy elsődleges szűrés. A betegség diagnosztizálásakor a szakemberek pontosan PCR-tesztek segítségével irányulnak.

Hasznos videó

A következő videóban nagyon részletes és érdekes megmondani, hogy mi a lényege a PCR módszernek, hogyan történik az elemzés:

következtetés

A vénás vér általában a hepatitis C PCR analízisére vonatkozik. Leggyakrabban kettős mintavétel egy biológiai anyagból - ELISA-hoz, és közvetlenül egy PCR-teszthez. A helyes teszteredményekhez a biológiai anyag laboratóriumi mintavételének legfontosabb szabályainak betartása szükséges:

  • a vér az analízishez reggel egy üres gyomorban van;
  • az evés és a vérvétel között legalább 8 óra legyen;
  • A vizsgálat megkezdése előtt kizárnia kell az alkoholt és a sült ételeket is;
  • A vért megelőző napon a fizikai erőfeszítést elkerülni kell.

A vérvizsgálat eredményei általában másnap készen állnak.

A hepatitis C vírus diagnózisa

A hepatitis C vírus (HCV) egy RNS-tartalmú vírus a Flaviviridae családból. Ez a fertőzés képes reprodukálni a vérsejtekben (monociták, neutrofilek, B-limfociták és makrofágok), valamint magának a máj sejtjeinek - a hepatociták - károsodását. A magas szintű mutációs aktivitás miatt az ilyen típusú hepatitis képes elkerülni az emberi immunrendszer hatását.

Jelenleg 11 genotípus és egy ilyen vírus altípusai vannak, amelyek májkárosodásban különböznek, és befolyásolják a májgyulladás kezelésének időzítését. Az ilyen sokféle hepatitis C különböző vírusellenes terápiás módszereket igényel. Például az első és a negyedik genotípus hepatitisét 48 hétig kell kezelni, és a második és harmadik faj vírusainak kezelésére 24 hétig tarthat.

Miután a hepatitis C gyors tesztje pozitív eredményt hozott, PCR-analízist végeztünk a vírus RNS-jének vérmintákban történő azonosítására.

PCR diagnosztika

A polimeráz láncreakció (PCR) egy kísérleti módszer a vírusok kimutatására. A hepatitis C-re vonatkozó ilyen elemzés lehetővé teszi a DNS vagy az RNS vírus egyes fragmenseinek koncentrációjának jelentős emelkedését a benyújtott mintákban. Ez lehetővé teszi számukra a számok felismerését és számozását.

Ezt a hepatitis C-tesztet a következő eljárás szerint végezzük:

  1. Egy vérmintát (genetikai anyagot), amely képes a kívánt hepatitisz gént tartalmazni, be kell vezetni egy kémcsőbe. Helyére speciális anyagokat - primereket tartalmaznak, a rövid távú részek a kívánt génből, amelyek kémiai úton szintetizálódnak. Ebben a tartályban DNS vagy RNS polimeráz is hozzá van adva, képes nukleinsav láncokat létrehozni, amelyek teljesen azonosak az eredetivel. A kapott kompozícióhoz olyan szabad nukleotidokat állítunk elő, amelyek a DNS és az RNS speciális építőanyaga, amelyek közül az egyik kis radioaktív foszforrészecskéket tartalmaz.
  2. A kapott elegyet először 95 ° C-ra melegítjük, ami miatt normál állapotban átlapoltunk, ezért mindkét DNS-hélix gyengül.
  3. Az elemzés folytatásához a hatóanyag hűl, ezen a ponton a primerek kapcsolódnak a hepatitisz-vírus genoma kívánt régiójához, és nem engedik meg a DNS-t kettős hélix formájában. Amikor az elegy hűl, a polimeráz egyetlen nukleotidszálat keres. Ennek az enzimnek a rögzítése során a DNS-szalag mentén csúszik (mint egy köteg egy kötél), és kettős spirállal nem képes "dolgozni", ebből a célból a keveréket felmelegítik.
  4. Az elemzés meghosszabbítása érdekében újrahevítjük, ami ismét a nukleotidláncok elválasztásához vezet. A mintában lévő ilyen PCR-ciklusok végrehajtása során a hepatitisz gének száma a geometriai arányban nő, és a fennmaradó genetikai anyagokat csak lineáris rendszerességgel állítják elő.
  5. A vizsgálat befejezéséhez az oldatot megmaradt nukleotidrészecskékből tisztítják. Ezek elektroforézissel vannak elválasztva, a molekuláris DNS-láncok molekulasúly paraméterekkel való elválasztásával. A hepatitis PCR segítségével végzett ilyen vizsgálatok lehetővé teszik annak megállapítását, hogy a vírus kívánt génjei vannak-e a vizsgálati mintában, vagy sem.

Ennek a vizsgálatnak az előnye a PCR reakció nagyon nagy érzékenységi küszöbe. Az ilyen technika a diagnosztika elvégzéséhez ideális esetben csak egyetlen genomot igényel a vírus számára a teljes mintához.

Ezenkívül az ilyen PCR teljesen specifikus. Mindegyik génben egyedülálló nukleotidszekvenciát találunk, amely ujjlenyomatokhoz hasonlóan sehol sem megismételhető. Ehhez a hepatitis C analízishez a primereket olyan módon szintetizálják, hogy teljesen megfeleljenek a kívánt gének azon egyedi részének, amelyeknek nincs más szekvenciája.

Ez a technika lehetővé teszi a hepatitis c elemzését és meghatározását is, ami segít meghatározni a végleges diagnózist.

Egy ilyen laboratóriumi analízis lehetővé teszi, hogy a HCV RNS jelenlétét vagy hiányát, illetve vérmintákon kívüli egyéb típusokat ne csak a betegeknél szerezzen be. A radioaktív sugárzás paraméterének meghatározása mellett lehetőség nyílik arra is, hogy feltárják, mennyit talált a vizsgált mintában a kívánt genetikai anyag. Ez lehetővé teszi számunkra, hogy meghatározzuk az úgynevezett vírus terhelés paramétereit - a hepatitis RNS részecskék koncentrációját egy bizonyos térfogatban.

Minõségi PCR analízis

Ez az elemzés lehetővé teszi a hepatitis vírus vérmintákban való jelenlétének meghatározását. Minden embernek meg kell történnie, akiknél kimutatták, hogy ellenanyagok vannak a hepatitis ellen.

Egy ilyen vizsgálat eredményeképpen csak két érték lehet:

  • „Észlelt”. Az ilyen pozitív vizsgálati eredményeket a következőképpen értelmezik: a vizsgált mintában a hepatitis vírus RNS fragmenseit találták biológiai anyagból. Ebből következik, hogy a beteg vírussal fertőződött. Ez azt jelezheti, hogy a hepatitis okozója a szervezetben megszaporodik, és új sejteket fertőz meg, megsemmisítve a májat.
  • "Nem észlelt". Ez az eredmény azt jelzi, hogy a mintában, amelyet laboratóriumban elemzett, találtak töredékei RNS, amely specifikus a hepatitis C-vírus is van lehetőség, hogy az RNS koncentrációját a vírus-kórokozó a mintában olyan kicsi volt, hogy a teszt nem volt képes azonosítani. Ilyen esetekben azt mondják, hogy a koncentrációszint a vizsgálati érzékenységi küszöb alatt van.

Az ilyen vizsgálat lehet hamis-pozitív vagy hamis-negatív is, mivel a bioméret szennyezõdése vagy a vizsgálathoz szükséges kémiai összetevõkkel reagáló speciális anyagok mintáinak jelenléte következik be.

Hangsúlyozni kell, hogy a hepatitis C akut fázisaiban a PCR módszerrel végzett minőségi vizsgálat RNS-t csak 1-2 hét elteltével tudja észlelni a szervezet fertőzésének pillanatától számítva. Ez azt jelenti, hogy a betegség jóval a külső tünetek megjelenése előtt vagy a hepatitis elleni antitest megjelenése előtt azonosítható.

A vérvételt (a vénából) előnyösen üres gyomoron végezzük.

PCR mennyiségi elemzése

Az elemzés segítségével meghatározzuk a hepatitisz-vírus koncentrációjának szintjét a páciensben (vírus terhelés). Az ilyen vizsgálatot be kell nyújtani annak érdekében, hogy becsülhető legyen a vírus RNS-értéke egy bizonyos térfogatban.

A hepatitis c tesztek elemzésének vizsgálata a következő eredményekkel járhat:

  • Kvantitatív mutató (számokban)

A vírus koncentrációját (szám) számszerűen adjuk meg. Ehhez különféle egységeket használunk: vagy ME / ml (nemzetközi egység milliliterenként) vagy másolat / ml (a vírus RNS példányainak száma milliliterben). Átlagosan 1 NE / ml 4 kópia / ml-nek felel meg, mivel a különböző vizsgálati rendszerek eltérő konverziós faktorokkal rendelkeznek az ilyen egységek esetében.

Az alacsony virális terhelés ebben a vizsgálatban kevesebb, mint 400 000 NE / ml, és a magas 8000000 IU / ml.

Ez a mennyiségi értékelés lehetővé teszi a betegség fertőzőképességének ("fertőzőképességének") meghatározását. Minél inkább ez az analízis mutatója, annál nagyobb a kórokozó más emberekkel való átadása (szexuális érintkezéssel vagy függőleges úton).

Ez az ítélet azt jelenti, hogy a mennyiségi módszer nem képes kimutatni a hepatitis RNS-t, de maga a vírus jelen van a szervezetben, csak nagyon alacsony koncentrációban. Ezt megerősítették a PCR további minőségi analízisével, pozitív eredménye pedig a hepatitis jelenlétére utal.

  • Eredmény "Nem észlelt"

    Az elemzés pozitív értelmezése szerint a vérminta mennyiségi vizsgálata nem tudott kimutatni a hepatitis C vírus specifikus RNS részecskéit.

  • Kvantitatív PCR-analízis végzett különböző szakaszaiban az antivirális terápia (1., 4., 12. és 24. hét) jelzi a kezelés hatékonyságát, és hogy a szükséges korrekciókat.

    Az elemzés sajátosságai

    Ezt a vizsgálatot be kell nyújtani a hepatitis C különböző genotípusainak meghatározására. Jelenleg 11 kórokozó genotípusa ismert és számos altípus. Hazánkban az 1., 2. és 3. fajok hepatitis C genotípusai gyakoriak. A laboratóriumokban képes észlelni a különböző altípusok ezen fajok: 1a, 1b, 2a, 2b, vagy 3, 4, 5, 6-genotípusok meghatározására különböző módosításokat altípusok. Mindezen hepatitis esetében a detektálás sajátossága 100%.

    A genotípus módosításának tisztázása lehetővé teszi a megfelelő kezelés kiválasztását. Egy adott típusú genotípus jelenléte a betegben nem jelenti azt, hogy a betegség könnyebbé vagy nehezebbé válik, csak a hepatitis vírus fajtái, és nem többé.

    Azokban az esetekben, amikor a laboratórium nem tudja izolálni a vírus genotípusát, eredményt adhat ki: "Nem írják be. Genotípusokat vizsgáltunk: ilyen és ilyen (például 1a, 2b, 3av). Ez az átirat azt jelzi, hogy ebben a laboratóriumban nem álltak rendelkezésre megfelelő reagensek, amelyek meghatározhatják a hepatitis vírus genotípusát. A vizsgálatban a listában szereplő vírusokat ellenőrizték, de az RNS-mintákkal való megfelelésüket nem észlelték.

    A végleges diagnózis érdekében csak egyfajta elemzés elégtelen. Mindegyik teszt hamis pozitív eredményt adhat. Komplex vizsgálatot végeznek a hepatitis pontos típusának és a fertőzésnek a test fertőzésével való meghatározására. Ugyanakkor a májbiopszia és az enzimek tesztelése készül: ALAT, ASAT, valamint alkalikus foszfatáz és LDH. A bilirubin teszt és protrombin index analízis is elvégezhető.

    Csak a tesztek és a laboratóriumi vizsgálatok egy komplexe, a beteg állapotának általános elemzése segít meghatározni a hepatitis jelenlétét a szervezetben, annak alakját és súlyosságát is. Alapján az orvos meghatározhatja a további kezelést és lehetséges prognózisát a beteg számára.

    HCV, RNS mennyiségileg [real-time PCR]

    Tanulmány azonosítani a kórokozó ágens a hepatitis C (HCV), amelyben a módszer a valós idejű polimeráz láncreakció (RT-PCR) határozzuk meg a jelenléte a genetikai anyag (RNS) vírus és annak térfogatát (a vírusterhelés) a vérmintában.

    A HCV RNS a koncentráció lineáris tartományának alsó határánál kisebb koncentrációban detektálható. A lineáris koncentrációtartomány olyan tartomány, amelyben a kórokozó példányainak számát pontosan kiszámíthatjuk. Ehhez az elemzéshez a detektálási erősítő által meghatározott HCV DNS-koncentrációk lineáris tartományát 7,5 × 10 2 - 1,0 × 10 8 kópia / ml minta.

    Orosz szinonimák

    Hepatitis C vírus (HCV), az RNS mennyiségi meghatározása.

    Szinonimák angol

    Hepatitis C vírus RNS, mennyiségi, valós idejű PCR, vér, HCV vírus terhelés, Hepatitis C vírus RNS Quant.

    A kutatás módszere

    Polimeráz láncreakció reverz transzkripcióval valós időben.

    Milyen bioméreteket lehet felhasználni a kutatáshoz?

    Hogyan kell megfelelően felkészülni a tanulmányra?

    Ne dohányozzon 30 percig, mielőtt vért ad.

    Általános információ a tanulmányról

    A hepatitis C vírus (HCV) az Flaviviridae családból származó RNS-tartalmú vírus, amely hatással van a májra. Ez képes szaporodni a vérsejtek (neutrofilek, monociták és makrofágok, B-limfociták) és indukálják krioglobulinémia, Sjögren-féle betegség, és a B-sejt limfoproliferatív betegség. A HCV a magas mutációs aktivitás miatt képes elkerülni az immunrendszer védőmechanizmusainak hatásait. A vírus 6 genotípusa és számos altípusa van, amelyek különböző értékeket mutatnak a betegség kialakulásának prognózisa és az antivirális terápia hatékonysága szempontjából.

    A fertőzés átvitelének fő módja a vér (vér és plazma elemek, donor szervek, nem steril fecskendők, tűk, tetováló eszközök, piercingek) transzfúziójára való készítmények. Valószínűleg fertőzés a szexuális együttélés és a gyermek az anyától a szülés alatt, de ez ritkán történik.

    Az akut vírusos hepatitiset általában tünetmentes tünetek jellemzik, és a legtöbb esetben nem diagnosztizálják. A fertőzöttek mindössze 15% -a akut betegségben van - émelygés, testhervadás, étvágytalanság és fogyás (ritkán kísérteties sárgaság). A 60-85% -a fertőzött alakul ki krónikus fertőzés, amely 15-szer magasabb, mint a frekvencia a krónikus hepatitis B Krónikus hepatitis C előfordul a megfigyelt máj enzimek és gyenge megnyilvánulása a tünetek. 20-30% -ánál a betegség vezet a májzsugorodás, növelve a májelégtelenség és a hepatocellularis carcinoma.

    A HCV RNS kimutatása a vírus proliferációját jelzi a testben, és a betegség diagnosztizálására szolgáló módszer. A genetikai anyag a vírus kimutatható PCR-rel 10-12 nappal a fertőzés után - ebben az időszakban, a specifikus antitestekkel, amelyek előállítása több hónappal a fertőzés után, és nem májfunkció belül referencia tartomány.

    PCR-rel a vírus RNS minőségi vagy mennyiségi mutatója. A minőségi módszer miatt megerősítették a hepatitis C vírus jelenlétét és aktív reprodukcióját. A vírusterhelés mennyiségi meghatározása a HCV genotípus figyelembevételével lehetővé teszi a jelenlegi terápia szabályozását és a betegség lefolyásának előrejelzését.

    A kezelés hatékonyságát az RNS mennyiségének becslése jelenti a kezelés előtt és alatt. A vér vírusterhelése általában a sikeres kezelés első három hónapjában többször csökken. Hatékony terápiával a viremia az első 4-12 hetes kezelés során két nagyságrenddel csökken, és a terápia befejezése után a vírus genetikai anyagát a vérben nem észlelik. A viremia csökkenésének hiánya a kezelés kezdetétől számított 12 héttel azt jelzi, hogy nem hatékony. Ajánlatos az elemzést a terápia megkezdése előtt elvégezni, a kezelés 4., 12. és 24. hetében, valamint a tanfolyam vége után 24 héttel. A terápia időtartama és a hepatitis C vírus RNS mennyiségi meghatározásának gyakorisága függ a vírus genotípusától és a májkárosodás mértékétől.

    Mi a felhasznált kutatás?

    • A "vírusos hepatitis C" diagnosztizálására.
    • A vírusos hepatitis C folyamatának előrejelzése.
    • A vírusellenes terápia nyomon követése és a további kezelési taktika kérdése.

    Mikor rendelik a tanulmányt?

    • A hepatitis C vírus RNS kimutatásával.
    • Akut és krónikus vírusos hepatitis C-ben.
    • Vegyes hepatitis.
    • A vírusellenes terápia megtervezésekor, alatt és után.

    Mit jelentenek az eredmények?

    • Nem találtuk - hepatitis C vírus RNS-t nem detektáltunk, vagy az érték a módszer érzékenységi határánál (200 kópia / ml = 400 NE / ml).
    • másolat / ml (IU / ml) - hepatitis C vírus RNS detektálódott. Alacsony viremia (a betegség lefolyásának legkedvezőbb prognózisa és a terápia hatékonysága).
    • > 2 * 10 ^ 6 kópia / ml (> 4 * 10 ^ 6 NE / ml) - A hepatitis C vírus RNS-je kimutatható. Magas viremia.
    • > 1,0 * 10 ^ 8 kópia / ml (> 2 * 10 ^ 8 IU / ml) - Hepatitis C vírus RNS-t detektáltunk a lineáris koncentrációtartomány feletti koncentrációkban.

    Lineáris tartomány HCV RNS koncentráció C határozzuk kimutatására thermocycler, 7,5 × 10 2 - 1,0 x 10 8 kópia / ml (1,5 x 10 ~ 3 - 2 db 10 8 NE / ml).

    Mi befolyásolja az eredményt?

    Nem megbízható eredmény érhető el a következőkkel:

    • bioméret szennyezése;
    • jelenléte az inhibitorok mintájában - a PCR különböző összetevőire ható kémiai és fehérjeanyagok;
    • jelenlétét a heparin vérében.

    Fontos megjegyzések

    • A vírusterhelés szintje nem jelzi a májkárosodás mértékét és a betegség súlyosságát. Az értékeléshez biokémiai mutatókat és biopsziás anyagokat kell vizsgálni.
    • A kezelés megtervezése során nagyon fontos meghatározni a hepatitis C vírus genotípusát.

    Ajánlott

    Ki jelölte ki a tanulmányt?

    irodalom

    • Vozianova Zh.I. Fertőző és parazita betegségek: 3 t-ben - K.: Health, 2000. - T.1.: 600-690.
    • Kishkun AA A klinikai gyakorlatban alkalmazott immunológiai és szerológiai vizsgálatok. - M.: MIA LLC, 2006. - 471-476. O.
    • Harrison a belgyógyászat alapelvei. 16. kiadás NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
    • Lerat H, Rumin S, Habersetzer F és mások. In vivo tropizmus a hepatitis C vírus genom szekvenciáiban hematopoetikus sejtekben: a vírusterhelés, a virális genotípus és a sejtfenotípus hatása. Blood. 1998. május 15., 91 (10): 3841-9. PID: 9573022.
    • Revie D, Salahuddin SZ. A hepatitis C vírus replikáció szempontjából fontos emberi sejtek in vivo és in vitro: régi állítások és aktuális bizonyítékok. Virol J. 2011, 11. július; 8: 346. doi: 10.1186 / 1743-422X-8-346. PMID: 21745397.

    PCR-vizsgálat a hepatitis C-re: típusok, indikációk, átirat

    A vírusos hepatitis C súlyos betegség, amely májkárosodással jár. A betegek nyolcvan százalékában krónikus formában jár. A vírus szaporodik a májsejtekben - májsejtekben - és halálát okozza. A halott szövetet kötőszöveti foci váltja fel, a fibrózis kialakul.

    A fejlesztés a máj fibrózis képtelen ellátni a funkcióját, kezdődik cirrhosis, ami veszélyes szövődményei: egyre nagyobb nyomás nehezedik a kapuvénában, gyomor-bélrendszeri vérzés, károsodott véralvadás mentális változások miatt kárt agyi magok mérgező termékeket.

    A betegség oka a Flaviviridae családból származó vírusfertőzés, amely RNS-vírus egy típusa. Ez azt jelenti, hogy a genetikai anyag, amellyel a patogén fehérjéit szintetizálják, egy ribonukleinsav molekulában kódoljuk. A fertőzés a vérben, szexuális úton történik, és terhes nőtől a magzatig. Sajnos a fertőzés és az antitestek termelésének kezdete meglehetősen nagy mennyiségű időtartamot eredményezhet - két hétről hat hónapra. Ez nem teszi lehetővé a fertőzés meghatározását az enzim immunvizsgálat módszerével és a kezdeti kezelést a korai stádiumban.

    Mi a PCR elemzés?

    A PCR molekuláris analízis olyan módszere, amely lehetővé teszi a kórokozó genetikai anyagának kimutatását a fertőzés utáni első héten polimeráz láncreakcióval. A tanulmány nagyfokú specifitást, pontosságot és nem csak a vírus jelenlétének vagy hiányának meghatározását, hanem koncentrációját és genotípusát is meghatározza.

    A vizsgálat elvégzéséhez vegye be a páciens vérét, amelyben potenciálisan megtalálható a vírus RNS-je. A vérben a primereket hozzáadjuk mesterségesen szintetizált részecskékhez, a kívánt gén kis hossza, és az RNS polimeráz egy speciális enzim, amely sokszorozza a kórokozó genetikai anyagának mennyiségét. Egy speciális berendezés segítségével több fűtési és hűtési ciklust hajtanak végre. Az anyagot ezután elemezzük és összehasonlítjuk az ismert vírusgénekkel, amelyek alapján következtetés születik a fertőzés jelenlétéről vagy hiányáról.

    A hepatitis C PCR analízis típusai

    A PCR-elemzés három típusa létezik:

    1. Minõségi PCR analízis. A tanulmány első szakasza. Lehetővé teszi a vírus genetikai anyagának azonosítását a vérben.

  • PCR mennyiségi elemzése. Lehetővé teszi a vírus terhelésének meghatározását - a patogén genetikai anyagának koncentrációját egy milliliter vérben. Ezt a vizsgálatot a terápia megkezdése előtt végezzük, majd az első, negyedik, tizenkettedik és (ha a tanfolyam hosszú) a kezelés huszonnegyedik hete annak hatékonyságának értékelésére.

  • genotipizáláshoz. A hepatitis C kórokozója gyakran és gyorsan mutál. A bolygón a vírus genotípusának hét variánsát találtam. Oroszországban az első, a második és a harmadik típus gyakori. A genotípusok mindegyike eltérő terápiás ellenállással rendelkezik, például az első típusú kezelés hatékonysága hatvan százalék, a második és a harmadik pedig nyolcvanöt. Ezért megfelelő gyógyszerek kiválasztása és megfelelő időtartamú kezelési eljárás meghatározása érdekében pontosan meg kell határozni, hogy a beteg milyen típusú vírussal fertőzött.
  • Javallatok a hepatitis C PCR analízishez

    PCR-vizsgálatot írnak elő a következő esetekben:

    • érintkezés egy beteg emberrel, ami fertőzéshez vezethet;
    • pozitív enzimkapcsolt immunvizsgálat;
    • a májcirrózis jelei: a májméret megváltozása, a megnagyobbodott lép, a szubkután vénás plexus megjelenése a hasra;
    • a májkárosodás tüneteinek megjelenése: fájdalom a hasüreg jobb oldalán, a bőr sárgulása;
    • az ALT és az AST fokozott aktivitása a biokémiai vérvizsgálatban;
    • a kezelés megkezdése előtt a vírusterhelés meghatározására;
    • az antivirális terápia hatékonyságának monitorozása;
    • a kezelés befejezése után a relapszus nyomon követése;
    • a diagnosztizált hepatitisz B jelenlétében, kizárva a vegyes májkárosodást.

    A hepatitis C PCR-vizsgálat dekódolása

    A hepatitis C-re vonatkozó PCR-analízis és enzim immunvizsgálat dekódolását egy hepatológus vagy fertőző betegség szakembernek kell foglalkoznia. A PCR eredményeinek elemzése biokémiai vérvizsgálattal, biopsziával és ultrahanggal kombinálva szükséges. Csak szakképzett orvos képes lesz elemezni a vizsgálatok eredményeit, és ezek alapján meghatározza a megfelelő kezelést.

    Minőségi elemzés dekódolása.

    A kórokozó genetikai anyagát az elemzett biológiai anyag tartalmazza. A fertőzés megerősítést nyert.

    Nincs fertőzés, vagy a patogén RNS mennyisége az érzékenységi határ alatt van.

    Kvantitatív elemzés dekódolása.

    Egészséges emberek számára normális szám. Ez azt jelenti, hogy nincs a hepatitis C RNS a vizsgálati anyagban, vagy koncentrációja a vizsgálat érzékenységi küszöb alatt van.

    Az RNS koncentrációja a mennyiségi tartomány alatt van. Az ilyen eredményeket nagyon óvatosan értelmezik, korrelálják más tanulmányok adataival, gyakran végeznek egy második vizsgálatot.

    A vírusterhelés szintje egy adott koncentrációban alacsony. Általában a vírus mennyiségének csökkenése azt jelenti, hogy a kezelés sikeres.

    Több mint 8 * 10 ^ 5 NE / ml

    A vírusterhelés szintje egy adott koncentrációban magasnak tekinthető.

    Több mint 2,4 * 10 ^ 7 NE / ml

    Az RNS mennyisége meghaladja a számszerűsítés tartományának felső határát. Lehetséges következtetéseket levonni a vírusterhelés mértéke miatt. Általában ilyen esetekben a tesztet megismétlik a vérminta hígításával.

    A genotipizálás dekódolása.

    Egy adott genotípus RNS-ét detektáltuk

    A biomateriában a hepatitisz C vírust kimutatják egy adott genotípus és altípus. Az eredmény latin számokkal és latin betűkkel van kódolva, például - 1a, 2b. Jelenleg hét genotípus és hatvanhét altípus van, de Oroszországban csak három első típus van.

    Hepatitis C vírus RNS-t detektáltunk

    A vérben az RNS egy ritka genotípust talál Oroszország számára, amely nem tulajdonítható az első, második vagy harmadik típusnak. Több kutatásra van szükség.

    Ez az eredmény azt jelzi, hogy a beteg egészséges vagy a kórokozó RNS szintje túl kicsi.

    Lehetséges a helyzet, ha a hepatitis C PCR-analízise negatív, és az enzim immunvizsgálat kimutatja a vírus ellenes antitesteket. Ez azt jelenti, hogy a beteg acut formában hepatitis C-t kapott és meggyógyult. Körülbelül húsz fertőzés esedékessé teszi a spontán gyógyulást, ha a páciens testének elegendő rezisztenciája van a fertőzésre.

    Annak ellenére, hogy a PCR nagyon pontos elemzés, annak eredménye az alábbi esetekben torzulhat:

    • a vért nem megfelelő körülmények között a laboratóriumba szállították, a hőmérsékleti rendszert megsértették;
    • a bioméret mintája szennyezett;
    • a vérben maradt nyomokban a heparin és más antikoagulánsok;
    • A vizsgált anyagban gátlók voltak - olyan anyagok, amelyek lassítják vagy leállítják a polimeráz láncreakciót.

    A PCR előnyei más módszerekkel szemben

    1. Diagnózis a korai szakaszban. A PCR detektálja a betegség kórokozójának genetikai anyagát. Az immunfluoreszcencia analízis segítségével csak immunglobulinokat lehet meghatározni, amelyeket a szervezet a fertőzésre adott válaszként termel. Hepatitis C fertőzés esetén a fertőzés és az immunválasz kialakulása között eltelt idő több hét és hónap lehet, mely időpontban az ELISA hatástalanná válik. A PCR már a fertőzés utáni első héten ad választ.

  • Alacsony hibalehetőség. A vizsgált anyagban meghatározzuk a genetikai anyagot, amely csak egyfajta kórokozóra jellemző. Ez lehetővé teszi a hamis eredmények kizárását. Az ELISA-val hibák léphetnek fel, mivel ugyanazok az antitestek felszabadulhatnak különböző vírusok ellen - ilyen antitesteket keresztreaktivitásnak neveznek.

  • Nagy érzékenység. A PCR a minimális mennyiségben is képes kimutatni a patogén RNS-ét. Ez lehetővé teszi a rejtett fertőzések azonosítását.
  • Hogyan készítsünk elő vérrátadást PCR kutatásra

    PCR analízis esetén a vénás vért gyűjtjük a hepatitis C-re. Általában két adag vért veszünk egyszerre a páciens vénájából: az első PCR-hez, a második az ELISA-hoz. Ez azért van így, hogy pontosabban felmérjük, mennyire rossz a páciensnek a vírussal fertőzött, és hogyan védekezik az immunitás.

    Általában az alábbi szabályok szükségesek a beteg számára:

    • reggel vérvizsgálatot végeznek;
    • az utolsó étkezés és a vérszállítás közötti szünetnek nyolc-tíz óra;
    • két vagy három nappal az elemzés előtt meg kell adni sült és zsíros ételeket, valamint alkoholt;
    • az elemzést megelőzően huszonnégy órával a betegnek kerülnie kell a fizikai erőfeszítést: ne hordjon súlyokat, ne vegyen részt edzőteremben vagy medencében.

    Mi a hepatitis C vírus RNS?

    A hepatitis C vírus RNS-vizsgálata a legfontosabb eljárás, amely lehetővé teszi a betegek kezelésének időtartamát és módszereit nagy pontossággal. A betegség diagnosztizálása több különböző vérvizsgálatból áll, mint például:

    • a hepatitis C markerek (anti-HCV);
    • hepatitis C vírus RNS kimutatására (HCV RNS).

    Az első vizsgálat a hepatitis első gyanúja. A második lehetőség a legfontosabb a HCV RNS kezelésében, ezért részletesebben megfontoljuk.

    Mi a vírusos hepatitis C?

    A vírusos hepatitis C vagy a HCV fertőző betegség, amely a májra hat. A vírussal fertőződik a vérben. Ha fertőzést szenved, vérátömlesztést végez, amikor az orvosi eszközök sterilizálására vonatkozó szabályokat nem tartják tiszteletben. Kevesebb olyan eset van, amikor a betegséget szexuális úton vagy terhes anyától a magzatig kapják. A hepatitis C 2 típusból áll.

    A krónikus hepatitis C a legveszélyesebb. Ez egy olyan betegségforma, amely egész életen át tarthat. Komoly problémákba ütközik a máj működésében, például cirrózisban vagy rákban. A fertőzött emberek 70-90% -ában a betegség krónikus állapotba kerül.

    A hepatitis C legfontosabb veszélye az, hogy titokban, icterikus jelek nélkül halad. Ebben az esetben leggyakrabban panaszkodnak láz, hányinger és hányás, fizikai gyengeség, fokozott fáradtság, étvágycsökkenés és súlycsökkenés. Ebben az esetben a májszövetek kis tömörödésének hátterében gyakran előfordul rosszindulatú degenerációja. Ezért a vírusos hepatitis C-t gyakran "időbombaként" vagy "gyengéd gyilkosnak" nevezik.

    A betegség másik különlegessége nagyon lassú fejlődés, amely több tucat évre becsülhető.

    Rendszerint a fertőzöttek nem éreznek semmilyen tüneteket, és nem gyanítják valódi állapotukat. Gyakran előfordul, hogy a betegség csak akkor azonosítható, ha másik orvosra utal.

    A kockázati csoport a következőket tartalmazza:

    • olyan gyermekek, akik az anyáknál hepatitis C vírust kaptak;
    • drogfüggők;
    • emberek, akik átszúrtak testrészeket vagy tetováltak nem steril eszközöket;
    • adományozó vért vagy szerveket (1992-ig, amikor hemodialízist nem végeztek);
    • a HIV fertőzöttek;
    • A fertőzött betegekkel érintkező orvosi dolgozók.

    A hepatitis C RNS meghatározása

    Meghatározása a hepatitis C vírus RNS-t, más néven a hepatitis C PCR, ez a tanulmány a biológiai anyagok (vér), amellyel azonosítani tudja a szervezetben az azonnali elérhetőségét genomateriala hepatitis B vírus (bármely adott vírus egy egyetlen részecske RNS).

    A fő vizsgálati módszer a PCR vagy a polimeráz láncreakció.

    A HCV RNS meghatározására kétféle vérvizsgálat létezik:

    Minőségi teszt

    A kvalitatív elemzés elvégzése lehetővé teszi annak megállapítását, hogy a vírus a vérben van-e. Minden olyan betegnek, aki C-hepatitis antitestet kapott, ezt a vizsgálatot meg kell vizsgálnia. Eredményeivel 2 válasz érhető el: "jelen van" vagy "hiányzik" a vírus. A pozitív vizsgálati eredmény (talált) alapján meg lehet ítélni egy olyan vírus aktív multiplikációját, amely az egészséges sejteket a májban fertőzi.

    A kiváló minõségû PCR-hez végzett tesztet specifikus érzékenységre hangolták, 10-500 NE / ml¹et. Ha a hepatitis vírus 10 μU / ml-nél kisebb koncentrációjú vérben található, akkor a vírus kimutatása lehetetlenné válik. A vírus specifikus tartalma nagyon alacsony értéket mutat azokon a betegeken, akiknél az antivirális terápiát írják elő. Ezért fontos, hogy az orvosi rendszer érzékenysége magas szintű legyen a polimeráz láncreakció minőségének megállapításához és meghatározásához.

    Gyakran előfordul, hogy a C-hepatitisz polimeráz láncreakcióját azonnal a megfelelő antitestek megtalálása után végezzük. A vírusellenes terápiás kezelést követő vizsgálatok a 4., 12. és 24. hetet tekintik meg. És egy másik elemzést a PVT befejezése után 24 hét után végzünk. Ezután - évente egyszer.

    Kvantitatív teszt

    A PCR RNS kvantitatív analízise, ​​amelyet néha vírus terhelésnek is neveznek, meghatározza a vírus koncentrációját (specifikus tartalma) a vérben. Más szóval, a vírusterhelés értetődik egy bizonyos mennyiségű virális RNS, amely jelen lehet egy adott mennyiségű vért (hozott kezelhető 1 ml 1 cm kocka). A vizsgálati eredmények egységei nemzetközi (standard) egységek, osztva egy milliliterrel (IU / ml). A vírus tartalma néha eltérőnek tűnik, attól függ, hogy a laboratórium melyik kutatást végzi. A hepatitis C esetében a mennyiségi meghatározás néha olyan értékeket használ, mint a másolatok / ml.

    Meg kell érteni, hogy nincs specifikus függőség a C-hepatitisz súlyosságától a törzs koncentrációjában a vérben.

    A "vírus terhelés" ellenőrzése lehetővé teszi a betegség fertőzőképességének meghatározását. Tehát a vírus egy másik vírusának megterhelésének kockázata nő a hepatitisz koncentrációjának növekedésében a vérben. Ezenkívül a vírus magas tartalma csökkenti a kezelés hatását. Ezért a kis vírusterhelés nagyon kedvező tényező a sikeres kezeléshez.

    Ezenkívül a hepatitis C teszt és a PCR általi meghatározása nagy szerepet játszik a betegség elleni kezelésben és a kezelés sikerességének meghatározásában. A vizsgálati eredmények alapján tervezik a rehabilitációs tanfolyamot. Például a hepatitis vírus specifikus koncentrációjának lassú csökkenése esetén az antivirális terápia meghosszabbodik, és fordítva.

    A modern orvostudományban úgy vélik, hogy a terhelés több mint 800000 ME / ml magas. A 10000000 ME / ml feletti terhelés kritikusnak tekintendő. De a különböző országok szakértői és a mai napig nem ugyanazon a véleményen voltak a vírusterhelés korlátai.

    A mennyiségi teszt gyakorisága

    Általában a hepatitis mennyiségi elemzését az antivirális terápia előtt és a kezelés befejezése után 3 hónappal a terápia minőségének meghatározása végett végezzük.

    Ennek eredményeképpen a mennyiségi vizsgálatot a fent leírt minta eredményeinek mennyiségi értékelésének kell tekinteni. Ennek következtében a "mért tartomány alatt" vagy "a vérben nem észlelhető" megállapítás fog megjelenni.

    A kvalitatív vizsgálat érzékenységi paramétere általában alacsonyabb, mint a kvantitatív elemzés érzékenysége. A "hiányzó" átirat jelzi, hogy mindkét fajta elemzés nem találta a vírus RNS-jét. A "mért tartomány alatti" vizsgálattal a kvantitatív elemzés valószínűleg nem találta meg a hepatitis RNS-t, bár ez igazolja egy nagyon kis specifikus vírus jelenlétét.

    Hepatitis C és genotípusai

    Genotipizálása hepatitis C vírus RNS diagnosztizálni jelenlétében különböző genetikai típusú hepatitis C Science tudja több mint 10 típusú vírus genom, de az orvosi gyakorlatban kellően megkülönböztetni több genotípus, amelyek a legnagyobb részesedése a régióban. Meghatározása genetikai típusa kulcsszerepet játszik kiválasztásában az időzítés a kezelés, ami szükséges, ha figyelembe vesszük, sokféle mellékhatása elleni gyógyszerek hepatitis.

    A vírusos hepatitis C kezelésének módszerei

    A hepatitisz vírus gyógyítására szolgáló egyetlen hatékony módszer 2 gyógyszer kombinációja: az interferon-alfa és a ribavirin. Különben ezek a gyógyszerek nem annyira hatékonyak. A gyógyszerek ajánlott dózisát és az alkalmazás időzítését csak az orvos írhatja elő, és minden egyes betegnél egyedileg. Ezeknek a gyógyszereknek a kezelése 6-12 hónapig tarthat.

    Ma nem találtak olyan gyógyszereket, amelyek garantálják a vírus 100% -os helyreállítását. A megfelelően kiválasztott kezeléssel azonban a betegek gyógyulása elérheti az esetek 90% -át.

    A hepatitis C PCR minőségi elemzése

    A hepatitis egy súlyos betegség, amelynek számos oka van a kezdetnek. A fejlődés középpontjában a máj közvetlen vagy közvetett károsodása okoz. Tekintve annak fontosságát az egész szervezetre, csak azt lehet kitalálni, milyen rossz a patológia. Ebben a cikkben részletesebben tárgyaljuk a kurzus jellemzőit és a hepatitis C laboratóriumi diagnosztikáját.

    A betegség oka egy vírus, amely RNS-tartalmú kórokozókra utal. Megkülönböztető jellemzője - a mutáció képessége, vagyis szerkezetének megváltoztatása. Emiatt a fertőzés elszökik az immunrendszer támadását, és a legtöbb esetben krónikus gyulladást okoz a májban.

    Figyelembe véve a vírus különböző altípusainak létezését, a gyógyszerek kiválasztását a genotipizálás eredményeinek figyelembevételével kell elvégezni. Annak ellenére, hogy hosszú ideig tartó vizsgálatot folytattak a betegségről és a HCV felépítésének sajátosságairól, nem volt lehetséges a vakcina elleni vakcina kifejlesztése.

    A korai diagnózis nehézségei a májgyulladás tünetmentes lefolyásának következményei, melynek következtében egy személy a cirrhosis szakaszában orvoshoz fordul. A betegség időben történő kimutatásához rendszeres fizikai vizsgálatokra van szükség. Csak a vér laboratóriumi vizsgálata képes azonosítani a HCV-t és megelőzni mások fertőzését. Az a tény, hogy a fertőzés hordozója sokáig nem tudja a patológiát, és tovább továbbítja a vírust az egészséges embereknek.

    Átviteli útvonalak

    A vírus a legtöbb esetben a véren terjed, mivel a kórokozók legnagyobb koncentrációját tartalmazza. Így a fertőzést továbbítják:

    • hemodialízissel;
    • tűzéssel;
    • a harc során, amikor a bőr sérült, és hemokontakt fordul elő;
    • vérátömlesztéssel (vérátömlesztés).

    Az intim intimitás okozta fertőzés valószínűsége jelentéktelen, mivel a sperma és a hüvelyi elváltozás kis számú kórokozót tartalmaz. A fertőzés kockázata jelentősen megnő, ha a genitális nyálkahártya integritása veszélybe kerül. Ezt agresszív és anális szexekkel figyelik meg.

    Ami a fertőzés átvitelének vertikális módját illeti, az a munka során történik. A terhesség idejében a kórokozó nem tud átjutni a méhlepénybe az embrióba. Természetes rendellenességek esetén a patogén ágens a bõr traumájába kerül, amikor az anya vérével való érintkezést észlelik.

    Miután a kórokozó egészséges szervezetbe került, az ellenanyagok szintézise megkezdődik, amelyek védelmet nyújtanak a fertőzés ellen és az immunrendszerhez tartoznak. Ezek megtalálhatók az ELISA segítségével egy személy kezdeti vizsgálatakor.

    A diagnózis megerõsítéséhez a páciens polimeráz láncreakciót végez. Ez egy elemzés egy patogén ágens genetikai anyagának azonosítására és a vírusterhelés meghatározására.

    A hepatitis C laboratóriumi diagnózisa

    A laboratóriumi diagnosztika enzim immunvizsgálattal kezdődik. Fő feladata a kórokozóval szemben előállított antitestek kimutatása. Hatékonysága majdnem 95%. A preklinikai szakaszban végzett kutatásnak köszönhetően a vírus hordozó azonosítása lehetséges, és további vizsgálat céljából elküldi.

    Az ELISA minőségi analízise azt jelzi, hogy az immunglobulinok jelen vannak vagy hiányoznak a páciens vérében. Eredménye lehet "pozitív" vagy "negatív". Miután megkapta a válasz első változatát, a személy eljut a következő vizsgálathoz - PCR. Az ára függ a reagensek és a laboratóriumok minőségétől. A polimeráz láncreakció költsége elérheti a 4000 rubelt.

    A PCR jellemzői

    A polimeráz láncreakcióval még kis mennyiségű biológiai anyag lehetővé teszi a vírusterhelés becslését a vérben, azaz a kórokozók koncentrációját egy milliliter folyadékban.

    A PCR megjelenésével a hepatitis diagnózisa sokkal egyszerűbb volt. Az elemzés lehetővé teszi a HCV RNS azonosítását, a fertőző folyamat színvonalának és a vírus hordozó fertőzőképességének megállapítására.

    Számos genetikai diagnózis létezik:

    1. a hepatitis C-re vonatkozó PCR minőségi elemzése - megerősíti a HCV jelenlétét vagy hiányát a vizsgázó vérében:
    2. mennyiségi, amellyel lehetővé válik a vírusok koncentrációjának kiszámítása és a betegség színpadának megállapítása. Az eredményt IU / ml-ben vagy másolatokban / ml-ben adják (a laboratóriumból);
    3. genotipizálás szükséges a HCV genotípusának meghatározásához. Ehhez a kábítószerek pontos kiválasztásához van szükség, amelyek ebben az esetben a leghatékonyabbak. Az elemzés közvetetten jelzi a kóros folyamat súlyosságát a májban. Tehát a kórokozó harmadik genotípusával leggyakrabban megfigyelhető a steatosis, amelynek fejlődése a zsír felhalmozódása a hepatocytákban (sejtjeiben). Ezenkívül a vírus típusa befolyásolja a terápiás kezelés eredményét és időtartamát.

    A hepatitis C PCR minőségi elemzése

    A laboratórium első lépése a biológiai anyag HCV RNS jelenlétének tanulmányozása. Fontos megjegyezni, hogy a hepatitis C minőségi elemzésének bizonyos szintű érzékenysége van, ezért nem mindig adhatja meg a helyes választ. Ebben az esetben ajánlott ismételt laboratóriumi diagnózist végezni más reagensek alkalmazásával.

    A megbízható eredmények eléréséhez legalább 50 IU / ml érzékenységű vizsgálati rendszert kell használni.

    A diagnózis eredménye lehet "pozitív" vagy "negatív". Ha a patogén nem található a vérben, a vizsgálat véget ér. Amikor egy patogén ágenst detektálunk a mintában, akkor a vírus terhelés kvantitatív számát végezzük.

    A hamis negatív válasz akkor érhető el, amikor a technológiai folyamat megzavarodik, például olyan aktív összetevők, amelyek elnyomják a kórokozó másolatainak kialakítását a környezetbe. Így nem lehet megjeleníteni a vér igaz képet, amely miatt nem diagnosztizálják az emberi fertőzést.

    Hamis pozitív eredményt lehet elérni, ha a biológiai anyag gyűjtőcsöve, valamint a vizsgálat környezete szennyezett. Ezen túlmenően, egy ilyen elemzésre adott válasz lehetséges vegyes fertőzéssel, amikor a májat több vírus, például hepatitis C és D is befolyásolja.

    A minőségi kutatásra utaló jelek

    Az orvos kvalitatív vizsgálatot rendelhet a páciensnek a hepatitis C vírus RNS kimutatásához:

    • amikor az enzim immunoassay pozitív vagy megkérdőjelezhető választ kap;
    • a diagnózis ellenőrzéséhez;
    • a vírusterhelés meghatározása;
    • a betegség színpadának felállítása;
    • vegyes fertőzés diagnózisát. Gyakran előfordul, hogy a hepatitis C a májat a "D" vírussal egyidejűleg érinti;
    • a terápiás taktika meghatározása, figyelembe véve a kórokozó genotípusát;
    • a változások dinamikájának értékelése az antivirális gyógyszerek kezelésének hátterében.

    A polimeráz láncreakció előnyei közé tartoznak a következők:

    1. a technika magas érzékenysége, amely lehetővé teszi a fertőzés tényét a preklinikai szakaszban;
    2. a kórokozó genetikai anyagának azonosítása, nem pedig antitestek;
    3. a kórokozó-ágens altípusának létrehozása;
    4. a nagy sebességű diagnosztika, mivel nem szükséges anyagot táplálékközegre vírni, de elegendő egyedi vizsgálati rendszereket használni. Egy személy 5 óra elteltével kap eredményt;
    5. sokoldalúságát. Az elemzés lehetővé teszi bármely genetikai anyag (RNS, DNS) azonosítását. Ennek következtében az orvos megerősítheti a hepatitis C-t és más típusú betegségeket (B);
    6. a látens fertőzés észlelésének a lehetősége.

    Kvantitatív kutatás

    A polimeráz láncreakcióval végzett vérvizsgálat során kórokozók számát lehet kiszámolni egy fix mennyiségű biológiai anyagban. A mutató IU / ml. Az elemzésnek köszönhetően meg lehet állapítani a beteg fertőzőképességének mértékét, meghatározni a fertőző folyamat stádiumát, valamint értékelni a gyógyszerterápia hatékonyságát.

    A PCR alapján a szakértő eldönti, hogy mely gyógyszerek dózisa képes blokkolni a kórokozók terjedését. Ezenkívül meghatározzák az antivirális kezelés időtartamát és az életre vonatkozó prognózist. Fontos megjegyezni, hogy a vizsgálati rendszerek nagyon érzékenyek, ezért a módszer lehetővé teszi az emberi fertőzés megerősítését még a preklinikai szakaszban is.

    genotipizáláshoz

    Tekintettel arra, hogy a kórokozó képes mutálni, meghatározni a kezelés taktikáját és az antivirális gyógyszerek kiválasztását, genotípusa szükséges. Például a hepatitis HCV 1 kezelése 48 hétig tart, pozitív trendként csak az esetek 60% -ában figyelhető meg. A 2. és 3. genotípus kedvezőbb prognózissal rendelkezik. A vírusellenes szereket 8 hónapig írják fel, és hatékonyságuk elérheti a 85% -ot.

    Statisztikai adatok szerint a legtöbb esetben az 1., 2. és 3. HCV az Orosz Föderáció területén található.

    Egy laboratóriumi vizsgálat megfejtésekor ilyen válasz jelezhető: "nincs beírva". Ez azt jelenti, hogy egy vírus kering a beteg keringési rendszerében, amelyet a tesztrendszer nem ismeri fel. Az elemzés eredménye ebben az esetben azt jelzi, hogy az atipikus ember fertőzést okoz a kórokozó adott földrajzi területére.

    Hogyan lehet megbízható eredményeket elérni?

    A PCR-nek a hepatitis C kórokozójának RNS-ének kimutatására szolgáló kvalitatív vizsgálata megfelelő eredményeket mutatott, ezért meg kell felelnie a laboratóriumi diagnosztika előkészítésének követelményeinek:

    1. a vérmintavétel üres gyomorban történik, és az "éhes" rés nem lehet rövidebb 8 óránál;
    2. két nappal a vizsgálat előtt ajánlott az alkoholfogyasztás abbahagyása és az éles, zsíros és füstölt ételek elutasítása;
    3. töröljék el a véralvadásgátló gyógyszereket, például a heparint. Ha ezeket a gyógyszereket életciklus miatt írják fel, erről értesítenie kell az orvost. Ezenkívül a szakorvosnak ismernie kell olyan egyéb gyógyszerek befogadását, amelyek befolyásolhatják a laboratóriumi vizsgálat eredményét;
    4. A biológiai anyaggyűjtés előestéjén a fizioterápiás eljárásokat nem szabad elvégezni, és nehéz fizikai terhelésnek kell alávetni.

    Az elemzés eredményeit nem csak a vér adományozója, hanem egyéb tényezők is befolyásolhatják:

    • rossz vérgyűjtés;
    • a biológiai anyagok szállítására vonatkozó ajánlások be nem tartása;
    • a laboratóriumi dolgozók nem megfelelő képzése;
    • a kutatási technikák figyelmen kívül hagyása;
    • a véralvadás előtti antikoagulánsok (heparin) bevezetése. Ez a gyógyszercsoport csökkenti a koagulálhatóságot, ezáltal lelassítja a reagensek munkáját.

    A különböző laboratóriumokban a diagnosztikai válasz némileg eltérő lehet, de ezek a hibák nem befolyásolják a vizsgálat végeredményét.

    Különös figyelmet fordítanak a laboratóriumi vizsgálati rendszerek típusaira. Gyakran előnyös a nagy érzékenységű reagensek alkalmazása. Ez fontos az alacsony virális terhelésű betegeknél, mivel nehéz észlelni.

    Milyen gyakran végez laboratóriumi vizsgálatot?

    Elsősorban a polimeráz láncreakciót végezzük olyan személyeknél, akik immunválaszt követően ellenőrizték a hepatitis vírus ellenanyagait. Ebben az esetben kijelölték, hogy megerősítik egy személy fertőzésének tényét és megállapítja a betegség színpadát. Ezenkívül az elemzés lehetővé teszi a vírus altípusának meghatározását, ami különösen fontos a gyógyszerek kiválasztásához.

    A kötelező laboratóriumi vizsgálatok következő periódusa a vírusellenes terápia megkezdésétől számított 3 hónap. A diagnózis lehetőséget nyújt a gyógyszerek hatékonyságának értékelésére, az adag módosítására vagy cseréjére.

    Az alapvető analízisek mellett PCR is végezhető a kezelés kezdetétől számított 4 és 24 héten belül. A betegség pozitív prognózisát a vírusterhelés 3 hónapos terápiás kezelés utáni csökkenése igazolja. Így például 1 millió NE / ml-ről több százezerre kell csökkennie.

    Ha a patogén ágensek koncentrációja a vérben ugyanakkora szinten marad, vagy enyhén emelkedik, ez jelzi a vírusellenes szerek hatástalanságát és helyettesíti őket. A kezelés végén a PCR segítségével megerősíthetjük a beteg helyreállítását.

    A laboratóriumi diagnózis eredményeinek helyes értelmezéséhez egy hepatológus vagy fertőző betegség specialistával kell konzultálni. Mivel az ELISA-val kapcsolatos téves válaszok nagy gyakorisággal fordulnak elő, az elemzést kizárólag az elsődleges szűréshez használják. A beteg alaposabb vizsgálatához polimeráz láncreakciót alkalmaznak.

    Meg lehet gyógyítani a hepatitis C-t mellékhatások nélkül?

    Ma, a modern gyógyszerek és az új generációs sofosbuvir Daklatasvir a 97-100% valószínűséggel örökre fog gyógyítani hepatitis C. A legújabb gyógyszeres kapható orosz a hivatalos képviselője az indiai farmgiganta ZYDUS Heptiza. A megrendelt termékeket a futár a kézhezvételt követő 4 napon belül kézbesíti. Ingyenes konzultáció a modern drogok használatáról, valamint a vásárlás módjáról a Zydus beszállítójának hivatalos honlapján, Oroszországban.


    Kapcsolódó Cikkek Hepatitis