A vírusos hepatitis C, B, A laboratóriumi diagnosztikája

Share Tweet Pin it

A vírusos májgyulladás a máj fertőző gyulladásos betegsége, amely a leggyakoribb patológia a máj léziók között. A vírusos hepatitis típusától függően a betegség diagnózisa klinikai tüneteken és laboratóriumi vizsgálatokon alapul. A gondosan kutatott kórtörténet és epidemiológiai történelem fontos szerepet játszik. A vírusos hepatitis számos formája van, figyelembe véve a kórokozók széles skáláját, a klinikai megnyilvánulásokat, a betegség súlyosságát és súlyosságát. A vírusos hepatitis laboratóriumi diagnosztikája sok esetben az egyetlen módszer, amely lehetővé teszi a betegség pontos megállapítását. Jelenleg többféle hepatotropikus hatású (A, B, C, D, E) vírust azonosítottak és tanulmányoztak, amelyek hasonló klinikai képet okoznak. A hepatitis C alacsony szintű és nehéz diagnózisa miatt az ismert fajok közül a legnehezebb.

Vírusos hepatitis A

Széklet-orális átviteli módja van, ami széles körben elterjedt fertőzést tesz lehetővé. A hepatitis A diagnosztizálása nem túl nehéz. Az inkubációs időszak viszonylag rövid - 7 - 50 nap; melyet éles fellépés jellemez: magas láz, kifejezett aszténa tünetegyüttes, fájdalom az összes ízületben - klinikailag hasonlít az influenzára. A betegség időtartama - 1 hónap. A betegség enyhe lefolyása néha nem igényel különleges terápiás intézkedéseket, vannak öngyógyító esetek.

Vírusos hepatitis B

A szubklinikai laboratóriumi diagnózisa hepatitis B az egyetlen pontos módszer, hogy ellenőrizze a diagnózis - meghatározott antigént a vérben és egy ellenanyag egy fehérjét a kórokozó, valamint a HBV DNS-t. Átviteli útvonalak:

  • parenterálisan - a véren keresztül;
  • szexuális - a spermiumon keresztül;
  • függőleges: az anyától a magzatig (az anyatejjel keresztül a vírust nem továbbítják a gyermeknek).

Fertőzés lenyelt használatakor szennyezett tűk (egy tűt szenvedélybetegek használja) keresztül eszközök (abban az esetben, sebészeti beavatkozások, tetoválás, akupunktúra, füllyukasztás, manikűr, pedikűr), a vérátömlesztés. A látens időszak 2 hónap és 6 hónap között van. A tünetek hasonlítanak a vírusos hepatitis A kialakulásához: az influenza-szerű szindróma kialakul, fáj a szervezet egészében és az ízületekben, súlyos gyengeségben, rossz közérzetben. Néha kiütések vannak. Az akut hepatitiszre vonatkozó prognózis viszonylag kedvező: az esetek 80% -ában a helyreállás történik. A betegség szubklinikus formája gyakran krónikussá válik - ritkán lehetséges ilyen esetekben komplett gyógyulást elérni.

Ugyanakkor a betegség sok esetben egy hepatitis B műhold, a D (delta) vírus, amely vírusos hepatitis D-t okoz, és súlyosbítja az alapbetegség lefolyását.

A vírusos hepatitis E a klinikai tünetekre hasonlít a HAV-hoz, de fokozatosan előfordul, és sokkal veszélyesebb a terhes nők számára.

A HCV megnyilvánulása

Különösen fontos a hepatitis C (HCV) laboratóriumi diagnózisa a laboratóriumban, mivel a világ népességének mintegy 3% -át érinti. Minden évben növekszik az incidencia - ez a világon a kábítószer-függőség folyamatos növekedéséhez kapcsolódik.

Figyelem! A vírusos hepatitis C az egyik legveszélyesebb és legsúlyosabb a fertőző májkárosodás ismert formái között. Őt "gyengéd gyilkosnak" nevezik, mivel a szubklinikus áramlás hosszú ideig fennáll, majd gyors kimenetele a cirrózisnak, amely végzetes következményekkel járhat. A HCV kombinációja a fertőző hepatitisz más formáival jelentősen megnöveli a betegség lefolyását, és felgyorsítja a halálos kimenetelt.

Az akut HCV tünetmentes, ezért ritkán diagnosztizálják. Ha lehetséges ebben a fázisban azonosítani a betegséget, akkor a kezelés időben történő elkezdésének 20% -ában visszatérhet.

A HCV leggyakrabban krónikus formában figyelhető meg későbbi szakaszában. A folyamat kronizálása az esetek 50% -ában fordul elő.

A vírus C tünetmentes szállításával a májsejtek fokozatosan károsodnak, fibrosis alakul ki. A jövőben, ha nem áll rendelkezésre időszerű kezelés, a cirrózis vagy a májrák kockázata nő.

A vírusos hepatitis bármelyik formájának diagnosztizálása a meghatározáson alapul:

  • a kórokozó és annak replikációja;
  • a fertőzés markerei.

A diagnosztikai módszerek közé tartoznak az immunokémiai és a molekuláris-biológiai reakciók, amelyek kimutatják:

  • a kórokozó antigénjei;
  • a vírus ellenanyagai;
  • nukleinsavak.

A C-vírus szerkezete

A C (BC) vírusnak egyetlen szálú RNS-je van a genomjában. Ő az egyetlen olyan vírusos hepatitis okozó ágensek között, amelyeknek ilyen szerkezete van. Mind a hordozó, mind a beteg nem tudja kitalálni a vírust. Ezért a kóros állapot kimutatására egy nem egyértelmű diagnózis esetén számos tanulmányra és diagnosztikai tesztre van szükség.

A C-vírus genomja (annak RNS-je) 10 000 nukleotid bázisból áll. Az ilyen nagy heterogenitás meghatározza a HCV jellemzőit. Az RNS nukleotidjainak tanulmányozása során szignifikáns különbségeket mutattak ki a szerkezetükben. Figyelembe véve a feltárt strukturális sajátosságokat, létrehozták a HCV osztályozását, amely szerint:

  • lehetőségek (6 - 9);
  • altípusok;
  • genotípusok.

Némelyikük kivétel nélkül minden országban megtalálható, némelyik - helyi szinten bizonyos régiókban. A szervezetbe való behatolás után a C vírust az RNS-molekula nukleotidjainak láncába helyezzük. Folyamatosan mutál (mutál), és egy személy válhat a vírus ugyanazon genotípusának 50 altípusát hordozóvá. Az immunrendszer nem lépést tart a gyors mutációval: a vírus egy csoportjára antitesteket állítanak elő, a betegség krónikussá válik.

A C-vírus meghatározása

A HCV diagnosztizálása a molekuláris biológia megjelenésével valósult meg. Ezt a vér vírus rendkívül alacsony tartalma magyarázza, amely nem teszi lehetővé antigének izolálását korábbi módszerekkel.

HCV gyanúja esetén a laboratóriumi diagnózis célja a következő:

  • ellenanyagokat (IgG, IgM) ELISA-val (immunoassay enzim);
  • RNS vírus PCR (polimeráz láncreakció) alkalmazásával.

Figyelem! A hepatitis C szerológiai markerei RNS-HCV és antitestek, amelyek a szervezetben képződnek.

PCR - a hepatitis C vírus meghatározása

Az RNS-HCV a HCV korai markereire utal: vérben való megjelenése 10-12 nappal a fertőzés után következik be, vagyis jóval korábban, mint az aminotranszferázok (AST, ALT, GGT) növekedése. Az RNS-HCV detektálása a vírus aktív replikációját (multiplicációját) jelzi. Ez a diagnózis "arany standardja", mivel tisztázza és megerősíti a diagnózist még akkor is, amikor a betegség tünetei gyakorlatilag hiányoznak. PCR-t kell elvégezni az ELISA eredményeinek megfigyelésére. Minőségi és kvantitatív változatokban kerül végrehajtásra.

A vírusterhelést 800 000 NE / ml vagy 2 millió másolat / ml PCR esetén magasnak tekintjük; alacsony - PCR-rel

Figyelem! A PCR nem csak minőségi analízis (RNS-vírus kimutatása), hanem meghatározza az RNS másolatainak számát 1 ml vérben. Ez fontos szerepet játszik a hatékony kezelés és a terápia sikere értékelésének kijelölésében. Ha a vírus RNS-ét a vérplazmában kimutatják, ez a betegség akut fázisát jelzi. A májkárosodás mértéke és a kóros elváltozások terjedése - a fibrózis és a gyulladás - egy biopszia után kiderül. Ez a módszer a leginkább informatív és megbízható a diagnózisban. A manipuláció teljesen ártalmatlan a beteg számára, és néhány másodpercig tart.

ELISA - a vírus ellenanyagainak kimutatása

Az emberi immunrendszer ellenanyagokat termel (IgG, Ig M) a kórokozó ellen, amikor bármely fertőző ágens belép. A kialakult immunglobulinok erős komplexet hoznak létre egy idegen fehérjével (a vírus antigénjével), amelynek kvantitatív és kvalitatív paramétereit az ELISA során határozzák meg. Közvetett vizsgálati módszerre utal: a vizsgálat során a vírust nem észlelték, de a szervezet fertőző ágensére adott immunválasz előfordul. Az ELISA-t a korai diagnózis érdekében végezzük, amely a folyamat dinamikáját követi.

Az antitesteket a fertőzés 80% -ánál csak a betegség kezdete után 5-6 héttel észlelték, 90% -kal 12 hétig. Néha ezek a tesztek hamis pozitív válaszokat adnak. Ilyen esetekben speciális vizsgálatokat végeznek - az antitestfehérjék spektrumát rekombináns immunoblotting módszerrel határozzák meg.

A megbízható eredmények elérése érdekében a PCR- és ELISA-teszteket kétszer végezzük el bizonyos ideig. Általában az időtartam 6 hónap.

A megfigyelés taktika

A folyamat májműködésének tisztázására, a kezelés taktikájának meghatározására, a májfunkciók meghatározása:

  • vér-transzaminázok (ALT, AST, GGT);
  • a teljes bilirubin és frakciói;
  • lúgos foszfatáz (AFP);
  • teljes fehérje frakciókkal.

A laboratóriumi vizsgálatok eredményeitől függően a betegkezelés különböző taktikáját alkalmazzák:

  • Normális értékekkel a páciens orvos felügyelete alatt áll. Az egészségügyi változásokkal a tesztek megismétlődnek.
  • 2 vagy többszeres növekedéssel az anti-HCV ellen ELISA-t alkalmaznak.
  • Ha az enzim immunvizsgálat pozitív, PCR-polimeráz láncreakciót alkalmaznak, ami az antivirális terápia kiválasztását eredményezi.
  • Emelt 2-szeres vagy több indikátorának a máj minták, de negatív ELISA vagy növelésével máj mintákat 2-szeres, a pozitív IFA és PCR negatív dinamikus ellenőrzését folytatódik vizsgálatok és ellenőrző vér biokémiai vizsgálatok 1 3 havonta.
  • Magas biokémiai paraméterek mellett az ELISA és a PCR pozitív eredményeit klinikai diagnózissal végezzük, vírusellenes hatóanyagot választunk ki, és a kezelést szabályozzuk.

Biokémiai mutatók kutatásai

A biokémiai vérvizsgálat eredményei alapján becsülik az aminotranszferázok szintjét.

  • ALT - alanin aminotranszferáz - a hepatocyták része. Még egy kis mértékű felesleg a korai szakaszban meglévő hepatitiset (beleértve a vírust is) jelzi.
  • AST - aszpartát aminotranszferáz: ha szintje meghaladja az ALT-t, ez az induló fibrózis (kötőszöveti proliferáció) indikátora.

Az ALT, az AST magas vércukorszintje a májsejtek nekrózisának eredménye. Ezek a gyulladásos folyamatok aktivitásának indirekt mutatói. Ha az ALT szintek haladja meg a 3-szor a norma, beszélünk a minimális aktivitás, 3-10-szer -umerennaya gyulladásos folyamat aktivitását, több mint 10-szer - hepatitis nagy aktivitást.

Az AST szint változik, és más patológiákkal az ALT-t specifikusabbnak tekintik a májbetegségek esetében.

  • A teljes és a közvetlen bilirubinszint növekedése a fokozott oktatással vagy a testből való késleltetett kiválasztódással fordul elő. A vírusos hepatitis a bilirubin kiválasztásának megsértésével történik. A nyálkahártyagyártás és a sclera 30-35 mmol / l feletti bilirubinszintek mellett, a sárga bőr további felhalmozódásával figyelhető meg. Krónikusan ez nem történik meg.
  • A szindrómára jellemző az alkalikus foszfatáz (AFP), a gamma-glutamintranszferáz (GGT), a koleszterin és az epesavak növekedése. A májbetegség azonban nem az egyedüli oka a növekedésnek.
  • Az albumin növekedése károsodott májfunkcióval jár.

Klinikai diagnózis

A vírusos hepatitis C javát klinikai tünetek jelzik. Krónikus lefolyású jellemzi gyér tünetek: rossz közérzet zavart és fokozott fáradékonyság felé a nap végén, csökkent tolerancia szokásos fizikai aktivitás. Normális biokémiai vizsgálatokban az ilyen klinikai tünetek ritkán kapcsolódnak a vírusos hepatitishez. Széthajtva klinikai kép jelenik meg a későbbiekben is: ott teleangíektázia és máj „sztárok”, máj - és és lépmegnagyobbodás, sárgaság, a ínhártya, a bőr és a nyálkahártyák, a száj, bőrviszketés (nagyon magas bilirubin szint a vérben), sötét vizelet, elszíneződött széklet, vérző, fogyás, májpálma.

Figyelem! Jelenlétében krónikus HCV képezhet nagy valószínűséggel májrák alakul ki, ezért szükséges rendszeres időközönként (1, minden hat hónapban), hogy vizsgálja meg a vérben a tumor markerek és az alfa - fetoprotein.

Ultrahangos vizsgálat

A laboratóriumi módszerek mellett további vizsgálati módszerek is vannak, amelyek fontos szerepet játszanak a HCV diagnózisában. Ezek közé tartozik az ultrahangvizsgálatok. Ezzel a vizsgálati módszerrel tanulmányozzák a hasi szervek állapotát. Meghatározzák a szervek méretét, sűrűségét, szerkezetét, elhelyezkedését, kiterjedt alakzatokat, egyenleteket, az epe kiáramlását, a portális méretét és a lépvénát. A splenomegália, a hepatomegalia, a portal-vénák nagyítása a májgyulladást jelzi a cirrózis átmenetével. További vizsgálat, serodiagnosis szükséges a vírusos hepatitis C kizárásához vagy megerősítéséhez.

Fibroszáró és egyéb vizsgálatok

A közvetett diagnózis módszerét, amely megfelel a biopszia - fibroscanning (elasztometria): nem invazív, biztonságos, ismételten végezhető a terápia szabályozására. Az elasztometria elvégzésére utaló jelek patológiás folyamatok a májban, beleértve a vírus jelenlétét.

Vannak olyan diagnosztikai tesztek is, amelyek a májbiopszia alternatívájaként szolgálnak. A vizsgálatok lehetővé teszik az érintett szerv pontos morfológiai képének, meglévő fibrózisnak, steatosisnak, nekrózisnak vagy gyulladásnak a meghatározását. Néhány közülük:

  • A FibroTest - segítségével 5 biokémiai indikátor átfogó elemzése és a fibrosis szakaszok időben történő diagnosztizálása.
  • Az ActiTest 6 biokémiai mutatót határoz meg, és lehetővé teszi a nekrózis gyulladásos folyamatának diagnosztizálását a májban.

Figyelem! A HCV prognózisa az időben történő diagnosztikától, a fertőzés mértékétől és a páciens gyógyulási vágyától függ. A modern terápiás módszerek antivirális gyógyszerek alkalmazásával lehetővé teszik a betegség gyógyítását vagy hosszú távú remisszió elérését, az élet meghosszabbítását és minőségének javítását egy fertőzött személyben vagy hordozóban. A vírusos hepatitis C, a nehéz diagnózis és a hosszan tartó kezelés ellenére, nem döntő. Időben orvoshoz kell fordulni, hogy minőségi orvosi ellátásban részesüljön, és gondosan teljesítse az összes célját.

A hepatitis B és a hepatitis C diagnosztizálása. Vizsgálat

A hepatitis a máj gyulladásos folyamatainak gyakori neve. A legtöbb esetben, a hepatitis vírusok okoznak hepatitisz B és hepatitisz C megfertőződhetnek végrehajtásakor a piercing, tetoválás, kéz-, az intravénás kábítószer-használat. A fogorvos nagy fertőzési veszélyt jelent, sebészeti beavatkozásokkal, vérátömlesztéssel. A hepatitis B szexuálisan és anyától a gyermekeig terjed a terhesség alatt (a kockázat körülbelül 30-40%). A hepatitis C esetében az ilyen átviteli útvonal kevéssé releváns.

A vírusos hepatitis B és a hepatitis C tünetei hasonlóak.

A klinikai kép akut és krónikus formában különbözik.

Az akut vírusos hepatitis a máj szöveti gyulladásos folyamata egy közelmúltban (kevesebb, mint 6 hónapos) fertőzés. A krónikus vírus hepatitis egy májgyulladás-dystrophi elváltozás, enyhe fibrózis, amely több mint 6 hónapig tart.

A vírusos hepatitis tünetei a máj méregtelenítő funkciójának és koleszázisának (az epe kiáramlásának megsértése) miatti méregtelenítésnek tulajdoníthatók. Először is van egy cerebro-toxikus hatás, ami fokozott fáradtsághoz, alvási zavarokhoz vezet (az akut hepatitis enyhe formáiban és a krónikus hepatitiszben).

Akut betegség esetén a kezdeti időszak kb. 2-3 hétig tart. Ez kíséri ízületi fájdalom, gyengeség, emésztési zavarok (hányinger, hányás, étvágytalanság), láz, különösen gyakori vírusos hepatitis B epepangásos sárgaság miatt szintén jellemző a hepatitis B Ez megváltoztatja a színét a vizelet (sötét) és a széklettel (ragyogást ). Gyakran az akut forma általában tünetmentes, különösen a hepatitis C-ben.
Az akut vírusos hepatitis B az esetek 80% -ában a gyógyulás befejezésével zárul, 20% -ban - krónikus formában. A hepatitis C-ben krónikus betegség fordul elő a felnőtt betegek mintegy 90% -ában és a gyermekek 20% -ában. A krónikus forma a legnagyobb veszélyt jelenti, mivel gyakran a máj cirrhózisa.

A kezeletlen betegeknél a diagnózis előtt a mentális depresszió és a fáradtság lehet a krónikus vírusos hepatitis egyetlen megnyilvánulása. A későbbi szakaszokban a krónikus hepatitis kiterjedt fibrózis és májzsugorodás előtérben portális hipertenzió szindróma, amely életveszélyes miatt folyadék felhalmozódása a hasüregben (ascites) és a lehetséges belső vérzés.

Az első megjelenése jellemző hepatitis tüneteket kell alávetni a diagnosztikai vizsgálatok a hepatitis B vírus (B) és C. Figyelembe véve azt a tényt, hogy ez lehetséges, tünetmentes a betegség lefolyását, valamint a könnyű fertőzés HBV szűrés kell végezni rendszeresen, de a virális hepatitis B do oltást.

A hepatitis C fertőzés kimutatására alkalmazott módszerek

A vírusos hepatitis legsúlyosabb formája a hepatitis C. Csak ezt a vírust az RNS jelenléte jellemzi összetételében. A májenzimek megnövekedett aktivitása esetén a vírus behatolásának és terjedésének gyanúja jelenik meg a szervezetben. Egy további tényező, amely jelzi a diagnózis szükségességét, egy esetleges hordozónak a kockázati csoporthoz való tartozása.

Tanácsok a hepatológusoktól

2012-ben áttörést jelentett a hepatitis C kezelésében. Új, közvetlen hatású vírusellenes szereket fejlesztettek ki, amelyek 97% -os valószínűséggel teljes mértékben enyhítik Önt a betegségben. Azóta a hepatitis C hivatalosan teljesen gyógyítható betegségnek számít az orvosi közösségben. Az Orosz Föderációban és a FÁK országokban a kábítószereket a cofosbuvir, az daklataswir és a lepidasvir márkák képviselik. Jelenleg sok hamisítvány jelent meg a piacon. A megfelelő minőségű gyógyszerek csak olyan vállalatoktól szerezhetők be, amelyek rendelkeznek engedélyekkel és a vonatkozó dokumentációval.
Menjen a hivatalos beszállító honlapjára >>

A legtöbb esetben a betegség különleges jelek nélkül halad, és a hordozó nem tudja, hogy a teste HCV fertőzött. A betegség felderítése érdekében számos vizsgálatot és tesztet kell elvégezni.

Ha az ilyen elemzések eredményei kétségesek, a szakember előírhatja a beteg ismételt vizsgálatát.

Az emberi testben a máj mini-laboratóriumként működik. Ha van penetráció a vírusok, ez ad jelet erről - megsértették a termelés bizonyos enzimek, vagy csökkentik az aktivitást, megváltoztatja a vér kémiai kapcsolatban cseréje vagy az új anyagok.

Például, közvetett indikációja a HCV jelenléte a szervezetben lehet egy változás az aktivitás a AST és ALT- enzim-transzferázok, bekerülni a vérben, amely annak köszönhető, hogy betegségek, a máj szövetben.

De ez a tényező a máj és a belső szervek egyéb betegségeiről is tanúskodhat, így a szakemberek speciális, rendkívül hatékony módszereket fejlesztettek ki a hepatitis C vírus diagnosztizálására.

Annak ellenőrzésére, hogy van-e betegség, előzetesen laboratóriumi, laboratóriumi és klinikai vizsgálatokat kell végezni.

A betegség általános tünetei

A betegség latens formában folytatódhat, és krónikus állapotba kerülhet, és ez a változat a legtöbb esetben rögzített. Azonban a vírus inkubációs periódusának vége után, amely legfeljebb egy hónapig tarthat, bizonyos jelek lehetnek, amelyek hasonlítanak az influenza tüneteire. Fontos, hogy időben figyeljen rájuk, és ellenőrizze a HCV elérhetőségét.

Az ilyen jelek rangsorolása:

  • az egészség általános romlása;
  • emelkedett testhőmérséklet;
  • fájdalom az izmokban és az ízületekben;
  • ritkábban - a bőrreakciók megjelenése.

Ezek a jelek fokozatosan manifesztálódnak, így a páciens könnyen összekeverheti állapotát egy közönséges hideggel vagy ugyanazon influenzával.

Néhány nap múlva azonban megváltozik a betegség folyamata. jelennek meg:

  • fájdalmas érzések a helyes hipokondrium régiójában;
  • az étvágy csökkenése vagy teljes elvesztése;
  • a vizelet sötétedése;
  • a széklet tisztázása;
  • az émelygés állapota, a hányás késztetése.

Ha nem kezdi meg a kezelést időben, akkor a betegség krónikus állapotba kerül.

A betegség jellegében bekövetkező ilyen változás jelei olykor olyan észlelhetetlenek, hogy a fertőzött személy nem tulajdonít számottevő jelentőséget, mindent levesz a banális fáradtságért. De valójában a szakemberek szoros figyelmet és vizsgálatot igényelnek.

Nemrég olvastam egy cikket, amely leírja a "SOFOSBUWIR" gyógyszercsalád használatát DAKLATASVIR "a hepatitis C kezelésére. Ezzel a komplexszel korábban megszabadulhat HEPATITIS C-től.

Nem voltam szokva bízni semmilyen információban, de úgy döntöttem, hogy megvizsgálom és megrendeltem. A kábítószerek nem olcsóak, de az élet drága! Nem éreztem semmilyen mellékhatást az eljárásból, már gondoltam, hogy minden hiábavaló, de egy hónappal később elhaladtam a teszteken és a PCR-t nem észleltem, egy hónapos kezelés után nem találtam. Kardinálisan javult a hangulat, ismét volt vágy élni és élvezni az életet! Három hónapig vittem a gyógyszert, és ennek eredményeképpen a vírus eltűnt. Próbáld ki, és ha érdekel, akkor az alábbi link egy cikk.

Ezek olyan tünetek, mint például:

  • a fáradtság gyors kezdete;
  • fizikai zavarok és nem képesek megbirkózni a szokásos stresszekkel;
  • kellemetlen érzés a hasban;
  • a hányás és hányinger gyakori előfordulása;
  • az izmok és ízületek fájdalmai;
  • csökkent bélműködés.

Ha a betegség krónikus folyamatot szerez, sárgaság, fokozott máj és lép, vérzés, fogyás jelentkezik. Ez veszélyezteti a máj cirrhózisát vagy a rák kialakulását.

A fenti jelek vagy aggodalmak jelenléte a HCV vérbe való behatolásával kapcsolatban azt sugallja, hogy átfogó vizsgálatot kell végezni az egészségi állapot és a minőségi orvosi ellátás mellett. Az ilyen beavatkozás olyan laboratóriumi vizsgálatokat jelent, amelyek megerősítik a vírus fertőzését és terjedését a szervezetben.

Laboratóriumi kutatás

A hepatitis C diagnózisa és a kezelés utáni kinevezése egy olyan fertőző betegség szakember szakmai hozzáértésébe tartozik, aki szakosodott a betegség akut lefolyásának felismerésében. Ha a beteg krónikus formája van a betegségnek, konzultálnia kell egy hepatológussal.

A máj állapotának megváltoztatásának tanulmányozása érdekében a betegnek ajánlott olyan vizsgálatok elvégzése, mint a bilirubin és a májenzimszintek (ALT) szintjének vizsgálata.

A biokémiai májpróbák kötelező felvétele is, amelynek vizsgálata lehetővé teszi a betegség jelenlétének és a májsejtek károsodásának mértékét. A test észlelt megsértése a HCV jelenlétének vérvizsgálatát javasolja.

A vírus létezését és tulajdonságait speciális markerek alkalmazásával azonosítják. Ezek anti-IgM / G és HCV RNS markerek. Az ilyen elemzéseket kétféle típusú vizsgálat jellemzi:

Immunológiai (ELISA). Ez a típus a vér vírus ellenes létezésének meghatározásán alapul. Az antitestek jelenléte a HCV megbízható mutatója. A szervezet (vagyis a vér leukocitái) a vírust elpusztítja. Miután az illető beteg volt, az antitestek minden életben a vér felépítésében maradnak. Ez az immunrendszer védő reakciója.

Ha ez az elemzés pozitív eredményt ad, fertőzés gyanúja merül fel. Továbbá a potenciális hordozónak meg kell erősíteni a megerősítő diagnosztikai módszerek komplexét. Ez annak köszönhető, hogy az antitestek létezése nem közvetlen bizonyíték a betegség jelenlétére. Talán a szervezet már egyszer már kölcsönhatott a vírussal, például az oltás során. Vagy például a hamis pozitív eredményt gyakran fel lehet venni terhes nőkre.

A pontos diagnózis érdekében a szakembernek ellenőriznie kell a genetikai vizsgálatok eredményeit. Az ilyen tesztek tagadhatatlan előnye a betegség korai szakaszának diagnosztizálása, az egyszerű használat, a fertőzés progressziójának ellenőrzése. Az ELISA hátrányai között szerepel a vírus jelenlétének meghatározására való képtelenség, de csak a megfelelő antitestek;

Genetikai (PCR). Ez a faj a PCR (polimeráz láncreakciós módszer) PCV genetikai anyagának meghatározásán alapul. Meghatározzuk a vírus RNS jelenlétét. Ennek eredményeként rendelkezésre állnak a vírus koncentrációra vonatkozó adatok és tagsága egy adott típushoz. Ez a módszer képes felismeri a HCV kis koncentrációját is.

Mivel a betegség lehet különböző jellegű származási, és ennek következtében a különböző típusú vírusok okozta, a vizsgálat PCR biztosítja a legteljesebb információt etiológiai tulajdonsága, hogy a vírus, amely kiváltotta a betegséget. Az ilyen típusú elemzések előnyeit a vérszérum HCV minőségi és mennyiségi vizsgálata jelenti. Ez lehetővé teszi az orvos számára, hogy előírja az optimális rendszert a betegség megszabadulására, a betegség dinamikájának megfigyelésére, a kiválasztott kezelési módszerek hatékonyságának értékelésére.

Ez az elemzés három fázisból áll: kvalitatív PCR, majd kvantitatív PCR és genotípus meghatározás. A legfrissebb kutatásoknak köszönhetően a szakember a leghatékonyabban kezelheti a betegség kezelését és alkalmazhat gyógyszereket egy adott vírusfajta számára. Ez segít abban, hogy a lehető leghamarabb megszabaduljon a betegségtől.

A laboratóriumi vizsgálatok elvégzése után az orvos előírja az optimális kezelési rendszert:

  • ha a biokémiai indikátorok a norma határain belül vannak, a beteg állapotának megfigyelése megtörtént, és a vizsgálatok időszakonként ismétlődnek;
  • jelenlétében rendellenességek májfunkciós tesztek, és az ELISA-pozitív PCR eredményeket, a szakértő hozzárendeli klinikai vizsgálatok attribútumok rend és a fertőzés elleni hatásosságát dinamikája és a kiválasztott gyógyszerek és kábítószer.

Mi a klinikai diagnózis jellemzője? A májkárosodás mértékének meghatározásához az ultrahangos módszert alkalmazzák. Az SPM során szerzett adatok alapján a szakember képes megítélni a szerv méretének, struktúrájának, szerkezetének, szöveti sűrűségének és bizonyos esetekben - funkcióinak változását.

A májállapot pontosabb adatai elemzik a biopsziát, amellyel megállapítják a fibrózis mértékét és a nekrózis-gyulladásos károsodást.

A diagnózis minden típusára alapozva meghatározza a diagnózist, és meghatározza a leghatékonyabb kezelést. Ha szakértő van bármilyen kétség merül fel a jelen lévő vírus vagy annak tartozó egy bizonyos típusú, esetleg a potenciális beteg megújítható vagy további vizsgálatok, amelyek segítenek létrehozni egy pontosabb képet annak állapotát.

Hepatitis C: fertőzés, diagnózis, kezelés módja

A hepatitis C (hepatitis C) a máj gyulladásos betegsége, melyet a vírus HCV és hepatitis C vírus okoz. Amikor a hepatitis C vírus megszaporodik, és a májszövet károsodik, kóros folyamatok alakulnak ki, májcirrhosis alakul ki, és a rák kialakul. Ezt a formát tartják a legveszélyesebb fajta hepatitis nem csak azért, mert a képesség, hogy megzavarják a teljes működését a szervezetben, és betegséget okoznak vezetnek rokkantság vagy halál, hanem azért is, mert a betegség természete. A hepatitis C tünetei általában nem fejeződnek ki, a fertőzés rejtve marad, és a hepatitis C elleni vakcina hiányzik.

Mi a hepatitis C (hepatitis C)?

A hepatitis C (HCV) egy különálló fertőző ágens felfedezése előtt különálló betegséggé vált. A „nem-A, nem-B hepatitisz», nem-A, nem-B hepatitisz (NANBH) volt, mint egy betegség megnyilvánulásai, amely lehetővé tette, hogy utalnak a hepatitis-csoport, de különböznek a betegség lefolyása és a súlyos komplikációkat. Ezt követően a hepatitis D és G vírusokat szintén izolálták hepatitis fajtákban.
A vírus egy speciális formáját először 1989-ben izolálták. Jelenleg hivatalosan azonosították a HCV vírus hat genotípusát, és további öt laboratóriumi vizsgálatot végeztek. A HCV 90 altípusáról is ismert. A leggyakoribb forma a vírus első formája, továbbá felelős a hepatitis C legsúlyosabb formájáért is, amely rezisztens az interferon terápiára.
A hepatitis C vírus változékonysága, az új genotípusok termelése a fertőzés során megnehezíti a vakcina létrehozását a betegség ellen, amely pillanatnyilag a statisztikusok szerint körülbelül 150 millió embernek van a világon. Évente a hepatitis C által okozott szövődményekből mintegy 350 ezer ember hal meg. Az egyedi törölt tünetek olyan helyzeteket eredményeznek, amikor a hepatitis HCV diagnózisát véletlenszerűen észlelik az elemzés során, vagy a komplikációk kialakulásának szakaszában állapítják meg. A vírus aktív mutációja a genotípus módosított példányainak létrehozásához vezet, ami a betegség krónikus formájának magas százalékát okozza.

A hepatitis C jelei

Fotó: Jarun Ontakrai / Shutterstock.com

A hepatitis C első jeleinek megjelenése a test ellenállásától függ. A fertőzéstől kezdve az elsődleges tünetekig 2 hét és 6 hónap között lehet. Ha korai diagnózisra gyanakodnak a fertőzéssel való érintkezés, PCR vérvizsgálatot végeznek a vírus RNS jelenlétének megállapítására a vérben, a fertőzés után 2 héttel.
A hepatitis C a "ragaszkodó gyilkos" jellemzője: a látens tünetek és súlyos komplikációk komoly károkat okoznak a testben, a HCV jelenlétének gyanúja hiányában.
A vírusos hepatitis ezen formájának első tünetei közé tartozik a munkaképesség csökkenése, az aszténikus állapot, a fáradtság érzése.
A hepatitis C fő tünetei, amelyek a szervezetben a vírus kifejezett szorzásának szakaszában manifesztálódnak, az alábbiak:

  • csökkenés vagy étvágytalanság;
  • hányinger;
  • általános gyengeség, gyengeség, egészségromlás;
  • fájdalom az ízületekben;
  • a bőr nyálkahártyája, a nyálkahártyák, a szem sclera a bilirubin vérben való koncentrációjának növekedése miatt a hepatitis C májkárosodása miatt;
  • a máj és a lép méretének növekedése.

A hepatitis C okai, a hepatitis C szerzésének módjai

A HCV vírus átvitelének módja hematogén, vérrel és más biológiai folyadékokkal. A fertőző ágens még a legkisebb cseppekben is jelen van, és legfeljebb 5 napig aktív marad, amikor a folyadék szobahőmérsékleten szárad. Fertőzés lenyelés fertőzött HCV biológiai anyag egy másik organizmus invazív eljárások, valamint a kapcsolatot a seb felületén (karcolások, karcolások, repedések és elváltozások a nyálkahártya és így tovább. D.). Ebben a tekintetben azonosítsa a fertőzés fő módjait:

  • nem sterilizált, újrafelhasználható fecskendők, tűk injekció formájában;
  • vérátömlesztés, plazma fertőzött donorból, transzplantáló szervek és szövetek;
  • a nem sterilizált eszközök használata a fogászati ​​klinikákban, kozmetikai, manikűr szalonok, piercingek, tetoválás rajzok stb.
  • traumás szexuális érintkezés: elegendően kis repedések a nyálkahártyán;
  • a fertőzés vertikális módja: anyától a magzatig terhesség alatt;
  • háztartási fertőzési mód a pengék, fogkefék stb. használata esetén (rendkívül ritka);
  • szállítási és operatív eljárásokban, traumák nem steril körülmények között.

vírusinaktiváló akkor jelentkezik, ha felületkezelés fertőtlenítőszerekkel klórt tartalmazó vizes kezeléssel legalább 60 ° C-on 40 percig, vagy három-perces forráspontú.
Veszélyeztetett csoportok a nagy kockázatnak kitett HCV fertőzés végez orvosi személyzet és a munkavállalók az egészségügyi-Járványügyi intézmények, kábítószerfüggők invazív gyógyszerek adagolását, az emberek nagy számát, védekezés nélküli szexuális közösülés, szexuális partnerei fertőzött betegek, beleértve a rejtett hordozók hepatitis C, autoimmun betegségben szenvedők, immunhiányos betegségek stb.
Hepatitis C vírus nem terjed át az érintés kézfogás levegőben lebegő cseppek, ritka esetekben a fertőzés az anyatejjel táplált (jelenlétében sebek tőgybimbőinak repedések az anya és a nyálkahártya-elváltozások a szájban a gyermek), és a háztartási kapcsolat, megosztás. Megelőzése hepatitis C sterilizálási orvosi és kozmetikai eszközök invazív eljárások és injekciók, szabályok betartása a személyes higiénia a lakásban, és mechanikai módszerekkel védeni szex ismeretlen partnerekkel.
A hepatitisz C gyermekének terhesség alatt történő fertőzésének megelőzése különleges terápia a vemhességi terhelés csökkentése a terhesség ideje alatt, valamint a nő fogamzásba vétele és kezelése.

A hepatitis C típusai és stádiumai

A hepatitis C két formája létezik. A vírusfertőzés akut formáját ritka esetekben diagnosztizálják a törölt klinikai kép miatt. Gyakran előfordul, hogy egy akut szakasz felismerése véletlenül megelőző vizsgálatban történik, vagy amikor egy személy gyanús kapcsolat esetén diagnózist keres.
Időszerű terápiával a hepatitis C akut formáinak 20% -a teljesen meggyógyul. A kezelés hiányában vagy hatékonyságában az akut hepatitis C krónikussá válik.
A krónikus formában kialakuló hepatitis C is előfordulhat tünetmentesen, a vírus terhelés hatására a testre, klinikai tünetek és specifikus tünetek nélkül. Ez a csoport a látens vírushordozó megnehezíti, hogy adatokat gyűjtsön a HCV előfordulása, hiszen csak az határozza meg vérvizsgálat markerek a hepatitis, de hozzájárulhat a fertőzés terjedését.
A krónikus hepatitis C klasszikus folyamatát károsítja a májsejtek károsodása, a szöveti fibrózis kialakulása. Kezelés hiányában a fibrotikus fókok előidézik a májcirrhosis kialakulását, a rákos daganatok kialakulását és más veszélyes szövődményeket.

A hepatitis C szövődményei

Fotó: Den Rise / Shutterstock.com

A szövődmények függ az általános állapota a szervezet azon képessége, az immunrendszer antitesteket termelni, formája a vírus genotípus és a mutációk, valamint az életmód és a személy étrendjét. Az alkoholfogyasztás, a zsíros ételek fogyasztása jelentősen gyorsítja a kóros folyamatok, alkoholos, mérgező hepatitis kialakulását.
A hepatitis C a következő betegségeket és rendellenességeket okozhatja:

  • májszövet fibrózisa;
  • steatohepatitis, a májszövet zsírral történő pótlása;
  • a máj cirrhosis;
  • hepatocelluláris karcinóma, májszövet rákos transzformációja;
  • a portál karakterének magas vérnyomása;
  • ascites, folyadék felhalmozódása a peritoneum szerveiben;
  • a belső szervek varikózus vénei;
  • máj encephalopathia;
  • a szervezet szöveti szétesése és a májfunkció hiánya miatt a szervezet krónikus intoxikációja;
  • látens belső vérzés.

A Hepatitis C szintén veszélyes a hepatitis B kialakulásának megnövekedett kockázatával, amikor a csökkent májfunkció miatt fertőzésnek van kitéve.

A hepatitis C diagnózisa

A hepatitis C diagnózisára a következő módszereket alkalmazzák:

  • az anamnézis gyűjtése és a beteg vizsgálata, a peritoneális szervek tapintása;
  • biokémiai vérvizsgálat;
  • a hepatitis C vírus (anti-HCV) és a HCV-RNS PCR ellenes antitestek vérvizsgálata;
  • vérvizsgálat IgM osztályú (anti-HCV IgM) antitestek jelenlétére, amely a betegség akut stádiumát mutatja;
  • általános vérvizsgálat, koagulációs jellemzők vizsgálata (koagulogram);
  • a máj, a lép, a peritoneális szervek ultrahangvizsgálata.

Bizonyos esetekben laboratóriumi vizsgálatot kell végezni a májszövetről (biopszia).
Ezek a módszerek lehetővé teszik a fertőzés jelenlétének meghatározását és pontos diagnózist hoznak létre a HCV genotípus meghatározásával.

Vírusos hepatitis C kezelése különböző szakaszokban

A Hepatitis C olyan átfogó terápiát jelent, amely mind a test támogatására, mind a HCV vírus elleni közös vagy specifikus vírusellenes hatás elleni küzdelemre irányul. A hepatitis C-ben szenvedő betegek terápiája:

  • vírusellenes gyógyszerekkel történő gyógyszeres terápia;
  • gyógyszerek szedése a májműködés fenntartása érdekében;
  • helyreállító hatású készítmények, immunmodulátorok, immunitás stimulánsok.

A gyógyszerterápia folyamata nem lesz hatékony, ha nem tartják be a táplálkozás szabályait, korlátozzák a fizikai aktivitást és megfigyelik a naprendszer működését. A Hepatitis C vírus agresszíven befolyásolja az emberi immunrendszert és a májszövetet, ami megköveteli a táplálék táplálásának megőrzését, megfelelő pihenést, kizárva más vírusos és bakteriális fertőzésekkel való érintkezés valószínűségét.

A hepatitis C elleni hagyományos antivirális kezelés

A HCV vírus elleni küzdelemhez vírusellenes szereket használnak, amelyek stimulálják a szervezet immunrendszert. A leghatékonyabb (45-50% -os gyógyulási függően a betegség stádiumától és a HCV genotípus okozta hepatitis) tekintjük drogok ribavirin és interferon alfa-használt, attól függően, hogy a színpad és az általános a beteg állapotától, külön-külön vagy kombinációban.
Az ezekkel a gyógyszerekkel való terápia, az adagolás és a beavatkozás általános módját a beteg orvos-hepatológus diagnosztikai adatok alapján és a beteg gyógyszerre adott válaszára határozza meg. A gyógyszerekkel végzett vírusellenes terápia átlagos időtartama 12 hónap.
A gyógyszerek kombinációja allergiás reakciókat válthat ki, terhesség alatt és bizonyos betegségekben elfogadhatatlan. A kezelés hatékonyságát a vírusterhelés (HCV RNS) szintjének és a transznáz aktivitásának mértékének csökkentésére szolgáló vérvizsgálati adatok alapján értékeljük.
A gyógyszerek jelentős mellékhatásokat okozhatnak. Fogadása az interferon-csoport nagy dózisban gyakran kíséri jelentős romlása jellemző időszakra való alkalmazkodás a hatóanyag (maximum 1 hónapig), és kíséretében hipertermia, hogy 38-39 ° C-on, fejfájás és ízületi fájdalom, fogyás, száraz bőr, hajhullás. Az ilyen tünetek önállóan mennek keresztül, és nem igénylik a gyógyszereltávolítást.
Az interferon csoport gyógyszeres kezelésének megkezdésétől számított 3-4 hónap elteltével megfigyelhető a vérkép változása: a vérlemezkék, a leukociták koncentrációjának csökkenése. A változás mértékétől függően a gyógyszerfelvétel rövid időn belül felfüggeszthető.
Súlyos szövődmények, amelyek a kezelés folyamata korrekcióját igénylik, vérzéses vérzés és bakteriális fertőzések felerősítése.
A ribavirin szedése esetén lehet kisebb mértékű dyspepsia, hemolítikus vérszegénység, fokozott húgysav-koncentráció, fejfájás.
A kezelést szakemberek felügyelete végzi.

Közvetlen hatású gyógyszerek a HCV-re

2013-ban egy új, 11 éven keresztül kifejlesztett gyógyszert klinikailag teszteltek és jóváhagytak antivirális ágensként a közvetlen cselekvéshez. A Gilead (USA) által gyártott Sofosbuvir jelenleg szabadon hozzáférhető egyetlen hatóanyag, tanulmányok szerint, a hepatitis C esetek 95% -át gyógyítja.
A termelés magas költsége miatt (az Egyesült Államokban a sophosbuvir kezelésének alapköze 84 ezer dollárba kerül), a vállalat átadta a gyógyszer előállításához szükséges engedélyeket. Jelenleg a Hepcinat termelés Indiában a gyógyszerek piacán is jelen van, a gyógyszerek költsége 880-1200 dollár.
A vírusellenes gyógyszerkészítmény szájon át felvett sophosbuvira és daklatasvira kombinációját tartalmazza. A kurzus adagolását és időtartamát a vírus genotípusa, a májfibrózis stádiuma és a páciens egyéni jellemzői alapján kiszámítja egy hepatológus. A gyógyszerek hatásosak a HCV minden genotípusára, nincs ellenjavalltuk a HIV-fertőzött betegeknél. A kezelés időtartama 12-24 hét.

Hepatoprotektorok a hepatitis C-ben

A hepatitis C terápia részét képező készítmények - a hepatoprotektorok célja az érintett szerv funkcióinak megőrzése. A betegség testének gyógyítása nélkül segítenek fenntartani és helyreállítani a máj egészségi állapotát, megújítani a szöveteket.
A hepatitishez hatékony ilyen készítményekhez Essentiale, Karsil, Lipoevuju sav, Silimar, Fosfogliv stb. A hepatoprotektorok kezelése a vírusellenes terápia jelenlététől vagy hiányától függetlenül kezdődik, és laboratóriumi vizsgálatokkal és műszeres vizsgálatokkal megerősített klinikai máj egészségi állapotával zárul.

immunmodulátor

Mivel az immunrendszer szenved vírusos terhelés állandó, gyógyszert szed megerősítését célzó belép a teljes terápia betegeknek adott hepatitis C A leggyakoribb az immunrendszerét, hepatitis C gyógyszerek és Zadaxin Temogen.

Diétás ételek

A hepatitis C kezelése és szövődményei együtt járnak a Pevzner 5-ös táplálkozási orvosi táplálkozási rendszerének kinevezésével. Az étrendnek való megfelelés elősegíti az emésztőrendszeri máj és egyéb szervek működését, ami lassítja a hepatitis C szövődményeinek kialakulását.
Alapelvei diéta №5 limit termékek fogyasztását, amelyek fokozzák a váladék az emésztőnedvek: zsíros, fűszeres, sós, füstölt, konzerv ételek, kávé, erős tea. Az alkoholtartalmú italok teljesen kizártak. Az ajánlott napi folyadékmennyiség (víz, komposztok, gyümölcsitalok és zöld gyümölcslevek, gyengén kis irritáló hatással) 2-3 literes.

A hepatitis C kezelés eredményeinek előrejelzése

A vírusos hepatitis C gyógyulásának prognózisa a terápia kezdetétől, a betegség állapotától, a szövődmények jelenlététől és mértékétől, a kezelés megválasztásától és a szakember kinevezésétől függ.
A legkedvezőbb prognózis a kezelés kezdetén a hepatitis C korai akut stádiumában, amikor a betegség még nem lépett be krónikus súlyos szövődményekkel, májsejtek degenerációjával, a test mérgező károsodásával.
Az étrendi táplálkozás elveinek tiszteletben tartása, az alkohol elutasítása nagymértékben hozzájárul a komplikációk korai fejlődésének elkerüléséhez és általában az egészség megőrzéséhez.
A közvetlen vagy általános vírusellenes hatású gyógyszerek kiválasztásától függően a vírusos hepatitis C prognosztikája a gyógyulási arány 45-95% -a. A hepatitis C komplex kezelése új vírusellenes gyógyszerek alkalmazásával segít a betegség gyógyításában és a szövődmények elkerülésében.

A hepatitis C megelőzése

Fotó: Alexander Raths / Shutterstock.com

Az ilyen típusú hepatitis vírusának nagyszámú genotípusa és a mutációk képessége miatt számos alfaj létrehozása miatt a hepatitis C vakcinázás formájában történő specifikus megelőzése még fejlesztés alatt áll. A vírusos hepatitis C-vel kapcsolatos betegségek megelőzésére szolgáló nemspecifikus intézkedéseket korlátozó intézkedéseknek tekintik, amelyek védelmet nyújtanak a vírusnak a testbe való behatolásával és a test teljes erősítésével szemben.
A hepatitis C-t kizárólag a vírust tartalmazó biológiai folyadékkal, a sebfelszínnel vagy a szubkután szövetekkel lehet érintkezésbe hozni. Ezért a betegség megelőzése az ilyen kapcsolatok helyzetének kizárása:

  • egészségügyi és higiéniai normák tiszteletben tartása orvosi intézmények, kozmetikai és fogászati ​​szalonok szolgáltatásai igénybevételével, kivéve a sterilizált sebészeti eszközök, újrafelhasználható fecskendők használatának lehetőségét;
  • korlátozza a szexuális kapcsolatok számát ismeretlen partnerekkel, az egyéni védőeszközök használata a nemi közösülés során;
  • A vírus jelölőinek rendszeres elemzése a fertőzések fokozott kockázatával járó munkában.

Mintegy 20% -ában a fertőzés hepatitisz B vírus ebben a formában ismeretlen etiológiájú, a betegség látható emberek, az egészséges életmód, és nem az eljárás alá vont a vérátömlesztés vagy szervátültetés, egy rendszeres szexuális partner, és nem hajlamos az intravénás kábítószer-használat. Megelőzés - a betegség megelőzésének mértéke, amelyet még a fertőzés valószínűségének hiányában is követni kell.
A nem specifikus megelőzés egyéb intézkedései közé tartozik az egészséges életmód, az alkoholfogyasztás korlátozása, a kiegyensúlyozott étrend, amely képes a betegség és szövődményeinek kialakulására, még akkor is, ha a vírus belép a szervezetbe.

Hepatitis C: megelőző intézkedések egy beteg jelenlétében a családban

A hepatitis C fertőző betegség, amelyet elsősorban a véren keresztül közvetítenek. Ha egy fertőzött betegen ugyanazon a területen együtt élnek, nincs szükség a helyiségek védelmére, megakadályozva a tapintható érintkezést vagy külön evőeszközök használatát.
Fontos, hogy kizárják közös használatának egy borotválkozási gép (miatt lehetséges vágások), fogkefe felületek fertőtlenítésére, amelyen fel egy csepp vért otthon sérülés, fehérítő oldatot (1: 100), a klór-folyadékot tartalmazó, forrásban vagy a mosás 60 ° C-on, megfigyelni védekezési intézkedések a nemi közösülés során, nem engedik meg a nemi szervek sérülését, a betegségek kialakulását, amelyek károsítják a bőrt vagy a nyálkahártyákat. Sérülés, nyitott sebek jelenlétében óvatosság ajánlott.
A test hepatitis más típusainak csökkent ellenállása miatt a családtagok és a gondozó személyzet ajánlott vakcinázni a hepatitis A és B ellen.

A magzat és az újszülött fertőzés megelőzése

A törölt tünetek miatt a vírusos hepatitis C jelenléte egy nőnél már a terhesség szakaszában diagnosztizálható a fertőzés vizsgálatának értékelése során. Ilyen esetekben a vírusnak a magzatra való átvitelének prognózisa az anya test vírusterhelésétől függ, amelyet a vérben lévő titerek száma határoz meg.
A magzat fertőzésének valószínűségének csökkentése érdekében ajánlott néhány általános gyógyszert szedni, valamint a hepatoprotektorok kinevezését annak érdekében, hogy csökkentse a terhesség szövődményeinek valószínűségét, mivel a májban fokozott stresszt okoz.
Alacsony vírusterheléssel valószínűsége a születési fertőzött gyermek kicsi, hanem meghatározza a vírus jelenléte a vérben csak 1-1,5 évvel a szülés után, mint a gyermek vér sokáig van az anya antitesteket.
A teljes körű profilaxis vérvizsgálat a vírus jelenlétére a koncepció előtt és a betegség kezelésének folyamán, ha terhesség előtt jelen van. A terhességi időszak alatt a vírusellenes gyógyszerek használata tilos a magzatra gyakorolt ​​lehetséges teratogén hatások és a vetélés kockázatának növekedése miatt.
Az újszülött fertőzésének valószínűségének csökkentése érdekében ugyanazokat az intézkedéseket ajánlják, mint a felnőtt betegekkel való együttélés esetén.
A hepatitis C nevű anya szoptatása most már biztonságos, mivel az anyatejben nincs vírus. Azonban meg kell, hogy gondosan figyelemmel kíséri a bőr állapotát, és a mell mellbimbó kiterjed annak megakadályozására, hogy a reszelt, repedések, és ellenőrizze a szájnyálkahártyán jelenlétében a baba sebek, horzsolások, gombás fertőzés.
Ha azt tapasztalja, mellbimbó területén mikrotrauma használatát javasoljuk párna, hogy ne kerüljön folyadék a sebből a szájban gyerek, vagy átmenetileg hagyja abba a szoptatást, amíg felépül a bőrt.

A hepatitis C laboratóriumi diagnózisa

MI Mikhailov, Epidemiológiai és Mikrobiológiai Intézet. NF Gamalei RAMS, Moszkva

A "hepatitis C" diagnosztizálásakor a következő legfontosabb tényezőket kell figyelembe venni:

  • a "máj" enzimek aktivitási mutatói;
  • a hepatitis C vírus (HCV) és más hepatotrop vírusok fertőzésének markereinek jelenléte vagy hiánya;
  • epidemiológiai történelem;
  • a beteg klinikai vizsgálatának eredményei. Ezeknek a tényezőknek csak egy átfogó ismertetése lehetővé teszi a betegség magas megbízhatóságú diagnosztizálását. Laboratóriumi munkavállalónak objektív tájékoztatása meghatározó körét virális antigének és antitestek, valamint a HCV-RNS, amely lehetővé teszi az orvos, a munkavállaló a vérátömlesztés szolgáltatások és járványügyi dönteni az előttük álló kihívásokat. Leggyakrabban:
  • A HCV-k azon személyeinek azonosítása, akiket a hepatitis C után csökkenteni kell;
  • az akut és krónikus hepatitis C diagnózisát és differenciálódását;
  • betegség prognózis;
  • kinevezése, értékelése és a terápia hatékonyságának prognózisa;
  • tanulmányozzák a HCV szélességét a populációban és a különböző népességcsoportokban.
    Ugyanakkor a laboratóriumi munkatársak által végzett főbb munkaterületek a következők:
  • a HCV-fertőzés markereinek kimutatására szolgáló legelismertebb módszerek kidolgozása és kiválasztása;
  • a kapott eredmények objektív értékelésére vonatkozó kritériumok meghatározása;
  • laboratóriumi vizsgálatok elvégzéséhez optimális algoritmusok kidolgozása;
  • olyan rendszer bevezetése, amely javítja a HCV-fertőzés markereinek kimutatását.

    Az alapja a laboratóriumi diagnosztikai hepatitis C. HCV szolgálja ismeretek a replikációját, információt a dinamika a megjelenése és eltűnése markerek a fertőzés, valamint a modern immunkémiai és molekuláris biológiai módszerek kimutatására antigének, antitestek és nukleinsavak.

    VIRUS HEPATITIS C. HCV-ben azonosították először 1988-ban, amikor egy csoport kutatók által vezetett M. Houghton és Choo Q.L, alkalmazott új molekulyarnobiologicheskie kutatási módszerek, és a klónozott sekvinirovala vírus genomja [I]. A hepatitisz C vírus részecske gömb alakú, átlagos átmérője körülbelül 50 nm [2,3]. Kísérletek vizuálisan felismerni és szerkezetének tanulmányozására a hepatitis C vírus vállalt felfedezése óta a vírus, de eddig nincs jól dokumentált E vizsgálatok eredményei, esetleg nehézségei miatt a felhalmozási virális részecskék a szükséges mennyiséget.

    VGSedinstvenny tagja a nemzetség Hepacivirus a Flaviviridae család, amely magában foglalja a vírusok, például a vírus bikák hasmenés és sertéspestis (genus Pestivirus) és a sárgaláz vírus, Dang vírus és a GB-vírus: GBV-A, GBV-B és GBV-C / HGV (a Flavivi-rus nemzetség). A hepatitis C vírus szerkezete a következőképpen ábrázolható (1. reakcióvázlat). A nukleokapszid tartalmazza RNS hepatitis C-vírus nukleokapszid tetején bevonva lipidburokkal süllyesztett ott burokfehérjék által kódolt HCV-RNS. A vírus genomját egy pozitív polaritású egyszálú lineáris RNS molekula képviseli, körülbelül 9600 nukleotid hosszúságú. A HCV genom megszervezése hasonló a többi flavivirushoz. Megkülönbözteti két olyan zónát, amelyek strukturális és nem strukturális (funkcionális) fehérjéket kódolnak. A strukturális fehérjéket kódoló gének a vírus genomjának 5'-régiójában helyezkednek el, és nem strukturálisak a 3'-régióban. A gén a HCV egy egyetlen nyitott leolvasási keretet (ORF), egyetlen polipeptid (körülbelül 3000 aminosav), amelyek hatására a celluláris és virális proteázok vágjuk szerkezeti és nem szerkezeti fehérjék.

    Ábra. 1. A HCV szerkezeti elemei

    A szerkezeti fehérjék közé tartoznak a Core, El és E2 által kódolt fehérjék HCV RNS zónákkal. Ez kimutatta, három formáját C-HCV-fehérjék: teljes hosszúságú (p21) molekulatömegű - 21 kD, csonkolt (p19), valamint a formában (p16) kimutatható volt a nukleoluszokban fertőzött hepatocitákban. A felületén a C-protein hordozza különböző erősen konzervált B-sejt-epitóp, amelynek léte rendkívül fontos kimutatására HCV-antitesteknek a laboratóriumi diagnózis hepatitis C.

    A HCV-E1 és E2 RNS-régiói 31 és 70 kD molekulatömegű fehérjéket kódolnak. Ezek a fehérjék számos N-glikozilációs helyet tartalmaznak; Az E1 fehérjében legfeljebb 6 ilyen helyet azonosítottunk, és az E2-11-ben. Egy kis fehérje, p7, az E2 szakaszban találtunk információt, amely nem volt megtalálható a vírusszerkezetben.

    A HCV RNS 3'-végéhez közelebbi régiók kijelölése - mint a vírus nem strukturális fehérjéiről szóló információkat hordozó zónák - azt jelzi, hogy ezek a fehérjék nem a vírusrészecske strukturális összetevői. A nemstrukturális zónában a HCV RNS a következő területeket jelöli ki: NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A és NS5B. A HCV RNS nem strukturális zónái által kódolt fehérjék többsége szükséges a vírus replikációjához.

    Összehasonlító elemzése nukleotidszekvenciák izolátumok HCV RNS termelt különböző régióiban a világ, és még a során a betegség azonos betegből származó mutatott alapvető jellemzője a vírus - magas heterogenitást RNS. A helyzet a nagy genetikai variabilitás a HCV-RNS volt az alapja az elmélet magyarázza: a hosszú távú (néha egész életen át tartó) hordozó vírus, gyakori a krónikus betegségek kialakulásában, nehezen lehet megállapítani a hatékony kezelés és vakcinák. A legjelentősebb különbség a HCV RNS-szekvenciák koncentrálódnak az N-terminális része az E2 régiót, amelynek megnevezése - „hipervariábilis régió” (HVR) [4].

    Jelenleg 6 fő genotípus és több mint 100 altípus van a HCV-ben. Genotípusok 1a, 1b, 2a, 2b, 2c és Over véve több mint 90% -a HCV-izolátumok nyert Észak-és Dél-Amerika, Európa, Oroszország, Kína, Japán és Ausztrália / Új-Zéland. [5] A 4., 5. és 6. genotípust Közép- és Dél-Afrikában, Délkelet-Ázsiában rögzítik. Oroszországban és a FÁK országaiban a 16. genotípus előfordulási gyakoriságát (legalább 68,9%) rögzítették [6,7]. Úgy véljük, hogy az 1. genotípussal (különösen az 1c) fertőzött betegeknél a vírus más genotípusával fertőzött betegekhez képest rosszabb a kezelésre.

    Egy betegben a HCV a vírusrészecskék populációjában kering, ahol a genomok 1-2% -kal (kvázi-specificitás) különböznek a fertőzés során felhalmozódott mutációk és / vagy a fertőzés során a páciens testében. Ezek a mutáns formák lehetnek, hogy erősebb vagy replikációját segíthet a vírus kikerülje az immunválaszt, és potenciálisan befolyásolja a kimenetelét egy akut fertőzés, a különbségeket a során a betegség, és a válasz IFN [8].

    AZ ANTI-HCV MEGHATÁROZÁSA. Miután felfedezték a HCV-vírus, és meghatározzák annak szerepét a fejlesztés a transzfúzió utáni hepatitis - „sem A, sem B” a kutatók támadták eljárások kifejlesztésére, amely képes észlelni a HCV és alkalmasak a diagnózis az akut és krónikus hepatitis C Azt találtuk, hogy a HCV-antigének keringeni rendkívül alacsony koncentrációk, és nyilvánvaló, hogy a XX. század végi, a vírusantigének kimutatására használt módszertani szintje nyilvánvalóan nem elegendő.

    1989-ben, a kutatók egy csoportja a cég „Chiron Corporation” irányítása alatt a Q-L.Choo végzett a HCV-RNS klónozása és immunreaktív volt oligopeptidek ellenanyagokkai reagálnak a vérben keringő a krónikus hepatitis „sem A, sem B”. Ezek az oligopeptidek a HCV elleni antitestek kimutatására szolgáló diagnosztikai gyógyszerek alapjává váltak. Ez határozza meg a gyors fejlődést a diagnosztikai termékek fejlesztésében és gyártásában. A fő használt módszer az anti-HCV volt az enzim-kapcsolt immunszorbens vizsgálati eljárás, mint egy módszert, amely megfelel a gyakorlati egészségügyi -te Nagy érzékenység, specifitás és könnyű magatartás.

    Tekintettel arra, hogy a HCV fennáll a vérben a betegek akut és krónikus hepatitis C együtt anti-HCV diagnosztikai termékek összpontosítani fejlesztők koncentrált létrehozására tesztrendszerek antitestek kimutatásához, a lehető legteljesebb hordozók azonosítását a vírus, és a lehető leghamarabb diagnosztizált akut fertőzés. A különböző antigének és antigén determinánsok által kódolt szerkezeti és nem-szerkezeti HCV RNS zónában, a meghatározott irányban a tervezés diagnosztikai készítmények Ez az elrendezés, és oligopeptidek létrehozásához használt őket. A HCV felfedezésének időpontjától három generáció diagnosztikai rendszerei jöttek létre (1. táblázat).

    1. táblázat
    Diagnosztikus gyógyszerek az anti-HCV kimutatására [9]

    Az alkalmazott peptidek,
    a HCV RNS zónái, amelyekben
    kódolva vannak

    % hordozók észlelése
    HCV

    Az első idő
    érzékelés
    anti-HCV-t
    korai sárgaság

    5-1-1 NS3
    C100-3 NS4

    C22-3 mag
    C200 NS3 és NS4
    NS3p NS3
    C 100-3 NS4

    C22-3 mag
    C200 NS3 és NS4
    NS3p NS3
    Peptid NS5

    További peptidek, elsősorban a c22-3 (Core) bevezetése a 2. és 3. generációs diagnosztikai gyógyszerek számára lehetővé tette a fő feladat megoldását, vagyis az anti-HCV érzékenységét, specifitását és legfőképpen az észlelhetőségét. A harmadik generációs diagnosztikai görbéknek köszönhetően a HCV-hordozók akár 97% -át is fel lehet ismerni. Ugyanakkor egy határozott vitát az NS5 HCV RNS-régió által kódolt peptid bevezetése indított el egy diagnosztikumba. Egyes kutatók szerint a peptid jelenléte nem alapvető fontosságú a diagnosztikai gyógyszer minőségének javítása szempontjából. [10,11]. Az NS5 ellenes antitesteket azonban a fertőzés korábbi időpontjában lehet kimutatni, ami javítja az akut hepatitis C laboratóriumi diagnózisának minőségét [12].

    Jelenleg a harmadik generációs diagnosztikai készítményeket használják az egész világon, beleértve Oroszországot is. Peptidek alkalmazhatók diagnosztikai készítményekben, amelyeket a rekombináns technológiával (például diagnosztikai cégek: „Diagnosztikai szerek”, Nyizsnyij Novgorod; „vektor”, Novosibirsk; „Roche”; „Abbott” et al.), Vagy szintetikus ( 000 MC "Avicenna", Szentpétervár, "Organon" stb.). A diagnosztika, amelyben mindkét típusú peptidet egyidejűleg használták, a 4. generáció készítményeként kapott megnevezéseket. Jellemzőik szerint ezeknek a gyógyszereknek nincs jelentős különbsége. Az oroszországi Egészségügyi Minisztérium által rendszeresen végzett összehasonlító vizsgálatok a hazai és külföldi gyártók diagnosztikai előkészítésével összehasonlítható érzékenységet mutattak.

    Megállapították, hogy a harmadik generációs diagnosztikai gyógyszerek alkalmazása az anti-HCV kimutatására immunokompetens populációk (például véradók) között 98,8-100% -os becslések szerint. Ugyanakkor az immunszupprimált személyek között, például a veseátültetést követően a csontvelő vagy a HIV-vel fertőzött betegek esetében ez a szám lényegesen alacsonyabb, 50-95% között van [12]. S.George és mtsai. [13] kimutatták, hogy a HIV-fertőzésben szenvedő betegek 8,4% -a hamis negatív eredményt mutat az anti-HCV kimutatásában. Az ilyen betegeknél a megfigyelés folyamán szeropreverziós hatás rögzíthető; pozitív eredmény regisztrálása a szeronegatív anti-HCV periódus után [14].

    Az anti-HCV jelenlétének tanulmányozásának egyik legfontosabb problémája a hamis pozitív eredmények. Megjelenésük a reakciókomponensek nem-specifikus kölcsönhatásának, esetleges keresztreakcióknak és más vírusantigéneknek és sok más tényezőnek tudható be. Az anti-HCV különböző diagnosztikai szerekkel való kimutatásában a hamis pozitív eredmények 10-20% -ot érhetnek el [15,16]. Ezeknek az eredményeknek az emelkedését figyelték meg onkológiai és autoimmun betegségben szenvedő betegek, immunhiányos állapotú és szifiliszes betegek körében [16,17]. A hamis pozitívumok megléte a laboratóriumi dolgozó feladata, hogy megkülönböztesse őket az anti-HCV tényleges kimutatásától. A probléma megoldásához a szérumot kimutatják a HCV RNS vérszérumában. A HCV RNS kimutatásának negatív eredménye azonban nem teszi lehetővé az anti-HCV hamis pozitív detektálásának jelenlétét. Meg kell jegyezni, hogy az anti-HCV-izoláljuk, és a vérben keringenek egy beteg, aki felépült akut hepatitis C (10-15%), vagy, amelyek kiküszöbölése a HCV RNS történt eredményeként a terápia.

    MEGHATÁROZÁS (KIEGÉSZÍTŐ) VIZSGÁLATOK. A hamis pozitív példányok és a HCV elleni antitesteket ténylegesen tartalmazó minták megkülönböztetéséhez kiegészítő (kiegészítő) teszteket fejlesztettek ki. Leggyakrabban ezeknél a vizsgálatoknál az immunoblot elvet alkalmazzák [például a RIBA-teszt ("Ortho-Clinical Diagnostics"); „LiaTek HCV” (Organon Teknika)], amikor adszorbeált nitrocellulóz membránra formájában egyes csíkok antigének által kódolt különböző zónákban a HCV-RNS. Az anti-HCV kölcsönhatásba lép az adszorbeált antigénekkel az enzim által jelzett antitestekkel az emberi IgG ellen, ezt követően egy szubsztrátkomplexel történő kimutatással. Továbbá immunoblot valamint további vizsgálatokat használni diagnosztikai ágenseket a kimutatására az anti-HCV-specifikus antigének elleni által kódolt különböző zónákban HCV RNS [ „Spectrum 4” ( „ImBio” Nizhni Novgorod; RecombiBest ANTI-HCV-spektrum „- ZAO” vektor Best ", Novoszibirszk, IFA-Anti-NSO-Spectrum, NGO" Diagnosztikai rendszerek ", Nizhny Novgorod].

    Tervezése és megvalósítása Ezen tesztek bevezetésével párhuzamosan a szűrővizsgálatok az anti-HCV, megismételve a elve bővülő spektrumának alkalmazott peptideket egymást követő generációja diagnosztikai szerek. Így a diagnosztikai RIBA-III eltér az előző generációtól az NS5 zóna által kódolt peptid hozzáadásával. Alapelvek, hogy erősítse meg a pozitív eredménye, hogy anti-HCV elsősorban a következők: a lehetőségét (bizonyos esetekben) a pontosabb eredmények az enzimatikus reakció reagáltatva az egyedi peptideket, valamint felhasználásra szórt spektrumú diagnosztikum peptidek, amelyek nem alkalmazhatók szkrínelő vizsgálatokban. Csak az új peptidek bevezetése teszi lehetővé a megerősítő vizsgálatok diagnosztikai értékének növelését.

    A kapott eredmények értelmezése például a RIBA-III-ban végzett vizsgálatban három lehetséges választ ad: pozitív, negatív és határozatlan eredményt. Ez utóbbit egyértelmű bizonyítékok hiányában adják ki (a diagnosztikai készlethez mellékelt utasításoknak megfelelően), ami lehetővé teszi a vizsgálati mintában a HCV antibiotikum jelenlétének vagy hiányának egyértelmű megítélését. A rögzített válaszok spektrumának korrelációja a megerősítő vizsgálatok során a betegek azon csoportjainak jellemzőitől függ, akikben az anti-HCV-t elsősorban kimutatták [18]. A J.M. Pawlotsky és mtsai. [19], az eredmények esetek felében, "homályosnak" értelmezve, HCV RNS kimutatható. Véleményünk szerint a legitimitását a válasz - „nem definiált eredmény kimutatását anti-HCV”, amelyet a laboratóriumi személyzet orvos, nyilvánvaló, nem csak a megerősítő vizsgálat és rutinvizsgálatok jelenlétére anti-HCV. A kapott eredmények ilyen értelmezésének szükségessége tükrözi a hepatitis C laboratóriumi diagnosztikájának jelenlegi állapotát.

    AZ IgM ANTI-HCV MEGHATÁROZÁSA. Jelenleg a cégek IgM anti-HCV kimutatására diagnosztikai készleteket hoztak létre és gyártanak: "Vector Best"; "Diagnosztikai rendszerek"; "Imbio", "Abbott" stb. A diagnosztikai készletek tervezési szakaszában ELISA készleteket fejlesztettek ki a HCV RNS különböző régiói által kódolt peptidek alapján [20]. A választás megállt a HCV RNS magrégiója által kódolt peptiden és az IgM antitestek kimutatására. Az anti-HCV (IgG) kimutatásához hasonlóan hamis pozitív eredményeket is fel lehet jegyezni az IgM anti-HCV vizsgálatára. Stevensona D.L. et al. [21] a krónikus hepatitis C-ben szenvedő betegek legfeljebb 70% -aa IgM anti-HCV jelenlétében egyidejűleg emelkedett rheumatoid faktor volt, ami hozzájárul a hamis pozitív eredmények megjelenéséhez. Ugyanakkor Pawlotsky J. M. szerint a reumatoid faktor jelenléte nem befolyásolja az IgM anti-HCV kimutatásának minőségét [22].

    A HCV ANTIGÉNEK MEGHATÁROZÁSA. A HCV antigének meghatározásának lehetősége a kutatók figyelmét a vírus felfedezését követően azonnal felkeltette. Az elméleti lehetősége tesztelés őket igazolták Krawczynski K. és munkatársai [23] megállapította, hogy immunhisztokémiai májszövetben a HCV-antigének, specifikusságát mutatja immunfluoreszcencia izzás. A használata poli- és monoklonális antitestek a különböző HCV-antigének létrehozta jelenlétében HCV mag Ag, kódolt antigének NS3 és NS4 zónák HCV RNS a sejtmagban és a citoplazmában a hepatociták, 60-90% a krónikus HS [24].Azonban, további vizsgálatok kimutatták, hogy a HCV antigénjei a májsejtek kevesebb mint 5% -ában mutathatók ki.

    Az első diagnosztikai vizsgálati rendszerek ( „Ortho ellenanyag a magantigénjének (rágcsáló monoklonális) EL1SA Test System” és „Imucheck F-HCV Ag Core Kokusai”) kimutatására HCVantigén jelent meg a piacon az immunológiai termékek 1999-ben. A kimutatás céljából Core HCV antigént választottunk ki, amelyet monoklonális antitestek alapján tervezett szilárd fázisú ELISA-változat alkalmazásával határoztunk meg. Ezeknek a vizsgálatoknak az első vizsgálata meghatározta a magas érzékenységet, specifitást és alkalmazási ígéretet, elsősorban a vérátömlesztési szolgáltatásban [25,26]. székhelye:

  • a központi Ag HCV szérumban vagy plazmában történő meghatározásának lehetősége;
  • a Core Ag HCV kimutatásának specifitása;
  • a keringő antigénnek a vérben szeronegatív anti-HCV-ben szenvedő személyek jelenléte;
  • gyakori (90,3%) Core Ag HCV detektálás szérum jelenlétében anti-HCV és HCV RNS [25];
  • közvetlen korreláció a HCV RNS koncentrációja és a Core Ag HCV kimutatása között [25];
  • csökkenti az "ablak" fázisát - a fertőzés pillanatától az anti-HCV kimutatásának első pozitív eredményéig. Meghatároztuk, hogy a HCV Core Ag az esetek 83% -ában (n = 24) a HCV RNS első kimutatása után [26] és hosszú (átlagosan 26 nap) az anti-HCV megjelenése előtt [27] kimutatható.

    A HCV RNS kimutatásának módszerei. A hepatitis C laboratóriumi diagnosztikájának modern stádiuma a HCV RNS kimutatására szolgáló molekuláris biológiai eljárások széles körű alkalmazásának kezdeti szakaszaként jellemezhető. A nukleinsavak kimutatására szolgáló eljárások túlnyomó többségét vizsgálták a HCV RNS kimutatására. A diagnosztikai készítmények felépítésének és a vírusos DNS vagy RNS kimutatására vonatkozó elvek számos, a hazai [28] és a külföldi kiadványokban [29] közzétett irodalmi áttekintéseknek szentelték. Mindezek a módszerek két csoportra oszthatók, amelyek a hibridizáció elvein alapulnak, a nukleinsav kiválasztott régiójának amplifikációja nélkül, vagy amplifikációjukkal, ami jelentősen növeli a módszer felbontóképességét.

    Hibridizációs módszer a jelölt hibridizációs próbák kombinációján alapulnak (genetikailag módosított vagy szintetikus molekuláris szerkezetek, amelyek a kiválasztott RNS helyeket komplementer nukleotidszekvenciákat tartalmazzák). Az eredményeket figyelembe veszik a jelzett jel intenzitásából a képződött összetétel összetételében.

    A hepatitis C-ben a HCV RNS detektálására szolgáló módszer elsősorban a hepatocitákban történő azonosításra vonatkozott, az in situ hibidizációnak nevezett vizsgálatokban [30]. A HCV RNS közvetlen kimutatása a szövetekben lehetővé tette a hepatitis C-ben lévő mononukleáris sejtekben, nyálmirigy-sejtekben és más szövetekben való kimutatását [31, 32].

    A HCV RNS detektálására használt hibridizációs módszer lehetővé teszi a HCV RNS negatív (replikatív) láncainak kimutatását, ami a vírus aktív replikációját jelzi [33].

    A polimeráz láncreakció módszere - jelenleg a legelterjedtebb módszertani módszer, amely a HCV RNS szinte minden molekuláris biológiai módszerének alapja. Ezenkívül a HCV RNS meghatározása mind minőségi, mind kvantitatív változatban lehetséges, ami különösen fontos az alkalmazott terápia hatékonyságának kijelölésére, ellenőrzésére és értékelésére.

    A módszer fő változatai a következőképpen azonosíthatók:

  • polimeráz láncreakció (PCR);
  • ligáz láncreakció;
  • NASBA;
  • TMA (transzkripciós amplifikált amplifikációs reakció, transzkripciós mediált amplifikáció).

    Polimeráz láncreakció - széles körben használják mind Oroszországban, mind külföldön a HCV RNS detektálására. Ez egy többciklusú folyamaton alapul, amely a nukleinsav természetes replikációjára emlékeztet, minden egymást követő szakaszból álló ciklusban.

    A vizsgált anyagból (szérum vagy plazma vér, máj biopszia) a HCV RNS felszabadul. Tekintettel arra, hogy a HCV nukleinsavját RNS képviseli, és az amplifikációhoz cDNS-molekulát igényel az enzim-reverz transzkriptáz révén, a HCV-cDNS egyszálú molekulái képződnek. A következő lépésben egy úgynevezett "cDNS-t" adunk hozzá a HCV cDNS egyes láncainak adott szakaszához. Primers - rövid oligonukleotidok, kiegészítve az ismert nukleotidszekvenciákkal. A különböző HCV-izolátumok genomjának 5'UTR régiójának primer struktúrájának összehasonlítása feltárta jelentéktelen variabilitását (genotípusok, nukleotid homológia - 92-98%, és a 98-99% genotípuson belül). Ez azt a célt szolgálta, hogy a HCV RNS ezen zónájából kiválasszuk a primereket, és alkalmazzuk hazánkban és külföldön gyártott diagnosztikai tesztrendszerekben.

    Továbbá a DNS-függő DNS-polimeráz enzim segítségével új DNS szakaszokat állítanak elő. Jelenleg, a forrása ennek az enzimnek a leggyakrabban használt thermophilus termus baktériumok (Tth-polimeráz) vagy az thermophilus aquaticus (Taq-polimeráz). A termikus stabilitás jelenlétében mangán és magnézium-ionokat, az enzim lehet egyszerre szintéziséhez használt komplementer molekulák egyszálú HCV cDNS és amplifikációs kiválasztott részeinek cDNS. Egyetlen reakcióciklus végső szakaszában a DNS-szintézis új komplex HCV cDNS-láncokat szintetizál. Többszörös ismétlések a reakció ciklus vezet a felhalmozódása a HCV cDNS-fragmensek, melyek regisztrálva lehetnek útján poliakrilamid gél-elektroforézist követő vizuális észlelését, vagy egy hibridizációs oligonukleotid próbákkal, ami növeli az érzékenységet és a specificitást a diagnosztikai termékek használt. Az enzimekkel jelölt primerek alkalmazása lehetővé teszi a PCR eredményeinek rögzítését enzim immunvizsgálattal.

    A HCV RNS kimutatására szolgáló diagnosztikai rendszereket tervező kutatók számára állandó cél az érzékenység és a specifikusság növelése. Ezt a célt a PCR-változat szolgáltatja, amelyet "beágyazott PCR" -nek neveznek [34]. Ennek a módszernek a "klasszikus" jellegzetessége, hogy két pár láncindítót egyidejűleg használnak, amelyek közül az egyik komplementer módon kapcsolódik az amplifikáció első fordulója után nyert amplikon belső régiójához. Ugyanakkor úgy vélik, hogy a PCR ezen változata nagyobb a minták szennyeződésének kockázatával, ami hamis pozitív eredményhez vezethet [35].

    A HCV RNS meghatározásának akut igénye és a PCR-diagnosztika nagy érzékenységű és specifikus diagnosztikai készleteinek nagyléptékű előállításához kapcsolódó komplexitás meghatározta a tudományos laboratóriumokban gyártott gyógyszerek széles körű alkalmazását. A tesztrendszerek összehasonlítása, úgynevezett "házon belüli" tesztek kimutatták az érzékenység és a specificitás nagy változékonyságát, valamint az eredmények laboratóriumok és diagnosztikai gyógyszerek közötti reprodukálhatóságának hiányát. Például a HCV RNS kimutatásának (1996) "külső" minőségellenőrzésének első európai fordulójában 136 laboratóriumból csak 22 (16%) tudta megfelelően meghatározni a vírus RNS jelenlétét vagy hiányát a kapott kontrollmintákban [36]. Hasonló eredményt tapasztaltunk hazánkban egy hasonló munkában a Szövetségi Külső Minőségellenőrzési Rendszer (2001) keretében, amikor a 14 résztvevő laboratórium közül csak 3 (21,4%) képes megfelelően megoldani a feladatot [37].

    A HCV RNS kimutatásának hamis-negatív és hamis pozitív eredményei különbözőek. Hamis negatív eredményekkel:
    - a HCV RNS elvesztése vagy megsemmisítése a klinikai anyag reagálására;
    - a PCR különböző összetevőit befolyásoló inhibitorok mintájában. Ezeket az inhibitorokat különböző kémiai vagy fehérje-anyagok képviselik. Például: a reverz transzkriptáz inhibitorok jelenléte a spermium folyadékban nem engedte meg a HCV RNS kimutatását, és beszélt a hepatitis C-átvitel szexuális útjának megvalósításának lehetőségéről [38]; a paprika jelenléte [39]; magas vércukorszint a vérszérumban [40];
    - a klinikai anyagok tárolásának és szállításának hőviszonyainak be nem tartása. Hamis pozitív eredményekkel:
    - a minták közötti szennyeződés (minták feldolgozása és / vagy a reakciókeverékkel való munka során), beleértve a pozitív kontrollminta szennyezettségét;
    - az amplifikációt megelőző termékek által okozott szennyeződés (amplikonok), amelyek aeroszolokon vagy laboratóriumi berendezéseken szennyezhetik a vizsgálati mintákat és oldatokat.

    A PCR-diagnosztika tömeges bevezetése a HCV RNS definíciójával a gyakorlati egészségügyi ellátás szerveit helyezte a laboratóriumi vizsgálatok új szintjére történő áttérés feladatának. Az izolált zónák izolálása a PCR főbb stádiumaihoz (mintaelőkészítés, amplifikáció, az eredmények figyelembevétele céljából); Különálló készlet a laboratóriumi ruhák, automatikus pipetták reakciójának minden egyes szakaszára; a standard diagnosztikai készletek létezése, és ami a legfontosabb, a magasan képzett laboratóriumi személyzet rendelkezésre állása lehetővé teszi a hamis eredmények szintjének csökkentését.

    Az első standardizált készlet a HCV RNS meghatározására ("Amplicor ™ HCV", "Roche Diagnostic Systems") 1993-ban készült. Az évek során kialakultak a HCV RNS kimutatására szolgáló készletek, melyek fő célja az volt, hogy növeljék érzékenységüket és specifikusságukat. Amikor tervezése „Amplicor TM HCV” használt számos eredeti módszertani technikák lehetővé teszik, hogy kimutatására vagy meghaladja a 100-másolat HCV RNS per ml., Valamint a kezelni lehetséges esetek a szennyeződés a minták és alkalmazott oldatok a beállított. Használata enzim - amperazy és deziksiuridintrifosfata (dUTP) lehetővé teszi, hogy elpusztítsa az első amplifikációs ciklus előző aplikony amely szennyeződés előfordulhat. Az amperáz megsemmisítése az első amplifikációs ciklus végén (+ 55 ° C-on) nem teszi lehetővé az enzimnek, hogy elpusztítsa a célként kiválasztott amplikont. Fontos innováció volt a belső ellenőrzés bevezetése. A jelentése ennek az innováció áll a bevezetőben a minta minden szekvencia ilyen amplifikált HCV RNS rész, amely ezt követően detektáltuk megfelelő primerek az amplifikációs reakciót ugyanabban az üzemmódban. A pozitív reakció hiánya a belső kontroll kimutatásában hamis negatív reakciót mutat a HCV RNS jelenlétére a mintában. A következő generáció diagnosztikája volt a "HCV Amplicor 2.0" nevű gyógyszer, 50-molekulák HCV-RNS határérzékenységét alkalmazva.

    A HCV RNS Roche-készletekkel történő kimutatására szolgáló rendszer nem tekinthető elkülönítve a műszerezettől, ami meghatározza a tesztek magas minőségét. A módszer fejlesztői a reakció minden szakaszát teljesen automatizálják. A megtestesítője ez a gondolat egy olyan rendszer volt a „COBASAmpliPrepTM”, amely lehetővé teszi, hogy teljes mértékben automatizálható a kivonására HCV RNS, amplifikációs és detekciós, így csökkenti a hamis pozitív és hamis negatív, miközben a nagy érzékenység és specificitás [41].

    Az RNS BGC (LCR) kimutatásának ligázláncreakciója. Az eljárás a "DNS-függő DNS-ligáz" enzim azon képességén alapul, hogy ATP és Mg 2+ ionok jelenlétében térhálósítanak (ligálják) a foszfo-diészter kötést. A HCV RNS kimutatásához használt "klasszikus" PCR-hez hasonlóan az LCR első szakasza a reverz transzkripció HCV cDNS előállításához. Ezenkívül a DNS-ligáz két pár láncindítót (az 5 'kódolatlan HCV RNS-régióhoz komplementer) köt össze, amelyeket tovább erősítünk. Az LCR-amplifikációs termékek kimutatását az antigén-antitest-reakció figyelembevételével végezzük. Mindkét láncindítót különböző hapténnel jelöltük. Az első ilyen vegyületet a mikrorészecskékre adszorbeált antitestek rögzítik. A mosási eljárás után egy fluoreszcens címkével jelzett második pár antitest alkalmazásával szelektíven kölcsönhatásba lépnek az amplifikációs termék hapténjével, majd egy szubsztrát reakcióval és figyelembe véve a fluorimétert.

    Ennek a módszernek az érzékenysége kb. 200 példányban HCV RNS ml-ben, ami lehetővé teszi különböző klinikai és diagnosztikai problémák megoldását [42]. Jelenleg az LCR-en alapuló HCV RNS kimutatására szolgáló diagnosztikai készleteket az Abbott gyártja.

    Nucleic Acids Seaquencence Amplification - NASBA -a HCV RNS detektálási módja három enzim egyidejű hatásán alapul: a madár myeloblastoma vírus, az RNSsease H és az RNS polimeráz T7 reverz transzkriptáz [43]. Az RT-PCR-rel ellentétben a HCV RNS reverz transzkripcióját az első szakaszban nem végezzük. A felhasznált enzimek segítségével a HCV cDNS-hely több mint 10 (9) példányát 90 percen belül meg lehet szerezni [44]. A reakciót alacsony hőmérsékleten (+41 ° C) nagyban leegyszerűsíti, és lehetővé teszi a magas hőmérsékleten ciklikus változásokat eredményező berendezés feladását. A reakció eredményeit az elektrokemilumineszcencia figyelembe veszi. Annak ellenére, hogy a NASBA érzékenysége közel áll az RT PCR-hez, a módszer nem széles körben alkalmazható a HCV RNS kimutatására. Jelenleg a NASBA és a "Real-time RT PCR" elveit ötvöző módszer egyik változata fejlesztés alatt áll.

    A transzkripciós mediált amplifikáció (TMA) eltér a PCR-től és az LCR-től, elsősorban abban az értelemben, hogy a HCV RNS-fragmensek közvetlenül amplifikálódnak, nem pedig a HCV-cDNS-t. A reakció kezdeti szakaszában az 1. számú primer a HCV RNS-hez kapcsolódik, és a célmolekula, a cDNS egy másolatát egy enzim (reverz transzkriptáz) segítségével szintetizáljuk. A reverz transzkriptáz, amely szintén rendelkezik RNáz-H aktivitásával, elpusztítja a vírus RNS-t az RNS-cDNS hibridben. Ezután egy második láncindítót kapcsolunk a cDNS-molekulához, amelyet a kettős szálú DNS reverz transzkriptázzal való befejezése követ. Egy másik enzim alkalmazásával az RNS-polimeráz, a cDNS-sel végzett RNS-transzkripció előfordul, amely a HCV RNS amplikonjának 100-1000 példányát eredményezi egyetlen reakcióciklusban. A 2. számú primert ezekhez az RNS-aplikonokhoz kapcsolják további cDNS-másolatok szintézisével és az RNS-molekula elpusztításával. Az 1. számú primer hozzáadását a cDNS-hez, majd a kettős szálú DNS befejezése okozza a következő amplifikációs ciklust. A reakció eredményeit figyelembe veszik a lumenométeren, mivel a képződött RNS-amplikonok specifikusan kölcsönhatásba lépnek a kemilumino-forrással jelzett DNS-próbákkal.

    A TMA módszer előnyei a HCV RNS kimutatásakor:

  • reakció alacsonyabb hőmérsékleten a PCR-hez viszonyítva;
  • nagyobb számú amplikon képződését egyetlen reakcióciklusban, ami csökkenti a végeredmény eléréséhez szükséges időt (30-40 perc), és növeli a reakció érzékenységét (50 kópia / ml) [45].
  • csökkentve a szennyeződés kockázatát, mivel az RNS kevésbé stabil, mint a DNS.

    A HCV RNS TMA-val és más módszerekkel történő kimutatására vonatkozó összehasonlító tanulmányok kimutatták az eredmények nagyfokú koincidenciáját [45].

    A hibridizáció és amplifikáció elveinek kombinációja a HCV RNS detektálására szolgáló módszer alapját képezi, amelyet a "A hibridizációs módszer elágazó próbák vagy elágazó DNS-vizsgálat (bDNS) alkalmazásával, [46]. A PCR-vel ellentétben ebben a tesztben az amplifikáció nem magában foglalja a HCV cDNS molekuláit, hanem a jelet. A reakciót 96 lyukú lemezeken, ahol a adszorbeált töredékei HCV RNS 5 „nem transzlálódó szakasz és a mag-gént a HCV-RNS. Mivel a következő kötési egy szintetikus DNS-molekula elágazó láncú, és hibridizációs próbával, alkalikus foszfatázzal jelzett erősítő és az azt követő enzimatikus reakciót úgy érjük el egy meredek emelkedése a vett jel. Jelenleg diagnosticums harmadik generációs diagnosztikai piacon (Bayer 3,0 Hepati-tis C vírus RNS mennyiségi meghatározást Brna), amelynek érzékenységet, hogy azonosítsa 520 NE / ml (2500 másolat HCV RNS).

    A HCV RNS MENNYISÉGI FELTÉTELE. A PCR mennyiségi változatát alkalmazzuk a HCV RNS-koncentráció becsléséhez. Kezdetben, a koncentráció a HCV RNS próbálta meg jellemezni ordinális értékek, mint például a „+”, „++”, stb, vizuálisan fényvisszaverő sávok intenzitása alapján elektroforézissel nyert amplifikációs termékek, vagy határhígításos, azaz, a jelenléte pozitív eredményt a végső titrálási pont. Nehézségek szabványosítani az összes PCR lépést nem teszik lehetővé, hogy objektíven értékelni a koncentráció a HCV RNS, ami jelentős hibákat az eredmények értelmezését.

    Jelenleg, a kutatási eredmények mennyiségi kifejezésekkel: a példányszámot a HCV RNS tartalmazott 1 ml, abszolút értelemben, vagy logarifmeticheskom (log 10).. Azon a tényen alapul, hogy a koncentráció a HCV RNS kimutatható tükrözi vírusrészecskék száma, ez a szám nevezzük „vírus ekvivalens (ekv)”, azzal a kiegészítéssel, előtag k (kilo ezer) vagy M (ppm). A vírusrészecskék számának egy másik módja a súlyegyenértékük. Például grammokban vagy pikogramokban (1 pg körülbelül 1 millió eq). Az alkalmazott mennyiségek sokfélesége megnehezíti a különböző laboratóriumok eredményeinek értelmezését. Ezért a WHO szakértői bizottság Biological Standardization tette „egy nemzetközi referencia anyag” tartalmazó HCV-RNS (liofilnovysushennaya vérszérum tartalmazó HCV RNS genotípus 1), amelynek koncentrációja van kifejezve nemzetközi egység (NE / ml) [47]. Különleges tényezők lehetővé teszik számunkra, hogy a kapott koncentrációértékeket nemzetközi egységekre újraszámoljuk.

    A HCV RNS koncentrációjának meghatározására szinte az összes PCR-variáns alkalmazható. Ugyanakkor számos speciális követelményt ismertetnek a diagnosztikai gyógyszerekre, amelyek közül a legfontosabb az eredmények szigorú linearitása, azaz az észlelt reakció jelének növekedése a HCV RNS koncentrációjának növekedésével a vizsgálati mintában. A különböző standard HCV RNS-tartalmú belső szabványok használatával számos módszertani hiba elkerülhető, amelyek befolyásolhatják a reakció végeredményét [28]. Érzékenység alkalmazott diagnosztikai (Amplicor HCV Monitor v2.0; LCx HCV RNS mennyiségi esszé) képes felismerni a HCV-RNS kezdve a 50 kópia per ml [48,49], ami különösen fontos, hogy megjósolni a hatékonyságát antivirális terápia választott.

    PCR valós időben ("Real-time RT PCR") -amely a HCV RNS kimutatására szolgáló kvantitatív módszer egyik legígéretesebb lehetősége. A módszert és a hardvert közösen fejlesztik a Roche és Percin Elmer szakemberei. A módszer elve a cDNS-szekvenciáknak az 5 '---- 3' irányban történő hidrolizálására alkalmas. A reakcióban egy speciális szondát használnak, két fluoreszcens színezékkel jelölt, közeli abszorpcióval és fluoreszcencia maximalitással. Amplifikációs termékek jelenlétében a Tag-polimeráz lehasítja a szondát, ami megakadályozza az energia egyik festékmolekulából a másikba történő átvitelét, és ezáltal megakadályozza a kvantum fény kibocsátását. Egy speciális eszköz figyelembe veszi a reakció minden szakaszában a fluoreszcencia kinetikájának reakcióját és matematikai modellezését, ami lehetővé teszi a HCV RNS kezdeti koncentrációjának megszerzését.

    A "valós idejű PCR" megkülönböztető jellemzője a HCV RNS jelenlétére vonatkozó információ megszerzésének lehetősége közvetlenül a reakciófolyamatban, amely lehetővé teszi az elemzési idő csökkentését a magas érzékenységgel és a kapott eredmények linearitásával kombinálva [50]. Tatiana Yashina és a szerzők szerint ez a módszer lehetővé teszi a 200 példányban HCV RNS kimutatását ml-ben. [51].

    A genotipizáló RNS VHC módszerei. A HCV-nek egy adott genotípusra és altípushoz való kötődésének meghatározása nem csupán pusztán tudományos, hanem gyakorlati kérdések megoldását is feltárta. Például: a fertőzés forrása a hepatitis C-járványok során, vagy az alkalmazott terápia hatékonyságának előrejelzése.

    A HCV genotipizálás "arany standardja" a HCV RNS primer struktúrájának közvetlen meghatározása az ezt követő filogenetikai analízissel [52], ami lehetővé teszi a vírus izolátumának egyértelmű jellemzését. Ezt az információt az alábbi szekvenálási lehetőségek segítségével szerezheti be:

  • közvetlen;
  • standard klónozás alapján;
  • a PCR reakció termékeinek szekvenálása (korlátozott szekvenálás).
    Annak ellenére, hogy az eredmények pontosságának, a módszer a direkt szekvenálás nem használják az orvosi gyakorlatban, mert a technikai nehézségek a tanulmány és a magas költségek a munkát. Azonban a rendelkezésre álló információt elsődleges szerkezetének RNS HCV genotipizáló referenciamódszer, és a jelenléte a készülékek az automatikus sekvinirovaniya egyszerűsíti a készítmény eredményeket.

    Jelenleg a legtöbb esetben a HCV RNS genotipizálásához PCR-t használó típus-specifikus primerekkel kapcsolatos módszereket alkalmaznak. A HCV RNS első genotipizálását N. Okamoto és munkatársai végezték 1992-ben RT-PCR-vel [53], amely két amplifikációs lépést tartalmaz. Az elsőt a HCV minden genotípusának univerzális primerjeivel végeztük, a második típus-specifikus láncindítók keverékével, hogy különböző hosszúságú specifikus amplifikációs termékeket kapjunk. Egy adott genotípus jelenlétét az amplifikált termék nagysága alapján határoztuk meg. Láncindítóként írja be a specifikus próbákat, amelyekről az RNKVS 5'UTR, Core vagy NS5 régióiban található információ található [54].

    Hibridizációja az amplifikált termékek génspecifikus próbákat adszorbeált (az 5 „nem transzlálódó régiót a HCV RNS), adszorbeált nitrocellulóz membránra, fekszik alapján a teszt - jelölt»INNO-LiPA HCV, INNO-GENETICS«[55]. Kezdetben a teszt segítségével lehetett megadni a genotípusokat: la; lb; 2a; 2b; 3a; 3; 4. és 5.a. Ezt követően a teszt-rendszer 2. generációs „INNO-LiPA HCV II, Innogenetics” lehetővé teszi, hogy megkülönböztessék az összes genotípus 6 és a további 2c; 2d; 2i; 3c; 4a-H; 6a és 10a. [56]

    A HCV genotipizálás módszertani arzenálja nem korlátozódik a fenti módszerekre, és számos módszert foglal magában:

  • genotipizálás az amplifikált termékek (RFLP) restrikciós profiljának elemzése alapján. A HCV RNS-fragmensek (5'UTR-régió vagy NS5 HCV RNS-régió) amplifikációs termékeit restrikciós enzimekkel emésztjük. A kialakult fragmensek hossza változik, attól függően, hogy a restrikciós helyek melyikben hasadnak. Az elektroforézis eredménye és összehasonlítása lehetővé teszi a HCV genotípus azonosítását a vizsgálati mintában [57]. A genotipizálás eredményeinek összehasonlítása a PCR-RFLP módszerrel, a szekvenálási adatokkal, az eredmények 95% -os magas koincidenciáját mutatta [58].
  • genotipizálás az SSCP módszer alapján (az egyszálú DNS-fragmensek konformációs polimorfizmusának felmérése). A vizsgálat tárgyává választották a HCV RNS 5'-nem transzlatált régióját, amelynek minimális számú nukleotidváltozata különbözteti meg a genotípusokat egymástól. Ez a tény meghatározza a közös láncindítók alkalmazásának lehetőségét a genotipizáláshoz [59].

    SEROTYPING Anti-HCV Kutatási tette lehetővé köszönhetően P.Simmonds és munkatársai, meghatározzák a epitópok ellen irányuló ellenanyagok genotipspetsifichnym mely információkat kódolt NS4 HCV RNS zóna [60]. A diagnosztikum ELISA alapján szerkesztett szintetikus peptidek, képes megkülönböztetni a hepatitis C, a vírusok által okozott 1, 2 és 3-as genotípus (89% -os egyezés az eredménnyel genotipizálás). Fejlesztési testsistem szintetikus és rekombináns antigének által kódolt NS4 és a mag zónák HCV RNS fokozott a listán tipizálható vírus variánsok, és a bíró jelenléte altípusok (1a, lb, 2a, 2b, Over, és 4a) [61,62]. Jelenleg a kereskedelmi forgalomba a diagnosztikai készítmények szerotipizálásához a kiviteli alaknál a spot ELISA - „NA Mureh 1-6 szerotipizálása Assay, Murex Diagnostics”, és a kiviteli alaknál „immunoblot” - RIBA HCV szerotipizálása Assay, Chiron Diagnostics. Összehasonlítható eredményeket adatok szerotipizálása és genotipizálására HCV RNS bizonyították magas szintű az egyezés, elérve a 95% [62].

    Az anti-HCV serotipizálása a HCV RNS genotipizálásához képest olyan előnyökkel jár, mint a reakció egyszerűsége és alacsonyabb költség. Ugyanakkor ez a módszer semmi esetre sem helyettesítheti a genotipizációt. Az anti-HCV-szerotipizálás eredményei bizonyítják az anti-HCV típusát a jelenlegi vagy korábban továbbított fertőzésben. Bizonyos esetekben (leggyakrabban hemofíliában szenvedő betegeknél) különböző altípusú anti-HCV szimultán detektálását jegyzik fel, ami többféle fertőzést jelenthet a HCV különböző altípusai és genotípusai miatt [63]. Ráadásul a hepatitis C-ben szenvedő betegeknél a kimondott immunhiányos állapot hátterében az RNS lehet az egyetlen marker, ami lehetetlenné teszi a szerotipizálás elvégzését.

    A HCV-INFEKCIÓ SZEMÉLYES MARKEROLAJÁNAK VIZSGÁLATA EREDMÉNYEINEK MEGJELENÍTÉSE ÉS MEGERŐSÍTÉSE. A széles szerológiai markerek jelenlegi vagy korábbi HCV fertőzés, valamint a modern módszertani keret Sok probléma megoldható a laboratóriumi diagnosztikai és megelőzése hepatitis C 2. táblázat mutatja a szám szerológiai markerek a HCV-fertőzés és a legfontosabb területei az tesztelés.

    2. táblázat
    A jelenlegi vagy korábbi HCV fertőzés markereinek diagnosztikai jelentősége

    árnyékolás
    a szolgáltatásban
    vér

    megerősített
    KIJELENTÉST
    eredmény
    + anti-HCV

    A hepatitis C laboratóriumi diagnosztikájának egyik fő feladata a krónikus hepatitis C akut krónikus diagnózisát és elválasztását a fertőzés szerológiai markereinek azonosításával. A többi akut vírusos hepatitishez hasonlóan a HCV fertőzés szerológiai markerei következetesen megjelennek és eltűnnek a fertőzés folyamán és a helyreállítás folyamatában (2. ábra).

    HCV-RNS-t lehet kimutatni 7-21 nappal a fertőzés után HCV és anti-HCV 20-150 perc egy nap (átlagosan 50 perc naponta) [64]. Az anti-HCV spektruma eltérhet az akut hepatitisz időszakától függően. Úgy gondolják, hogy az első, amely a Core és NS5 által kódolt antitesteket azonosítja a HCV RNS régió. Az NS4-zónában kódolt fehérjék elleni HCV nem szerepel a hepatitis C akut fázisában [65]. Az akut és krónikus hepatitiszben szenvedő betegeknél az anti HCV koncentrációjának összehasonlító vizsgálata, az anti-HCV és a HCV RNS spektruma néhány különbséget mutatott [66]. Véleményünk szerint ezek a különbségek kapcsolódhatnak a fertőző folyamat egyedi jellemzőihez, ami csökkenti diagnosztikai értéküket.

    Ábra. 2. Akut hepatitis C

    Ennek analógiájára a laboratóriumi diagnózisa hepatitis A és B várhatóan a HCV-antitesteknek az IgM osztály lesz olyan nagy, mint a diagnosztikai értékét IgM anti-HAV és IgM anti-HBc. Azonban, ezek a vizsgálati szenvedő betegek szérumával akut és krónikus hepatitis C jelenlétében IgM anti-HCV jelzik azok gyakori azonosítására ilyen betegek között - 50-93% és 50-70%, sorrendben [67,68], ezek az eredmények azt jelzik, hogy a IgM anti -HCV nem használható az akut HCV fertőzés markereiént.

    Az akut hepatitisz C "arany" standardját jelző marker hiánya alapján megállapítható, hogy a páciens dinamikus megfigyelése alapján átfogó értékelést kell végezni.

    Ugyancsak fontos terület a nagyon érzékeny módszerek alkalmazására a HCV RNS tesztelésére - a poszttranszfúzió hepatitis C kockázatának csökkentése. Az ilyen munkák szükségességét az "ablak" fázis jelenléte határozza meg, azaz a HCV RNS első kimutatása és az anti-HCV megjelenése között, valamint a vírusellenesek (Krónikus hepatitisz C), akik HCV RNS-sel rendelkeznek HCV anti-HCV hiányában. A HCV véradásainak megfigyelésének jelenlegi rendszere csak az anti-HCV vizsgálatát foglalja magában, a hepatitis C-fertőzés veszélye továbbra is fennáll. Ebből kiindulva jogszerű felvetni a HCV RNS jelenlétének vérvizsgálatát modern módszerekkel (A NAT-eljárások egy "nukleinsavamplifikációs teszt"). A munkát korlátozó tényező a kutatás magas ára. A költségek csökkentése érdekében ajánlatos tesztelés sera medencék (8-96 minta), majd a keresési pozitív minta észlelése esetén a HCV RNS szérumgyűjtemény. Figyelembe véve a kívánt HCV RNS hígításának tényezőjét, amikor a vérszérum kipirulódik, a legérzékenyebb detektálási módszerek alkalmazása alapvető fontosságú. Úgy gondolják, hogy a NAT diagnosztikai készletének használata - 50-100 NE / ml érzékenységgel - jelentősen csökkentheti a poszttranszfúziós hepatitis C kockázatát.

    Kétségkívül a HCV-fertőzés markereinek teljes spektrumának tesztelése során megoldható problémák felsorolása nem korlátozódik e két területre. A modern vizsgálati módszerek rendelkezésre állása a képességek ismeretével kombinálva széleskörű kilátást kínál a hepatitis C tudományos és alkalmazott kutatásaira.


  • Kapcsolódó Cikkek Hepatitis