Minőségi analízis a hepatitis C esetében

Share Tweet Pin it

Hagy egy válasz

A polimeráz láncreakció kvalitatív elemzése - a hepatitis C-re vonatkozó PCR meghatározza a HCV jelenlétét vagy hiányát a szervezetben. A laboratóriumban megvizsgálják az RNS szerkezetét, amelyben a vírus található. Ha a C-vírus kimutatható, szükségessé válik a kezelés folyamata, mivel az elhanyagolt májbetegség komoly következményekkel jár. A kinyerés után kvalitatív PCR-t végzünk, hogy megerősítsük az antitestek hiányát. Kinevezett és megelőző vizsgálat. A vér kórokozója alacsony koncentrációban a PCR (kvalitatív) nem képes észlelni semmit, mert a diagnosztikai rendszernek érzékenységi küszöbe van. A betegség kezdeti szakaszában vagy enyhe formában a PCR-t végül ultrahangos berendezéssel diagnosztizálják.

Mi az RNS vírus?

A hepatitis C vírus (vagy a hepatitis C vírus RNS) RNS-ről nevezik magát májbetegségnek. A C vírus egy egészséges sejthez kötődik, és behatol. Idővel elterjedt az egész testben, csak a vérbe jut. Ennek eredményeképpen a kórokozó behatol a májba, megolvasztja sejtjeit és keményen dolgozik. A májsejtek (hepatociták) a hatása alatt, változásokon át, és ebből a veszteségből dolgoznak. Minél hosszabb a C vírus a májban, annál több sejt hal meg. Idővel veszélyes betegségek alakulnak ki, amelyek rosszindulatú degenerációhoz és halálhoz vezetnek.

A máj fertőzése ilyen típusú vírussal semmilyen módon nem nyilvánulhat meg külsőleg. Sok éven át vagy több tucat évig a fertőzött személy egészségesnek érzi magát, és csak egy véletlen vizsgálat leggyakrabban patológiát tár fel. A hepatitis vérének adományozásakor az emberi gén (DNS) részét képező RNS (ribonukleinsav) lánc egy részét vizsgáljuk. A laboratóriumi kutatások eredményeit nem szabad az öngyógyításra használni, mert ez csak indikátor. Az orvos meghatározza a pontos képet és további diagnózist.

Ha kész: a tanulmány tanúsága

A HCV megerősítésére PCR-analízist (polimeráz láncreakció) rendelünk. A PCR vizsgálatok segítenek megtalálni a kórokozó anyagot az RNS szerkezetében, és hatékony terápiát írnak le. A következő esetekben kinevezett:

  • a májgyulladás jeleinek azonosítása;
  • megelőző szűrővizsgálatok;
  • kapcsolattartó személyek vizsgálata;
  • a vegyes eredetű hepatitis diagnózisa (a fő kórokozó meghatározása);
  • A vírus szaporodásának aktivitási szintjének meghatározása krónikus formában;
  • a máj cirrhosis;
  • hogy meghatározzák az előírt kezelés hatékonyságát.
A PCR-vizsgálatokat orvos határozza meg a hepatitis kezelésének hatékonyságának meghatározására.

A PCR minőségi és mennyiségi analízise is van. A kvantitatív PCR mutatja az RNS százalékát a vírus hordozóival a vérben, és a minőségi PCR vírus jelenlétét vagy hiányát jelzi. A minőségi pozitív mutató (a hepatitis C RNS jelenléte) szintén kvantitatív vizsgálatot igényel. A hepatitis C kórokozójának magas koncentrációja az átvitel kockázatával jár együtt, azaz mások fertőzésével. Az alacsony mennyiségeket jobban kezelik. A vérben található RNS vírusok mennyisége nem kapcsolódik a betegség intenzitásához. A PCR-analízist az interferon terápia esetében is végezzük, annak érdekében, hogy meghatározzuk a kezelés folyamatának időtartamát és összetettségét.

A hepatitis C minőségi PCR analízisének jellemzői

A polimeráz-láncreakció-indexhez kvalitatív analízist rendelünk minden olyan beteghez, akik vércukorszint-ellenes antitesttel rendelkeznek, és akik visszanyerték és gyógyultak, újra kell vizsgálni. Javasoljuk, hogy a vizsgálatot elvégezni a hepatitis B és, majd abban az esetben pozitív következtetés, és a hepatitis D. minőségileg is analizáltuk reakatsiya kell elvégezni együtt más vérvizsgálat. Az elemzések teljes képet adnak a vírus terjedésének.

A vizsgálati eredmények közül csak pozitív, hepatitis C vagy negatív teszt, azaz a vírus jelenléte vagy hiánya látható. Ha a következtetést "észlelik", akkor a vírus aktívan cselekszik és folytatja tevékenységét. A "nem található" megnevezés azt jelzi, hogy nincs vírus vagy kis mennyisége. Ezzel a mutatóval figyelembe kell venni azt a tényt, hogy a diagnosztikai rendszerek analitikai érzékenysége eltérő, és az RNS hepatitis C még mindig a vérben maradhat, de nem mutatható ki az elemzésben.

A PCR ultra-hepatitis C különösen érzékeny módszere még kis mennyiségben is feltárul. Egy hibridizációs-fluoreszcens vizsgálatot alkalmaznak, amely sokszor magasabb, mint a standard PCR rendszerek. A módszert több esetben használják:

  • a hepatitis C gyanús rejtett formái;
  • A PCR diagnózisát a kórokozó nem igazolta, de vannak antitestek;
  • visszanyerés esetén;
  • hogy azonosítsa a fertőzés korai szakaszát.
Vissza a tartalomhoz

Az elemzés magyarázata

A diagnózis végső döntését a HCV PCR dekódolásának hatása befolyásolja, különösen az ultramethod módszerrel. Ennek a kutatásnak a fő hátránya a minta és az anyagok steril körülmények közötti szigorú betartása. A kis eltérés néha az elemző pontatlan következtetéseit mutatja, bonyolítja a diagnózist és a későbbi kezelést. A PCR analízise a hepatitis vírus RNS meghatározására nem mindig mutatja a betegség képét bizalommal, néha pontatlanságok is be vannak engedve, mindkét irányban.

A hepatitisz-vírus diagnosztizálására ajánlott átfogó vizsgálatot alkalmazni.

A mutatók normája

A vírusos hepatitis C-ben található RNS-sel szembeni JgM antitestek hiányát a polimeráz láncreakció analízisének tekintik. Ugyanakkor a szerológiai analízis eredményei azt mutatják, hogy a C-vírus antitestjei jelen vannak, és ez a norma határain belül is fennáll. A minőségi meghatározás nem mutatja a betegség intenzitását, csak a hepatitis C okozó ágensét mutatja az RNS-ben. Az ilyen elemzést a kezelés után meg kell ismételni a tényleges gyógyulás megerősítése érdekében.

eltérések

Ha a HCV RNS-nek megfelelő JgM ellenanyagok vannak jelen, ez egy fejlődő fertőzésre utal. A betegség akut vagy krónikus, különböző szakaszokban manifesztálódik. Ha az antitestek számának csökkenését rögzítik, az elemzés a kezelés során elért eredmények elérését jelzi. Rendkívül ritkán előfordulnak a hamis pozitív eredmények a diagnózisban. A nőknél a terhesség alatt és más fertőző betegségekben szenvedőknél fordulnak elő.

Mi a hepatitis C vírus RNS?

A hepatitis C vírus RNS-vizsgálata a legfontosabb eljárás, amely lehetővé teszi a betegek kezelésének időtartamát és módszereit nagy pontossággal. A betegség diagnosztizálása több különböző vérvizsgálatból áll, mint például:

  • a hepatitis C markerek (anti-HCV);
  • hepatitis C vírus RNS kimutatására (HCV RNS).

Az első vizsgálat a hepatitis első gyanúja. A második lehetőség a legfontosabb a HCV RNS kezelésében, ezért részletesebben megfontoljuk.

Mi a vírusos hepatitis C?

A vírusos hepatitis C vagy a HCV fertőző betegség, amely a májra hat. A vírussal fertőződik a vérben. Ha fertőzést szenved, vérátömlesztést végez, amikor az orvosi eszközök sterilizálására vonatkozó szabályokat nem tartják tiszteletben. Kevesebb olyan eset van, amikor a betegséget szexuális úton vagy terhes anyától a magzatig kapják. A hepatitis C 2 típusból áll.

A krónikus hepatitis C a legveszélyesebb. Ez egy olyan betegségforma, amely egész életen át tarthat. Komoly problémákba ütközik a máj működésében, például cirrózisban vagy rákban. A fertőzött emberek 70-90% -ában a betegség krónikus állapotba kerül.

A hepatitis C legfontosabb veszélye az, hogy titokban, icterikus jelek nélkül halad. Ebben az esetben leggyakrabban panaszkodnak láz, hányinger és hányás, fizikai gyengeség, fokozott fáradtság, étvágycsökkenés és súlycsökkenés. Ebben az esetben a májszövetek kis tömörödésének hátterében gyakran előfordul rosszindulatú degenerációja. Ezért a vírusos hepatitis C-t gyakran "időbombaként" vagy "gyengéd gyilkosnak" nevezik.

A betegség másik különlegessége nagyon lassú fejlődés, amely több tucat évre becsülhető.

Rendszerint a fertőzöttek nem éreznek semmilyen tüneteket, és nem gyanítják valódi állapotukat. Gyakran előfordul, hogy a betegség csak akkor azonosítható, ha másik orvosra utal.

A kockázati csoport a következőket tartalmazza:

  • olyan gyermekek, akik az anyáknál hepatitis C vírust kaptak;
  • drogfüggők;
  • emberek, akik átszúrtak testrészeket vagy tetováltak nem steril eszközöket;
  • adományozó vért vagy szerveket (1992-ig, amikor hemodialízist nem végeztek);
  • a HIV fertőzöttek;
  • A fertőzött betegekkel érintkező orvosi dolgozók.

A hepatitis C RNS meghatározása

Meghatározása a hepatitis C vírus RNS-t, más néven a hepatitis C PCR, ez a tanulmány a biológiai anyagok (vér), amellyel azonosítani tudja a szervezetben az azonnali elérhetőségét genomateriala hepatitis B vírus (bármely adott vírus egy egyetlen részecske RNS).

A fő vizsgálati módszer a PCR vagy a polimeráz láncreakció.

A HCV RNS meghatározására kétféle vérvizsgálat létezik:

Minőségi teszt

A kvalitatív elemzés elvégzése lehetővé teszi annak megállapítását, hogy a vírus a vérben van-e. Minden olyan betegnek, aki C-hepatitis antitestet kapott, ezt a vizsgálatot meg kell vizsgálnia. Eredményeivel 2 válasz érhető el: "jelen van" vagy "hiányzik" a vírus. A pozitív vizsgálati eredmény (talált) alapján meg lehet ítélni egy olyan vírus aktív multiplikációját, amely az egészséges sejteket a májban fertőzi.

A kiváló minõségû PCR-hez végzett tesztet specifikus érzékenységre hangolták, 10-500 NE / ml¹et. Ha a hepatitis vírus 10 μU / ml-nél kisebb koncentrációjú vérben található, akkor a vírus kimutatása lehetetlenné válik. A vírus specifikus tartalma nagyon alacsony értéket mutat azokon a betegeken, akiknél az antivirális terápiát írják elő. Ezért fontos, hogy az orvosi rendszer érzékenysége magas szintű legyen a polimeráz láncreakció minőségének megállapításához és meghatározásához.

Gyakran előfordul, hogy a C-hepatitisz polimeráz láncreakcióját azonnal a megfelelő antitestek megtalálása után végezzük. A vírusellenes terápiás kezelést követő vizsgálatok a 4., 12. és 24. hetet tekintik meg. És egy másik elemzést a PVT befejezése után 24 hét után végzünk. Ezután - évente egyszer.

Kvantitatív teszt

A PCR RNS kvantitatív analízise, ​​amelyet néha vírus terhelésnek is neveznek, meghatározza a vírus koncentrációját (specifikus tartalma) a vérben. Más szóval, a vírusterhelés értetődik egy bizonyos mennyiségű virális RNS, amely jelen lehet egy adott mennyiségű vért (hozott kezelhető 1 ml 1 cm kocka). A vizsgálati eredmények egységei nemzetközi (standard) egységek, osztva egy milliliterrel (IU / ml). A vírus tartalma néha eltérőnek tűnik, attól függ, hogy a laboratórium melyik kutatást végzi. A hepatitis C esetében a mennyiségi meghatározás néha olyan értékeket használ, mint a másolatok / ml.

Meg kell érteni, hogy nincs specifikus függőség a C-hepatitisz súlyosságától a törzs koncentrációjában a vérben.

A "vírus terhelés" ellenőrzése lehetővé teszi a betegség fertőzőképességének meghatározását. Tehát a vírus egy másik vírusának megterhelésének kockázata nő a hepatitisz koncentrációjának növekedésében a vérben. Ezenkívül a vírus magas tartalma csökkenti a kezelés hatását. Ezért a kis vírusterhelés nagyon kedvező tényező a sikeres kezeléshez.

Ezenkívül a hepatitis C teszt és a PCR általi meghatározása nagy szerepet játszik a betegség elleni kezelésben és a kezelés sikerességének meghatározásában. A vizsgálati eredmények alapján tervezik a rehabilitációs tanfolyamot. Például a hepatitis vírus specifikus koncentrációjának lassú csökkenése esetén az antivirális terápia meghosszabbodik, és fordítva.

A modern orvostudományban úgy vélik, hogy a terhelés több mint 800000 ME / ml magas. A 10000000 ME / ml feletti terhelés kritikusnak tekintendő. De a különböző országok szakértői és a mai napig nem ugyanazon a véleményen voltak a vírusterhelés korlátai.

A mennyiségi teszt gyakorisága

Általában a hepatitis mennyiségi elemzését az antivirális terápia előtt és a kezelés befejezése után 3 hónappal a terápia minőségének meghatározása végett végezzük.

Ennek eredményeképpen a mennyiségi vizsgálatot a fent leírt minta eredményeinek mennyiségi értékelésének kell tekinteni. Ennek következtében a "mért tartomány alatt" vagy "a vérben nem észlelhető" megállapítás fog megjelenni.

A kvalitatív vizsgálat érzékenységi paramétere általában alacsonyabb, mint a kvantitatív elemzés érzékenysége. A "hiányzó" átirat jelzi, hogy mindkét fajta elemzés nem találta a vírus RNS-jét. A "mért tartomány alatti" vizsgálattal a kvantitatív elemzés valószínűleg nem találta meg a hepatitis RNS-t, bár ez igazolja egy nagyon kis specifikus vírus jelenlétét.

Hepatitis C és genotípusai

Genotipizálása hepatitis C vírus RNS diagnosztizálni jelenlétében különböző genetikai típusú hepatitis C Science tudja több mint 10 típusú vírus genom, de az orvosi gyakorlatban kellően megkülönböztetni több genotípus, amelyek a legnagyobb részesedése a régióban. Meghatározása genetikai típusa kulcsszerepet játszik kiválasztásában az időzítés a kezelés, ami szükséges, ha figyelembe vesszük, sokféle mellékhatása elleni gyógyszerek hepatitis.

A vírusos hepatitis C kezelésének módszerei

A hepatitisz vírus gyógyítására szolgáló egyetlen hatékony módszer 2 gyógyszer kombinációja: az interferon-alfa és a ribavirin. Különben ezek a gyógyszerek nem annyira hatékonyak. A gyógyszerek ajánlott dózisát és az alkalmazás időzítését csak az orvos írhatja elő, és minden egyes betegnél egyedileg. Ezeknek a gyógyszereknek a kezelése 6-12 hónapig tarthat.

Ma nem találtak olyan gyógyszereket, amelyek garantálják a vírus 100% -os helyreállítását. A megfelelően kiválasztott kezeléssel azonban a betegek gyógyulása elérheti az esetek 90% -át.

PCR diagnosztika használata

A polimeráz láncreakciót (PCR) a molekuláris biológiában a víruskeresés kísérleti módszerének nevezik. Lehetővé teszi a nukleinsav (DNS) bizonyos fragmenseinek koncentrációjának jelentős növelését a biológiai anyag mintáiban, ami lehetővé teszi számukra a felismerés és számlálást.

Az elemzés az alábbiak szerint történik. A genetikai anyagot (vérmintát), amely potenciálisan tartalmazhatja a kívánt gént, egy kémcsőbe kerül. Ezenkívül a primereket a kémiai úton szintetizáltuk a kívánt gén kis hosszán.

A DNS-hez vagy RNS-polimerázt is hozzáadják az edényhez, képes egy olyan nukleinsavláncot létrehozni, amely teljesen azonos az eredetivel. A kapott kompozícióba négy szabad nukleotidot, egy RNS-hez vagy DNS-hez speciális építőanyagot helyezünk, amelyek közül az egyik a foszfor radioaktív részecskéit tartalmazza.

A kapott elegyet 95-96 ° C-ra melegítjük, aminek következtében a szokásos állapotban összefonódott két DNS-helikát feloldjuk. Ezután a készítményt lehűtjük, ebben az időben a primerek a vírusgenom kívánt régiójához kötődnek anélkül, hogy az RNS (vagy DNS) kettős hélixet állítana elő ismét.

Hűtés közben a polimeráz egy nukleotidok szabad láncolatát keresi. Ennek az enzimnek a működéséhez egyetlen lánc nukleotidra van szükség. Mivel a polimeráz a DNS-szalag mentén csúszik (mint egy gyűrű egy kötélen), nem működhet kettős spirállal.

Ezután ismétlődő ciklusú melegítést végzünk, ami miatt a nukleotidláncokat elválasztjuk. Mindegyik PCR ciklus esetében a mintában lévő kívánt hepatitis gén mennyisége növekszik a geometriai progresszióban, és a genetikai anyag többi része lineárisan keletkezik.

A nukleotidmaradékok oldatának tisztítása és a DNS-szálak elektroforézissel történő molekulasúly-paraméterével történő elválasztása után könnyen meghatározható, hogy a kívánt gén létezik-e a vizsgálati mintában, vagy sem.

A PCR előnyei

A PCR módszerrel végzett laboratóriumi vizsgálat lehetővé teszi, hogy még több információt szerezzen, mint az RNS vírus jelenlétét. A radioaktív sugárzás szintjének meghatározásakor meghatározható, hogy a vizsgált mintában mely genetikai anyagot kezdetben tartalmaznak. Hepatitis esetén határozza meg a vírusterhelés szintjét.

Ennek a módszernek egy másik előnye a CR reakció nagyon nagy érzékenysége. Sokkal magasabb, mint a vírusok észlelésének klasszikus módszerei. Ideális esetben a kívánt gén azonosítása céljából csak egy mintában lévő vírus elegendő a PCR-hez.

Emellett a PCR teljesen specifikus. A primereket olyan módon hozták létre, hogy teljesen megfeleljenek a kívánt gének egyedülálló részeinek, amelyeknek nincs más szekvenciája. Mindkét ujjlenyomat egyedülálló, és minden génben egyedi nukleotidszekvenciák vannak.

Minõségi PCR analízis

A kvalitatív analízis csak a vírus jelenlétét mutatja a vérben. Ezt a vizsgálatot minden olyan betegnél el kell végezni, akikről kimutatták, hogy vérükben a hepatitis C elleni antitestek eredményei csak két érték közül választhatnak: "észleltek" vagy "nem észleltek". Egészséges ember esetében a normát (referenciaérték) "nem szabad észlelni".

Az elvégzett kvalitatív kutatás ilyen eredményeinek speciális értelmezése is van:

  • Az eredmény "felfedezett". Ez azt jelenti, hogy a mintában a biológiai anyagot hozott találtak egy olyan RNS-fragmens, amely specifikus a hepatitis C-vírus Következésképpen, ott van a tény, a beteg hepatitis B vírus fertőzés C. Ha az eredmény a kvalitatív PCR „felfedezte”, ez azt jelzi, hogy a vírus ismétlésben és ebben az időben új májsejteket fertőz meg a szervezetben.
  • Az eredmény "nem észlelhető". Az ilyen döntés azt jelzi, hogy a mintában a biológiai anyag kapott RNS-fragmentum nem mutatható ki a laboratóriumban, amely specifikus vagy HCV RNS azonos koncentrációban a patogén fertőzés a mintában határ alatt volt az a teszt érzékenységét.

A hepatitis C vírus RNS akut fázisában a PCR technikát alkalmazó kvalitatív vizsgálatok 1-2 hét után azonnal felfedezhetik a szervezet fertőzését, vagyis röviddel a hepatitis elleni antitestek megjelenését megelőzően.

Az ilyen vizsgálatok analízisének megbízhatatlan eredményei a következőkkel érhetők el:

  • szennyezett biomassza;
  • heparin jelenléte a beteg vérében;
  • a mintában lévő vegyi vagy fehérjeanyagok (inhibitorok) jelenléte, amelyek befolyásolják a PCR különböző komponenseit.

A PCR minőségi analíziséhez nem szükséges a beteg speciális preparálása a vizsgálat elvégzéséhez. A vénás vért anyagként használják.

Az eredmények értékelése

A kvalitatív PCR-tesztek bizonyos fokú érzékenységgel rendelkeznek, és a laboratóriumi pontosságtól és a laboratóriumi felszerelés mértékétől függően 10 és 500 NE / ml között változhatnak.

Ez azt jelenti, hogy ha a vírus a vérmintában nagyon alacsony koncentrációban van jelen (kevesebb, mint az adott laboratórium érzékenységi küszöbe), akkor a beteg páciensét "nem detektálják". Ennek következtében, ha minőségi PCR-elemzést végeznek alacsony vírusszinttel (vírus alacsony koncentrációja), például antivirális terápiában részesülő betegeknél, nagyon fontos tudni a diagnosztikai rendszer érzékenységi küszöbét.

Diagnosztikai rendszerek változatai

A virológiai válasz szabályozására ajánlott az antivirális kezelés legalább 50 NE / ml érzékenységi küszöbértékű diagnosztikai rendszerek alkalmazása. Ezek a kritériumok teljesülnek, például: Cobas Ampicolor VGS-teszt elemzők (50 IU / ml pontossággal), valamint RealBest HCV RNS (15 IU / ml érzékenységgel).

A WHO szerint ajánlásokat létrehozó végleges diagnózist a hepatitis C, meg kell kizárólag alapján hármas kimutatására RNS-vírus szérummintákon szenvedő beteg nincs más hepatitis marker faj.

A PCR-eljárások mellett TMA-vizsgálatot (transzkripciós amplifikációs módszert) is alkalmaznak HCV RNS kimutatására betegekben. A legjobb érzékenység küszöbérték (5-10 NE / ml), de hazánkban ez a tesztelési módszer még nem túl gyakori.

A vírusok észlelt módosításainak hatóköre

Ez a kvalitatív meghatározás a hepatitis C vírus RNS jelenlétében szérumban lehetővé teszi számos vírus genotípusának meghatározását. Jelenleg a tudomány több mint hat genotípust ismeri a vírusról, valamint a betegség mintegy 10 altípusairól.

Az 1, 2, 3 genotípusú vírusok gyakoriak országunkban. Laboratories képes észlelni a következő genotípusok: 1a, 1b, 2a, 2b és 2c és 3, 4, 5a és 6. függetlenül altípus. Minden vírusmódosítás esetében a detektálás sajátossága 100%.

PCR mennyiségi elemzése

Kvantitatív PCR-teszt segítségével megállapítják a vérminták hepatitis vírusának koncentrációját (vírus terhelés). Ez a viremia-teszt (a vírus koncentrációja) lehetővé teszi egy meghatározott genetikai anyag (a leginkább vírusos RNS) egységek számának meghatározását, amelyet egy bizonyos mennyiségben észlelnek. Ebben az esetben határozza meg a koncentrációját 1 ml-ben, ami megfelel 1 cu. cm.

Az analízis mennyiségi paramétereit számokban fejezzük ki, ezt a mérést nemzetközi egységegységként (IU) milliliterenként (ml), ME / ml-ként jelöljük. Néhány laboratóriumban a vírus mennyisége más egységekben is meghatározható: a példányok számát ml-enként, másolatként / ml-nek.

  • Időzítés A hepatitis C esetében a PCR ilyen kvantitatív analízise a terápia megkezdése előtt történik. Aztán az 1., 4., 12. és 24. hetet. A 12. héten végzett értékelés indikatív, lehetővé teszi a terápia hatékonyságának meghatározását.
  • Elemzés előkészítése. A PCR mennyiségi elemzéséhez nem szükséges a beteg speciális felkészítése a vizsgálathoz. A mintavétel előtt fél órával nem szabad dohányozni. Vénás vért használnak laboratóriumi anyagként.

Az eredmények értékelése

Különböző laboratóriumi vizsgálati rendszerek esetében ez a mutató különböző konverziós tényezőket mutat be IU / ml-ben. Átlagosan egy konverziós paramétert alkalmaznak, amelyben 4 kópia / ml = 1 NE / ml. Ez például, ha a laboratórium 2,4 * 10 6 kópia / ml PCR-analízist eredményez, akkor ezt a paramétert 4-gyel kell osztani, és 6 * 10 5 NE / ml-t kapunk.

A 800 000 NE / ml magas terhelési szint magasnak tekinthető, ami megközelítőleg 3 000 000 példány / ml index. Az alacsony viremia egyes szerzők szerint a kvantitatív PCR 400 000 NE / ml alatti paramétereinek felel meg.

A kvantitatív teszt eredményeként a végeredmény nem digitális érték formájában jeleníthető meg, hanem: "a mérési tartomány alatt" vagy "nem detektálható".

  • Értékelés: "a mérési tartomány alatt". Ez azt jelzi, hogy a mennyiségi vizsgálat nem tudta kimutatni a hepatitis C virális RNS-t, de maga a vírus igen kis koncentrációban jelen van a szervezetben. Ezt egy további kvalitatív vizsgálat is jelzi, amely igazolja a vírus jelenlétének tényét.
  • Értékelés: "nem észlelt". Ez az eredmény azt jelzi, hogy a mennyiségi vizsgálat nem észlelt vírust az RNS mintában.

A vírusterhelés paramétere elsősorban a betegség fertőzőképességének mértékét, a beteg fertőzőképességének mértékét határozza meg. Minél magasabb a páciens koncentrációja a vírusnak, annál nagyobb a valószínűsége annak, hogy más emberekre átruházzák. Például, amikor szexuális kapcsolatban áll egy beteg vagy egy függőleges út. Az ilyen mennyiségi mutató segít a páciens kezelésének hatékonyságának meghatározásában.

A PCC mennyiségi elemzésének elvégzése fontos az antivirális terápiához, értékeli sikerét és ütemezi a tanfolyam időtartamát. Tehát a test gyors reakciója a kezelés és alacsony mértékű viremia esetén a terápia időtartama csökkenthető.

A mennyiségi PCR paraméter lassú csökkenésével az antivirális terápiát ki kell terjeszteni vagy módosítani. Ha a vírusterhelés szintje alacsony, akkor ez a terápia kedvező tényezője, ha magas, akkor az alkalmazott kezelési módszer hatástalan, és a gyógyszereknek vagy azok használatának módszereit módosítani kell.

Mik a normák a hepatitis C mennyiségi elemzésében?

A hepatitis C vírus képes reprodukálni a vérsejtekben és lymphoproliferatív betegségeket okozni. Több mutációnak köszönhetően a szervezet immunvédelme gyengül, a genotípusok és a vírus altípusai jelennek meg. Egy adott típus helyes és pontos azonosítása az antivirális terápia hatékonyságától függ. A fertőzés veszélye, hogy a betegség tünetmentes. Összesen 15% -a 100 hányingert és hányást, fogyást és lázot tapasztalhat.

A hepatitis C vírus meghatározása

A hepatitis C standard normája a 40-60 nm-es méretű, a lipidek többségénél a májkárosodás az akut vagy krónikus betegség következtében következik be. A Hepatitis C, nevezetesen a Togaviridae család RNS vírusa rendkívül tartós, vérátömlesztéssel vagy nem steril tételekkel, a fürdőszobai kiegészítők nem megfelelő higiéniájával, A kvantitatív elemzés lehetővé teszi a vér vizsgálatát és a fertőzött vírus genetikai szerkezetének azonosítását.

A hepatitis C és annak genotípusai meghatározásához kvantitatív elemzést kell végezni. Az analizátortól függően az RNS vírus előfordulási gyakoriságának három szintje határozható meg.

Az altípusok különböző módosításokat eredményezhetnek, ezért az analizátor sajátossága és érzékenysége száz százalék. A páciens betegségének felderítése mellett meg kell határozni a súlyosság mértékét. Egyes laboratóriumok nem rendelkeznek az RNS vírus definícióival kapcsolatos összes adatról, hamis pozitív válasz lehetséges.

A hepatitis C vizsgálata pontosabb lesz az ilyen mutatók tanulmányozása során:

Figyelembe véve ezen mutatók eredményeit és a szervezet általános állapotát, megjelenik egy eredmény, amely a fertőzés mértékét, a formáját és a hepatitis C sejtek számát mutatja a vérben. Ez hozzájárul a gyógyuláshoz és a vírusellenes terápia hatékonyságához.

A hepatitis C elemzés típusai

A polidizált láncreakció (PCR) a DNS-részecskék mennyiségét mutatja be a páciens elemzésében, és helyesen azonosítja a fertőzés kórokozóját.

A fertőző ágensek megnyilvánulhatnak. Az ilyen fertőző májbetegség, mint a hepatitis C, manapság, gyógyítható, ha időben észlelhető. Ha vírus gyanúja merül fel, PCR elemzést végeznek.

Míg a vírus tünetei hosszú ideig maszkolhatók, a beteg nem érezheti a betegség lefolyását. De az esetek 60-70% -ában történő alapos vizsgálata során a hepatitis C-t detektálják, amely elsődleges elemzés az ELISA, majd a PCR diagnózis. Az elemzést bizonyos időszakokban végezzük, hogy meghatározzuk a betegség állapotát és előírjuk a megfelelő kezelést. Ne tegye nélkül, anélkül, hogy ezeket az eljárásokat, akkor lehet, oltás a hepatitis.

Minőségi és mennyiségi elemzés

Vannak minőségi és kvantitatív elemzések. Az első lényege, hogy meghatározza a fertőzés jelenlétét a vérben. És ez azt jelenti, hogy a vírus egészséges májsejtekre hat. Ha a betegnek a hepatitis C elleni antitestjei vannak, azonnal minőségi vizsgálatot végeznek. Az eredmény, amelyet az eredménynek kell előállítania, "nem észlelhető a vérben". A vírus koncentrációjának meghatározásakor szükség van a diagnosztikai rendszer érzékenységének ismeretére, mivel az elemzést antivirális terápiában részesülő személyek végezhetik. Az analizátor érzékenysége nem lehet kisebb, mint 50 NE / ml.

Vírus kimutatásakor kvantitatív elemzést végzünk, vagyis egy vírus terhelést, amely meghatározza a vírus koncentrációját a vérben és a betegség súlyosságát.

A vírusos RNS, amely bizonyos mennyiségű vérben van, az 1 ml köbméterenkénti 1 ml-es normává. A vírusterhelés számszerűsítése után meg lehet ítélni a fertőzött környezet fertőzésének mértékét. Amint a hepatitis C koncentrációja emelkedik a vérben, a környezetet el kell különíteni.

Fontos, hogy az első szakaszokban a hepatitisz-koncentráció mértékét felismerjék a rehabilitáció ütemének meghatározása érdekében. Ha a Hepatitis C arányt meghaladja több mint 800 ezer IU / ml, akkor túl magasnak tekintjük, és ez egy milliós növekedésnek felel meg. Ha a mennyiségi tartomány kevesebb, mint 400 ezer IU / ml, akkor úgy tekintjük, hogy a többi szennyeződés kevésbé valószínű. Ez a szám világossá teszi, hogy a hepatitis C a szervezetben nagyon kis dózisokban van jelen. Az elemzés nem tudta meghatározni a vírusrészecskék RNS mennyiségének értékét, ezért a diagnózis pontosságát többször is átrendezte.

A kvantitatív elemzés eredményei

A vírusterhelés mennyiségének meghatározása a páciens vérében a fertőzés mértékének meghatározása mások számára.

PCR-elemzés eredményei:

  1. A pozitív válasz azt jelenti, hogy fertőzés van a biológiai anyagban. Elemzéssel meghatározhatja a fertőzött sejtek pontos számát.
  2. A negatív válasz a fertőzés hiányát jelzi, amelyet alaposan átkutattak a szervezetben.

A hepatitis C mennyiségi módszere pontos és informatív, magas érzékenységű berendezéseken. Az elemzés eredményeinek megfejtése lehetővé teszi, hogy megtudja, van-e fertőzés és annak specifikussága, hogy a fertőzött sejtek legkisebb számát a nagy érzékenységű analizátorokon látják.

Az elemzés hamis pozitív vagy ellentétes eredményei ritkán adódnak, gyakrabban történik immunoassay vizsgálatokban.

A hepatitis C PCR minőségi elemzése

A hepatitis egy súlyos betegség, amelynek számos oka van a kezdetnek. A fejlődés középpontjában a máj közvetlen vagy közvetett károsodása okoz. Tekintve annak fontosságát az egész szervezetre, csak azt lehet kitalálni, milyen rossz a patológia. Ebben a cikkben részletesebben tárgyaljuk a kurzus jellemzőit és a hepatitis C laboratóriumi diagnosztikáját.

A betegség oka egy vírus, amely RNS-tartalmú kórokozókra utal. Megkülönböztető jellemzője - a mutáció képessége, vagyis szerkezetének megváltoztatása. Emiatt a fertőzés elszökik az immunrendszer támadását, és a legtöbb esetben krónikus gyulladást okoz a májban.

Figyelembe véve a vírus különböző altípusainak létezését, a gyógyszerek kiválasztását a genotipizálás eredményeinek figyelembevételével kell elvégezni. Annak ellenére, hogy hosszú ideig tartó vizsgálatot folytattak a betegségről és a HCV felépítésének sajátosságairól, nem volt lehetséges a vakcina elleni vakcina kifejlesztése.

A korai diagnózis nehézségei a májgyulladás tünetmentes lefolyásának következményei, melynek következtében egy személy a cirrhosis szakaszában orvoshoz fordul. A betegség időben történő kimutatásához rendszeres fizikai vizsgálatokra van szükség. Csak a vér laboratóriumi vizsgálata képes azonosítani a HCV-t és megelőzni mások fertőzését. Az a tény, hogy a fertőzés hordozója sokáig nem tudja a patológiát, és tovább továbbítja a vírust az egészséges embereknek.

Átviteli útvonalak

A vírus a legtöbb esetben a véren terjed, mivel a kórokozók legnagyobb koncentrációját tartalmazza. Így a fertőzést továbbítják:

  • hemodialízissel;
  • tűzéssel;
  • a harc során, amikor a bőr sérült, és hemokontakt fordul elő;
  • vérátömlesztéssel (vérátömlesztés).

Az intim intimitás okozta fertőzés valószínűsége jelentéktelen, mivel a sperma és a hüvelyi elváltozás kis számú kórokozót tartalmaz. A fertőzés kockázata jelentősen megnő, ha a genitális nyálkahártya integritása veszélybe kerül. Ezt agresszív és anális szexekkel figyelik meg.

Ami a fertőzés átvitelének vertikális módját illeti, az a munka során történik. A terhesség idejében a kórokozó nem tud átjutni a méhlepénybe az embrióba. Természetes rendellenességek esetén a patogén ágens a bõr traumájába kerül, amikor az anya vérével való érintkezést észlelik.

Miután a kórokozó egészséges szervezetbe került, az ellenanyagok szintézise megkezdődik, amelyek védelmet nyújtanak a fertőzés ellen és az immunrendszerhez tartoznak. Ezek megtalálhatók az ELISA segítségével egy személy kezdeti vizsgálatakor.

A diagnózis megerõsítéséhez a páciens polimeráz láncreakciót végez. Ez egy elemzés egy patogén ágens genetikai anyagának azonosítására és a vírusterhelés meghatározására.

A hepatitis C laboratóriumi diagnózisa

A laboratóriumi diagnosztika enzim immunvizsgálattal kezdődik. Fő feladata a kórokozóval szemben előállított antitestek kimutatása. Hatékonysága majdnem 95%. A preklinikai szakaszban végzett kutatásnak köszönhetően a vírus hordozó azonosítása lehetséges, és további vizsgálat céljából elküldi.

Az ELISA minőségi analízise azt jelzi, hogy az immunglobulinok jelen vannak vagy hiányoznak a páciens vérében. Eredménye lehet "pozitív" vagy "negatív". Miután megkapta a válasz első változatát, a személy eljut a következő vizsgálathoz - PCR. Az ára függ a reagensek és a laboratóriumok minőségétől. A polimeráz láncreakció költsége elérheti a 4000 rubelt.

A PCR jellemzői

A polimeráz láncreakcióval még kis mennyiségű biológiai anyag lehetővé teszi a vírusterhelés becslését a vérben, azaz a kórokozók koncentrációját egy milliliter folyadékban.

A PCR megjelenésével a hepatitis diagnózisa sokkal egyszerűbb volt. Az elemzés lehetővé teszi a HCV RNS azonosítását, a fertőző folyamat színvonalának és a vírus hordozó fertőzőképességének megállapítására.

Számos genetikai diagnózis létezik:

  1. a hepatitis C-re vonatkozó PCR minőségi elemzése - megerősíti a HCV jelenlétét vagy hiányát a vizsgázó vérében:
  2. mennyiségi, amellyel lehetővé válik a vírusok koncentrációjának kiszámítása és a betegség színpadának megállapítása. Az eredményt IU / ml-ben vagy másolatokban / ml-ben adják (a laboratóriumból);
  3. genotipizálás szükséges a HCV genotípusának meghatározásához. Ehhez a kábítószerek pontos kiválasztásához van szükség, amelyek ebben az esetben a leghatékonyabbak. Az elemzés közvetetten jelzi a kóros folyamat súlyosságát a májban. Tehát a kórokozó harmadik genotípusával leggyakrabban megfigyelhető a steatosis, amelynek fejlődése a zsír felhalmozódása a hepatocytákban (sejtjeiben). Ezenkívül a vírus típusa befolyásolja a terápiás kezelés eredményét és időtartamát.

A hepatitis C PCR minőségi elemzése

A laboratórium első lépése a biológiai anyag HCV RNS jelenlétének tanulmányozása. Fontos megjegyezni, hogy a hepatitis C minőségi elemzésének bizonyos szintű érzékenysége van, ezért nem mindig adhatja meg a helyes választ. Ebben az esetben ajánlott ismételt laboratóriumi diagnózist végezni más reagensek alkalmazásával.

A megbízható eredmények eléréséhez legalább 50 IU / ml érzékenységű vizsgálati rendszert kell használni.

A diagnózis eredménye lehet "pozitív" vagy "negatív". Ha a patogén nem található a vérben, a vizsgálat véget ér. Amikor egy patogén ágenst detektálunk a mintában, akkor a vírus terhelés kvantitatív számát végezzük.

A hamis negatív válasz akkor érhető el, amikor a technológiai folyamat megzavarodik, például olyan aktív összetevők, amelyek elnyomják a kórokozó másolatainak kialakítását a környezetbe. Így nem lehet megjeleníteni a vér igaz képet, amely miatt nem diagnosztizálják az emberi fertőzést.

Hamis pozitív eredményt lehet elérni, ha a biológiai anyag gyűjtőcsöve, valamint a vizsgálat környezete szennyezett. Ezen túlmenően, egy ilyen elemzésre adott válasz lehetséges vegyes fertőzéssel, amikor a májat több vírus, például hepatitis C és D is befolyásolja.

A minőségi kutatásra utaló jelek

Az orvos kvalitatív vizsgálatot rendelhet a páciensnek a hepatitis C vírus RNS kimutatásához:

  • amikor az enzim immunoassay pozitív vagy megkérdőjelezhető választ kap;
  • a diagnózis ellenőrzéséhez;
  • a vírusterhelés meghatározása;
  • a betegség színpadának felállítása;
  • vegyes fertőzés diagnózisát. Gyakran előfordul, hogy a hepatitis C a májat a "D" vírussal egyidejűleg érinti;
  • a terápiás taktika meghatározása, figyelembe véve a kórokozó genotípusát;
  • a változások dinamikájának értékelése az antivirális gyógyszerek kezelésének hátterében.

A polimeráz láncreakció előnyei közé tartoznak a következők:

  1. a technika magas érzékenysége, amely lehetővé teszi a fertőzés tényét a preklinikai szakaszban;
  2. a kórokozó genetikai anyagának azonosítása, nem pedig antitestek;
  3. a kórokozó-ágens altípusának létrehozása;
  4. a nagy sebességű diagnosztika, mivel nem szükséges anyagot táplálékközegre vírni, de elegendő egyedi vizsgálati rendszereket használni. Egy személy 5 óra elteltével kap eredményt;
  5. sokoldalúságát. Az elemzés lehetővé teszi bármely genetikai anyag (RNS, DNS) azonosítását. Ennek következtében az orvos megerősítheti a hepatitis C-t és más típusú betegségeket (B);
  6. a látens fertőzés észlelésének a lehetősége.

Kvantitatív kutatás

A polimeráz láncreakcióval végzett vérvizsgálat során kórokozók számát lehet kiszámolni egy fix mennyiségű biológiai anyagban. A mutató IU / ml. Az elemzésnek köszönhetően meg lehet állapítani a beteg fertőzőképességének mértékét, meghatározni a fertőző folyamat stádiumát, valamint értékelni a gyógyszerterápia hatékonyságát.

A PCR alapján a szakértő eldönti, hogy mely gyógyszerek dózisa képes blokkolni a kórokozók terjedését. Ezenkívül meghatározzák az antivirális kezelés időtartamát és az életre vonatkozó prognózist. Fontos megjegyezni, hogy a vizsgálati rendszerek nagyon érzékenyek, ezért a módszer lehetővé teszi az emberi fertőzés megerősítését még a preklinikai szakaszban is.

genotipizáláshoz

Tekintettel arra, hogy a kórokozó képes mutálni, meghatározni a kezelés taktikáját és az antivirális gyógyszerek kiválasztását, genotípusa szükséges. Például a hepatitis HCV 1 kezelése 48 hétig tart, pozitív trendként csak az esetek 60% -ában figyelhető meg. A 2. és 3. genotípus kedvezőbb prognózissal rendelkezik. A vírusellenes szereket 8 hónapig írják fel, és hatékonyságuk elérheti a 85% -ot.

Statisztikai adatok szerint a legtöbb esetben az 1., 2. és 3. HCV az Orosz Föderáció területén található.

Egy laboratóriumi vizsgálat megfejtésekor ilyen válasz jelezhető: "nincs beírva". Ez azt jelenti, hogy egy vírus kering a beteg keringési rendszerében, amelyet a tesztrendszer nem ismeri fel. Az elemzés eredménye ebben az esetben azt jelzi, hogy az atipikus ember fertőzést okoz a kórokozó adott földrajzi területére.

Hogyan lehet megbízható eredményeket elérni?

A PCR-nek a hepatitis C kórokozójának RNS-ének kimutatására szolgáló kvalitatív vizsgálata megfelelő eredményeket mutatott, ezért meg kell felelnie a laboratóriumi diagnosztika előkészítésének követelményeinek:

  1. a vérmintavétel üres gyomorban történik, és az "éhes" rés nem lehet rövidebb 8 óránál;
  2. két nappal a vizsgálat előtt ajánlott az alkoholfogyasztás abbahagyása és az éles, zsíros és füstölt ételek elutasítása;
  3. töröljék el a véralvadásgátló gyógyszereket, például a heparint. Ha ezeket a gyógyszereket életciklus miatt írják fel, erről értesítenie kell az orvost. Ezenkívül a szakorvosnak ismernie kell olyan egyéb gyógyszerek befogadását, amelyek befolyásolhatják a laboratóriumi vizsgálat eredményét;
  4. A biológiai anyaggyűjtés előestéjén a fizioterápiás eljárásokat nem szabad elvégezni, és nehéz fizikai terhelésnek kell alávetni.

Az elemzés eredményeit nem csak a vér adományozója, hanem egyéb tényezők is befolyásolhatják:

  • rossz vérgyűjtés;
  • a biológiai anyagok szállítására vonatkozó ajánlások be nem tartása;
  • a laboratóriumi dolgozók nem megfelelő képzése;
  • a kutatási technikák figyelmen kívül hagyása;
  • a véralvadás előtti antikoagulánsok (heparin) bevezetése. Ez a gyógyszercsoport csökkenti a koagulálhatóságot, ezáltal lelassítja a reagensek munkáját.

A különböző laboratóriumokban a diagnosztikai válasz némileg eltérő lehet, de ezek a hibák nem befolyásolják a vizsgálat végeredményét.

Különös figyelmet fordítanak a laboratóriumi vizsgálati rendszerek típusaira. Gyakran előnyös a nagy érzékenységű reagensek alkalmazása. Ez fontos az alacsony virális terhelésű betegeknél, mivel nehéz észlelni.

Milyen gyakran végez laboratóriumi vizsgálatot?

Elsősorban a polimeráz láncreakciót végezzük olyan személyeknél, akik immunválaszt követően ellenőrizték a hepatitis vírus ellenanyagait. Ebben az esetben kijelölték, hogy megerősítik egy személy fertőzésének tényét és megállapítja a betegség színpadát. Ezenkívül az elemzés lehetővé teszi a vírus altípusának meghatározását, ami különösen fontos a gyógyszerek kiválasztásához.

A kötelező laboratóriumi vizsgálatok következő periódusa a vírusellenes terápia megkezdésétől számított 3 hónap. A diagnózis lehetőséget nyújt a gyógyszerek hatékonyságának értékelésére, az adag módosítására vagy cseréjére.

Az alapvető analízisek mellett PCR is végezhető a kezelés kezdetétől számított 4 és 24 héten belül. A betegség pozitív prognózisát a vírusterhelés 3 hónapos terápiás kezelés utáni csökkenése igazolja. Így például 1 millió NE / ml-ről több százezerre kell csökkennie.

Ha a patogén ágensek koncentrációja a vérben ugyanakkora szinten marad, vagy enyhén emelkedik, ez jelzi a vírusellenes szerek hatástalanságát és helyettesíti őket. A kezelés végén a PCR segítségével megerősíthetjük a beteg helyreállítását.

A laboratóriumi diagnózis eredményeinek helyes értelmezéséhez egy hepatológus vagy fertőző betegség specialistával kell konzultálni. Mivel az ELISA-val kapcsolatos téves válaszok nagy gyakorisággal fordulnak elő, az elemzést kizárólag az elsődleges szűréshez használják. A beteg alaposabb vizsgálatához polimeráz láncreakciót alkalmaznak.

Hogyan lehet visszaszerezni a hepatitis C-ből 97% -os valószínűséggel?

Ma, a modern gyógyszerek és az új generációs sofosbuvir Daklatasvir a 97-100% valószínűséggel örökre fog gyógyítani hepatitis C. A legújabb gyógyszeres kapható orosz a hivatalos képviselője az indiai farmgiganta ZYDUS Heptiza. A megrendelt termékeket a futár a kézhezvételt követő 4 napon belül kézbesíti. Ingyenes konzultáció a modern drogok használatáról, valamint a vásárlás módjáról a Zydus beszállítójának hivatalos honlapján, Oroszországban.

PCR-vizsgálat a hepatitis C-re: típusok, indikációk, átirat

A vírusos hepatitis C súlyos betegség, amely májkárosodással jár. A betegek nyolcvan százalékában krónikus formában jár. A vírus szaporodik a májsejtekben - májsejtekben - és halálát okozza. A halott szövetet kötőszöveti foci váltja fel, a fibrózis kialakul.

A fejlesztés a máj fibrózis képtelen ellátni a funkcióját, kezdődik cirrhosis, ami veszélyes szövődményei: egyre nagyobb nyomás nehezedik a kapuvénában, gyomor-bélrendszeri vérzés, károsodott véralvadás mentális változások miatt kárt agyi magok mérgező termékeket.

A betegség oka a Flaviviridae családból származó vírusfertőzés, amely RNS-vírus egy típusa. Ez azt jelenti, hogy a genetikai anyag, amellyel a patogén fehérjéit szintetizálják, egy ribonukleinsav molekulában kódoljuk. A fertőzés a vérben, szexuális úton történik, és terhes nőtől a magzatig. Sajnos a fertőzés és az antitestek termelésének kezdete meglehetősen nagy mennyiségű időtartamot eredményezhet - két hétről hat hónapra. Ez nem teszi lehetővé a fertőzés meghatározását az enzim immunvizsgálat módszerével és a kezdeti kezelést a korai stádiumban.

Mi a PCR elemzés?

A PCR molekuláris analízis olyan módszere, amely lehetővé teszi a kórokozó genetikai anyagának kimutatását a fertőzés utáni első héten polimeráz láncreakcióval. A tanulmány nagyfokú specifitást, pontosságot és nem csak a vírus jelenlétének vagy hiányának meghatározását, hanem koncentrációját és genotípusát is meghatározza.

A vizsgálat elvégzéséhez vegye be a páciens vérét, amelyben potenciálisan megtalálható a vírus RNS-je. A vérben a primereket hozzáadjuk mesterségesen szintetizált részecskékhez, a kívánt gén kis hossza, és az RNS polimeráz egy speciális enzim, amely sokszorozza a kórokozó genetikai anyagának mennyiségét. Egy speciális berendezés segítségével több fűtési és hűtési ciklust hajtanak végre. Az anyagot ezután elemezzük és összehasonlítjuk az ismert vírusgénekkel, amelyek alapján következtetés születik a fertőzés jelenlétéről vagy hiányáról.

A hepatitis C PCR analízis típusai

A PCR-elemzés három típusa létezik:

  1. Minõségi PCR analízis. A tanulmány első szakasza. Lehetővé teszi a vírus genetikai anyagának azonosítását a vérben.

  • PCR mennyiségi elemzése. Lehetővé teszi a vírus terhelésének meghatározását - a patogén genetikai anyagának koncentrációját egy milliliter vérben. Ezt a vizsgálatot a terápia megkezdése előtt végezzük, majd az első, negyedik, tizenkettedik és (ha a tanfolyam hosszú) a kezelés huszonnegyedik hete annak hatékonyságának értékelésére.

  • genotipizáláshoz. A hepatitis C kórokozója gyakran és gyorsan mutál. A bolygón a vírus genotípusának hét variánsát találtam. Oroszországban az első, a második és a harmadik típus gyakori. A genotípusok mindegyike eltérő terápiás ellenállással rendelkezik, például az első típusú kezelés hatékonysága hatvan százalék, a második és a harmadik pedig nyolcvanöt. Ezért megfelelő gyógyszerek kiválasztása és megfelelő időtartamú kezelési eljárás meghatározása érdekében pontosan meg kell határozni, hogy a beteg milyen típusú vírussal fertőzött.
  • Javallatok a hepatitis C PCR analízishez

    PCR-vizsgálatot írnak elő a következő esetekben:

    • érintkezés egy beteg emberrel, ami fertőzéshez vezethet;
    • pozitív enzimkapcsolt immunvizsgálat;
    • a májcirrózis jelei: a májméret megváltozása, a megnagyobbodott lép, a szubkután vénás plexus megjelenése a hasra;
    • a májkárosodás tüneteinek megjelenése: fájdalom a hasüreg jobb oldalán, a bőr sárgulása;
    • az ALT és az AST fokozott aktivitása a biokémiai vérvizsgálatban;
    • a kezelés megkezdése előtt a vírusterhelés meghatározására;
    • az antivirális terápia hatékonyságának monitorozása;
    • a kezelés befejezése után a relapszus nyomon követése;
    • a diagnosztizált hepatitisz B jelenlétében, kizárva a vegyes májkárosodást.

    A hepatitis C PCR-vizsgálat dekódolása

    A hepatitis C-re vonatkozó PCR-analízis és enzim immunvizsgálat dekódolását egy hepatológus vagy fertőző betegség szakembernek kell foglalkoznia. A PCR eredményeinek elemzése biokémiai vérvizsgálattal, biopsziával és ultrahanggal kombinálva szükséges. Csak szakképzett orvos képes lesz elemezni a vizsgálatok eredményeit, és ezek alapján meghatározza a megfelelő kezelést.

    Minőségi elemzés dekódolása.

    A kórokozó genetikai anyagát az elemzett biológiai anyag tartalmazza. A fertőzés megerősítést nyert.

    Nincs fertőzés, vagy a patogén RNS mennyisége az érzékenységi határ alatt van.

    Kvantitatív elemzés dekódolása.

    Egészséges emberek számára normális szám. Ez azt jelenti, hogy nincs a hepatitis C RNS a vizsgálati anyagban, vagy koncentrációja a vizsgálat érzékenységi küszöb alatt van.

    Az RNS koncentrációja a mennyiségi tartomány alatt van. Az ilyen eredményeket nagyon óvatosan értelmezik, korrelálják más tanulmányok adataival, gyakran végeznek egy második vizsgálatot.

    A vírusterhelés szintje egy adott koncentrációban alacsony. Általában a vírus mennyiségének csökkenése azt jelenti, hogy a kezelés sikeres.

    Több mint 8 * 10 ^ 5 NE / ml

    A vírusterhelés szintje egy adott koncentrációban magasnak tekinthető.

    Több mint 2,4 * 10 ^ 7 NE / ml

    Az RNS mennyisége meghaladja a számszerűsítés tartományának felső határát. Lehetséges következtetéseket levonni a vírusterhelés mértéke miatt. Általában ilyen esetekben a tesztet megismétlik a vérminta hígításával.

    A genotipizálás dekódolása.

    Egy adott genotípus RNS-ét detektáltuk

    A biomateriában a hepatitisz C vírust kimutatják egy adott genotípus és altípus. Az eredmény latin számokkal és latin betűkkel van kódolva, például - 1a, 2b. Jelenleg hét genotípus és hatvanhét altípus van, de Oroszországban csak három első típus van.

    Hepatitis C vírus RNS-t detektáltunk

    A vérben az RNS egy ritka genotípust talál Oroszország számára, amely nem tulajdonítható az első, második vagy harmadik típusnak. Több kutatásra van szükség.

    Ez az eredmény azt jelzi, hogy a beteg egészséges vagy a kórokozó RNS szintje túl kicsi.

    Lehetséges a helyzet, ha a hepatitis C PCR-analízise negatív, és az enzim immunvizsgálat kimutatja a vírus ellenes antitesteket. Ez azt jelenti, hogy a beteg acut formában hepatitis C-t kapott és meggyógyult. Körülbelül húsz fertőzés esedékessé teszi a spontán gyógyulást, ha a páciens testének elegendő rezisztenciája van a fertőzésre.

    Annak ellenére, hogy a PCR nagyon pontos elemzés, annak eredménye az alábbi esetekben torzulhat:

    • a vért nem megfelelő körülmények között a laboratóriumba szállították, a hőmérsékleti rendszert megsértették;
    • a bioméret mintája szennyezett;
    • a vérben maradt nyomokban a heparin és más antikoagulánsok;
    • A vizsgált anyagban gátlók voltak - olyan anyagok, amelyek lassítják vagy leállítják a polimeráz láncreakciót.

    A PCR előnyei más módszerekkel szemben

    1. Diagnózis a korai szakaszban. A PCR detektálja a betegség kórokozójának genetikai anyagát. Az immunfluoreszcencia analízis segítségével csak immunglobulinokat lehet meghatározni, amelyeket a szervezet a fertőzésre adott válaszként termel. Hepatitis C fertőzés esetén a fertőzés és az immunválasz kialakulása között eltelt idő több hét és hónap lehet, mely időpontban az ELISA hatástalanná válik. A PCR már a fertőzés utáni első héten ad választ.

  • Alacsony hibalehetőség. A vizsgált anyagban meghatározzuk a genetikai anyagot, amely csak egyfajta kórokozóra jellemző. Ez lehetővé teszi a hamis eredmények kizárását. Az ELISA-val hibák léphetnek fel, mivel ugyanazok az antitestek felszabadulhatnak különböző vírusok ellen - ilyen antitesteket keresztreaktivitásnak neveznek.

  • Nagy érzékenység. A PCR a minimális mennyiségben is képes kimutatni a patogén RNS-ét. Ez lehetővé teszi a rejtett fertőzések azonosítását.
  • Hogyan készítsünk elő vérrátadást PCR kutatásra

    PCR analízis esetén a vénás vért gyűjtjük a hepatitis C-re. Általában két adag vért veszünk egyszerre a páciens vénájából: az első PCR-hez, a második az ELISA-hoz. Ez azért van így, hogy pontosabban felmérjük, mennyire rossz a páciensnek a vírussal fertőzött, és hogyan védekezik az immunitás.

    Általában az alábbi szabályok szükségesek a beteg számára:

    • reggel vérvizsgálatot végeznek;
    • az utolsó étkezés és a vérszállítás közötti szünetnek nyolc-tíz óra;
    • két vagy három nappal az elemzés előtt meg kell adni sült és zsíros ételeket, valamint alkoholt;
    • az elemzést megelőzően huszonnégy órával a betegnek kerülnie kell a fizikai erőfeszítést: ne hordjon súlyokat, ne vegyen részt edzőteremben vagy medencében.

    Kapcsolódó Cikkek Hepatitis