A hepatitisz C-re vonatkozó PCR elemzése

Share Tweet Pin it

A hepatitis diagnosztizálása magában foglal egy egész vizsgálati komplexet, amely meghatározza a vírus jelenlétét a vérben. A betegség kimutatásának egyik módja a hepatitis C-hez hasonló PCR-módszer alkalmazása. Mi ez az oka, miért fontos a hepatitis PCR-elemzése, hogyan történik és dekódolja?

Mi ez?

A polimeráz láncreakciót vagy a PCR-t gyomorfekély, vastagbélgyulladás, bélgyulladás diagnosztizálására használják. De a fő előnye, hogy segít a szervezetnek, hogy észleli a vírus maga a C hepatitis, és antitesteket is, amelyek képesek nem okoz reakciót az immunrendszer azon képessége miatt, hogy mutálódik.

A vizsgálat és annak lényege, hogy bizonyos feltételeket teremt, amelyek során a hepatitis RNS láncreakció lép fel. Ha a hepatitis C vírus nukleotidszekvenciájához viszonyítva véletlen egybeesést észlel, ez azt jelzi, hogy vannak vírusos részecskék a vérben, és a bomlás a májban történik. Ha a vírus mennyisége egy bizonyos szint alá esik, negatív diagnózis történik, ha magasabb - pozitív.

A hepatitis PCR-módszerrel kétféle vérvizsgálat létezik: mennyiségi elemzés és minőségi elemzés.

A mennyiségi PCR, ahogy fent említettük, meghatározza a hepatitis vírus RNS-koncentrációját. Ezenkívül képes információt szolgáltatni arról, hogy milyen intenzitású a patológia és az előírt kezelés hatékonysága. A hepatitis C mennyiségi elemzése rendkívül fontos, mivel ellenáll az antivirális hatóanyagok hatásának, és lehetővé teszi a terápia módosítását.

Miután a páciens egy kezelésen átment, a PCR segít meghatározni a receptek további sorrendjét. Bizonyos esetekben további felmérésekre van szükség. Például, ha a szint az ALP emelkedett (de nem több, mint 2-szer hat hónapon belül), és elemzése transzkriptum kifejezés egy vírusterhelés feletti 105 NE / ml, a beteg van rendelve biopszia. Ha a PCR mennyiségi analízise erős gyulladást és fibrózist mutat, akkor a pácienst vírusellenes gyógyszerek kezelésére írják fel.

Olyan esetekben, amikor nagyszámú vírusrészecskét kombinálnak magas ALT-értékkel, a beteget azonnal további diagnosztikai intézkedések nélkül kell kezelni.

Vegye ezt a tesztet, és megtudja, ha májproblémái vannak.

A hepatitis vérének mennyiségi elemzésére szolgáló mutatók minőségi értelmezése csak képzett és tapasztalt szakember lehet, és a modern technológia segít a vírus alacsony koncentrációjában a vérben.

A kvalitatív PCR-analízis célja a vírus tényleges jelenlétének meghatározása és megerősítése a szervezetben. Ez a vér hepatitis elleni antitestek kimutatásával történik. Ez egy minőségi teszt hepatitis garantálja a pontosságát az eredmény 100% -kal, és lehetővé teszi, hogy diagnosztizálni a korai szakaszában a betegség, ami lehetővé teszi, hogy a harcot a hepatitis B az első héttel a fertőzés után, és növeli annak az esélyét, teljes gyógyulás (abban az esetben, B típusú betegség).

A PCR előnyei

A PCR-módszer vizsgálata és a hepatitis vérvizsgálatának megfejtése érdekében lehetőség van a betegség kórokozójának genotípusának meghatározására is. A vírus 6 genotípusa és számos altípusa létezik, de a régióban az 1, 2 és 3 genotípus eloszlása.

Az ilyen típusú diagnózis további előnyei:

  • A vett indikátorok nagy pontossága és alacsony a hibák valószínűsége;
  • magas a vírus részecskékre való érzékenysége a vérben;
  • több kórokozó kimutatásának lehetősége;
  • a magas antigén variabilitású patogén intracelluláris mikroorganizmusok diagnosztikája;
  • a hepatitisz analízisének dekódolásával végzett munka lehetővé teszi a látens áramfertőzések felfedezését.

Kinek nevezzen

A hepatitiszre vonatkozó PCR-vizsgálat szükségszerűen a következő embercsoportokat veszi figyelembe:

  • terhes nők;
  • az egészségügyi intézmények alkalmazottai;
  • a vér és a szervek lehetséges adományozói;
  • azok, akiknek a betegség jellegzetes jelei vannak;
  • HIV-fertőzöttek;
  • drogfüggők;
  • a szexuális életet átélt személyek.

Hogyan történik az elemzés és a képzés szükséges?

Vérvételezést végzünk a vénából. Jellemző, hogy ez előtti reggel előfordul, mielőtt az ember evett, mert az étkezés után legalább 8 órát kell eltelnie. Szélsőséges esetekben nap vagy esti vérvizsgálat végezhető, de az analízis és az élelmiszerfelvétel között eltelt idő legalább 5 óra.

Az emberi tényezõ mennyiségi hatást fejthet ki az eredményekben: pontosságuk egyes esetekben 100% -ról 95% -ra csökken, ezért elõkészíteni kell a vér elõállítását. Az analitikai bioméret minősége megfelelő, ha a beteg az alábbi szabályokat követi:

  • Mielőtt vért adna, csak tiszta vizet inni;
  • két nappal a vizsgálat előtt el kell utasítani a sült és zsíros élelmiszerek bevitelét, valamint az alkoholtartalmú italokat;
  • egy nappal a laboratóriumi látogatás előtt hagyja abba a gyógyszeres kezelést. Abban az esetben, ha ez nem lehetséges, feltétlenül figyelmeztetni kell a laboratóriumi asszisztenst és a kezelőorvost;
  • a stresszes helyzetek és a fizikai erőfeszítések előestéjén;
  • Ne végezzünk ultrahangot, radiológiát és instrumentális vizsgálatokat röviddel a véradás előtt;
  • egy órával az elemzés előtt tartózkodnia kell a dohányzástól;
  • 20 perccel a vér szállítása előtt meg kell zavarni, nyugtatni és még lélegezni.

Ha a vizsgálatot egy 5 évesnél fiatalabb gyermek végzi, a szülőknek gondoskodniuk kell arról, hogy a bioméret mintavétele előtt fél órával 10 percenként inni is forralt vizet.

A kapott adatok magyarázata

Az elemzés szöveges formában (kvalitatív kutatás esetén), például "nem található" vagy "a változtatások alatti" lehet. Az első esetben ez azt jelzi, hogy a fertőzést nem észlelték. A második -, hogy a vírus jelen van, de kis mennyiségben. Ez a helyzet újbóli vizsgálatot igényel.

A vírusterhelést a fertőző RNS mennyisége határozza meg, és ME / ml-nek vagy másolatoknak felel meg.

A hepatitis C mennyiségi analízisének normál indikátora (normája) a 1,8x102 és 2,4x107 NE / ml tartományba esik.

A vírus koncentrációja a vérben lehet:

  • alacsony: 600 NE / ml-ről 3x104 / ml-re;
  • átlag: 3 óra 4 NE / ml-től 8 óráig 5 NE / ml;
  • magas: több mint 8 óra 10 NE / ml.

A hepatitis PCR mennyiségi és minőségi elemzése lehetővé teszi a vírus jelenlétének meghatározását a testben és koncentrációjának szintjét. A polidizált láncreakció korai stádiumban képes diagnosztizálni a betegséget, de ehhez szükség van arra, hogy a betegek a lehető leghamarabb forduljanak orvoshoz segítségért és szigorúan kövessék a kezelőorvos ajánlásait.

Hogyan történik a PCR elemzés: eljárás leírása

A polimeráz láncreakció már 30 éve ismert. Sok területen széles körben használják, a régészetektől a genetikáig.

Ez az a PCR módszer, amely segít az apaság megállapításában, de leggyakrabban az emberi szervezet különböző fertőző betegségeinek azonosítására szolgál.

Hogyan történik a PCR elemzés, és mi az? Megpróbálunk részletesen megválaszolni ezeket a kérdéseket.

PCR elemzés - mi ez?

Polimeráz láncreakció (PCR) - precíziós molekuláris genetikai diagnózis, amely lehetővé teszi egy személy azonosítására különböző fertőző és örökletes betegségek, akut és krónikus szakaszában és jól, mielőtt a betegség megnyilvánulhat.

A PCR módszer teljesen specifikus, és helyesen hajtja végre a hamis pozitív eredményt. Vagyis, ha nincs fertőzés, az elemzés soha nem fogja megmutatni, hogy ez az. Ezért most nagyon gyakran a diagnózis kimutatására a PTSR analízis továbbadja a kezdeményező és annak természetét.

A polimeráz láncreakciót (PCR) 1983-ban Cary Muillis (USA) fejlesztette ki, amelyhez 1993-ban elnyerte a kémiai Nobel-díjat.

Mi a módszer előnye?

A módszerrel végzett diagnózis lehetővé teszi a kórokozó közvetlen megtalálását a génben, amelyet a vizsgált anyagok tartalmaznak. Ez a legpontosabb elemzés a szexuális fertőzésekre, rejtett fertőzésekre, különböző szexuális úton terjedő betegségekre.

A PCR-diagnosztika eltérései a laboratóriumi kutatás más módszereitől a következők:

  • a módszer célja a kórokozó felismerése;
  • a PCR módszerrel végzett diagnózis sokoldalú: a kórokozók felismerése több;
  • csak egy beteg biológiai mintája elegendő;
  • a módszer nagy érzékenységgel rendelkezik, és nincs más keresztreakció.

Emellett a PCR-diagnosztika előnye, hogy a páciens bármely biológiai anyaga alkalmas a vérben, a nemi szervekből, a vizeletből, a spermából származó váladékokból.

Milyen fertőzések képesek kimutatni a PCR kenetét?

A szervezetben számos fertőzés kórokozója lehet, ez magában foglalja a "rejtett", amely hosszú időn keresztül nem jelentkezik semmilyen módon.

A PCR kimutatásának vizsgálata ilyen fertőzésekre utal:

A PCR tesztanyaga általában köpet, nyál, vizelet, vér. Az elemzés előtt gondosan fel kell készülnie rá, miután előzetes konzultációt kapott az orvosával.

A PCR vérét általában üres gyomorban adják. Jó eredmények mutatják az elemzést, amikor a vizsgálat anyagát a cervicalis csatornából vagy a húgycsőből vettük. Ebben az esetben a PCR diagnosztikát legkésőbb egy nappal a nemi közösülés után kell elvégezni.

A PCR típusai

A PCR-t számos területen használják elemzéshez és tudományos kísérletekhez. Számos elemzési módszer létezik:

  1. Fordított transzkripciós PCR (RT-PCR) - ismert RNS-könyvtárból származó ismert szekvencia amplifikálására, izolálására vagy azonosítására használják.
  2. Invertált PCR (Inverse PCR (angol)) - akkor használatos, ha csak egy kis terület található a kívánt sorrendben. Ez a módszer különösen akkor hasznos, amikor szükséges a szomszédos szekvenciák meghatározása a DNS genomba helyezését követően.
  3. A beágyazott PCR (Nested PCR (English)) - a melléktermékek számának csökkentésére szolgál. Két pár láncindítót használunk, és két egymást követő reakciót hajtunk végre.
  4. Az aszimmetrikus PCR-t (angol aszimmetrikus PCR) végezzük, amikor szükségessé válik az eredeti DNS egyik láncának elsajátítása. A szekvenálás és a hibridizációs analízis néhány módszere alkalmazható.
  5. Kvantitatív PCR (kvantitatív PCR, Q-PCR (angol)) vagy valós idejű PCR-t alkalmazunk közvetlenül egy specifikus PCR-termék mennyiségének mérésére az egyes reakcióciklusokban.
  6. Step PCR (Touchdown PCR (angolul)) - ez a megközelítés csökkenti a nem specifikus primerkötés hatását.
  7. Csoportspecifikus PCR (PCR) - PCR a kapcsolódó szekvenciákon belül egy vagy különböző fajok között, konzervatív primerek alkalmazásával ezekhez a szekvenciákhoz.

Ha a mátrix nukleotidszekvenciája részben ismert vagy ismeretlen, akkor degenerált primerek alkalmazhatók, amelyek szekvenciája olyan degenerált pozíciókat tartalmaz, amelyekben bármely bázis megtalálható. Például a primer szekvencia lehet:... ATH..., ahol H jelentése A, T vagy C.

Milyen biológiai anyagokat vizsgálnak?

Számos biológiai folyadék és folyadék szolgálhat anyagként egy PCR-vizsgálatban, amelyben képes azonosítani egy idegen DNS-baktériumot vagy egy vírus DNS-ét vagy RNS-ét:

  1. Vizelet. Felhasználható a húgyúti fertőzés fertőzésére férfiaknál és a vizeletben a nőknél (férfiak esetében, vizeletanyagként alkalmazva, epitheliális kaparás helyett).
  2. Köpet. A tuberkulózis diagnózisára és ritkábban a chlamydia és mycoplasmosis légúti formáinak diagnosztizálására szolgál. A köpet 15-20 ml-es mennyiségét steril (egyszeri) injekciós üvegben gyűjtjük össze.
  3. Biológiai folyadékok. A prosztata lé, a mellhártya, a gerincvelő, a magzatvíz, az ízületi folyadék, a bronchoalveoláris mosás, a nyál a jelzések szerint kerülnek.
  4. A nyálkahártyák epitéliális kaparása. Általánosan használt diagnosztizálására szexuális úton terjedő betegségek (STD) mint a gonorrhoea, chlamydia, mikoplazmózis, ureaplasmosis, trichomoniasis, vaginosis, a herpesz és más érintő fertőzések nyálkahártyákat.
  5. Biopszia. Leggyakrabban a gyomor és a duodénum biopsziája a Helicobacter pylori fertőzés azonosítására.
  6. Vér, plazma, szérum. A hepatitis B, C, D, G, herpesz, CMV, HIV, humán gének PCR analízisére alkalmazható.

Hogyan készüljünk fel az elemzésre?

A PCR eredményének megbízhatósága közvetlenül függ attól, hogy pontosan mekkora a vizsgálati anyag szállítása. Az anyagot nem szabad szennyezni, különben a vizsgálat eredménye nem lesz objektív. A PCR-elemzés eljuttatása előtt a legfontosabb ajánlások a következő követelményeket tartalmazzák:

  1. A vizeletet reggel egy steril tartályban szállítjuk.
  2. A fertőzés vérvizsgálatát reggel üres gyomorra kell vinni.
  3. Nem szükséges a szexuális aktivitást egy nappal az elemzés előtt bemutatni.

Az elemzés eredményét a vizsgált eljárás után 1,5-2 napon belül elkészítjük. Vannak olyan helyzetek, amikor az eredmény ugyanazon a napon elkészíthető.

A KNK elemzésének magyarázata

A bemutatott kutatás értelmezési folyamatát az egyszerűség különbözteti meg. A PCR analízis eredményeit az anyag leadását követő 1,5-2 nap múlva érhetjük el. Egyes esetekben az eredmény készen áll az első napon, és ez az, amit jelenthetnek:

  • Negatív eredmény azt mutatja, hogy a keresett fertőző ágens nincs jelen a diagnosztizált anyagban.
  • A PCR pozitív azt jelenti, hogy a kórokozó DNS-je vagy RNS-je van az emberi szervezetben.

Bizonyos esetekben a mikroorganizmusok mennyiségi meghatározását végezzük. Ez különösen igaz az opportunista mikroorganizmusok által okozott betegségekre. Mivel ezek a baktériumok csak akkor mutatják negatív hatásukat, ha az összeg túlzott.

Emellett a kvantitatív PCR-analízis fontos a terápiás taktikák kiválasztásához és a vírusfertőzések, mint például a HIV és a hepatitis vírusok kezelésének szabályozásához.

Mennyire pontos a fertőzések PCR-diagnózisa?

A PCR-eljárást nagy pontosság, specifitás és érzékenység jellemzi. Ez azt jelenti, hogy ez az elemzés képes:

  • pontosan meghatározza a fertőzés jelenlétét vagy hiányát;
  • Pontosan jelezze, hogy pontosan mi ez a fertőzés (specifitás);
  • A fertőzés kimutatása még a mikrobák nagyon alacsony DNS-tartalmánál a biológiai anyagban,
  • amelyet vizsgáltak (érzékenység).

PCR elemzés: ár és időzítés

Egy konkrét elemzés ára attól függ, hogy milyen fertőzést kell tesztelni. Hozzávetőleges árak és feltételek:

  1. STI: 300-500 rubel, feltételek - 1 nap;
  2. Epstein-Barr vírus, humán papillomavírus, herpesz, citomegalovírus: 300-500 dörzsölés, terms - 1 nap;
  3. Hepatitis A, B, C, D, G: minőségi elemzés 650 rubel, kvantitatív elemzés 2000 rubel. Feltételek - legfeljebb 5 napig;
  4. A hepatitis C vírus elleni antitestek összesen (Anti-HCV) - 420 rubel;
  5. Antitestek a hepatitis C vírushoz, IgM (Anti-HCV IgM) - 420 rubel;
  6. Helicobacter pylori (Helicobacter pylori): 300-400 dörzsölés, feltételek - 1 nap;
  7. HIV (antitestek és antigének) - 380 rubel;
  8. HIV RNS, minőségi szempontból - 3 500 rubel;
  9. HIV RNS mennyiségileg - 11 000 rubel.

Pénzt takaríthat meg, egy fix tesztcsomagot választhat. Az ilyen szolgáltatásokat a klinikák többsége biztosítja, ahol az elemzés a PRC módszerrel (in vitro, onklinikus stb.) Átvihető.

PCR diagnosztika használata

A polimeráz láncreakciót (PCR) a molekuláris biológiában a víruskeresés kísérleti módszerének nevezik. Lehetővé teszi a nukleinsav (DNS) bizonyos fragmenseinek koncentrációjának jelentős növelését a biológiai anyag mintáiban, ami lehetővé teszi számukra a felismerés és számlálást.

Az elemzés az alábbiak szerint történik. A genetikai anyagot (vérmintát), amely potenciálisan tartalmazhatja a kívánt gént, egy kémcsőbe kerül. Ezenkívül a primereket a kémiai úton szintetizáltuk a kívánt gén kis hosszán.

A DNS-hez vagy RNS-polimerázt is hozzáadják az edényhez, képes egy olyan nukleinsavláncot létrehozni, amely teljesen azonos az eredetivel. A kapott kompozícióba négy szabad nukleotidot, egy RNS-hez vagy DNS-hez speciális építőanyagot helyezünk, amelyek közül az egyik a foszfor radioaktív részecskéit tartalmazza.

A kapott elegyet 95-96 ° C-ra melegítjük, aminek következtében a szokásos állapotban összefonódott két DNS-helikát feloldjuk. Ezután a készítményt lehűtjük, ebben az időben a primerek a vírusgenom kívánt régiójához kötődnek anélkül, hogy az RNS (vagy DNS) kettős hélixet állítana elő ismét.

Hűtés közben a polimeráz egy nukleotidok szabad láncolatát keresi. Ennek az enzimnek a működéséhez egyetlen lánc nukleotidra van szükség. Mivel a polimeráz a DNS-szalag mentén csúszik (mint egy gyűrű egy kötélen), nem működhet kettős spirállal.

Ezután ismétlődő ciklusú melegítést végzünk, ami miatt a nukleotidláncokat elválasztjuk. Mindegyik PCR ciklus esetében a mintában lévő kívánt hepatitis gén mennyisége növekszik a geometriai progresszióban, és a genetikai anyag többi része lineárisan keletkezik.

A nukleotidmaradékok oldatának tisztítása és a DNS-szálak elektroforézissel történő molekulasúly-paraméterével történő elválasztása után könnyen meghatározható, hogy a kívánt gén létezik-e a vizsgálati mintában, vagy sem.

A PCR előnyei

A PCR módszerrel végzett laboratóriumi vizsgálat lehetővé teszi, hogy még több információt szerezzen, mint az RNS vírus jelenlétét. A radioaktív sugárzás szintjének meghatározásakor meghatározható, hogy a vizsgált mintában mely genetikai anyagot kezdetben tartalmaznak. Hepatitis esetén határozza meg a vírusterhelés szintjét.

Ennek a módszernek egy másik előnye a CR reakció nagyon nagy érzékenysége. Sokkal magasabb, mint a vírusok észlelésének klasszikus módszerei. Ideális esetben a kívánt gén azonosítása céljából csak egy mintában lévő vírus elegendő a PCR-hez.

Emellett a PCR teljesen specifikus. A primereket olyan módon hozták létre, hogy teljesen megfeleljenek a kívánt gének egyedülálló részeinek, amelyeknek nincs más szekvenciája. Mindkét ujjlenyomat egyedülálló, és minden génben egyedi nukleotidszekvenciák vannak.

Minõségi PCR analízis

A kvalitatív analízis csak a vírus jelenlétét mutatja a vérben. Ezt a vizsgálatot minden olyan betegnél el kell végezni, akikről kimutatták, hogy vérükben a hepatitis C elleni antitestek eredményei csak két érték közül választhatnak: "észleltek" vagy "nem észleltek". Egészséges ember esetében a normát (referenciaérték) "nem szabad észlelni".

Az elvégzett kvalitatív kutatás ilyen eredményeinek speciális értelmezése is van:

  • Az eredmény "felfedezett". Ez azt jelenti, hogy a mintában a biológiai anyagot hozott találtak egy olyan RNS-fragmens, amely specifikus a hepatitis C-vírus Következésképpen, ott van a tény, a beteg hepatitis B vírus fertőzés C. Ha az eredmény a kvalitatív PCR „felfedezte”, ez azt jelzi, hogy a vírus ismétlésben és ebben az időben új májsejteket fertőz meg a szervezetben.
  • Az eredmény "nem észlelhető". Az ilyen döntés azt jelzi, hogy a mintában a biológiai anyag kapott RNS-fragmentum nem mutatható ki a laboratóriumban, amely specifikus vagy HCV RNS azonos koncentrációban a patogén fertőzés a mintában határ alatt volt az a teszt érzékenységét.

A hepatitis C vírus RNS akut fázisában a PCR technikát alkalmazó kvalitatív vizsgálatok 1-2 hét után azonnal felfedezhetik a szervezet fertőzését, vagyis röviddel a hepatitis elleni antitestek megjelenését megelőzően.

Az ilyen vizsgálatok analízisének megbízhatatlan eredményei a következőkkel érhetők el:

  • szennyezett biomassza;
  • heparin jelenléte a beteg vérében;
  • a mintában lévő vegyi vagy fehérjeanyagok (inhibitorok) jelenléte, amelyek befolyásolják a PCR különböző komponenseit.

A PCR minőségi analíziséhez nem szükséges a beteg speciális preparálása a vizsgálat elvégzéséhez. A vénás vért anyagként használják.

Az eredmények értékelése

A kvalitatív PCR-tesztek bizonyos fokú érzékenységgel rendelkeznek, és a laboratóriumi pontosságtól és a laboratóriumi felszerelés mértékétől függően 10 és 500 NE / ml között változhatnak.

Ez azt jelenti, hogy ha a vírus a vérmintában nagyon alacsony koncentrációban van jelen (kevesebb, mint az adott laboratórium érzékenységi küszöbe), akkor a beteg páciensét "nem detektálják". Ennek következtében, ha minőségi PCR-elemzést végeznek alacsony vírusszinttel (vírus alacsony koncentrációja), például antivirális terápiában részesülő betegeknél, nagyon fontos tudni a diagnosztikai rendszer érzékenységi küszöbét.

Diagnosztikai rendszerek változatai

A virológiai válasz szabályozására ajánlott az antivirális kezelés legalább 50 NE / ml érzékenységi küszöbértékű diagnosztikai rendszerek alkalmazása. Ezek a kritériumok teljesülnek, például: Cobas Ampicolor VGS-teszt elemzők (50 IU / ml pontossággal), valamint RealBest HCV RNS (15 IU / ml érzékenységgel).

A WHO szerint ajánlásokat létrehozó végleges diagnózist a hepatitis C, meg kell kizárólag alapján hármas kimutatására RNS-vírus szérummintákon szenvedő beteg nincs más hepatitis marker faj.

A PCR-eljárások mellett TMA-vizsgálatot (transzkripciós amplifikációs módszert) is alkalmaznak HCV RNS kimutatására betegekben. A legjobb érzékenység küszöbérték (5-10 NE / ml), de hazánkban ez a tesztelési módszer még nem túl gyakori.

A vírusok észlelt módosításainak hatóköre

Ez a kvalitatív meghatározás a hepatitis C vírus RNS jelenlétében szérumban lehetővé teszi számos vírus genotípusának meghatározását. Jelenleg a tudomány több mint hat genotípust ismeri a vírusról, valamint a betegség mintegy 10 altípusairól.

Az 1, 2, 3 genotípusú vírusok gyakoriak országunkban. Laboratories képes észlelni a következő genotípusok: 1a, 1b, 2a, 2b és 2c és 3, 4, 5a és 6. függetlenül altípus. Minden vírusmódosítás esetében a detektálás sajátossága 100%.

PCR mennyiségi elemzése

Kvantitatív PCR-teszt segítségével megállapítják a vérminták hepatitis vírusának koncentrációját (vírus terhelés). Ez a viremia-teszt (a vírus koncentrációja) lehetővé teszi egy meghatározott genetikai anyag (a leginkább vírusos RNS) egységek számának meghatározását, amelyet egy bizonyos mennyiségben észlelnek. Ebben az esetben határozza meg a koncentrációját 1 ml-ben, ami megfelel 1 cu. cm.

Az analízis mennyiségi paramétereit számokban fejezzük ki, ezt a mérést nemzetközi egységegységként (IU) milliliterenként (ml), ME / ml-ként jelöljük. Néhány laboratóriumban a vírus mennyisége más egységekben is meghatározható: a példányok számát ml-enként, másolatként / ml-nek.

  • Időzítés A hepatitis C esetében a PCR ilyen kvantitatív analízise a terápia megkezdése előtt történik. Aztán az 1., 4., 12. és 24. hetet. A 12. héten végzett értékelés indikatív, lehetővé teszi a terápia hatékonyságának meghatározását.
  • Elemzés előkészítése. A PCR mennyiségi elemzéséhez nem szükséges a beteg speciális felkészítése a vizsgálathoz. A mintavétel előtt fél órával nem szabad dohányozni. Vénás vért használnak laboratóriumi anyagként.

Az eredmények értékelése

Különböző laboratóriumi vizsgálati rendszerek esetében ez a mutató különböző konverziós tényezőket mutat be IU / ml-ben. Átlagosan egy konverziós paramétert alkalmaznak, amelyben 4 kópia / ml = 1 NE / ml. Ez például, ha a laboratórium 2,4 * 10 6 kópia / ml PCR-analízist eredményez, akkor ezt a paramétert 4-gyel kell osztani, és 6 * 10 5 NE / ml-t kapunk.

A 800 000 NE / ml magas terhelési szint magasnak tekinthető, ami megközelítőleg 3 000 000 példány / ml index. Az alacsony viremia egyes szerzők szerint a kvantitatív PCR 400 000 NE / ml alatti paramétereinek felel meg.

A kvantitatív teszt eredményeként a végeredmény nem digitális érték formájában jeleníthető meg, hanem: "a mérési tartomány alatt" vagy "nem detektálható".

  • Értékelés: "a mérési tartomány alatt". Ez azt jelzi, hogy a mennyiségi vizsgálat nem tudta kimutatni a hepatitis C virális RNS-t, de maga a vírus igen kis koncentrációban jelen van a szervezetben. Ezt egy további kvalitatív vizsgálat is jelzi, amely igazolja a vírus jelenlétének tényét.
  • Értékelés: "nem észlelt". Ez az eredmény azt jelzi, hogy a mennyiségi vizsgálat nem észlelt vírust az RNS mintában.

A vírusterhelés paramétere elsősorban a betegség fertőzőképességének mértékét, a beteg fertőzőképességének mértékét határozza meg. Minél magasabb a páciens koncentrációja a vírusnak, annál nagyobb a valószínűsége annak, hogy más emberekre átruházzák. Például, amikor szexuális kapcsolatban áll egy beteg vagy egy függőleges út. Az ilyen mennyiségi mutató segít a páciens kezelésének hatékonyságának meghatározásában.

A PCC mennyiségi elemzésének elvégzése fontos az antivirális terápiához, értékeli sikerét és ütemezi a tanfolyam időtartamát. Tehát a test gyors reakciója a kezelés és alacsony mértékű viremia esetén a terápia időtartama csökkenthető.

A mennyiségi PCR paraméter lassú csökkenésével az antivirális terápiát ki kell terjeszteni vagy módosítani. Ha a vírusterhelés szintje alacsony, akkor ez a terápia kedvező tényezője, ha magas, akkor az alkalmazott kezelési módszer hatástalan, és a gyógyszereknek vagy azok használatának módszereit módosítani kell.

Mi a PCR elemzés és a vírusterhelés?

A polimeráz láncreakció (PCR) egy laboratóriumi módszer a DNS és RNS meghatározására. Az első alkalommal az amerikai Cary Mullis csaknem fél évszázaddal ezelőtt tesztelte. Ez a túlérzékenységi vizsgálat képes meghatározni a genom hordozóját a vérben, nyálban vagy bőrben található egyik forrásmolekulából.

A PCR-módszer nagyszerű kilátásokkal rendelkezik, nemcsak az orvostudományban, hanem a géntechnológiában és a kriminalisztika területén is. Segítségével klónokat hoznak létre és új típusú DNS-eket hoznak létre, meghatározzák a rokonság mértékét. A bűncselekményen talált epitéliumon bűncselekményt hozzon létre.

A hepatitis PCR elemzése - mi ez és miért csinálják?

Miért szükséges a PCR elemzés a hepatitis C gyanúja esetén, mi ez?

Hepatitis C vírus - Vírust tartalmazó RNS 6 genotípust és legfeljebb 500 altípust tartalmaz. A májgyulladás közül a vírusnak van a legmagasabb mutációs képessége, és leküzdeni az immunrendszer védő gátját. A hepatitis esetek összes számából a C-vírus okozta a krónikus esetek 70% -át és a májcukor és májrák 30% -át.

A módszer lényege: a vizsgált génnek a speciális enzimek és körülmények hatására történő kiváltására egy tesztcsőben van szükség. A PCR analízis lehetővé teszi a vírus törzsének meghatározását, amely nélkül nem lehet hatékony kezelést végrehajtani: minden genotípus másképpen érzékeny az antivirális szerekre. Kétféle PCR létezik:

A vírusellenes terápia folyamatos ellenőrzést igényel a kezelés megfelelő időben történő kijavítása érdekében, polimeráz láncreakciót is alkalmaznak erre a célra.

Minőségi és mennyiségi PCR

PCR kvalitatív a hepatitis C-re adott válasz: van-e a vírus C-törzse a beteg vérében, és melyik. A genotipizálás szükséges a betegség diagnózisának, prognózisának tisztázásához és a kezelés időzítésének meghatározásához.

Az elfogadott osztályozás szerint a gént egy szám jelöli, és az altípust egy kis latin betű jelöli.

A természetes anyagokon alapuló speciális gyógyszer

A gyógyszer ára

Visszajelzés a kezelésről

Az első eredmények egy hét múlva érkeznek

További információ a készítményről

Naponta egyszer, 3 cseppenként

Használati utasítások

A C vírus genotípusai táblázatának dekódolása:

  • Az 1a, 1b, 1c genotípus
  • 2a, 2b, 2c, 2d genotípus
  • A 3a, 3b, 3c, 3d, 3e, 3f genotípus
  • 4a, 4b, 4c, 4d, 4e, 4f, 4g, 4h, 4j, 4j genotípus
  • Genotípus 5 a
  • Genotípus 6 a

A leggyakoribb genotípusok 1,2,3. Oroszországban a vírus 1a, 1b, 2 és 3 törzsei.

Az 1b vírus genotípusa nehezebb kezelni, mint mások, 90% -ában krónikus formába juttat, amelyből 30% regenerálódik a máj daganatos vagy májzsugorodásaként.

A 2a és 3a genotípusok 33-50% -os fokú chronizációs fokkal reagálnak az antivirális terápiára.

A vírus jelenlétének igazolásakor a PCR-t számszerűsíteni kell a hepatitis C-re, amely kiszámítja az RNS-molekulák számát a beteg laboratóriumi mintájában.

Az elemzés magyarázata

Minőségi PCR az elemzésnek két válasza van:

PCR negatív azt jelenti, hogy a kórokozót a vérmintákban nem észlelik.
pozitív a válasz az ellenkezőjét sugallja: a vírus egyik vagy másik genotípusának RNS-je.

Az eredmény megbízhatóságának valószínűsége 95%. A fennmaradó 5% hiba az ember hibája miatt. Ez a lehetőség a kutatás elvégzésének magas követelményei miatt megengedett:

  • a reagensek tárolására vonatkozó szabályok;
  • az orvosi személyzet megfelelő képzettsége;
  • a bioméret tisztasága.

A PCR készlet 100% -os diagnosztikai pontossággal rendelkezik.

Kvantitatív PCR A hepatitis C RNS-je lehetővé teszi a vírus terhelésének meghatározását a páciens testén. Használata:

  • a betegség állapota (akut, krónikus);
  • meghatározzák az antivirális kezelés hatékonyságát;
  • a májbiopszia szükségességét tisztázzák.

Bizonyos esetekben a beteg nem érez semmi jelét a betegségről, míg a PCR módszere HCV-fertőzést mutat. Ez azt jelenti, hogy a betegség a fejlődés korai szakaszában vagy krónikus formában van. A diagnózis tisztázása érdekében több kutatásra van szükség a vírusellenes kezelés lehető legrövidebb időn belül történő elindításához.

Vírusterhelés a hepatitis C-ben

A vírus terhelés mutatja a máj vírus aktivitását, milyen mértékben aktív a reprodukciója.

Mi ez?

A mennyiségi hepatitis C PCR-t Nemzetközi Egységben mérjük ml / IU / ml-enként, ami azt jelenti, hogy a C-vírus egy adott törzsének ribonukleinsavának hány példányát 1 ml vizsgálati vérben találtuk.

Mi tekinthető magasnak, milyen alacsony?

A vírusterhelés elemzése lehetővé teszi a vírus RNS jelenlétét 50 NE / ml koncentrációban. A vírus terhelése normális - ebben az esetben nem mutatható ki egyetlen HCV RNS molekula sem PCR-rel.

Vírus terhelés táblázat:

  • alacsony koncentráció 600 NE / ml 3 * 104 NE / ml;
  • átlagos - koncentráció 3 * 104 NE / ml-től 8 * 105Mm-ig;
  • Magas - több mint 8 * 105 NE / ml.

Alacsony vírus terhelés - ez jelzi, hogy a terápiás kezelés helyesen van megválasztva, és a hepatitis C gyógyulásának prognózisa kedvező.

Nagy koncentrációjú vírusos sejtek azt jelzi, hogy a betegség akut fázisban van. A páciens vér veszélyes fertőzésforrás.

A vírusterhelés, amelynek mutatói átlagos szinten jellemzik a melegvíz krónikus szakaszát, vagy két fejlődési tendenciája lehet: növelni vagy csökkenteni.

A végén - 6 hónap alatt ellenőrzési PCR-t végzünk.

A PCR-diagnosztika költsége

A következő tünetek aggodalomra adhatnak okot:

  • általános gyengeség;
  • a bőrszín megváltozása, a szem sclera, a mentesítés;
  • hányinger;
  • csökkent étvágy;
  • fájdalom az izmokban és az ízületekben;
  • súlyos a jó hipokondriumban;
  • emelkedett AST és ALT vérszintje.

A fertőzött betegekkel való érintkezés során a preoperatív periódus alatt a hemodialízis vizsgálatra is ajánlott.

Az állami klinikák vérvizsgálatot végeznek a PCR ingyenesen, ha fertőzéses betegségre vagy hepatológushoz fordulnak.

A PCR-diagnosztikára fizetett szolgáltatások minden nagyobb orosz városban rendelkezésre állnak. A költség függ a teszt típusától, az elérhető berendezésektől, az időzítéstől és egyéb tényezőktől.

A kvalitatív PCR elemzés Moszkvában és Szentpéterváron 600 és 900 rubel között lesz. A régiókban - 300-800 rubel.

A hepatitis C virális terhelés meghatározása 17,000-22,000 rubel lesz. Egyéb fertőzéstípusok esetében a mennyiségi vizsgálat ára 1200-10000 rub.

A PCR módszer előnyei és hátrányai

Milyen előnyei vannak a polimeráz láncreakciónak más diagnosztikai módszerekkel szemben?

  1. Széleskörű alkalmazások. A PCR használatával szabványos berendezés segítségével bármilyen vírust azonosíthat.
  2. A kórokozó kimutatásának pontossága. Az enzimek és analitikai módszerek különböző kombinációi alkalmazásával a megjelölt fertőzés 100% -os specifikus vizsgálata valósul meg.
  3. Nagy érzékenység. A technika lehetővé teszi a vírus egy molekula jelenlétének kimutatását a vérben.
  4. hatékonyság. Minőségi elemzés készen áll néhány óra alatt, mennyiségi - két nap múlva.
  5. A vírus diagnózisa az inkubációs időszakban. A PCR-ben a kórokozót nem az antitestek jelenléte határozza meg, hanem akkor is, ha már létezik a szervezet immunválasztja, de a kóros folyamat kezdete előtt, ami megkönnyíti a kezelést.

A PCR hátrányai az előnyei:

  • A vizsgálat tisztasága a legmagasabb tisztaságot igényli, beleértve a levegőt a laboratóriumban, úgyhogy "idegen" DNS nem lép be a mintába;
  • magas személyzeti követelmények, a bioméret mintavételének és elemzésének elvégzése.

PCR vizsgálatok

A polimeráz láncreakciót az egyik legpontosabb és leggyorsabb módszer a számos fertőző betegség diagnosztizálására. Sikeresen alkalmazzák a kriminológiában is, hogy egyszerűsítse a bűnözők azonosításának folyamatát, amelynek segítségével nagy pontossággal hozza létre az apaságot.

A PCR módszer lényege

Minden élő szervezet, beleértve a baktériumokat és vírusokat, egyedi géneket tartalmaz, amelyek egy bizonyos sorrendben a DNS- vagy RNS-struktúra részét képezik. A PCR-vizsgálat során a genetikai anyagot többször másolja a DNS-polimeráz és a speciális hőmérsékleti ciklusok hatására.

A polimeráz láncreakció két fő módszere van:

  1. A klasszikus módszer a kórokozó genetikai anyagának elkülönítése elektroforézissel;
  2. PCR valós idejű üzemmódban.

A módszertan három fő szakaszból áll:

  • A vizsgálati minta előkészítése;
  • DNS-amplifikáció;
  • Az állítólagos kórokozó genetikai anyagának kimutatása (azonosítása).

A kutatás elvégzéséhez a PCR laboratóriumot 3 zónára kell osztani, a reakció minden szakaszát szigorúan a szánt helyiségben kell végrehajtani. Minden zónát fel kell szerelni a szükséges felszereléssel, adagolókkal, fogyóeszközökkel, védőruházattal, amelyek csak ebben a szobában használhatók.

A minták bejegyzését és címkézését követően a mintaelőkészítő helyiségben a kórokozó DNS-jét vagy RNS-ét izolálták a vizsgált anyagból meghatározott hőmérséklet és speciális reagensek hatására. Ezután megkezdődik az amplifikáció folyamata - egy egyedi DNS-fragmentum számos példányának létrehozása. 3 fő szakaszból áll:

  • A DNS denaturálása - magas hőmérséklet (95 fok) hatására a DNS kettős hélixét két láncba rendezzük.
  • A primerek hevítése - speciális szintetikus vegyületeket (primereket) kötnek a DNS láncok végeire, azonosak a nukleinsavak kívánt fragmenseinek végein lévő genetikai információval. A primer rögzítéséhez szükséges hőmérséklet egy adott esetben 50-65 g közötti.
  • DNS-polimeráz enzim 70-72 ° C-on történő alkalmazásával egy hasonló DNS-régió (amplikon) keletkezik a két primer között. Építőanyagként speciális anyagokat használnak, amelyeket a kémcsőbe adnak.

Az amplifikációs ciklust többször megismételjük, ezért sokszor másoljuk az extrahált DNS-t, ami egyszerűsíti az azonosítás folyamatát. Az azonosítás vizuálisan elvégezhető az amplifikációs termékek elektroforézisének agaróz gélben történő végrehajtása után, vagy automatikusan a valós idejű technikával.

A valós idejű PCR módszer alkalmazása során az erősítés és detektálás egyidejűleg történik speciális eszközökön. Ez a módszer a legelőnyösebb, mivel a vizsgálatot zárt tesztcsövekben végzik, így csökken a szennyeződés kockázata, következésképpen a hamis pozitív eredmények kibocsátása.

A módszer előnyei és hátrányai

  • A tanulmány csak néhány órát vesz igénybe, ellentétben a hosszú klasszikus mikrobiológiai módszerekkel;
  • Magas specifitás 95% -ról 100% -ra, mert a kívánt DNS-fragmens egyedülálló minden egyes mikroorganizmus esetében;
  • A módszer nagy érzékenysége, a kórokozó felismerése, még akkor is, ha a mintában csak egy sejt vizsgálja;
  • A kórokozó azonosítása minőségi és mennyiségi módszer lehet. Ez nagyon fontos az opportunista mikroorganizmusok elosztásában, amelyek kis számban nem okoznak betegséget;
  • A kórokozó genotípusának meghatározása (hepatitis C, HIV-fertőzés). Ez szükséges a racionális kezeléshez és a lehetséges komplikációk prognózisához;
  • A betegség genetikai hajlamának azonosítása, ezáltal megakadályozza annak fejlődését;
  • Szinte minden fertőzésforrást elkülöníthetünk, és a modern módszerek lehetővé teszik a minta teljes mikroflórájának azonosítását, például a hüvely biocenózisát.
  • A hamis pozitív és hamis negatív minták megszerzésének lehetősége, ha nem követik a mintavételre vonatkozó szabályokat, a kutatás során elkövetett hibákat;
  • Nagy elemzési költség.

kérelem

PCR kivizsgálása gyakorlatilag bármely mintát (vér, vizelet, agy-gerincvelői folyadék, nyaki scrapings a csatorna és a húgycső, szőrtüszők, ondó, stb). Ezt a technikát széles körben alkalmazzák a diagnózis az STD-k (gonorrhoea, chlamydia, ureaplasmosis, mikoplazmózis, trichomoniasis). Ezt fel lehet használni olyan anyagok azonosítására, a tuberkulózis, a diftéria, a tüdőgyulladás, vírusos hepatitis, HIV-fertőzés, toxoplazmózis, citomegalovírus és a herpesz vírus, szalmonella, stb

Polaritás láncreakciót alkalmaznak az apaság megállapítására a szülő és a gyermek DNS-jének összehasonlításával, felfedve a genetikai anomáliákat és az organizmus örökletes hajlamát különböző betegségekre.

Az elemzés előkészítése

  • Ajánlatos szigorúan adni a véreket üres gyomorra.
  • Meghozatala előtt kenetet a húgycső vagy a méhnyak kell három napon belül, hogy tartózkodjanak a szexuális aktivitást, hogy az elemzés nem használt legalább egy hónap múlva vége az antibiotikumos kezelés, különben az eredmény lehet fals pozitív. A PCR módszer egy halott kórokozó DNS-jét is feltárja, ezért a teljes sejtmegújítás után jobb a teszt.
  • A vizeletet steril tartályban kell összegyűjteni.

A válasz általában pár nap alatt készen áll a laboratóriumi képességek függvényében.

Az eredmények magyarázata

Minőségi technikát alkalmazva csak 2 válasz lehet: pozitív vagy negatív. A pozitív eredmény azt jelzi, hogy egy kiválasztott mikroorganizmus jelen van a mintában, a negatív eredmény kimutatja a hiányt.

A kvantitatív eredményt a kezelőorvosnak értékelnie kell, minden egyes esetben egyedi megközelítést kell alkalmazni. A szakember, figyelembe véve a kapott választ, megoldja a kezelés szükségességét, a készítmények adagolását, meghatározza a betegség formáját és stádiumát.

Az eredmény megfejtése után a genetikai profil (a thrombophilia, az emlőrákra való hajlam) meghatározása során az orvos fel tudja mérni a betegség kockázatának mértékét, valamint speciális étrendet és megelőző intézkedéseket ír elő.

Hasznos volt az oldal? Ossza meg a kedvenc közösségi oldaladon!

Hepatitis C PCR

Szólj hozzá! 15,344

A hepatitis C a vírusos betegségek egyik legveszélyesebb és legnehezebb diagnosztizálása. Annak meghatározására, a betegség PCR hepatitis C. Ez a módszer egy új high-tech technika, amely lehetővé teszi az egyik, hogy tanulmányozza a genetikai anyag a létezését élet a legkisebb részecskék (molekulák), és a legkisebb mennyiségben. A hepatitis vírus nagyon ellenálló, képes hosszú ideig élni a környezetben és tökéletesen illeszkedik az emberi testbe.

Mi a PCR?

Ma sok a betegség. És nem kevésbé a módszerek meghatározására. Mivel a fertõzõ szerek megtanulják könnyedén megszokni a környezetet és fejlõdni, a legújabb technológiákat diagnosztizálják. A polimeráz láncreakció (PCR) egy gyorsabb és pontosabb módszer, amelynek célja a betegség kórokozójának megtalálása, lényegesen növelve a hepatitis vírus DNS-arányát a mintában. Gyakran írták: keresnek egy tűt egy szénakazalban, majd építeni egy köteg tűket.

A PCR módszer típusai

Ki kell emelni a hepatitis minőségi és mennyiségi elemzését. Annak megállapításához, hogy a vírus a szervezetben van-e, és azok, akik a hepatitis C ellenanyagokat találták, minőségi tesztelést végeznek. Az elemzés elemzése eredményt ad: "pozitív"; „Negatív”. A negatív jelentés azt jelenti: vagy az ember egészséges vagy a vérben lévő szerek nem elégek és nem találhatók. Érdemes tehát egy idő után egy második vizsgálatot folytatni.

A pozitív eredmény a fertőzés fennállását jelzi. Ez szinte mindig pontos érték. A hibás eredmények általában az emberi tényezőtől függenek (helytelen tárolás vagy az eljárás szabályainak be nem tartása). Amikor a norma, az eredmény negatív. A vizsgálat előtt nincsenek különleges szabályok, csak vért veszünk a vénából.

Ha megtalálható, végezzen kvantitatív elemzést (vírus terhelés) - számszerű értékeket ad: mennyi a hepatitis vírus RNS-je van jelenleg a vizsgálati anyag előírt térfogatában. A fertőzés aktív kifejlődésével a fertőzött személy 1-2 héten keresztül megtalálható. A vért rendszerint azért is megvizsgálják, mert a hatóanyagok szabadon keringenek.

A kvantitatív PCR analízis jellemzői

A kvantitatív elemzés különbsége, hogy nem mindegyik áthalad. Minőségi - meghatározza a jelenlétét és mennyiségi - segít a "hepatitis vírus" következtetés megerősítésében, a betegség lefolyásának prognózisában és a kezelés folyamatának meghatározásában. Mennyire hatékony a terápia, nézzük meg az RNS számát a kezelés előtt és alatt. Továbbá a gyógyszeradag meghatározására is használják.

bizonyság

Rendszerint a helyreállítás kezdete előtt állítják elő. A fő jelzések lehetnek:

  • a vírusterhelés meghatározása és az antivirális terápia szabályozása;
  • kvalitatív PCR-k találtak hepatitis C ellenanyagokat;
  • akut és krónikus hepatitis C megtalálása;
  • vegyes hepatitis létezését;
  • a kezelés tervezésekor;
  • ha egy kvalitatív vizsgálat még mindig a betegség jelenlétét mutatja a kezelés tizenkettedik hete után.

Tekintse meg, hogy milyen típusú vírus terhelés a hepatitis esetében: az alacsony terápia sikeres; emelkedett - a kezelés nem hatékony, és meg kell változtatni.

Mi történik a betegség különböző szakaszaiban?

A betegség különböző fázisaiban a vizsgálatot a kezelés előnyeinek áttekintése és a későbbi végrehajtásának időtartamának tervezése céljából végzik. A terápiára adott jó válaszokkal rövidítve. Ellenkező esetben a vírus lassú visszavonásával a kezelés időtartama meghosszabbodik. A hepatitis PCR-je a terápia 1,4, 12, 24 hetes korában történik. Amikor a mutatók nem csökkennek 12 hét elteltével, arra a következtetésre jutnak, hogy a terápia nem alkalmas erre a szervezetre. Ez az elemzés annak megállapítására szolgál, hogy mennyire aktív a fertőzés, és mennyire valószínű, hogy át kell adni. Például terhesség alatt fennáll a veszélye annak, hogy megfertőzik a baba. A terápia után a relapszus kockázata azonosítható.

másolat

A vizsgálat után az elemzés nem számokkal, hanem a "mérési tartomány alatt" és a "nem észlelhető" szavakkal olvasható ki. A kvantitatív PCR érzékenyebb a minőségre. A "nem található" következtetés azt mondhatja, hogy a fertőzés nem található. "A mérési tartomány alatt" - a tesztet a vírus nem észlelte, de kis mennyiségben. Ebben a helyzetben készítsen egy második vizsgálatot.

Vírus terhelés - a fertőzött RNS számának meghatározása a megállapított vérmennyiségben (kvantitatívan 1 ml = 1 köbcentiméter). Nemzetközi mérésekben ME / ml-ben van megfogalmazva. Az egyes laboratóriumok példányokat jelölnek / ml. Határozza meg az összetevők nemzetközi értékekbe történő fordítását, a különböző tesztrendszerek saját módján tudnak. 1. táblázat A vírus RNS mennyiségi elemzésének dekódolása

A hepatitis C mennyiségi elemzésének normája

Amikor egy személy egészséges, a norma - "nem található". Az érintett személyek norma csökken az adagolás vírus eredményez logaritmikus egység, amely megnyilvánul csökkenti a nullák száma az elemzés egy (például 1 * 106 IU / ml és 1 * 105 NE / ml). A vírus koncentrációtartományának kerete, amely meghatározza a termocikleret, 1,8 * 102 - 2,4 * 107 NE / ml határokon belül van. Az eredmény értelmezése:

  • alacsony koncentráció - 600 NE / ml-ről 3 * 104 NE / ml-re;
  • átlagosan - 3 * 104 NE / ml-ről 8 * 105 NE / ml-re;
  • Magas - 8 * 105 NE / ml felett.
Vissza a tartalomhoz

eltérések

Ha az elemzések eredményei a normán kívül változtak, ez a betegség visszaszolgáltatását és a vírus reprodukcióját jelezheti. Bizonyos tényezők befolyásolhatják a megbízhatatlan eredményt, például a minták szennyeződését; a heparin vérben való jelenléte és a PCR-összetevők működését lassító anyagok; laboratóriumi hibák; a vizsgálat nem teljesítése.

Továbbá számos laboratórium eredményei változhatnak, talán más kutatási módszertan is létezett. Annak tudatában, hogy mennyire érintett a máj és a betegség veszélye, nem elég a hepatitis PCR számszerűsítése. Ezenkívül biokémiai eljárásokat és biopsziát végzünk.

A kezelés megtervezésekor a vírus genotípusú. Mivel a hepatitis C képes megváltozni, több csoport is létezik. A különböző típusú kezelések eltérőek lehetnek. Vannak olyan helyzetek, ahol több faj van, de az elemzés megtalálja az egyiket, amelyik érvényesül. Ezután a teszt újra megismétlődik.

A módszer előnyei

A PCR technika lehetővé teszi a véleménynyilvánítás és a helyes kezelés előírását. A módszertan előnyei:

  • Az eredmények sebessége nem igényli a kórokozó fajának megkülönböztetését és termesztését. A folyamat automatizálása lehetővé teszi az anyag feldolgozását és tanulmányozását 4-5 órán keresztül.
  • A kórokozó meghatározásának közvetlen - a DNS egy speciális részének megtalálása közvetlenül jelzi a betegség jelenlétét. Például az ELISA - megtalálja a fehérje markert (a baktériumok életének termékeit), ami nem biztosítja a betegség jelenlétének pontos igazolását.
  • Specifikusság - egy adott kórokozóra specifikus anyagot vizsgálunk, amely kizárja a hamis reaktív szerekkel szembeni reakciót.
  • Érzékenység - érzékeli a legkisebb vírusszámot.
  • Az univerzalitás - azon alapul, hogy a specifikus organizmusok DNS-jének vagy RNS-jének fragmentumait találják. Ez lehetővé teszi diagnosztika elvégzését bármely biomérnök bármely ágenséhez, ha más módszerek tehetetlenek.
  • Nemcsak nyilvánvaló, hanem rejtett fertőzésekre is rámutat - hatékonyan tanulmányozza a nehezen művelt, nem művelt, tartósan ható szereket.
  • https://www.youtube.com/watch?v=lBi-d6jAKxQ

Ezzel a kutatással minden beteg diagnosztizálható a betegség hiánya miatt. De megbízható tényekhez kövesse az utasításokat. A PCR-t különböző ágazatokban használják: kriminalisztika, apasági vizsgálat, különféle vírusok diagnosztizálására, allergia kimutatására, gén klónozásra, mutagenezisre, DNS-szekvenálásra.

PCR mennyiségi elemzése

A kvantitatív PCR módszer egy laboratóriumi vizsgálat, amely lehetővé teszi a kórokozó azonosítását és a szervezetben található mennyiség meghatározását. Ez a módszer lehetővé teszi nemcsak a mikroorganizmus kimutatását, hanem annak megértését is, hogy ez okozhatja-e a betegséget.

Különösen fontos a PCR mennyiségi elemzése a vírusfertőzések diagnózisában és kezelésében.

Fontos! A kórokozók standard PCR mennyiségi meghatározása nem lehetséges.

Az ilyen elemzés nem alkalmas az opportunista mikroorganizmusokat okozó betegségek pontos diagnosztizálására.

PCR mennyiségi elemzése: a módszer lényege

PCR vagy polimeráz láncreakció észleli a mikroorganizmusok DNS és RNS anyagi fragmenseit.

Az elemzés hatékony mindenféle mikroorganizmus kimutatására:

A vizsgálatban a DNS- vagy RNS-helyek szelektív másolása az enzimek hatására történik.

Ez lehetővé teszi a kórokozó okozta kórokozók meghatározását, még akkor is, ha a tartalma alacsony az anyagban. A mennyiségi PCR számít minden egyes másolási ciklus után. Ennek köszönhetően a test fertőző terhelése az elemzés végén ismertté válik.

Kvantitatív PCR elemzés: előnyök

A módszer számos pozitív tulajdonsággal rendelkezik a többi laboratóriumi vizsgálathoz képest:

  • Az elemzés gyors felkészültsége - 24 órán belül
  • Specificitás - A PCR pontosan feltárja a keresett mikroorganizmust
  • Nagy érzékenység - csak néhány kórokozó sejtje
  • A mikroorganizmusok számának megszámlálási lehetősége
  • Ön azonosítani tudja a kórokozó egy bizonyos törzsét
  • A PCR a mikroorganizmusokat még az immunitás reakciója előtt is detektálja
  • A terápia hatékonyságának meghatározása

E tényezők kombinációja a PCR kvantitatív elemzését teszi lehetővé nagy pontosságú laboratóriumi analízissel. A vizsgálatokat a betegség bármely szakaszában folytatják. A kvantitatív PCR további plusz az a képesség, hogy bármilyen anyagot megvizsgál. Vért, vizeletet, nyálkahártyákat, spermákat, szövetmintákat használnak az elemzéshez.

A módszer hátránya viszonylag magas költségnek tekinthető. Ez az elemzéshez szükséges berendezések magas költségeinek köszönhető.

PCR: kvantitatív módszer a hepatitis C diagnosztizálására

A standard szerológiai módszerek nem nyújtanak lehetőséget arra, hogy meghatározzák a vírus mennyiségét a szervezetben. Ezekkel a tesztekkel nem lehet megállapítani a betegség lefolyásának szakaszát. Ha PCR-vizsgálatot végeznek, a kvantitatív módszer pontosan azonosítja a vírusterhelést.

Ezzel a teszttel meg lehet állapítani, hogy a vírus jelentős károsodást okozhat a májszövetben.

Ne feledd! Minél alacsonyabb a vírus tartalma a vérben, annál kisebb a szexuális partner fertőzésének esélye.

A hepatitis C-ben mennyiségi PCR-t végeznek a kezelés előtt és 12 hetes kezelés után. A vírus terhelés 800 * 10 3 vagy 800 000 ME / ml feletti értékkel magas.

Ha a vizsgálati eredmény meghaladja az 1 * 10 7 NE / ml-t, akkor ez nagyon magas vírustartalmat jelent.

A kezelés hátterében ilyen eredmények azt mutatják, hogy a kiválasztott terápia hatástalan. Ha a gyógyszerek megkezdése után a mennyiségi PCR titere csökken, ez azt jelenti, hogy a kezelés hatékony. A kurzus hatékonyságáról és annak korrekciójáról döntést csak a kezelőorvos végezhet.

A hepatitis C-ben mért kvantitatív PCR a biokémiai vérparaméterek egyidejű vizsgálatát igényli. Ez szükséges a máj transzamináz szintjének monitorozásához és a májkárosodás felméréséhez.

PCR kvantitatív módszert alkalmazunk klinikánk laboratóriumában. A vizsgálat eredménye alapján orvosi segítséget kaphat.

A PTSR kvantitatív elemzésének átvétele a klinikánkban, címünkben lehetséges.


Kapcsolódó Cikkek Hepatitis