PCR diagnosztika használata

Share Tweet Pin it

A polimeráz láncreakciót (PCR) a molekuláris biológiában a víruskeresés kísérleti módszerének nevezik. Lehetővé teszi a nukleinsav (DNS) bizonyos fragmenseinek koncentrációjának jelentős növelését a biológiai anyag mintáiban, ami lehetővé teszi számukra a felismerés és számlálást.

Az elemzés az alábbiak szerint történik. A genetikai anyagot (vérmintát), amely potenciálisan tartalmazhatja a kívánt gént, egy kémcsőbe kerül. Ezenkívül a primereket a kémiai úton szintetizáltuk a kívánt gén kis hosszán.

A DNS-hez vagy RNS-polimerázt is hozzáadják az edényhez, képes egy olyan nukleinsavláncot létrehozni, amely teljesen azonos az eredetivel. A kapott kompozícióba négy szabad nukleotidot, egy RNS-hez vagy DNS-hez speciális építőanyagot helyezünk, amelyek közül az egyik a foszfor radioaktív részecskéit tartalmazza.

A kapott elegyet 95-96 ° C-ra melegítjük, aminek következtében a szokásos állapotban összefonódott két DNS-helikát feloldjuk. Ezután a készítményt lehűtjük, ebben az időben a primerek a vírusgenom kívánt régiójához kötődnek anélkül, hogy az RNS (vagy DNS) kettős hélixet állítana elő ismét.

Hűtés közben a polimeráz egy nukleotidok szabad láncolatát keresi. Ennek az enzimnek a működéséhez egyetlen lánc nukleotidra van szükség. Mivel a polimeráz a DNS-szalag mentén csúszik (mint egy gyűrű egy kötélen), nem működhet kettős spirállal.

Ezután ismétlődő ciklusú melegítést végzünk, ami miatt a nukleotidláncokat elválasztjuk. Mindegyik PCR ciklus esetében a mintában lévő kívánt hepatitis gén mennyisége növekszik a geometriai progresszióban, és a genetikai anyag többi része lineárisan keletkezik.

A nukleotidmaradékok oldatának tisztítása és a DNS-szálak elektroforézissel történő molekulasúly-paraméterével történő elválasztása után könnyen meghatározható, hogy a kívánt gén létezik-e a vizsgálati mintában, vagy sem.

A PCR előnyei

A PCR módszerrel végzett laboratóriumi vizsgálat lehetővé teszi, hogy még több információt szerezzen, mint az RNS vírus jelenlétét. A radioaktív sugárzás szintjének meghatározásakor meghatározható, hogy a vizsgált mintában mely genetikai anyagot kezdetben tartalmaznak. Hepatitis esetén határozza meg a vírusterhelés szintjét.

Ennek a módszernek egy másik előnye a CR reakció nagyon nagy érzékenysége. Sokkal magasabb, mint a vírusok észlelésének klasszikus módszerei. Ideális esetben a kívánt gén azonosítása céljából csak egy mintában lévő vírus elegendő a PCR-hez.

Emellett a PCR teljesen specifikus. A primereket olyan módon hozták létre, hogy teljesen megfeleljenek a kívánt gének egyedülálló részeinek, amelyeknek nincs más szekvenciája. Mindkét ujjlenyomat egyedülálló, és minden génben egyedi nukleotidszekvenciák vannak.

Minõségi PCR analízis

A kvalitatív analízis csak a vírus jelenlétét mutatja a vérben. Ezt a vizsgálatot minden olyan betegnél el kell végezni, akikről kimutatták, hogy vérükben a hepatitis C elleni antitestek eredményei csak két érték közül választhatnak: "észleltek" vagy "nem észleltek". Egészséges ember esetében a normát (referenciaérték) "nem szabad észlelni".

Az elvégzett kvalitatív kutatás ilyen eredményeinek speciális értelmezése is van:

  • Az eredmény "felfedezett". Ez azt jelenti, hogy a mintában a biológiai anyagot hozott találtak egy olyan RNS-fragmens, amely specifikus a hepatitis C-vírus Következésképpen, ott van a tény, a beteg hepatitis B vírus fertőzés C. Ha az eredmény a kvalitatív PCR „felfedezte”, ez azt jelzi, hogy a vírus ismétlésben és ebben az időben új májsejteket fertőz meg a szervezetben.
  • Az eredmény "nem észlelhető". Az ilyen döntés azt jelzi, hogy a mintában a biológiai anyag kapott RNS-fragmentum nem mutatható ki a laboratóriumban, amely specifikus vagy HCV RNS azonos koncentrációban a patogén fertőzés a mintában határ alatt volt az a teszt érzékenységét.

A hepatitis C vírus RNS akut fázisában a PCR technikát alkalmazó kvalitatív vizsgálatok 1-2 hét után azonnal felfedezhetik a szervezet fertőzését, vagyis röviddel a hepatitis elleni antitestek megjelenését megelőzően.

Az ilyen vizsgálatok analízisének megbízhatatlan eredményei a következőkkel érhetők el:

  • szennyezett biomassza;
  • heparin jelenléte a beteg vérében;
  • a mintában lévő vegyi vagy fehérjeanyagok (inhibitorok) jelenléte, amelyek befolyásolják a PCR különböző komponenseit.

A PCR minőségi analíziséhez nem szükséges a beteg speciális preparálása a vizsgálat elvégzéséhez. A vénás vért anyagként használják.

Az eredmények értékelése

A kvalitatív PCR-tesztek bizonyos fokú érzékenységgel rendelkeznek, és a laboratóriumi pontosságtól és a laboratóriumi felszerelés mértékétől függően 10 és 500 NE / ml között változhatnak.

Ez azt jelenti, hogy ha a vírus a vérmintában nagyon alacsony koncentrációban van jelen (kevesebb, mint az adott laboratórium érzékenységi küszöbe), akkor a beteg páciensét "nem detektálják". Ennek következtében, ha minőségi PCR-elemzést végeznek alacsony vírusszinttel (vírus alacsony koncentrációja), például antivirális terápiában részesülő betegeknél, nagyon fontos tudni a diagnosztikai rendszer érzékenységi küszöbét.

Diagnosztikai rendszerek változatai

A virológiai válasz szabályozására ajánlott az antivirális kezelés legalább 50 NE / ml érzékenységi küszöbértékű diagnosztikai rendszerek alkalmazása. Ezek a kritériumok teljesülnek, például: Cobas Ampicolor VGS-teszt elemzők (50 IU / ml pontossággal), valamint RealBest HCV RNS (15 IU / ml érzékenységgel).

A WHO szerint ajánlásokat létrehozó végleges diagnózist a hepatitis C, meg kell kizárólag alapján hármas kimutatására RNS-vírus szérummintákon szenvedő beteg nincs más hepatitis marker faj.

A PCR-eljárások mellett TMA-vizsgálatot (transzkripciós amplifikációs módszert) is alkalmaznak HCV RNS kimutatására betegekben. A legjobb érzékenység küszöbérték (5-10 NE / ml), de hazánkban ez a tesztelési módszer még nem túl gyakori.

A vírusok észlelt módosításainak hatóköre

Ez a kvalitatív meghatározás a hepatitis C vírus RNS jelenlétében szérumban lehetővé teszi számos vírus genotípusának meghatározását. Jelenleg a tudomány több mint hat genotípust ismeri a vírusról, valamint a betegség mintegy 10 altípusairól.

Az 1, 2, 3 genotípusú vírusok gyakoriak országunkban. Laboratories képes észlelni a következő genotípusok: 1a, 1b, 2a, 2b és 2c és 3, 4, 5a és 6. függetlenül altípus. Minden vírusmódosítás esetében a detektálás sajátossága 100%.

PCR mennyiségi elemzése

Kvantitatív PCR-teszt segítségével megállapítják a vérminták hepatitis vírusának koncentrációját (vírus terhelés). Ez a viremia-teszt (a vírus koncentrációja) lehetővé teszi egy meghatározott genetikai anyag (a leginkább vírusos RNS) egységek számának meghatározását, amelyet egy bizonyos mennyiségben észlelnek. Ebben az esetben határozza meg a koncentrációját 1 ml-ben, ami megfelel 1 cu. cm.

Az analízis mennyiségi paramétereit számokban fejezzük ki, ezt a mérést nemzetközi egységegységként (IU) milliliterenként (ml), ME / ml-ként jelöljük. Néhány laboratóriumban a vírus mennyisége más egységekben is meghatározható: a példányok számát ml-enként, másolatként / ml-nek.

  • Időzítés A hepatitis C esetében a PCR ilyen kvantitatív analízise a terápia megkezdése előtt történik. Aztán az 1., 4., 12. és 24. hetet. A 12. héten végzett értékelés indikatív, lehetővé teszi a terápia hatékonyságának meghatározását.
  • Elemzés előkészítése. A PCR mennyiségi elemzéséhez nem szükséges a beteg speciális felkészítése a vizsgálathoz. A mintavétel előtt fél órával nem szabad dohányozni. Vénás vért használnak laboratóriumi anyagként.

Az eredmények értékelése

Különböző laboratóriumi vizsgálati rendszerek esetében ez a mutató különböző konverziós tényezőket mutat be IU / ml-ben. Átlagosan egy konverziós paramétert alkalmaznak, amelyben 4 kópia / ml = 1 NE / ml. Ez például, ha a laboratórium 2,4 * 10 6 kópia / ml PCR-analízist eredményez, akkor ezt a paramétert 4-gyel kell osztani, és 6 * 10 5 NE / ml-t kapunk.

A 800 000 NE / ml magas terhelési szint magasnak tekinthető, ami megközelítőleg 3 000 000 példány / ml index. Az alacsony viremia egyes szerzők szerint a kvantitatív PCR 400 000 NE / ml alatti paramétereinek felel meg.

A kvantitatív teszt eredményeként a végeredmény nem digitális érték formájában jeleníthető meg, hanem: "a mérési tartomány alatt" vagy "nem detektálható".

  • Értékelés: "a mérési tartomány alatt". Ez azt jelzi, hogy a mennyiségi vizsgálat nem tudta kimutatni a hepatitis C virális RNS-t, de maga a vírus igen kis koncentrációban jelen van a szervezetben. Ezt egy további kvalitatív vizsgálat is jelzi, amely igazolja a vírus jelenlétének tényét.
  • Értékelés: "nem észlelt". Ez az eredmény azt jelzi, hogy a mennyiségi vizsgálat nem észlelt vírust az RNS mintában.

A vírusterhelés paramétere elsősorban a betegség fertőzőképességének mértékét, a beteg fertőzőképességének mértékét határozza meg. Minél magasabb a páciens koncentrációja a vírusnak, annál nagyobb a valószínűsége annak, hogy más emberekre átruházzák. Például, amikor szexuális kapcsolatban áll egy beteg vagy egy függőleges út. Az ilyen mennyiségi mutató segít a páciens kezelésének hatékonyságának meghatározásában.

A PCC mennyiségi elemzésének elvégzése fontos az antivirális terápiához, értékeli sikerét és ütemezi a tanfolyam időtartamát. Tehát a test gyors reakciója a kezelés és alacsony mértékű viremia esetén a terápia időtartama csökkenthető.

A mennyiségi PCR paraméter lassú csökkenésével az antivirális terápiát ki kell terjeszteni vagy módosítani. Ha a vírusterhelés szintje alacsony, akkor ez a terápia kedvező tényezője, ha magas, akkor az alkalmazott kezelési módszer hatástalan, és a gyógyszereknek vagy azok használatának módszereit módosítani kell.

A hepatitis C-vel végzett PCR diagnosztizálása

Nem mindenki tudja, hogy mi a hepatitis C PCR diagnosztikai módszere. A betegségek egyik legelterjedtebb csoportja a gyomor-bél traktus fertőző betegsége. Leggyakrabban gyomor (fekélyek), belek (colitis, enteritis) és máj (hepatitis) szenvednek.

A fent említett szervek között a májra a legnagyobb terhet rendelik. A szervezetben a máj szerepe rendkívül fontos:

  1. Szinte minden metabolikus reakció a májban fordul elő (itt minden olyan létfontosságú komponens, amely lehetővé teszi a test működését).
  2. A máj a fő szerv, amely elvégzi a méregtelenítő funkciót. Segítségével (különösen epével) számos szubsztrátot eltávolítanak, ami mérgezést okozhat, és súlyos következményekhez vezethet.

Sajnos sokan nem követik az egészségüket, mert a máj szenved. Általában különböző etiológiájú hepatitis alakul ki (vírusos, mérgező).

A hepatitis meghatározása

A vírusos hepatitis fontos helyet foglal el a májbetegségek között. A betegség lefolyásának súlyossága, a kezelés bonyolultsága miatt ezek az elsőek a szerv másik természetének kórtörténetében.

Minden hepatitis akut és krónikus. Akut hordozó A és B hepatitis. A krónikus az első helyen a hepatitis C.

Ezt a betegséget a hepatitisz C vírus okozza, amely jellemzője, hogy a betegség hosszú távon kóros klinikai tünetek nélkül is fennállhat.

Főleg a vér által közvetített. A véráramlással a vírus belép a májba, ahol a sejtjeiben szaporodni kezd. A virionok felhalmozódása következtében a fertőzött hepatocita elpusztul. Válaszul az antitestek kezdődnek, amelyek megtámadják a hepatocyták maradványait. Emiatt idővel egy medence épül a májsejtek ellen, ami súlyosbítja a betegség lefolyását.

Mivel a betegség tünetmentes vagy tünetmentes, és a klinikai tünetek csak a sejtek jelentős károsodásával járnak, ez a betegség diagnosztikai módszerek létrehozását igényli a jelenlétének azonosítása és a megfelelő intézkedések megtétele érdekében.

A hepatitis C diagnózisa: kvalitatív és kvantitatív elemzések

Jelenleg olyan módszereket alkalmaznak, mint a máj biopszia, immunogram a hepatitis C diagnosztizálására.

Lehetővé teszik az érintett májsejtek (májbiopsziás vizsgálat) vagy a fertőzött sejtekkel szembeni specifikus antitestek (immunogram) közvetlen meghatározását. Van azonban egy olyan módszer, amely megbízhatóan meghatározza a vírus jelenlétét. Ez a PCR egy polimeráz láncreakció.

Ennek a módszernek az a lényege, hogy bizonyos körülmények között az RNS láncok kialakulása bekövetkezik. Ez annak a ténynek tudható be, hogy a vírusrészecskék fragmentumai vannak a vérben vagy a biopsziás mintában. Ha a táptalajban egyes molekulákkal kombinálódnak, a vírus RNS-szel komplementer láncok szintézise megtörténik. A hepatitis C vírus ismert nukleotidszekvenciájával végzett későbbi elemzésük és összehasonlításuk alapján megállapítható, hogy van-e vírus a szervezetben és van-e májkárosodás.

A PCR-t a vér hepatitis vírusával szembeni specifikus antitestek detektálása után végezzük. A teszt után az eredmény megjelenik - RNS "észlelt" vagy "nem észlelt". Esetenként azt mondja, hogy "nem elég anyag" - ebben az esetben a hepatitis C ismételt elemzésére.

Ha a vírusrészecskék száma kevesebb, mint a szükséges minimális összeget, akkor beszélhetünk az a tény, hogy a hepatitis B nincs jelen, és a minimális mennyiségű genetikai anyag lehet „zavaros”, mert a mimikri a genetikai anyag, vagy bizonyos szekvenciák nukleotidok az esély egybeeshetne, hogy a vírus.

  1. PCR-negatív eredményt adhat, ha valójában van vírusrészecskék a vérben, de ezek olyan kicsi (fertőzés történt a közelmúltban, vagy az elemzés előzte meg hosszú és intenzív antivirális terápia), hogy a vizsgálati rendszer egyszerűen nem volt képes megfelelően meghatározni azok koncentrációjától. RNS - "nem észlelt".
  2. Ha a PCR-nek pozitív eredménye van, akkor a vérben olyan sok vírusrészecske van, hogy számuk meghaladja a tesztrendszer érzékenységének alacsonyabb küszöbét. Ebben az esetben a fertőző folyamat kialakulásának kockázata magas (vagy már eléggé elhanyagolt állapotban van). Általában a vírus nagy mennyisége már jelzi a kezelést és a későbbi májtranszplantációt.

Néha a teszt hamis-pozitív vagy hamis-negatív lehet.

A hepatitis PCR hamis negatív eredményét akkor lehet megfigyelni, ha a reakcióközegben olyan komponensek vannak, amelyek gátolják a vírusrészecskék másolatainak képződését. Emiatt nem lehet valós képet kapni a vér állapotáról, ami hozzájárul a vírus átadásához és a betegség progressziójához. A reakciót befolyásolhatja a heparin jelenléte a vérben (a vér relatív viszkozitásának csökkenése miatt). Az analízis téves értelmezése akkor is lehetséges, ha a vizsgálati anyag szállításának és tárolásának feltételei nem teljesülnek.

Hamis pozitív eredmények, amikor a hepatitis C-t diagnosztizálják, a PCR-t leggyakrabban akkor adják meg, amikor a kémcső vagy a munkaközeg szennyezett. Emellett pozitív eredmények figyelhetők meg a többi csoport hepatitisz jelenlétében és vírusainál (keresztreakció miatt).

A PCR kimutatása a hepatitis C kimutatására

A nagyszámú krioglobulin vérben való jelenléte szintén közvetlenül befolyásolja a PCR viselkedését. Emiatt a vizsgálat előtt a hepatitis C szükség, hogy meghatározzuk azok koncentrációja a vérben kimutatására torzítása az eredményt előre, és megakadályozzák azt.

A meghatározott vizsgálatok elvégzése után világossá válik, hogy van-e vérvírus-részecskék. Amikor meghatározásra kerülnek, azonnal ajánlott azonnali vírusellenes terápiát kezdeni a folyamat progressziójának lassítása érdekében. A hepatitis B-vel ellentétben a hepatitis C-re nincs komplett gyógymód; a betegség csak látens szakaszba kerül, és lassabban indul. A máj veresége elkerülhetetlen. A folyamat utolsó szakaszában, amikor a máj már nem képes megbirkózni a funkciójával, szükség lehet átültetésre.

A kezelést elsősorban két gyógyszerrel - interferonnal és ribavirinnel végzik.

Hatékonyságuk a májsejtek elváltozásainak lelassításában bizonyított. Időközben infúziós terápiát kell alkalmazni a máj munkájának megkönnyítése érdekében.

Minden olyan beteg, aki a vérben lévő vírusrészecskék számának növekedését látta, feltétlenül a hepatológus számláján van. Évente több alkalommal ajánlott megelőző vizsgálatot végezni a folyamat előrehaladásának és a transzplantációra utaló jelek időben történő kimutatásának meghatározására. Ezen kívül használhatsz és májvédőket is, bár az orvosok véleménye némiképp eltér. Egyesek úgy vélik, hogy ezek a gyógyszerek leállíthatják a folyamatot, és megóvhatják a nem gyógyult májsejteket; Mások meg vannak győződve arról, hogy nincs értelme elfogadni őket, és hogy intenzív antivirális terápiát kell végrehajtani.

Így a hepatitis C a betegségek kategóriájába tartozik, amelynek észlelése nehézségeket okoz. A diagnosztikai módszerek javítása, valamint az időben történő megelőző vizsgálatok csökkenti a betegség előfordulását. Fontos a betegség megelőzése is. Óvatosan kerülni kell a vérrel való érintkezést, és meg kell tagadni a kábítószert, csak akkor, ha ez a betegség megszűnik. A megelőzésben és a kezelésben a páciens tudatos hozzáállása az egészségéhez.

Ptsr nem észlelt hepatitiset

A hepatitis C-re vonatkozó PCR analízise intravénás vérmintavétel a hepatitis RNS vírus genetikai szinten történő meghatározása céljából. A neve a kutatási módszerből származott.

A PCR egy polimeráz láncreakció, amelynek segítségével meghatározzuk a hepatitis C jelenlétét a vérszérumban, és az eredmény pozitív és negatív lehet.

A PCR módszer előnyei

Ez a diagnosztikai módszer a következő előnyökkel jár:

  1. A PCR módszer lehetővé teszi a következő eredmények meghatározását:
    • RNS vírus jelenléte;
    • a radioaktív sugárzás mértékét;
    • kezdeti genetikai információ;
    • a genetikai adatok egyediségét és egyediségét.
  2. Bármely szükséges klinikai anyag használható:
    • vér;
    • plazma;
    • vizelet;
    • biológiai folyadékok és váladék;
    • váladék és mások.
  3. Lehetővé teszi a vérben egynél több mikroorganizmus meghatározását, más mintákkal ellentétben.
  4. Az eredmény 24 órán belül.
  5. Az analízis tárolásának és továbbításának egyszerűsített módszereit, a kórokozókat még halott környezetben is meghatározzák.
  6. A PCR egyedülállósága lehetővé teszi olyan mikroorganizmusok kimutatását, amelyek nem engednek más mintának.
  7. A reagensek nagyfokú érzékenysége, a teszt a legpontosabb a maga nemében.

A PCR minőségi analízisének jellemzői

Minőségi vizsgálatot végeznek a vírus vérben való jelenlétének megállapítására és negatív vagy pozitív eredmény elérésére.

Az ilyen típusú diagnózisra utaló jel a hepatitis C elleni antitestek kimutatása a páciens testében.

Lehetséges kimenetelek:

  • észlelt (pozitív);
  • nem észlelt (negatív).

A kvalitatív vizsgálat nem alkalmas olyan betegeknél, akiknél a vírus nagyon alacsony a vérben, ezért bizonyos érzékenységgel rendelkezik.

A hepatitis C vírus kimutatására néhány héttel a szervezet fertőzését követően, még akkor is, ha nincsenek ilyen kórokozó elleni antitestek. Ez az eredmény azt jelzi, hogy a hepatitis C-re jellemző RNS fragmentum jelen van a szervezetben és egy vérmintát.

A páciens az adott vírussal fertőzöttnek tekintendő, és a kórokozó sejtek további terjedése a szervezetben történik.

Az eredmény "nem található"

Ez a változat azt jelzi, hogy a hepatitis C-re specifikus RNS-fragmentumok nem állnak rendelkezésre a biológiai anyag mintájában, ez negatív eredmény.

A teszt érzékenysége nem teszi lehetővé az RNS-fragmensek alacsony tartalmának feltárását, így az "nem detektált" eredmény nem mindig elfogadható.

Az eredmények értelmezésének jellemzői

Az eredmények értelmezésének fő jellemzője a PCR módszer érzékenységi küszöbe.

Az alábbi mutatóktól függ:

  • a vizsgálat pontossága;
  • a használt berendezés típusát és minőségét.

Megjegyezzük, hogy az érzékenység 10-500 NE / ml-en belül változhat. Ebből következik, hogy ha a vírus a vizsgált beteg testében 10 NE / ml-nél kisebb koncentrációban van jelen, a teszt az "nem detektált" eredményt jeleníti meg. De ez nem jelenti azt, hogy a kórokozó teljesen hiányzik.

Diagnosztikai rendszerek változatai

Jelenleg különböznek a diagnosztikai rendszerek következő verziói:

  1. Ha a vértestvérrel végzett vérmintát veszik a páciensből, a diagnosztikai rendszereket legalább 50 NE / ml érzékenységgel kell alkalmazni. Ebből a célból a következő elemzőket használják:
    • Cobas Ampicolor HCV-teszt;
    • A HCV RealBest RNS-je.
  2. A "hepatitis C" végleges diagnózisának feltárásához az RNS-vírust fel kell ismerni a biológiai anyag három különböző kerítésében. Ezeket az ajánlásokat az Egészségügyi Világszervezet fejlesztette ki. Ha a teljes háromszoros negatív, akkor a diagnózist nem erősítették meg.
  3. Jelen pillanatban a PCR módszer mellett pontosabb teszt is létezik, amelyet TMA-nak neveznek (transzkripciós amplifikációs módszer). Az érzékenység küszöbértéke sokkal magasabb, mint más diagnosztikai módszereknél.

A vírusok észlelt módosításainak hatóköre

A genetika fejlődésének ezen szakaszában a vírusok módosításának számos típusa és változata ismeretes.

A hazai laboratóriumi diagnosztika 100% -os pontossággal meghatározhatja a következő genotípusokat:

A PCR kvantitatív analízisének jellemzői

A mennyiségi elemzés a hepatitis C vírus emberi testben történő meghatározását jelenti. A vizsgálat során az RNS-t és a kiindulási anyag vírusterhelését PCR-vel határozzuk meg. Egyébként elmondható, hogy a teszt lehetővé teszi számunkra, hogy meghatározzuk, hány virális sejt van a biológiai folyadékban. Ehhez a vizsgálathoz csak vénás vért alkalmaznak. A teszthez nincs külön előkészület.

A mennyiségi elemzés lehetővé teszi, hogy figyelemmel kísérje a már megkezdett kezelést, és értékelje annak hatékonyságát. Az értékeléshez vegye be a vizsgálati adatokat a terápia előtt és alatt. A kapott eredmények segítségével meg lehet állapítani a betegség lefolyását.

Ha a kiválasztott kezelés módja 3 hónap után sikeres, az RNS mennyiségének többszörösére kell csökkennie. Az ajánlások szerint a mennyiségi elemzést egy, majd három és hat hónappal később hajtják végre. A sikeres kezelés utolsó eredményének negatívnak kell lennie.

Kvantitatív PCR-vizsgálat eredményeinek értékelése

Hazánkban két lehetőség van a kvantitatív PCR-vizsgálat eredményének értékelésére:

  • a biológiai folyadék milliliterenként másolatok száma;
  • a nemzetközi egységek száma milliliterenként.

A nemzetközi egységek beszerzéséhez a másolatok számát négyszer osztja el.

2 stressz vagy viremia van:

  • magas, 800 000 NE / ml feletti PCR-rel;
  • alacsony, 400 000 NE / ml alatti PCR-rel.

A kvantitatív teszt eredménye két lehetőséget kínál:

  • "A mérési tartomány alatt";
  • "Nem észlelt" (negatív).

Pontszám: "a mérési tartomány alatt"

Ez a következtetés akkor jön létre, amikor a kvantitatív RNS-teszt nem érzékeli a hepatitis C okozó ágens sejtjeit a forrásanyagban, de a vírus még mindig jelen van a vérben. A vizsgálat megbízhatóságát kvalitatív módszerrel igazolják, mivel a mennyiségi teszt érzékenységi küszöbe nem képes kimutatni a kórokozó kicsi értékeit és koncentrációját.

Értékelés: "nem található"

Ezt a következtetést akkor kell megtenni, amikor a diagnózis során a kiindulási anyagban nem észleltek HCV RNS-vírusokat, ez negatív eredmény.

A kvantitatív PCR-vizsgálat eredményeinek értelmezése

A vírus terhelésindikátor segítségével meghatározhatja:

  • a betegség elhanyagolásának mértéke;
  • mennyire fertőző a beteg;
  • az antivirális terápia hatékonyságát.

Minél magasabb a hepatitis C vírus indexe a szervezetben, annál veszélyesebb a beteg a környező emberek számára, és annál fokozatosabb a betegsége.

A hepatitis C-re vonatkozó PCR a diagnózis fontos módszere, különösen a terápiás folyamatban. A kapott negatív vagy pozitív eredményeknek köszönhetően lehetőség van hatékonyságuk értékelésére, a beteg teljes gyógyítására vagy a kezelés időtartamának lerövidítésére.

szerző: Petrunina Svetlana Sergeevna,
nővér intenzív osztály,
specializáció-akut mérgezés, újraélesztés,
különösen a moizhivot.ru

Hasznos videó a polimeráz láncreakcióról

Gasztroenterológusok a városban

Város kiválasztása:

A polimeráz láncreakció kvalitatív elemzése - a hepatitis C-re vonatkozó PCR meghatározza a HCV jelenlétét vagy hiányát a szervezetben. A laboratóriumban megvizsgálják az RNS szerkezetét, amelyben a vírus található. Ha a C-vírus kimutatható, szükségessé válik a kezelés folyamata, mivel az elhanyagolt májbetegség komoly következményekkel jár. A kinyerés után kvalitatív PCR-t végzünk, hogy megerősítsük az antitestek hiányát. Kinevezett és megelőző vizsgálat. A vér kórokozója alacsony koncentrációban a PCR (kvalitatív) nem képes észlelni semmit, mert a diagnosztikai rendszernek érzékenységi küszöbe van. A betegség kezdeti szakaszában vagy enyhe formában a PCR-t végül ultrahangos berendezéssel diagnosztizálják.

Mi az RNS vírus?

A hepatitis C vírus (vagy a hepatitis C vírus RNS) RNS-ről nevezik magát májbetegségnek. A C vírus egy egészséges sejthez kötődik, és behatol. Idővel elterjedt az egész testben, csak a vérbe jut. Ennek eredményeképpen a kórokozó behatol a májba, megolvasztja sejtjeit és keményen dolgozik. A májsejtek (hepatociták) a hatása alatt, változásokon át, és ebből a veszteségből dolgoznak. Minél hosszabb a C vírus a májban, annál több sejt hal meg. Idővel veszélyes betegségek alakulnak ki, amelyek rosszindulatú degenerációhoz és halálhoz vezetnek.

A máj fertőzése ilyen típusú vírussal semmilyen módon nem nyilvánulhat meg külsőleg. Sok éven át vagy több tucat évig a fertőzött személy egészségesnek érzi magát, és csak egy véletlen vizsgálat leggyakrabban patológiát tár fel. A hepatitis vérének adományozásakor az emberi gén (DNS) részét képező RNS (ribonukleinsav) lánc egy részét vizsgáljuk. A laboratóriumi kutatások eredményeit nem szabad az öngyógyításra használni, mert ez csak indikátor. Az orvos meghatározza a pontos képet és további diagnózist.

Ha kész: a tanulmány tanúsága

A HCV megerősítésére PCR-analízist (polimeráz láncreakció) rendelünk. A PCR vizsgálatok segítenek megtalálni a kórokozó anyagot az RNS szerkezetében, és hatékony terápiát írnak le. A következő esetekben kinevezett:

  • a májgyulladás jeleinek azonosítása;
  • megelőző szűrővizsgálatok;
  • kapcsolattartó személyek vizsgálata;
  • a vegyes eredetű hepatitis diagnózisa (a fő kórokozó meghatározása);
  • A vírus szaporodásának aktivitási szintjének meghatározása krónikus formában;
  • a máj cirrhosis;
  • hogy meghatározzák az előírt kezelés hatékonyságát.

A PCR-vizsgálatokat orvos határozza meg a hepatitis kezelésének hatékonyságának meghatározására.

A PCR minőségi és mennyiségi analízise is van. A kvantitatív PCR mutatja az RNS százalékát a vírus hordozóival a vérben, és a minőségi PCR vírus jelenlétét vagy hiányát jelzi. A minőségi pozitív mutató (a hepatitis C RNS jelenléte) szintén kvantitatív vizsgálatot igényel. A hepatitis C kórokozójának magas koncentrációja az átvitel kockázatával jár együtt, azaz mások fertőzésével. Az alacsony mennyiségeket jobban kezelik. A vérben található RNS vírusok mennyisége nem kapcsolódik a betegség intenzitásához. A PCR-analízist az interferon terápia esetében is végezzük, annak érdekében, hogy meghatározzuk a kezelés folyamatának időtartamát és összetettségét.

A hepatitis C minőségi PCR analízisének jellemzői

A polimeráz-láncreakció-indexhez kvalitatív analízist rendelünk minden olyan beteghez, akik vércukorszint-ellenes antitesttel rendelkeznek, és akik visszanyerték és gyógyultak, újra kell vizsgálni. Javasoljuk, hogy a vizsgálatot elvégezni a hepatitis B és, majd abban az esetben pozitív következtetés, és a hepatitis D. minőségileg is analizáltuk reakatsiya kell elvégezni együtt más vérvizsgálat. Az elemzések teljes képet adnak a vírus terjedésének.

A vizsgálati eredmények közül csak pozitív, hepatitis C vagy negatív teszt, azaz a vírus jelenléte vagy hiánya látható. Ha a következtetést "észlelik", akkor a vírus aktívan cselekszik és folytatja tevékenységét. A "nem található" megnevezés azt jelzi, hogy nincs vírus vagy kis mennyisége. Ezzel a mutatóval figyelembe kell venni azt a tényt, hogy a diagnosztikai rendszerek analitikai érzékenysége eltérő, és az RNS hepatitis C még mindig a vérben maradhat, de nem mutatható ki az elemzésben.

A PCR ultra-hepatitis C különösen érzékeny módszere még kis mennyiségben is feltárul. Egy hibridizációs-fluoreszcens vizsgálatot alkalmaznak, amely sokszor magasabb, mint a standard PCR rendszerek. A módszert több esetben használják:

  • a hepatitis C gyanús rejtett formái;
  • A PCR diagnózisát a kórokozó nem igazolta, de vannak antitestek;
  • visszanyerés esetén;
  • hogy azonosítsa a fertőzés korai szakaszát.

Az elemzés magyarázata

A hepatitis C vírus RNS meghatározása polimeráz láncreakcióval.

A diagnózis végső döntését a HCV PCR dekódolásának hatása befolyásolja, különösen az ultramethod módszerrel. Ennek a kutatásnak a fő hátránya a minta és az anyagok steril körülmények közötti szigorú betartása. A kis eltérés néha az elemző pontatlan következtetéseit mutatja, bonyolítja a diagnózist és a későbbi kezelést. A PCR analízise a hepatitis vírus RNS meghatározására nem mindig mutatja a betegség képét bizalommal, néha pontatlanságok is be vannak engedve, mindkét irányban.

A hepatitisz-vírus diagnosztizálására ajánlott átfogó vizsgálatot alkalmazni.

A mutatók normája

A vírusos hepatitis C-ben található RNS-sel szembeni JgM antitestek hiányát a polimeráz láncreakció analízisének tekintik. Ugyanakkor a szerológiai analízis eredményei azt mutatják, hogy a C-vírus antitestjei jelen vannak, és ez a norma határain belül is fennáll. A minőségi meghatározás nem mutatja a betegség intenzitását, csak a hepatitis C okozó ágensét mutatja az RNS-ben. Az ilyen elemzést a kezelés után meg kell ismételni a tényleges gyógyulás megerősítése érdekében.

eltérések

Ha a HCV RNS-nek megfelelő JgM ellenanyagok vannak jelen, ez egy fejlődő fertőzésre utal. A betegség akut vagy krónikus, különböző szakaszokban manifesztálódik. Ha az antitestek számának csökkenését rögzítik, az elemzés a kezelés során elért eredmények elérését jelzi. Rendkívül ritkán előfordulnak a hamis pozitív eredmények a diagnózisban. A nőknél a terhesség alatt és más fertőző betegségekben szenvedőknél fordulnak elő.

Minőségi analízis a hepatitis C esetében

Hagy egy válasz

A polimeráz láncreakció kvalitatív elemzése - a hepatitis C-re vonatkozó PCR meghatározza a HCV jelenlétét vagy hiányát a szervezetben. A laboratóriumban megvizsgálják az RNS szerkezetét, amelyben a vírus található. Ha a C-vírus kimutatható, szükségessé válik a kezelés folyamata, mivel az elhanyagolt májbetegség komoly következményekkel jár. A kinyerés után kvalitatív PCR-t végzünk, hogy megerősítsük az antitestek hiányát. Kinevezett és megelőző vizsgálat. A vér kórokozója alacsony koncentrációban a PCR (kvalitatív) nem képes észlelni semmit, mert a diagnosztikai rendszernek érzékenységi küszöbe van. A betegség kezdeti szakaszában vagy enyhe formában a PCR-t végül ultrahangos berendezéssel diagnosztizálják.

Mi az RNS vírus?

A hepatitis C vírus (vagy a hepatitis C vírus RNS) RNS-ről nevezik magát májbetegségnek. A C vírus egy egészséges sejthez kötődik, és behatol. Idővel elterjedt az egész testben, csak a vérbe jut. Ennek eredményeképpen a kórokozó behatol a májba, megolvasztja sejtjeit és keményen dolgozik. A májsejtek (hepatociták) a hatása alatt, változásokon át, és ebből a veszteségből dolgoznak. Minél hosszabb a C vírus a májban, annál több sejt hal meg. Idővel veszélyes betegségek alakulnak ki, amelyek rosszindulatú degenerációhoz és halálhoz vezetnek.

A máj fertőzése ilyen típusú vírussal semmilyen módon nem nyilvánulhat meg külsőleg. Sok éven át vagy több tucat évig a fertőzött személy egészségesnek érzi magát, és csak egy véletlen vizsgálat leggyakrabban patológiát tár fel. A hepatitis vérének adományozásakor az emberi gén (DNS) részét képező RNS (ribonukleinsav) lánc egy részét vizsgáljuk. A laboratóriumi kutatások eredményeit nem szabad az öngyógyításra használni, mert ez csak indikátor. Az orvos meghatározza a pontos képet és további diagnózist.

Ha kész: a tanulmány tanúsága

A HCV megerősítésére PCR-analízist (polimeráz láncreakció) rendelünk. A PCR vizsgálatok segítenek megtalálni a kórokozó anyagot az RNS szerkezetében, és hatékony terápiát írnak le. A következő esetekben kinevezett:

  • a májgyulladás jeleinek azonosítása;
  • megelőző szűrővizsgálatok;
  • kapcsolattartó személyek vizsgálata;
  • a vegyes eredetű hepatitis diagnózisa (a fő kórokozó meghatározása);
  • A vírus szaporodásának aktivitási szintjének meghatározása krónikus formában;
  • a máj cirrhosis;
  • hogy meghatározzák az előírt kezelés hatékonyságát.
A PCR-vizsgálatokat orvos határozza meg a hepatitis kezelésének hatékonyságának meghatározására.

A PCR minőségi és mennyiségi analízise is van. A kvantitatív PCR mutatja az RNS százalékát a vírus hordozóival a vérben, és a minőségi PCR vírus jelenlétét vagy hiányát jelzi. A minőségi pozitív mutató (a hepatitis C RNS jelenléte) szintén kvantitatív vizsgálatot igényel. A hepatitis C kórokozójának magas koncentrációja az átvitel kockázatával jár együtt, azaz mások fertőzésével. Az alacsony mennyiségeket jobban kezelik. A vérben található RNS vírusok mennyisége nem kapcsolódik a betegség intenzitásához. A PCR-analízist az interferon terápia esetében is végezzük, annak érdekében, hogy meghatározzuk a kezelés folyamatának időtartamát és összetettségét.

A hepatitis C minőségi PCR analízisének jellemzői

A polimeráz-láncreakció-indexhez kvalitatív analízist rendelünk minden olyan beteghez, akik vércukorszint-ellenes antitesttel rendelkeznek, és akik visszanyerték és gyógyultak, újra kell vizsgálni. Javasoljuk, hogy a vizsgálatot elvégezni a hepatitis B és, majd abban az esetben pozitív következtetés, és a hepatitis D. minőségileg is analizáltuk reakatsiya kell elvégezni együtt más vérvizsgálat. Az elemzések teljes képet adnak a vírus terjedésének.

A vizsgálati eredmények közül csak pozitív, hepatitis C vagy negatív teszt, azaz a vírus jelenléte vagy hiánya látható. Ha a következtetést "észlelik", akkor a vírus aktívan cselekszik és folytatja tevékenységét. A "nem található" megnevezés azt jelzi, hogy nincs vírus vagy kis mennyisége. Ezzel a mutatóval figyelembe kell venni azt a tényt, hogy a diagnosztikai rendszerek analitikai érzékenysége eltérő, és az RNS hepatitis C még mindig a vérben maradhat, de nem mutatható ki az elemzésben.

A PCR ultra-hepatitis C különösen érzékeny módszere még kis mennyiségben is feltárul. Egy hibridizációs-fluoreszcens vizsgálatot alkalmaznak, amely sokszor magasabb, mint a standard PCR rendszerek. A módszert több esetben használják:

  • a hepatitis C gyanús rejtett formái;
  • A PCR diagnózisát a kórokozó nem igazolta, de vannak antitestek;
  • visszanyerés esetén;
  • hogy azonosítsa a fertőzés korai szakaszát.
Vissza a tartalomhoz

Az elemzés magyarázata

A diagnózis végső döntését a HCV PCR dekódolásának hatása befolyásolja, különösen az ultramethod módszerrel. Ennek a kutatásnak a fő hátránya a minta és az anyagok steril körülmények közötti szigorú betartása. A kis eltérés néha az elemző pontatlan következtetéseit mutatja, bonyolítja a diagnózist és a későbbi kezelést. A PCR analízise a hepatitis vírus RNS meghatározására nem mindig mutatja a betegség képét bizalommal, néha pontatlanságok is be vannak engedve, mindkét irányban.

A hepatitisz-vírus diagnosztizálására ajánlott átfogó vizsgálatot alkalmazni.

A mutatók normája

A vírusos hepatitis C-ben található RNS-sel szembeni JgM antitestek hiányát a polimeráz láncreakció analízisének tekintik. Ugyanakkor a szerológiai analízis eredményei azt mutatják, hogy a C-vírus antitestjei jelen vannak, és ez a norma határain belül is fennáll. A minőségi meghatározás nem mutatja a betegség intenzitását, csak a hepatitis C okozó ágensét mutatja az RNS-ben. Az ilyen elemzést a kezelés után meg kell ismételni a tényleges gyógyulás megerősítése érdekében.

eltérések

Ha a HCV RNS-nek megfelelő JgM ellenanyagok vannak jelen, ez egy fejlődő fertőzésre utal. A betegség akut vagy krónikus, különböző szakaszokban manifesztálódik. Ha az antitestek számának csökkenését rögzítik, az elemzés a kezelés során elért eredmények elérését jelzi. Rendkívül ritkán előfordulnak a hamis pozitív eredmények a diagnózisban. A nőknél a terhesség alatt és más fertőző betegségekben szenvedőknél fordulnak elő.

PCR-vizsgálat a hepatitis C-re: típusok, indikációk, átirat

A vírusos hepatitis C súlyos betegség, amely májkárosodással jár. A betegek nyolcvan százalékában krónikus formában jár. A vírus szaporodik a májsejtekben - májsejtekben - és halálát okozza. A halott szövetet kötőszöveti foci váltja fel, a fibrózis kialakul.

A fejlesztés a máj fibrózis képtelen ellátni a funkcióját, kezdődik cirrhosis, ami veszélyes szövődményei: egyre nagyobb nyomás nehezedik a kapuvénában, gyomor-bélrendszeri vérzés, károsodott véralvadás mentális változások miatt kárt agyi magok mérgező termékeket.

A betegség oka a Flaviviridae családból származó vírusfertőzés, amely RNS-vírus egy típusa. Ez azt jelenti, hogy a genetikai anyag, amellyel a patogén fehérjéit szintetizálják, egy ribonukleinsav molekulában kódoljuk. A fertőzés a vérben, szexuális úton történik, és terhes nőtől a magzatig. Sajnos a fertőzés és az antitestek termelésének kezdete meglehetősen nagy mennyiségű időtartamot eredményezhet - két hétről hat hónapra. Ez nem teszi lehetővé a fertőzés meghatározását az enzim immunvizsgálat módszerével és a kezdeti kezelést a korai stádiumban.

Mi a PCR elemzés?

A PCR molekuláris analízis olyan módszere, amely lehetővé teszi a kórokozó genetikai anyagának kimutatását a fertőzés utáni első héten polimeráz láncreakcióval. A tanulmány nagyfokú specifitást, pontosságot és nem csak a vírus jelenlétének vagy hiányának meghatározását, hanem koncentrációját és genotípusát is meghatározza.

A vizsgálat elvégzéséhez vegye be a páciens vérét, amelyben potenciálisan megtalálható a vírus RNS-je. A vérben a primereket hozzáadjuk mesterségesen szintetizált részecskékhez, a kívánt gén kis hossza, és az RNS polimeráz egy speciális enzim, amely sokszorozza a kórokozó genetikai anyagának mennyiségét. Egy speciális berendezés segítségével több fűtési és hűtési ciklust hajtanak végre. Az anyagot ezután elemezzük és összehasonlítjuk az ismert vírusgénekkel, amelyek alapján következtetés születik a fertőzés jelenlétéről vagy hiányáról.

A hepatitis C PCR analízis típusai

A PCR-elemzés három típusa létezik:

  1. Minõségi PCR analízis. A tanulmány első szakasza. Lehetővé teszi a vírus genetikai anyagának azonosítását a vérben.

  • PCR mennyiségi elemzése. Lehetővé teszi a vírus terhelésének meghatározását - a patogén genetikai anyagának koncentrációját egy milliliter vérben. Ezt a vizsgálatot a terápia megkezdése előtt végezzük, majd az első, negyedik, tizenkettedik és (ha a tanfolyam hosszú) a kezelés huszonnegyedik hete annak hatékonyságának értékelésére.

  • genotipizáláshoz. A hepatitis C kórokozója gyakran és gyorsan mutál. A bolygón a vírus genotípusának hét variánsát találtam. Oroszországban az első, a második és a harmadik típus gyakori. A genotípusok mindegyike eltérő terápiás ellenállással rendelkezik, például az első típusú kezelés hatékonysága hatvan százalék, a második és a harmadik pedig nyolcvanöt. Ezért megfelelő gyógyszerek kiválasztása és megfelelő időtartamú kezelési eljárás meghatározása érdekében pontosan meg kell határozni, hogy a beteg milyen típusú vírussal fertőzött.
  • Javallatok a hepatitis C PCR analízishez

    PCR-vizsgálatot írnak elő a következő esetekben:

    • érintkezés egy beteg emberrel, ami fertőzéshez vezethet;
    • pozitív enzimkapcsolt immunvizsgálat;
    • a májcirrózis jelei: a májméret megváltozása, a megnagyobbodott lép, a szubkután vénás plexus megjelenése a hasra;
    • a májkárosodás tüneteinek megjelenése: fájdalom a hasüreg jobb oldalán, a bőr sárgulása;
    • az ALT és az AST fokozott aktivitása a biokémiai vérvizsgálatban;
    • a kezelés megkezdése előtt a vírusterhelés meghatározására;
    • az antivirális terápia hatékonyságának monitorozása;
    • a kezelés befejezése után a relapszus nyomon követése;
    • a diagnosztizált hepatitisz B jelenlétében, kizárva a vegyes májkárosodást.

    A hepatitis C PCR-vizsgálat dekódolása

    A hepatitis C-re vonatkozó PCR-analízis és enzim immunvizsgálat dekódolását egy hepatológus vagy fertőző betegség szakembernek kell foglalkoznia. A PCR eredményeinek elemzése biokémiai vérvizsgálattal, biopsziával és ultrahanggal kombinálva szükséges. Csak szakképzett orvos képes lesz elemezni a vizsgálatok eredményeit, és ezek alapján meghatározza a megfelelő kezelést.

    Minőségi elemzés dekódolása.

    A kórokozó genetikai anyagát az elemzett biológiai anyag tartalmazza. A fertőzés megerősítést nyert.

    Nincs fertőzés, vagy a patogén RNS mennyisége az érzékenységi határ alatt van.

    Kvantitatív elemzés dekódolása.

    Egészséges emberek számára normális szám. Ez azt jelenti, hogy nincs a hepatitis C RNS a vizsgálati anyagban, vagy koncentrációja a vizsgálat érzékenységi küszöb alatt van.

    Az RNS koncentrációja a mennyiségi tartomány alatt van. Az ilyen eredményeket nagyon óvatosan értelmezik, korrelálják más tanulmányok adataival, gyakran végeznek egy második vizsgálatot.

    A vírusterhelés szintje egy adott koncentrációban alacsony. Általában a vírus mennyiségének csökkenése azt jelenti, hogy a kezelés sikeres.

    Több mint 8 * 10 ^ 5 NE / ml

    A vírusterhelés szintje egy adott koncentrációban magasnak tekinthető.

    Több mint 2,4 * 10 ^ 7 NE / ml

    Az RNS mennyisége meghaladja a számszerűsítés tartományának felső határát. Lehetséges következtetéseket levonni a vírusterhelés mértéke miatt. Általában ilyen esetekben a tesztet megismétlik a vérminta hígításával.

    A genotipizálás dekódolása.

    Egy adott genotípus RNS-ét detektáltuk

    A biomateriában a hepatitisz C vírust kimutatják egy adott genotípus és altípus. Az eredmény latin számokkal és latin betűkkel van kódolva, például - 1a, 2b. Jelenleg hét genotípus és hatvanhét altípus van, de Oroszországban csak három első típus van.

    Hepatitis C vírus RNS-t detektáltunk

    A vérben az RNS egy ritka genotípust talál Oroszország számára, amely nem tulajdonítható az első, második vagy harmadik típusnak. Több kutatásra van szükség.

    Ez az eredmény azt jelzi, hogy a beteg egészséges vagy a kórokozó RNS szintje túl kicsi.

    Lehetséges a helyzet, ha a hepatitis C PCR-analízise negatív, és az enzim immunvizsgálat kimutatja a vírus ellenes antitesteket. Ez azt jelenti, hogy a beteg acut formában hepatitis C-t kapott és meggyógyult. Körülbelül húsz fertőzés esedékessé teszi a spontán gyógyulást, ha a páciens testének elegendő rezisztenciája van a fertőzésre.

    Annak ellenére, hogy a PCR nagyon pontos elemzés, annak eredménye az alábbi esetekben torzulhat:

    • a vért nem megfelelő körülmények között a laboratóriumba szállították, a hőmérsékleti rendszert megsértették;
    • a bioméret mintája szennyezett;
    • a vérben maradt nyomokban a heparin és más antikoagulánsok;
    • A vizsgált anyagban gátlók voltak - olyan anyagok, amelyek lassítják vagy leállítják a polimeráz láncreakciót.

    A PCR előnyei más módszerekkel szemben

    1. Diagnózis a korai szakaszban. A PCR detektálja a betegség kórokozójának genetikai anyagát. Az immunfluoreszcencia analízis segítségével csak immunglobulinokat lehet meghatározni, amelyeket a szervezet a fertőzésre adott válaszként termel. Hepatitis C fertőzés esetén a fertőzés és az immunválasz kialakulása között eltelt idő több hét és hónap lehet, mely időpontban az ELISA hatástalanná válik. A PCR már a fertőzés utáni első héten ad választ.

  • Alacsony hibalehetőség. A vizsgált anyagban meghatározzuk a genetikai anyagot, amely csak egyfajta kórokozóra jellemző. Ez lehetővé teszi a hamis eredmények kizárását. Az ELISA-val hibák léphetnek fel, mivel ugyanazok az antitestek felszabadulhatnak különböző vírusok ellen - ilyen antitesteket keresztreaktivitásnak neveznek.

  • Nagy érzékenység. A PCR a minimális mennyiségben is képes kimutatni a patogén RNS-ét. Ez lehetővé teszi a rejtett fertőzések azonosítását.
  • Hogyan készítsünk elő vérrátadást PCR kutatásra

    PCR analízis esetén a vénás vért gyűjtjük a hepatitis C-re. Általában két adag vért veszünk egyszerre a páciens vénájából: az első PCR-hez, a második az ELISA-hoz. Ez azért van így, hogy pontosabban felmérjük, mennyire rossz a páciensnek a vírussal fertőzött, és hogyan védekezik az immunitás.

    Általában az alábbi szabályok szükségesek a beteg számára:

    • reggel vérvizsgálatot végeznek;
    • az utolsó étkezés és a vérszállítás közötti szünetnek nyolc-tíz óra;
    • két vagy három nappal az elemzés előtt meg kell adni sült és zsíros ételeket, valamint alkoholt;
    • az elemzést megelőzően huszonnégy órával a betegnek kerülnie kell a fizikai erőfeszítést: ne hordjon súlyokat, ne vegyen részt edzőteremben vagy medencében.

    A ptsr-vel nem észlelt hepatitis

    A hepatitis C-vírus (HCV) a felelős körülbelül 20% az akut hepatitis, 60 és 70% a krónikus hepatitis, és körülbelül 30% a cirrhosis és a májrák. HCV, felfedezett 1989, egy RNS-vírus nemzetség flavivírus család Togaviridae, mérete 40-60 nm, túlnyomórészt lipidtartalom. Legalább hat genotípus és 50 HCV szerotípus van. A HCV genotípusának vagy szerotípusának (a genotípus specifikus antitestjeinek) ismerete ajánlott és kezelhető. HCV továbbítják való érintkezés útján fertőzött vérrel vagy vér szennyezett készítmények: vérátömlesztés, a tűk és fecskendők után egy másik személy, sterilizálás nélküli vagy rosszul sterilizált, tetoválás, oltás nem sterilizált gépek megosztás fogkefe borotválkozás kiegészítők, csipeszek, manikűr készlet. Biológiai folyadékokban (nyál, tej, hüvelyi váladék, sperma, stb), de alacsonyabb koncentrációban, mint a B vírus átvihető az anyáról a magzatra. A HCV-pozitív terhes nők esetében a vertikális átvitel szintje 2,7-4,4%. Ez a mutató elérte a 5,4-8,6% értéket a HCV-HIV fertőzéssel együtt szenvedő terhes nőknél. Az akut forma kb. 85% -a krónikus formába kerül. Hepatocelluláris rák is előfordulhat körülbelül 20% -ánál a májzsugorodás (medián, 30 év), és 1-5% -a HCV-vel fertőzött.


    A betegség kezdete titokban áll, a vírust időzített bombának vagy gyengéd gyilkosnak hívják. A HCV jelenlétének és az anti-HCV kimutatásának közötti szerológiai ablakok különböző betegekben változhatnak. Az aktuális immunológiai vizsgálatok antitesteket észlelnek, átlagosan 7-8 héttel a betegség kialakulása után. Spontán gyógyulás esetén az anti-HCV egész életében vagy fokozatosan csökkenhet, amíg eltűnik több éven keresztül. Krónikus fertőzésben szenvedő betegeknél az anti-HCV határozatlan időre megmarad. Az alacsonyabb kockázatú lakosság körében a diagnózishoz tartozó emberek száma 0,5-1%.


    Elemzés a HCV RNS-t (meghatározását HCV RNS), gyakran nevezik PCR analízise hepatitis C egy vérvizsgálat, amely lehetővé teszi, hogy azonosítsa a genetikai anyagot közvetlenül a hepatitis B vírus (mindegyik egy RNS-vírus részecske). Ezt a vizsgálatot leggyakrabban PCR végzi, ezért a hepatitis C-re vonatkozó PCR-név. A HCV RNS kvalitatív és kvantitatív analízise van.


    A kvalitatív analízis azt jelzi, hogy vírus van jelen a vérben. Ezt a vizsgálatot minden olyan betegnél végre kell hajtani, akiknek a hepatitis C ellenanyaga van. Eredménye kimutatható vagy nem detektálható. A referenciaértékeket (normál értéket) nem észlelték. A talált eredmény azt jelezheti, hogy a vírus szaporodik és fertőz minden új májsejtet. A minőségi PCR-teszt bizonyos érzékenységgel bír. Ez azt jelenti, hogy ha a vírus nagyon alacsony koncentrációban jelen van a vérben (a módszer érzékenységi küszöbértéke alatt), akkor nem lehet eredményt elérni. Ezért, ha minőségi PCR-t alkalmaznak alacsony viremia (vírus koncentrációja) esetén, pl. Antivirális kezelés alatt, fontos tudni a diagnosztikai rendszer érzékenységét. Az antivirális terápia során alkalmazott virológiai válasz szabályozásához kívánatos legalább 50 NE / ml érzékenységgel rendelkező diagnosztikai rendszert alkalmazni.

    Betegkészítés: A vér szállítása üres gyomorra

    anyaga: Vér plazma.

    Hepatitis C with

    Hello, korábban feltettem egy kérdést, de nem kaptam választ. segít a probléma megértésében; A 2010. november végén nem mutatható ki a második terhesség 35 hétig jött anti-HCV-pozitív, az orvos küldött PCR RNS vírus. Ekkor tettem a háttérben a cholestasis terhesség (viszkető láb és tenyér éjszaka, emelkedett ALT, AST, alkalikus foszfatáz.), A bőr nem fordult sárga, a széklet és vizelet norma. Az ursosan-indikátorok ivartalanodtak, a viszketés eltűnt. Azt mondták, hogy a születés után minden el fog telni. szülés után az összes mutató normális, és tk. RNS vírus-negatív, majd a kérdésemre senki sem jött vissza. 8 hónap múlva az anti-hcv-0.91 teszt nem reaktív. Erre nyugodtam. egy kis viszkető kéz és láb után megjelent 2 év és 4 hónap március 12-felső negyedében kellemetlenséget nagyon sprava- következtetést fgds- nagy nyombélfekély papilla Hazafias, nincs átjárás az epe a patkóbélbe 12. a vér bilirubin biokémiája 15-3, alt-14, ast-20, összesen. fehérje-70, húgysav-ta-293, karbamid 5,6, holest.-4,6, 59-AP, GGT-18, c-React. protein-2. Blood Sugar 4.2 Uzi hasüreget nélkül rendellenességek (anatomich. Kólsav hajlítása a nyaki gerinc). a hepatitis B és az A-negatív markerek, valamint az anti-hcv-28.51-reaktív. Március 25-től - a hepatitisz C vírus ptsr-rnk vizsgálatát nem észlelték (2 különböző laboratóriumban). Tegyük fel, hogy velem, és ha van a hepatitis C, ha az első alkalommal, mivel a antitestek (2,5 év) RNS-ét mutatjuk valaha? Segítség a válaszhoz, 2 kicsi gyermekem van.

    Egészséges vagy, nincs vírus a szervezetben, az ellenanyagok maradnak - ez az immun memória. Tisztelettel, hepatológus Stepanova TV

    Üdvözlet az orvosnak, köszönöm a választ! Mondja el, hogy a hepatitis antitestek elemzését kirajzolták, és ez azt jelenti, hogy a spektrum pozitív az antitest spektrumban, igG cor-posolban. igGns3-neg. igGNs4 és igGNs5-negatív. Éjszaka a fájdalom a jobb oldalon, mintha sétálna, aggódik, iszom hofitol, ursosan, a viszketés a láb és a tenyér kevesebb lett. és vajon ez a fájdalom a cholestasis és az edematous BDS súlyosbodásának hátterében áll-e és az epe áthaladásának hiánya? És milyen gyakran kell PCR-t venni a HCV vírus RNS-meghatározásának? Ha 2,4 évig soha nem észlelték? Az orvos azt mondja, miért indult az indexanti-hcv-0,91 és március -28,51-es év? Súgó, majd teljesen zavaros!

    Az antitestek száma folyamatosan ingadozik, nem játszik diagnosztikai szerepet. A legfontosabb az, hogy a vírus RNS hosszú ideje nem jelenik meg. A fájdalmat az Oddi izzadásgátló diszfunkciója okozza, helyesen veszi a kolagóga készítményeket. A vírus RNS-je nem tehető meg, ha nincs fertőzés lehetősége (műtét, fogorvos, manikűr, pedikűr). Tisztelettel: hepatológus Stepanova T.V.

    Üdvözlet az orvosnak, köszönöm a választ! Azt akartam tisztázni, hogy az RNS 2, 5 évig negatív lehet a vírus nagyon minimális mennyiségével (az érzékenység küszöbértéke nem olvassa fel). azaz a szervezetben van, vagy egyáltalán nem (ha az RNS nem található), és az ellenanyagok végül eltűnnek a szervezetből? Számomra a fertőzésgátló elmondta vagy elmondta, hogy 5 éve átadja a ptsr-t és az antitestek analízisét, ha eltűnnek, és a ptsr minden idõ negatív lesz - akkor a diagnózist eltávolítják. Ha az ellenanyag immun memória, akkor miután eltűnnek, és miért ingadozik a tartományuk?

    Senki sem tudja, hogy az antitestek idővel eltávoznak-e vagy sem. Nagyon sok ember van, akik ellenanyagok vannak a hepatitis C vírus ellen, és az RNS több mint 10 éve makacsul negatív, de egyáltalán nem vezetnek egészséges életmódhoz. Ez arra utal, hogy nincs vírus a szervezetben. Tisztelettel: Stepanova T, V. hepatológus

    Orvos aranyos segítség! Átadta a Hbs Ag-nem reaktív. a fertőző orvos azt mondta, hogy oltást kap a hepatitis B ellen, és átadja a HBeAg-ot és az anti-HBcor-t (IgM és IgG). Tegnap túljutott: HBeAg-0.047-nem reaktív, anti-HBcor (összesen) - 10,0-reaktív volt. A doktort a fentiekben ismertetjük a biokémia összes elemzésével. Mondd meg nekem. Tényleg kivéve a hepatitisz antitestjeit Annak ellenére, hogy beteg vagyok a hepatitis In-ben? Mi a következő lépés?

    Nem, te egészséges, de ez érthető a megvalósíthatósági hepatitis B elleni védőoltást, akkor át kell mennie egy vérvizsgálat antitestek a hepatitis B-vírus HBsAg Üdvözlettel hepatológiai Stepanova TV

    A webhely szerzője

    Stepanova Tatiana Vladimirovna orvos - Hepatológiai, gasztroenterológus, tüdőgyógyász, a terapeuta a magasabb kategóriájú, jelenleg tagja az EASL (Európai Szövetség a tanulmány a máj) egy nemzetközi szabvány bizonyítvány kutató GCP (helyes klinikai gyakorlat), alezredes orvosi szolgáltatás.

    1996-ban végzett a Saratov Állami Orvostudományi Egyetem Katonai Orvosi Karán. Ez küldtek a Juzsno-Sakhalinsk a vezető gyakornok Garrison Kórház, ahol a 7 évek óta szenvedő betegek kezelésében súlyos terápiás patológia: tüdőgyulladás, asztma, szívinfarktus, magas vérnyomás, gyomorfekély, hepatitis és cirrhosis a máj.

    2001-ben szakmai átképzésben részesült pulmonológia területén, 2003-ban - gasztroenterológiában, hepatológiában.

    2003-tól 2006-ig az Orosz Föderáció Honvédelmi Minisztériumának Orvosok Állandó Intézetében tanult klinikai rezidencián.

    2003 óta a gyakorlati tevékenység fő területe a gasztroenterológia, a hepatológia.

    2003 óta vesz részt a klinikai vizsgálatok lefolytatása az új gyógyszerek a betegek kezelése vírusos fertőzések hepatotropikus nemzetközi szabályok által GCP. Összesen 15 klinikai vizsgálatot végzett. Jelenleg élén egy klinikai vizsgálatban, biztonságosságát és hatásosságát egy új gyógyszer a hepatitis-B kezelésére 2009-ben az FDA bizottság értékelte a munkát a kutatási központ, ahol a vezető kutató az Tatyana Stepanova.

    2003 óta már a betegek kezelésére a vírusos hepatitis, ő felhalmozott hatalmas tapasztalat betegek kezelésére vírusellenes gyógyszereket. A probléma tökéletesen tudja a vírusos hepatitis kezelését betegek kísérő betegségek: cukorbetegség, magas vérnyomás, vesebetegség, bronchiális asztma, pikkelysömör, ízületi gyulladás, a HIV, a kábítószer-függőség, az alkoholizmus. Vírusellenes kezelést végez a kompenzált és dekompenzált májzsugorodásban szenvedő betegeknél. A májbetegségben szenvedő terhes nők kezelésében vesz részt.

    Hála a mély ismerete a terápia és ügyes kombinációja gyógyszerek fejlesztette kezelési betegek, akik elérték a hasznosítás csaknem 90% -át a felperesek betegek vírusos hepatitis. Terápiás tevékenysége során a bizonyítékokon alapuló orvoslás elveit használja. Ügyesen ellenőrzik a mellékhatásai antivirális szerek: vérlemezkék csökkentésében, leukociták, a depresszió, és egyéb feltételek, így szinte senki nem idő előtt megszűnik antivirális kezelést.

    Folyékonyan fejti ki a szúrás máj biopsziát. Több mint 300 biopsziát hajtott végre.

    2004 óta folyamatosan tanácsadóként dolgozik vezető hepatológiai helyszíneken. Több mint 20 000 kérdésre válaszolt a májbetegségről. Gyakran szakmai segítséget nyújt a hepatológiai betegek kezelésében hazánk különböző területein, külföldön és messze külföldön dolgozó munkatársaihoz.

    Tatyana Vladimirovna-t gyakran hívják népszerű orvosi televíziós műsorokba, mint szakértő orvos.

    Felelősség, kompetencia, magas szakmai színvonal jellemzi az orvosi tevékenységet.

    A személyes tulajdonságokról egy jellemző tény alapján lehet megítélni: a betegei soha nem mennek el egy másik orvoshoz.

    Egy cikk a Stepanova Tatyana Vladimirovna orvosról az "Orvos- és Egészségügy" című rész "Orvosi legjobb emberek" című enciklopédiájába került.


    Kapcsolódó Cikkek Hepatitis