Mi a PCR elemzés és a vírusterhelés?

Share Tweet Pin it

A polimeráz láncreakció (PCR) egy laboratóriumi módszer a DNS és RNS meghatározására. Az első alkalommal az amerikai Cary Mullis csaknem fél évszázaddal ezelőtt tesztelte. Ez a túlérzékenységi vizsgálat képes meghatározni a genom hordozóját a vérben, nyálban vagy bőrben található egyik forrásmolekulából.

A PCR-módszer nagyszerű kilátásokkal rendelkezik, nemcsak az orvostudományban, hanem a géntechnológiában és a kriminalisztika területén is. Segítségével klónokat hoznak létre és új típusú DNS-eket hoznak létre, meghatározzák a rokonság mértékét. A bűncselekményen talált epitéliumon bűncselekményt hozzon létre.

A hepatitis PCR elemzése - mi ez és miért csinálják?

Miért szükséges a PCR elemzés a hepatitis C gyanúja esetén, mi ez?

Hepatitis C vírus - Vírust tartalmazó RNS 6 genotípust és legfeljebb 500 altípust tartalmaz. A májgyulladás közül a vírusnak van a legmagasabb mutációs képessége, és leküzdeni az immunrendszer védő gátját. A hepatitis esetek összes számából a C-vírus okozta a krónikus esetek 70% -át és a májcukor és májrák 30% -át.

A módszer lényege: a vizsgált génnek a speciális enzimek és körülmények hatására történő kiváltására egy tesztcsőben van szükség. A PCR analízis lehetővé teszi a vírus törzsének meghatározását, amely nélkül nem lehet hatékony kezelést végrehajtani: minden genotípus másképpen érzékeny az antivirális szerekre. Kétféle PCR létezik:

A vírusellenes terápia folyamatos ellenőrzést igényel a kezelés megfelelő időben történő kijavítása érdekében, polimeráz láncreakciót is alkalmaznak erre a célra.

Minőségi és mennyiségi PCR

PCR kvalitatív a hepatitis C-re adott válasz: van-e a vírus C-törzse a beteg vérében, és melyik. A genotipizálás szükséges a betegség diagnózisának, prognózisának tisztázásához és a kezelés időzítésének meghatározásához.

Az elfogadott osztályozás szerint a gént egy szám jelöli, és az altípust egy kis latin betű jelöli.

A természetes anyagokon alapuló speciális gyógyszer

A gyógyszer ára

Visszajelzés a kezelésről

Az első eredmények egy hét múlva érkeznek

További információ a készítményről

Naponta egyszer, 3 cseppenként

Használati utasítások

A C vírus genotípusai táblázatának dekódolása:

  • Az 1a, 1b, 1c genotípus
  • 2a, 2b, 2c, 2d genotípus
  • A 3a, 3b, 3c, 3d, 3e, 3f genotípus
  • 4a, 4b, 4c, 4d, 4e, 4f, 4g, 4h, 4j, 4j genotípus
  • Genotípus 5 a
  • Genotípus 6 a

A leggyakoribb genotípusok 1,2,3. Oroszországban a vírus 1a, 1b, 2 és 3 törzsei.

Az 1b vírus genotípusa nehezebb kezelni, mint mások, 90% -ában krónikus formába juttat, amelyből 30% regenerálódik a máj daganatos vagy májzsugorodásaként.

A 2a és 3a genotípusok 33-50% -os fokú chronizációs fokkal reagálnak az antivirális terápiára.

A vírus jelenlétének igazolásakor a PCR-t számszerűsíteni kell a hepatitis C-re, amely kiszámítja az RNS-molekulák számát a beteg laboratóriumi mintájában.

Az elemzés magyarázata

Minőségi PCR az elemzésnek két válasza van:

PCR negatív azt jelenti, hogy a kórokozót a vérmintákban nem észlelik.
pozitív a válasz az ellenkezőjét sugallja: a vírus egyik vagy másik genotípusának RNS-je.

Az eredmény megbízhatóságának valószínűsége 95%. A fennmaradó 5% hiba az ember hibája miatt. Ez a lehetőség a kutatás elvégzésének magas követelményei miatt megengedett:

  • a reagensek tárolására vonatkozó szabályok;
  • az orvosi személyzet megfelelő képzettsége;
  • a bioméret tisztasága.

A PCR készlet 100% -os diagnosztikai pontossággal rendelkezik.

Kvantitatív PCR A hepatitis C RNS-je lehetővé teszi a vírus terhelésének meghatározását a páciens testén. Használata:

  • a betegség állapota (akut, krónikus);
  • meghatározzák az antivirális kezelés hatékonyságát;
  • a májbiopszia szükségességét tisztázzák.

Bizonyos esetekben a beteg nem érez semmi jelét a betegségről, míg a PCR módszere HCV-fertőzést mutat. Ez azt jelenti, hogy a betegség a fejlődés korai szakaszában vagy krónikus formában van. A diagnózis tisztázása érdekében több kutatásra van szükség a vírusellenes kezelés lehető legrövidebb időn belül történő elindításához.

Vírusterhelés a hepatitis C-ben

A vírus terhelés mutatja a máj vírus aktivitását, milyen mértékben aktív a reprodukciója.

Mi ez?

A mennyiségi hepatitis C PCR-t Nemzetközi Egységben mérjük ml / IU / ml-enként, ami azt jelenti, hogy a C-vírus egy adott törzsének ribonukleinsavának hány példányát 1 ml vizsgálati vérben találtuk.

Mi tekinthető magasnak, milyen alacsony?

A vírusterhelés elemzése lehetővé teszi a vírus RNS jelenlétét 50 NE / ml koncentrációban. A vírus terhelése normális - ebben az esetben nem mutatható ki egyetlen HCV RNS molekula sem PCR-rel.

Vírus terhelés táblázat:

  • alacsony koncentráció 600 NE / ml 3 * 104 NE / ml;
  • átlagos - koncentráció 3 * 104 NE / ml-től 8 * 105Mm-ig;
  • Magas - több mint 8 * 105 NE / ml.

Alacsony vírus terhelés - ez jelzi, hogy a terápiás kezelés helyesen van megválasztva, és a hepatitis C gyógyulásának prognózisa kedvező.

Nagy koncentrációjú vírusos sejtek azt jelzi, hogy a betegség akut fázisban van. A páciens vér veszélyes fertőzésforrás.

A vírusterhelés, amelynek mutatói átlagos szinten jellemzik a melegvíz krónikus szakaszát, vagy két fejlődési tendenciája lehet: növelni vagy csökkenteni.

A végén - 6 hónap alatt ellenőrzési PCR-t végzünk.

A PCR-diagnosztika költsége

A következő tünetek aggodalomra adhatnak okot:

  • általános gyengeség;
  • a bőrszín megváltozása, a szem sclera, a mentesítés;
  • hányinger;
  • csökkent étvágy;
  • fájdalom az izmokban és az ízületekben;
  • súlyos a jó hipokondriumban;
  • emelkedett AST és ALT vérszintje.

A fertőzött betegekkel való érintkezés során a preoperatív periódus alatt a hemodialízis vizsgálatra is ajánlott.

Az állami klinikák vérvizsgálatot végeznek a PCR ingyenesen, ha fertőzéses betegségre vagy hepatológushoz fordulnak.

A PCR-diagnosztikára fizetett szolgáltatások minden nagyobb orosz városban rendelkezésre állnak. A költség függ a teszt típusától, az elérhető berendezésektől, az időzítéstől és egyéb tényezőktől.

A kvalitatív PCR elemzés Moszkvában és Szentpéterváron 600 és 900 rubel között lesz. A régiókban - 300-800 rubel.

A hepatitis C virális terhelés meghatározása 17,000-22,000 rubel lesz. Egyéb fertőzéstípusok esetében a mennyiségi vizsgálat ára 1200-10000 rub.

A PCR módszer előnyei és hátrányai

Milyen előnyei vannak a polimeráz láncreakciónak más diagnosztikai módszerekkel szemben?

  1. Széleskörű alkalmazások. A PCR használatával szabványos berendezés segítségével bármilyen vírust azonosíthat.
  2. A kórokozó kimutatásának pontossága. Az enzimek és analitikai módszerek különböző kombinációi alkalmazásával a megjelölt fertőzés 100% -os specifikus vizsgálata valósul meg.
  3. Nagy érzékenység. A technika lehetővé teszi a vírus egy molekula jelenlétének kimutatását a vérben.
  4. hatékonyság. Minőségi elemzés készen áll néhány óra alatt, mennyiségi - két nap múlva.
  5. A vírus diagnózisa az inkubációs időszakban. A PCR-ben a kórokozót nem az antitestek jelenléte határozza meg, hanem akkor is, ha már létezik a szervezet immunválasztja, de a kóros folyamat kezdete előtt, ami megkönnyíti a kezelést.

A PCR hátrányai az előnyei:

  • A vizsgálat tisztasága a legmagasabb tisztaságot igényli, beleértve a levegőt a laboratóriumban, úgyhogy "idegen" DNS nem lép be a mintába;
  • magas személyzeti követelmények, a bioméret mintavételének és elemzésének elvégzése.

PCR diagnosztika használata

A polimeráz láncreakciót (PCR) a molekuláris biológiában a víruskeresés kísérleti módszerének nevezik. Lehetővé teszi a nukleinsav (DNS) bizonyos fragmenseinek koncentrációjának jelentős növelését a biológiai anyag mintáiban, ami lehetővé teszi számukra a felismerés és számlálást.

Az elemzés az alábbiak szerint történik. A genetikai anyagot (vérmintát), amely potenciálisan tartalmazhatja a kívánt gént, egy kémcsőbe kerül. Ezenkívül a primereket a kémiai úton szintetizáltuk a kívánt gén kis hosszán.

A DNS-hez vagy RNS-polimerázt is hozzáadják az edényhez, képes egy olyan nukleinsavláncot létrehozni, amely teljesen azonos az eredetivel. A kapott kompozícióba négy szabad nukleotidot, egy RNS-hez vagy DNS-hez speciális építőanyagot helyezünk, amelyek közül az egyik a foszfor radioaktív részecskéit tartalmazza.

A kapott elegyet 95-96 ° C-ra melegítjük, aminek következtében a szokásos állapotban összefonódott két DNS-helikát feloldjuk. Ezután a készítményt lehűtjük, ebben az időben a primerek a vírusgenom kívánt régiójához kötődnek anélkül, hogy az RNS (vagy DNS) kettős hélixet állítana elő ismét.

Hűtés közben a polimeráz egy nukleotidok szabad láncolatát keresi. Ennek az enzimnek a működéséhez egyetlen lánc nukleotidra van szükség. Mivel a polimeráz a DNS-szalag mentén csúszik (mint egy gyűrű egy kötélen), nem működhet kettős spirállal.

Ezután ismétlődő ciklusú melegítést végzünk, ami miatt a nukleotidláncokat elválasztjuk. Mindegyik PCR ciklus esetében a mintában lévő kívánt hepatitis gén mennyisége növekszik a geometriai progresszióban, és a genetikai anyag többi része lineárisan keletkezik.

A nukleotidmaradékok oldatának tisztítása és a DNS-szálak elektroforézissel történő molekulasúly-paraméterével történő elválasztása után könnyen meghatározható, hogy a kívánt gén létezik-e a vizsgálati mintában, vagy sem.

A PCR előnyei

A PCR módszerrel végzett laboratóriumi vizsgálat lehetővé teszi, hogy még több információt szerezzen, mint az RNS vírus jelenlétét. A radioaktív sugárzás szintjének meghatározásakor meghatározható, hogy a vizsgált mintában mely genetikai anyagot kezdetben tartalmaznak. Hepatitis esetén határozza meg a vírusterhelés szintjét.

Ennek a módszernek egy másik előnye a CR reakció nagyon nagy érzékenysége. Sokkal magasabb, mint a vírusok észlelésének klasszikus módszerei. Ideális esetben a kívánt gén azonosítása céljából csak egy mintában lévő vírus elegendő a PCR-hez.

Emellett a PCR teljesen specifikus. A primereket olyan módon hozták létre, hogy teljesen megfeleljenek a kívánt gének egyedülálló részeinek, amelyeknek nincs más szekvenciája. Mindkét ujjlenyomat egyedülálló, és minden génben egyedi nukleotidszekvenciák vannak.

Minõségi PCR analízis

A kvalitatív analízis csak a vírus jelenlétét mutatja a vérben. Ezt a vizsgálatot minden olyan betegnél el kell végezni, akikről kimutatták, hogy vérükben a hepatitis C elleni antitestek eredményei csak két érték közül választhatnak: "észleltek" vagy "nem észleltek". Egészséges ember esetében a normát (referenciaérték) "nem szabad észlelni".

Az elvégzett kvalitatív kutatás ilyen eredményeinek speciális értelmezése is van:

  • Az eredmény "felfedezett". Ez azt jelenti, hogy a mintában a biológiai anyagot hozott találtak egy olyan RNS-fragmens, amely specifikus a hepatitis C-vírus Következésképpen, ott van a tény, a beteg hepatitis B vírus fertőzés C. Ha az eredmény a kvalitatív PCR „felfedezte”, ez azt jelzi, hogy a vírus ismétlésben és ebben az időben új májsejteket fertőz meg a szervezetben.
  • Az eredmény "nem észlelhető". Az ilyen döntés azt jelzi, hogy a mintában a biológiai anyag kapott RNS-fragmentum nem mutatható ki a laboratóriumban, amely specifikus vagy HCV RNS azonos koncentrációban a patogén fertőzés a mintában határ alatt volt az a teszt érzékenységét.

A hepatitis C vírus RNS akut fázisában a PCR technikát alkalmazó kvalitatív vizsgálatok 1-2 hét után azonnal felfedezhetik a szervezet fertőzését, vagyis röviddel a hepatitis elleni antitestek megjelenését megelőzően.

Az ilyen vizsgálatok analízisének megbízhatatlan eredményei a következőkkel érhetők el:

  • szennyezett biomassza;
  • heparin jelenléte a beteg vérében;
  • a mintában lévő vegyi vagy fehérjeanyagok (inhibitorok) jelenléte, amelyek befolyásolják a PCR különböző komponenseit.

A PCR minőségi analíziséhez nem szükséges a beteg speciális preparálása a vizsgálat elvégzéséhez. A vénás vért anyagként használják.

Az eredmények értékelése

A kvalitatív PCR-tesztek bizonyos fokú érzékenységgel rendelkeznek, és a laboratóriumi pontosságtól és a laboratóriumi felszerelés mértékétől függően 10 és 500 NE / ml között változhatnak.

Ez azt jelenti, hogy ha a vírus a vérmintában nagyon alacsony koncentrációban van jelen (kevesebb, mint az adott laboratórium érzékenységi küszöbe), akkor a beteg páciensét "nem detektálják". Ennek következtében, ha minőségi PCR-elemzést végeznek alacsony vírusszinttel (vírus alacsony koncentrációja), például antivirális terápiában részesülő betegeknél, nagyon fontos tudni a diagnosztikai rendszer érzékenységi küszöbét.

Diagnosztikai rendszerek változatai

A virológiai válasz szabályozására ajánlott az antivirális kezelés legalább 50 NE / ml érzékenységi küszöbértékű diagnosztikai rendszerek alkalmazása. Ezek a kritériumok teljesülnek, például: Cobas Ampicolor VGS-teszt elemzők (50 IU / ml pontossággal), valamint RealBest HCV RNS (15 IU / ml érzékenységgel).

A WHO szerint ajánlásokat létrehozó végleges diagnózist a hepatitis C, meg kell kizárólag alapján hármas kimutatására RNS-vírus szérummintákon szenvedő beteg nincs más hepatitis marker faj.

A PCR-eljárások mellett TMA-vizsgálatot (transzkripciós amplifikációs módszert) is alkalmaznak HCV RNS kimutatására betegekben. A legjobb érzékenység küszöbérték (5-10 NE / ml), de hazánkban ez a tesztelési módszer még nem túl gyakori.

A vírusok észlelt módosításainak hatóköre

Ez a kvalitatív meghatározás a hepatitis C vírus RNS jelenlétében szérumban lehetővé teszi számos vírus genotípusának meghatározását. Jelenleg a tudomány több mint hat genotípust ismeri a vírusról, valamint a betegség mintegy 10 altípusairól.

Az 1, 2, 3 genotípusú vírusok gyakoriak országunkban. Laboratories képes észlelni a következő genotípusok: 1a, 1b, 2a, 2b és 2c és 3, 4, 5a és 6. függetlenül altípus. Minden vírusmódosítás esetében a detektálás sajátossága 100%.

PCR mennyiségi elemzése

Kvantitatív PCR-teszt segítségével megállapítják a vérminták hepatitis vírusának koncentrációját (vírus terhelés). Ez a viremia-teszt (a vírus koncentrációja) lehetővé teszi egy meghatározott genetikai anyag (a leginkább vírusos RNS) egységek számának meghatározását, amelyet egy bizonyos mennyiségben észlelnek. Ebben az esetben határozza meg a koncentrációját 1 ml-ben, ami megfelel 1 cu. cm.

Az analízis mennyiségi paramétereit számokban fejezzük ki, ezt a mérést nemzetközi egységegységként (IU) milliliterenként (ml), ME / ml-ként jelöljük. Néhány laboratóriumban a vírus mennyisége más egységekben is meghatározható: a példányok számát ml-enként, másolatként / ml-nek.

  • Időzítés A hepatitis C esetében a PCR ilyen kvantitatív analízise a terápia megkezdése előtt történik. Aztán az 1., 4., 12. és 24. hetet. A 12. héten végzett értékelés indikatív, lehetővé teszi a terápia hatékonyságának meghatározását.
  • Elemzés előkészítése. A PCR mennyiségi elemzéséhez nem szükséges a beteg speciális felkészítése a vizsgálathoz. A mintavétel előtt fél órával nem szabad dohányozni. Vénás vért használnak laboratóriumi anyagként.

Az eredmények értékelése

Különböző laboratóriumi vizsgálati rendszerek esetében ez a mutató különböző konverziós tényezőket mutat be IU / ml-ben. Átlagosan egy konverziós paramétert alkalmaznak, amelyben 4 kópia / ml = 1 NE / ml. Ez például, ha a laboratórium 2,4 * 10 6 kópia / ml PCR-analízist eredményez, akkor ezt a paramétert 4-gyel kell osztani, és 6 * 10 5 NE / ml-t kapunk.

A 800 000 NE / ml magas terhelési szint magasnak tekinthető, ami megközelítőleg 3 000 000 példány / ml index. Az alacsony viremia egyes szerzők szerint a kvantitatív PCR 400 000 NE / ml alatti paramétereinek felel meg.

A kvantitatív teszt eredményeként a végeredmény nem digitális érték formájában jeleníthető meg, hanem: "a mérési tartomány alatt" vagy "nem detektálható".

  • Értékelés: "a mérési tartomány alatt". Ez azt jelzi, hogy a mennyiségi vizsgálat nem tudta kimutatni a hepatitis C virális RNS-t, de maga a vírus igen kis koncentrációban jelen van a szervezetben. Ezt egy további kvalitatív vizsgálat is jelzi, amely igazolja a vírus jelenlétének tényét.
  • Értékelés: "nem észlelt". Ez az eredmény azt jelzi, hogy a mennyiségi vizsgálat nem észlelt vírust az RNS mintában.

A vírusterhelés paramétere elsősorban a betegség fertőzőképességének mértékét, a beteg fertőzőképességének mértékét határozza meg. Minél magasabb a páciens koncentrációja a vírusnak, annál nagyobb a valószínűsége annak, hogy más emberekre átruházzák. Például, amikor szexuális kapcsolatban áll egy beteg vagy egy függőleges út. Az ilyen mennyiségi mutató segít a páciens kezelésének hatékonyságának meghatározásában.

A PCC mennyiségi elemzésének elvégzése fontos az antivirális terápiához, értékeli sikerét és ütemezi a tanfolyam időtartamát. Tehát a test gyors reakciója a kezelés és alacsony mértékű viremia esetén a terápia időtartama csökkenthető.

A mennyiségi PCR paraméter lassú csökkenésével az antivirális terápiát ki kell terjeszteni vagy módosítani. Ha a vírusterhelés szintje alacsony, akkor ez a terápia kedvező tényezője, ha magas, akkor az alkalmazott kezelési módszer hatástalan, és a gyógyszereknek vagy azok használatának módszereit módosítani kell.

A hepatitisz C-re vonatkozó PCR elemzése

A hepatitis diagnosztizálása magában foglal egy egész vizsgálati komplexet, amely meghatározza a vírus jelenlétét a vérben. A betegség kimutatásának egyik módja a hepatitis C-hez hasonló PCR-módszer alkalmazása. Mi ez az oka, miért fontos a hepatitis PCR-elemzése, hogyan történik és dekódolja?

Mi ez?

A polimeráz láncreakciót vagy a PCR-t gyomorfekély, vastagbélgyulladás, bélgyulladás diagnosztizálására használják. De a fő előnye, hogy segít a szervezetnek, hogy észleli a vírus maga a C hepatitis, és antitesteket is, amelyek képesek nem okoz reakciót az immunrendszer azon képessége miatt, hogy mutálódik.

A vizsgálat és annak lényege, hogy bizonyos feltételeket teremt, amelyek során a hepatitis RNS láncreakció lép fel. Ha a hepatitis C vírus nukleotidszekvenciájához viszonyítva véletlen egybeesést észlel, ez azt jelzi, hogy vannak vírusos részecskék a vérben, és a bomlás a májban történik. Ha a vírus mennyisége egy bizonyos szint alá esik, negatív diagnózis történik, ha magasabb - pozitív.

A hepatitis PCR-módszerrel kétféle vérvizsgálat létezik: mennyiségi elemzés és minőségi elemzés.

A mennyiségi PCR, ahogy fent említettük, meghatározza a hepatitis vírus RNS-koncentrációját. Ezenkívül képes információt szolgáltatni arról, hogy milyen intenzitású a patológia és az előírt kezelés hatékonysága. A hepatitis C mennyiségi elemzése rendkívül fontos, mivel ellenáll az antivirális hatóanyagok hatásának, és lehetővé teszi a terápia módosítását.

Miután a páciens egy kezelésen átment, a PCR segít meghatározni a receptek további sorrendjét. Bizonyos esetekben további felmérésekre van szükség. Például, ha a szint az ALP emelkedett (de nem több, mint 2-szer hat hónapon belül), és elemzése transzkriptum kifejezés egy vírusterhelés feletti 105 NE / ml, a beteg van rendelve biopszia. Ha a PCR mennyiségi analízise erős gyulladást és fibrózist mutat, akkor a pácienst vírusellenes gyógyszerek kezelésére írják fel.

Olyan esetekben, amikor nagyszámú vírusrészecskét kombinálnak magas ALT-értékkel, a beteget azonnal további diagnosztikai intézkedések nélkül kell kezelni.

Vegye ezt a tesztet, és megtudja, ha májproblémái vannak.

A hepatitis vérének mennyiségi elemzésére szolgáló mutatók minőségi értelmezése csak képzett és tapasztalt szakember lehet, és a modern technológia segít a vírus alacsony koncentrációjában a vérben.

A kvalitatív PCR-analízis célja a vírus tényleges jelenlétének meghatározása és megerősítése a szervezetben. Ez a vér hepatitis elleni antitestek kimutatásával történik. Ez egy minőségi teszt hepatitis garantálja a pontosságát az eredmény 100% -kal, és lehetővé teszi, hogy diagnosztizálni a korai szakaszában a betegség, ami lehetővé teszi, hogy a harcot a hepatitis B az első héttel a fertőzés után, és növeli annak az esélyét, teljes gyógyulás (abban az esetben, B típusú betegség).

A PCR előnyei

A PCR-módszer vizsgálata és a hepatitis vérvizsgálatának megfejtése érdekében lehetőség van a betegség kórokozójának genotípusának meghatározására is. A vírus 6 genotípusa és számos altípusa létezik, de a régióban az 1, 2 és 3 genotípus eloszlása.

Az ilyen típusú diagnózis további előnyei:

  • A vett indikátorok nagy pontossága és alacsony a hibák valószínűsége;
  • magas a vírus részecskékre való érzékenysége a vérben;
  • több kórokozó kimutatásának lehetősége;
  • a magas antigén variabilitású patogén intracelluláris mikroorganizmusok diagnosztikája;
  • a hepatitisz analízisének dekódolásával végzett munka lehetővé teszi a látens áramfertőzések felfedezését.

Kinek nevezzen

A hepatitiszre vonatkozó PCR-vizsgálat szükségszerűen a következő embercsoportokat veszi figyelembe:

  • terhes nők;
  • az egészségügyi intézmények alkalmazottai;
  • a vér és a szervek lehetséges adományozói;
  • azok, akiknek a betegség jellegzetes jelei vannak;
  • HIV-fertőzöttek;
  • drogfüggők;
  • a szexuális életet átélt személyek.

Hogyan történik az elemzés és a képzés szükséges?

Vérvételezést végzünk a vénából. Jellemző, hogy ez előtti reggel előfordul, mielőtt az ember evett, mert az étkezés után legalább 8 órát kell eltelnie. Szélsőséges esetekben nap vagy esti vérvizsgálat végezhető, de az analízis és az élelmiszerfelvétel között eltelt idő legalább 5 óra.

Az emberi tényezõ mennyiségi hatást fejthet ki az eredményekben: pontosságuk egyes esetekben 100% -ról 95% -ra csökken, ezért elõkészíteni kell a vér elõállítását. Az analitikai bioméret minősége megfelelő, ha a beteg az alábbi szabályokat követi:

  • Mielőtt vért adna, csak tiszta vizet inni;
  • két nappal a vizsgálat előtt el kell utasítani a sült és zsíros élelmiszerek bevitelét, valamint az alkoholtartalmú italokat;
  • egy nappal a laboratóriumi látogatás előtt hagyja abba a gyógyszeres kezelést. Abban az esetben, ha ez nem lehetséges, feltétlenül figyelmeztetni kell a laboratóriumi asszisztenst és a kezelőorvost;
  • a stresszes helyzetek és a fizikai erőfeszítések előestéjén;
  • Ne végezzünk ultrahangot, radiológiát és instrumentális vizsgálatokat röviddel a véradás előtt;
  • egy órával az elemzés előtt tartózkodnia kell a dohányzástól;
  • 20 perccel a vér szállítása előtt meg kell zavarni, nyugtatni és még lélegezni.

Ha a vizsgálatot egy 5 évesnél fiatalabb gyermek végzi, a szülőknek gondoskodniuk kell arról, hogy a bioméret mintavétele előtt fél órával 10 percenként inni is forralt vizet.

A kapott adatok magyarázata

Az elemzés szöveges formában (kvalitatív kutatás esetén), például "nem található" vagy "a változtatások alatti" lehet. Az első esetben ez azt jelzi, hogy a fertőzést nem észlelték. A második -, hogy a vírus jelen van, de kis mennyiségben. Ez a helyzet újbóli vizsgálatot igényel.

A vírusterhelést a fertőző RNS mennyisége határozza meg, és ME / ml-nek vagy másolatoknak felel meg.

A hepatitis C mennyiségi analízisének normál indikátora (normája) a 1,8x102 és 2,4x107 NE / ml tartományba esik.

A vírus koncentrációja a vérben lehet:

  • alacsony: 600 NE / ml-ről 3x104 / ml-re;
  • átlag: 3 óra 4 NE / ml-től 8 óráig 5 NE / ml;
  • magas: több mint 8 óra 10 NE / ml.

A hepatitis PCR mennyiségi és minőségi elemzése lehetővé teszi a vírus jelenlétének meghatározását a testben és koncentrációjának szintjét. A polidizált láncreakció korai stádiumban képes diagnosztizálni a betegséget, de ehhez szükség van arra, hogy a betegek a lehető leghamarabb forduljanak orvoshoz segítségért és szigorúan kövessék a kezelőorvos ajánlásait.

A hepatitis C kvantitatív elemzésének dekódolása

A hepatitis nevű betegség súlyosan károsíthatja a májat és súlyos gyulladást okozhat. Számos hepatitis létezik, és a vírusok, amelyek a betegség kialakulását okozzák, a genotípus szerint oszthatók meg, a mutációtól és a földrajzi elhelyezkedéstől függően. A betegség egyik leggyakoribb típusa a C. típusú. A hepatitis C kémiai elemzését, amelynek megfejtését a kezelőorvos végzi, akut formában fordulhat elő vagy krónikussá válhat.

A hepatitis szerzésének módjai

A diagnózis meghatározásához megfelelő laboratóriumi vizsgálatot kell végezni. Első felületi vizsgálatként kvalitatív analízist lehet alkalmazni annak kimutatására, hogy a szervezetben van-e májgyulladás-szer. A betegség pontos szakaszának és a kezelés kijelölésének megállapítása érdekében azonban kvantitatív vizsgálatot kell végezni.

A hepatitis vírus személyről személyre továbbítható. A betegségnek olyan inkubációs ideje van, amelyben a tünetek szinte nem manifesztálódnak. A betegség látens útjának ideje függ az emberi immunrendszertől és a vírusnak a szervezetbe jutó mennyiségétől. Az orvosok meghatározzák a hepatitis C átvitelének alábbi főbb módjait:

  • 47% -os valószínűséggel a vírus a véren keresztül kötődik a szokásos, nem steril fecskendőkkel az intravénás gyógyszerek bevezetése során. A kábítószer hatására gyengült szervezet nem képes ellenállni a vírusnak és a betegség terjed.
  • 22% -os valószínűséggel a májgyulladás vérátömlesztéssel. A hepatitis, a HIV és más betegségek donor vér általi fertőzésének magas kockázata miatt az orvosi intézmények minden biológiai mintát a használat előtt kötelezően tesztelni fognak. Ha ezt a szabályt megfigyelik, akkor a fertőzés kockázata minimális.
  • 16% -os hepatitiszfertőzés kockázata nem steril orvosi eszközök használata esetén. Rendszerint minden orvos szorosan figyelemmel kíséri a berendezéseket és a készleteket. De ha nem követik a biztonsági óvintézkedéseket, hepatitis-fertőzés vagy más betegségek is előfordulhatnak.
  • 13% -os eséllyel a fertőzött anyától a növekvő magzatig terjedő vírus.
  • 12% esély a vírusnak szexuális kontaktuson keresztül történő megkötésére anélkül, hogy óvszereket kellene használni egy alkalmi szexuális partnerrel. A homoszexuális párok statisztikái szerint a kockázat nagyobb.

A betegség tünetei

A normális, azaz egészséges állapotot tekintik a rossz közérzet súlyos megnyilvánulásának hiányára. A hepatitis vírus veszélye, hogy a betegség nem képes erős tüneteket okozni. A betegség egyértelmű jelei (hányás, hirtelen fogyás stb.) Csak az esetek 15% -ában fordulnak elő. A betegek fennmaradó 85% -a meglehetősen gyenge. Szükséges az Ön egészségi állapotának figyelése és a károsodásra reagálni.

  • A májbetegségek legelismertebb jele a bőr icterus és a szemprotein. Ezek a jelek nem csak a hepatitisz vírusnak felelnek meg, hanem más májbetegségeknek is.
  • A vaszkuláris csillagok megjelenése a bőrön. A krémek kapillárisai, amelyek a bőrön találhatók, a vírus vérben való jelenlétének eredményeként kibővülnek, és a "csillagok" jelennek meg.
  • A "májpálma" tünet, amelyet kíséri a tenyér, és néha a lábak vörössége. Ezt a jelenséget palmar erythema néven is nevezik, és általában vascularis csillagokkal együtt jelenik meg.
  • A vírus irritáló toxikus hatásai a szervezetre viszkető bőrt okozhatnak.
  • A vér kémiai összetételének megváltozása miatt az alvadási faktor veszélybe kerülhet.
  • Hosszú távú expozíció a víruson a szervezetben a károsodott agyműködéshez vezet (megszerzett encephalopathia).
  • Belső vérzés lehetséges.
  • A máj funkcióinak megsértése a hasi üregben (ascites) folyadék felhalmozódásához vezethet.
  • A nap végén a páciens lábai duzzadnak.

Egy vagy két tünet megnyilvánulása számos betegségre jellemző. Leggyakrabban a rossz közérzetet fizikai fáradtság vagy súlyos pszichológiai stressz és stressz magyarázza. Ha a jegyzékből számos jellegzetes tünetet találunk, akkor érdemes kvantitatív elemzést készíteni a hepatitis C-re.

Az analízis típusai

A hepatitis diagnosztizálásának egyik legmegbízhatóbb és legmegbízhatóbb módja a polimeráz láncreakció vagy PCR. Ellentétben az egyéb típusú vizsgálatokkal (ELISA vagy RIF), a hepatitisz PCR-analízise lehetővé teszi a vírus genetikai anyagának közvetlen kimutatását, nem pedig az ellenanyag ellen. Ez lehetővé teszi a pontos diagnózist. A vírus ellenanyagai az emberi szervezetben maradnak, és teljes gyógyulást követnek. Ebben az esetben az ELISA felismeri az egészséges személyből származó antitesteket, vagyis az eredmény pozitív lesz. A PCR elemzésével nincs ilyen probléma.

A mutató normája nullához közeli érték. Vagyis az egészséges embernek elvileg nem kell vírussejtjei a szervezetben. A kvantitatív PCR tükrözi a vizsgált biológiai mintában található vírussejtek számát. A megállapítások alapján az orvos levonhatja a következtetést a szervezet egészének fertőzésének mértékéről. A vírus koncentrációja a betegség színpadát jelzi, és lehetővé teszi a fertőzés közelítő idejének követését.

Mennyiségi mutató

Fontos nem csak az elemzés helyes felkészítése és a biológiai minták benyújtása a laboratóriumba, hanem a megszerzett adatok megfejtése is. Ezt csak szakképzett orvos végezheti el. Természetesen az eredményes formában már van információ az elfogadott normákról, és a beteg értékei jelennek meg. Azonban a számok nem mindenek, a tapasztalat és az orvosi ismeretek lehetővé teszik, hogy több információt kapj. A táblázat azt mutatja, hogy a PCR-elemzés milyen eredményt mutathat a C típusú hepatitis mennyiségi vonatkozásában:

A hepatitis C PCR mennyiségi elemzése

A HCV számos altípusa létezik, ezért nem mindig lehetséges hatékony vírusellenes hatóanyagok kiválasztása és a kívánt eredmény elérése a kezelésben. A kórokozók sokféleségének köszönhető, hogy képesek megváltoztatni szerkezetüket, azaz mutálni. Ennek eredményeképpen az immunitásnak nincs ideje arra, hogy hatékony reagálást alakítson ki egy patogén szerrel szemben, és a gyógyszerek hatástalanok.

Gyakran a hepatitist diagnosztizálják a cirrhosisban, ami a klinikai tünetek hiánya miatt később felderíti a betegséget. Csak a laboratóriumi vizsgálaton keresztül lehet HCV-t kimutatni az inkubációs időszakban.

A hepatitis C mennyiségi elemzése lehetővé teszi nemcsak a kórokozó jelenlétének megállapítását a vérben, hanem a koncentráció kiszámítását is.

Ajánlások az elemzésre való felkészüléshez

A laboratóriumi diagnózisra külön előkészítésre nincs szükség. Elég, hogy tartsuk be az alábbi ajánlásokat:

  1. a mennyiségi elemzést üres gyomorra végezzük, az utolsó étellel - 8 órával a vérminta előtt;
  2. két napra el kell hagyni az alkoholt és a "nehéz" ételeket;
  3. Különös fontosságúak a gyógyszerek, amelyeket a beteg veszi. Ezek befolyásolhatják a vizsgálat eredményét, ezért az orvosnak tudnia kell róluk.

A vérminták előestéjén a nehéz fizikai terhelés és fizioterápiás eljárások sem kívánatosak. A hepatitis C mennyiségi elemzésének megfejtéséhez kiderült, hogy megbízhatónak kell lennie, ne hagyja figyelmen kívül a fenti ajánlásokat.

Gyakran előfordul, hogy a beteg az elemzés eredményét naponta megkapja. A kórokozó vérben való koncentrációjának meghatározására szolgáló vizsgálat ára a laboratóriumtól és a reagensek minőségétől függ, és elérheti a 4000 rubelt.

A hepatitis C laboratóriumi diagnózisa

Az elsődleges diagnosztikai módszerek közé tartozik az ELISA, vagy más módon enzimkapcsolt immunoszorbens vizsgálat. A HCV specifikus antitestek kimutatására van kijelölve. Hatékonysága eléri a 95% -ot. Ha a tanulmány átiratai pozitív eredményt adnak, akkor érdemes feltételezni, hogy egy anyag jelen van a vérben.

Meg kell jegyezni, hogy a "+" teszttel vizsgált alanyok fele a további diagnózis során nem észlel vírusos anyagot a vérben. Ebben az esetben az ELISA azt jelzi, hogy a múltban előzőleg HCV volt a kapcsolata, amelyet keringő antitestek igazolnak.

Pontosabb vizsgálat egy polimeráz láncreakció, vagy PCR. Lehetővé teszi a patogén RNS-koncentrációjának meghatározását a vérben. Miután felfedezte a vírus genetikai készletét biológiai anyagokban, az orvos megerősíti a hepatitis C-t.

PCR-t rendelnek a beteghez a diagnózis ellenőrzéséhez. Lehetővé teszi az RNS azonosítását olyan szakaszban, ahol az antitestek még nem állnak rendelkezésre. Számos genetikai vizsgálat létezik:

  1. a hepatitis C-re vonatkozó PCR mennyiségi elemzése, amely nemcsak a kórokozó jelenlétét hozza létre a vérben, hanem tájékoztatást nyújt a koncentrációjáról;
  2. minőség - megerősíti a fertőzést;
  3. genotipizálás - lehetővé teszi a patogén szer genotípusának meghatározását és a leghatékonyabb gyógyszerek kiválasztását.

Polimeráz láncreakció

Mint már említettük, számos laboratóriumi kutatás létezik:

  • minőségi analízis - a patogén szer jelenlétét jelzi a vérben. Az ilyen típusú diagnózisnak van egy bizonyos "válaszszintje", ezért nem mindig megbízható. Az eredmények helyes megfejtése és valódi indikátorok elérése érdekében javasolt legalább 50 NE / ml érzékenységű vizsgálati rendszert használni. Az analízis normája "negatív válasz" vagy "a vírus nem észlelhető". Ez azt jelzi, hogy nincs kórokozó-genetikai készlet a vizsgálati anyagban. Ha az eredmény pozitív, a beteg további vizsgálata szükséges;
  • A hepatitis C PCR mennyiségi analízise meghatározza a vírusterhelést, vagyis a patogén szer koncentrációját a vérben. A vizsgálat eredménye mutatja a RNS egységek számát a biológiai folyadék meghatározott térfogatában;

A vírus terhelés a fertőző RNS számát jelenti a kutató egy milliliterében. A mérési egységek ME / ml, de egyes laboratóriumok meghatározzák a "másolatok / ml" értéket, miközben az analízis standard üresét jelölik az összehasonlításhoz és az eredmények értékeléséhez.

  • genotipizáláshoz. Mivel a kórokozó képes megváltoztatni a hatékony antivirális gyógyszerek kiválasztását a terápiára, annak genotípusán kell alapulnia. Nem csak az eredményről, hanem a kezelés időtartamáról is függ. Tehát a HCV 1 hepatitis egy évig gyógyszert igényel, de az esetek 60% -a pozitív dinamikát mutat. Ami a második és a harmadik genotípust illeti, kevésbé ellenállnak az antivirális szerek hatásának, ezért a terápia hatékonysága meghaladja a 85% -ot. Ha a kutatás ilyen eredményét - "a vírust nem írják", akkor érdemes gyanítani egy olyan ügynök jelenlétét, amelyet a standard tesztrendszerek nem ismertek el.

Javallatok az analízishez

A hepatitis C mennyiségi elemzésének értelmezése a következő célokra szolgál:

  1. a beteg további vizsgálata, amikor a HCV ellenanyagokat ELISA-val detektálták;
  2. a diagnózis megerősítése;
  3. vírus terhelés megállapítása vegyes fertőzés esetén, amikor egy személy többféle kórokozóval fertőzött;
  4. a kezelési taktika meghatározása (vírusellenes gyógyszerek kiválasztása, terápia cseréje vagy befejezése);
  5. felmérni a betegség progressziójának dinamikáját, valamint a gyógyszerek hatékonyságát;
  6. a patológia (akut, krónikus) állapotának meghatározása.

A PCR a következő előnyökkel rendelkezik:

  1. jó érzékenység, melynek köszönhetően még csak kis mennyiségű vírust is lehet számolni;
  2. maga a kórokozó (RNS) meghatározása, nem antigének;
  3. a technika specifikussága - egy specifikus típusú patogén ágens létrehozása;
  4. az eredmények megszerzésének sebessége, mivel az elemzéshez nem szükséges növényi kultúrák termesztése tápközegben. A válasz készen áll 5 óra alatt;
  5. egyetemesség - lehetővé teszi a különböző kórokozók genetikai csoportjának azonosítását, mind RNS-t, mind DNS-tartalmú (hepatitis B);
  6. látens fertőzés kimutatása.

A laboratóriumi vizsgálat segít a diagnózis megerősítésében, és szerves részét képezi az átfogó vizsgálatnak (a klinikai tünetek elemzése, az ELISA és a biokémia eredményei).

Ezenkívül a PCR-t széles körben használják az allergológia, a genetika területén, valamint az apaság tényének megállapítására.

A hepatitis C vírus mennyiségi elemzésének dekódolása

A laboratóriumi diagnosztika eredményeinek értékelését egy orvos végzi, a kapott adatok összehasonlításával.

A hepatitis C PCR kvalitatív és kvantitatív elemzése: negatív, pozitív, dekódolás

A hepatitis C a máj vírusos megbetegedése, amelyet a flavonavírus HCV (angol hepatitisz C vírus) okoz, amely ribonukleinsav (RNS) molekulát tartalmaz. Az RNS hordozza a vírus genetikai kódját. Jelenléte lehetővé teszi a hepatitisz C-re vonatkozó PCR-analízist.

Az emberre nézve a HCV veszélye az, hogy az úgynevezett szerológiai ablak (a fertőzés és az immunrendszer reakciója megjelenése közötti időintervallum) nagyon hosszú lehet - több héttől hat hónapig.

Ez nem tárja fel a fertőzést és időben elkezdi a kezelést.

A gazdaszervezet sajátosságaitól függően a HCV akut formában jelenhet meg, és krónikus betegségként is kialakulhat, amely hosszú távú és drága kezelést igényel. A HCV elleni antitestek kimutatásakor számos laboratóriumi vizsgálatot végeznek, beleértve a hepatitisz C-re vonatkozó PCR-t is. Ez a vizsgálat minden olyan személy esetében történik, amelynek vérében a HCV ellenanyagok találhatók.

Mi a PCR elemzés?

PCR hepatitis C laboratóriumi elemzése - biológiai anyag vizsgálata a flavavirus jelenlétének azonosítására.

A polimeráz láncreakció (a rövidítéssel megfejtve) a szervezet vírusos károsodásának mennyiségi értékét, minőségi jellemzőit és az RNS-t tartalmazó vírus genotípusait mutatja.

Alapul véve, valamint további elemzések alapján meghatározták a terápia módját és időtartamát, valamint a járványtani tényezőt (a másik fuvarozó számára történő átvitel kockázata).

Mi az RNS analízis a hepatitis C-re?

A hepatitis C PCR-t RNS-analízisnek is nevezik (HCV RNS), mert nem ismert. A Flavavirus 30-60 nm virion méretű RNS részecskét tartalmaz. Ennek a mikroorganizmusnak az egyik jellemzője a mutációk nagy hajlama.

A vírus minden alfajának (genotípusai) eltérő rezisztenciát mutatnak, ami különböző kezelési módszereket és a beteg további prognózisának jellegét okozza.

Biológiai anyag (vénás vér) foglalkozik éhomi és általában tesztelték Real-Time PCR (nagyon érzékeny valós idejű diagnosztika, hogy meghatározzuk az alsó határ a 15 NE / ml-automatizált zárt rendszer módban).

Vannak más vizsgálatok is, például COBAS AMPLICOR, amelynek érzékenysége 50-100 NE / ml. Bármely laboratóriumi vizsgálat esetében az érzékenységi küszöb fontos, azaz a reagens képes a vírus minimális koncentrációjának kimutatására a biológiai anyagban.

A hepatitis C analízis típusai a PCR módszer alkalmazásával

A hepatitis C PCR-je három fontos elemet tartalmaz:

  • minőségi elemzés;
  • kvantitatív elemzés;
  • genotipizáláshoz.

Ezek a vizsgálatok meghatározhatják a viremia jellegét, valamint a kórokozó genetikai jeleit. A diagnosztikai rendszer érzékenységétől függően a tesztet egyszer elvégzik, és néha egy második vizsgálatot végeznek érzékenyebb reagenssel az eredmények megerősítésére vagy finomítására.

Kiváló minőségű hepatitis C PCR

A hepatitis C-re vonatkozó PCR-analízis a polimeráz-láncreakciós vizsgálat másik gyakori elnevezése. A vizsgálat standard érzékenysége, amely lehetővé teszi a vírusos elváltozás kimutatását, a 10-500 NE / ml tartományban van.

A hepatitis C-re vonatkozó PCR negatív elemzése azt mutatja, hogy a vírus koncentrációja a beteg vérében a diagnosztikai rendszer érzékenységének küszöbértékénél alacsonyabb.

Ha a minőségi PCR "nem észlelt" választ adott, akkor a későbbi kezeléshez fontos tudni a reagens érzékenységi küszöbértékét.

A proteinfrakciók a flavavirushoz sokkal később jelentkeznek.

Quantitative Hepatitis C PCR

A PCR hepatitis C mennyiségi mutatója a vírusterhelés, amely tükrözi a flavavirus RNS koncentrációjának szintjét a szervezetben. Ez egy mutató, amely megmutatja, hogy hány darab vírus RNS-t tartalmaz egy köbcentiméter vér. A hepatitis C PCR RNS eredményeit egy hagyományos rendszerben nemzetközi egységben (IU / ml) nevezik ki, és különböző módokon rögzíthetők, például 1,7 millió vagy 1,7 millió NE / ml.

A hepatitis C mennyiségi PCR-diagnózisát a vírusellenes terápia megkezdése előtt, a kezelés 12. hetében pedig a HCV elleni küzdelem kiválasztott módszerének eredményeinek értékelésére adják. A vírus terhelés lehetővé teszi a betegség három fontos mutatójának azonosítását:

  • fertőzőképesség, azaz a vírus egyik hordozótól a másikig terjedő kockázatának mértéke (minél nagyobb a flavavirus RNS koncentrációja, annál nagyobb a valószínűsége egy másik személy fertőzésére, például szexuális érintkezés esetén);
  • a kezelés módszere és hatékonysága;
  • időtartamát és prognózisát (minél nagyobb a vírusterhelés, annál hosszabb a kezelés).

A hepatitis C mennyiségi PCR-diagnózisa a laboratóriumi vizsgálat típusától és az érzékenység küszöbétől függ. A norma alsó határa rendszerint 600 000 NE / ml, az átlagérték 600.000-700.000 NE / ml. A 800 000 NE / ml és annál magasabb értékeket magas szintű RNS-tartalmú vírusnak tekintik.

genotipizáláshoz

Tekintettel a HCV magas mutációs aktivitására, fontos, hogy a vizsgálati stádiumban meghatározzuk, hogy a vírus genotípusa a beteg vérében van-e. Összesen 11 hepatitis C vírus genotípust jegyeztek fel a bolygón, amely számos alfajot tartalmaz. Az Orosz Föderáció területén 1,2-es és 3-as gyakoriak.

A hepatitis C PCR RNS-je a genotipizálással együtt nagyon fontos eleme az elemzésnek, mert lehetővé teszi az orvos számára a vírus rezisztenciájának (rezisztencia) meghatározását, megfelelő gyógyszerek kiválasztását és a kezelés lefolyását.

A genotipizálás lehetővé teszi a máj állapotának közvetett meghatározását is. Például a HCV 3 genotípusát gyakran steatosis kísérli, amelyben a zsír felhalmozódik a test sejtjeibe.

A PCR-nek a hepatitis C-ben végzett vérvizsgálatának olyan számot kell adnia, amely meghatározza a genotípust. A laboratóriumi válaszokban írható "nem gépelt" - ez azt jelenti, hogy az emberi vérben olyan vírus van, amelyet a tesztrendszer nem határoz meg. Ez azt jelezheti, hogy a genotípus egy adott földrajzi területen nem jellemző. Ebben az esetben szükség van az elemzés újbóli átadására a diagnosztikai rendszer nagyobb érzékenységével.

PCR analízis dekódolása hepatitis C-re

A hepatitis C PCR vizsgálatát a fenti adatok alapján számszerűsíthetjük. A laboratóriumi vizsgálatok eredményeinek átvételekor általában a következő adatokat írják fel:

  • "Found" / "not found" (magas minõségû PCR a hepatitis C esetében);
  • az RNS-t tartalmazó frakciók mennyisége, például 831.680 IU / ml (kvantitatív PCR-vizsgálat);
  • az a szám, amely meghatározza a HCV genotípust, például - 1, 2, 3, 4;
  • a teszt neve leginkább Real-time.

A legfontosabb a hepatitis C PCR-elemzésének megfejtéséhez a második tétel, amely a vírusterhelést mutatja a prognózis, a módszer és a kezelés időtartamának meghatározása céljából.

Ha a hepatitis C-re vonatkozó PCR-analízis negatív, és ELISA pozitív - mit jelent ez?

A laboratóriumi tesztek megfejtéséhez fontos, hogy kapcsolatba lépjen egy hepatológussal vagy fertőző betegséggel foglalkozó szakemberrel, aki megmagyarázza a kapott információkat a diagnosztikai rendszer típusának és az érzékenység küszöbének megfelelően. Az orvosi gyakorlatban sok vérvizsgálati adat van, amelyek az orvosi nevelés nélküli embert zavartsággá teszik.

Például, ha a vizsgálati HCV PCR negatív és pozitív ELISA, azt jelezheti, hogy ebben az időben a beteg vérében nem HCV, de mielőtt szenvedett akut formában a hepatitis C Úgy ​​tekinthető, hogy a pozitív-linked immunosorbent assay (ELISA) azt mutatja, hogy a vérben vannak olyan antitestek, amelyeket a múltban a vírus inváziója után állítottak elő. De a modern orvosi gyakorlatban ELISA elemzés nem eléggé megbízható, és gyakran ad szokatlan eredményeket, így az orvosok használni, mint egy elsődleges szűrés. A betegség diagnosztizálásakor a szakemberek pontosan PCR-tesztek segítségével irányulnak.

Hasznos videó

A következő videóban nagyon részletes és érdekes megmondani, hogy mi a lényege a PCR módszernek, hogyan történik az elemzés:

következtetés

A vénás vér általában a hepatitis C PCR analízisére vonatkozik. Leggyakrabban kettős mintavétel egy biológiai anyagból - ELISA-hoz, és közvetlenül egy PCR-teszthez. A helyes teszteredményekhez a biológiai anyag laboratóriumi mintavételének legfontosabb szabályainak betartása szükséges:

  • a vér az analízishez reggel egy üres gyomorban van;
  • az evés és a vérvétel között legalább 8 óra legyen;
  • A vizsgálat megkezdése előtt kizárnia kell az alkoholt és a sült ételeket is;
  • A vért megelőző napon a fizikai erőfeszítést elkerülni kell.

A vérvizsgálat eredményei általában másnap készen állnak.

A hepatitis C diagnosztizálása PCR-vel

A polimeráz láncreakciót (PCR) egyre inkább a klinikai gyakorlatban alkalmazzák különböző vírusos betegségek okainak meghatározására, beleértve a vírusos hepatitis C diagnózisát.

Tanácsok a hepatológusoktól

2012-ben áttörést jelentett a hepatitis C kezelésében. Új, közvetlen hatású vírusellenes szereket fejlesztettek ki, amelyek 97% -os valószínűséggel teljes mértékben enyhítik Önt a betegségben. Azóta a hepatitis C hivatalosan teljesen gyógyítható betegségnek számít az orvosi közösségben. Az Orosz Föderációban és a FÁK országokban a kábítószereket a cofosbuvir, az daklataswir és a lepidasvir márkák képviselik. Jelenleg sok hamisítvány jelent meg a piacon. A megfelelő minőségű gyógyszerek csak olyan vállalatoktól szerezhetők be, amelyek rendelkeznek engedélyekkel és a vonatkozó dokumentációval.
Menjen a hivatalos beszállító honlapjára >>

A diagnózis érdekében a PCR-t széles körben alkalmazzák különböző módosításaiban. A hepatitisz C-re kifejtett PCR segítségével meg lehet állapítani a hepatitis C vírus jelenlétét a beteg vérében és pontosan diagnosztizálni.

Az analízis változatai

A PCR technika néhány évtizeddel ezelőtt az orvosok rendelkezésére állt. A vírusos vagy bakteriális RNS vagy DNS specifikus fragmentumának többszörözésére épül, amelyet a beteg vérszérumának kimutatása (egy adott fragmentum felismerése) követ.

Ebben az esetben a PCR-vizsgálat két alapvető módja van: kvantitatív és kvalitatív.

A kvalitatív módszer csak arra a kérdésre ad választ, hogy létezik-e egy adott vírus genetikai anyaga a biológiai anyagban (vérszérum, nyál, szeminárium stb.)?

A kvantitatív módszer viszont lehetővé teszi ennek a genetikai anyagnak a mennyiségét, amely bizonyos esetekben szükséges a betegség stádiumának meghatározásához vagy a terápia hatékonyságának értékeléséhez.

A PCR kvalitatív változata betegség esetén

Egy kvalitatív variáns PCR elemzést ebben a betegségben képes észlelni a tényt, a jelenléte a hepatitis C vírus RNS biológiai folyadékokban (szérum, nyál és hasonlók. D.) a beteg. Így az elemzés eredménye csak kétféle lehet: pozitív vagy negatív. Ebben az esetben nagyon fontos a helyes dekódolás.

  • a vírusos hepatitis C RNS-vizsgálatának pozitív eredménye azt mondja az orvosnak, hogy a szóban forgó biológiai folyadék tartalmazza a vírus RNS-ét. Ennek megfelelően, a beteg fertőzött vele, és ezért lehetséges diagnózis hepatitis C-ben, mindig emlékezni a lehetőségét álpozitív eredmények elemzését;
  • Negatív PCR elemzés azt jelzi, hiányában a HCV RNS a vizsgálati biológiai folyadék, vagy a tartalom RNS-molekulák a mintában folyékony túl alacsony volt, és nem éri el az érzékenysége a PCR-módszer határt. A negatív vizsgálati eredmények nem feltétlenül jelzik a vírus hiányát a vérben. Az orvosnak mindig figyelembe kell vennie az elemzés hamis negatív eredményeinek lehetőségét.

A hepatitis C akut formájának kialakulása révén a magas minőségű PCR-vizsgálat lehetővé teszi, hogy a vírus az emberi szervezetbe való belépését követő 1-3 héten belül megállapíthassa a betegség tényét.

Hamis negatív eredmények adódhatnak a következőkből:

  • bejutni a szennyező anyagok biológiai anyagába (vérébe);
  • A heparin alkalmazása a véralvadás megakadályozására a kémcsőben vagy annak egy beteg általi alkalmazásában;
  • behatolás a vizsgált anyagba a környezetben lévő anyagokból, blokkoló enzimek a PCR-ben.

A páciensnek nem szabad speciális ajánlásokat követnie, mielőtt minőségi PCR-diagnosztikai eljárást folytatna. Ehhez csak vérvizsgálatot kell végezni a páciens vénájából.

PCR mennyiségi változata

A kvantitatív PCR-analízis segítségével nemcsak a vírus jelenlétének tényét, hanem a vírusrészecskék számát is meghatározhatjuk bármely biológiai folyadékban (az úgynevezett vírusterhelés). Az ilyen típusú PCR segítségével meg lehet határozni a HCV RNS másolatainak számát, amelyek egy bizonyos térfogatban kerülnek forgalomba.

Az ilyen típusú PCR eredményeit numerikus értékekben fejezik ki, ahol a mérési egység a nemzetközi egységek milliliterenként - ME / ml.

Hasonló típusú PCR-diagnózist végzünk a vírusos hepatitis C kezelésének egy bizonyos napján. A vírus terhelés első meghatározása abban az esetben fordul elő, amikor egy beteg bejut a kórházba. További elemzést végez a gyógyszerek alkalmazásának kezdetétől számított 1., 4., 12. és 24. héten. Már a 12. héten elmondhatja, hogy a kezelés hatékony-e vagy sem.

Nemrég olvastam egy cikket, amely leírja a "SOFOSBUWIR" gyógyszercsalád használatát DAKLATASVIR "a hepatitis C kezelésére. Ezzel a komplexszel korábban megszabadulhat HEPATITIS C-től.

Nem voltam szokva bízni semmilyen információban, de úgy döntöttem, hogy megvizsgálom és megrendeltem. A kábítószerek nem olcsóak, de az élet drága! Nem éreztem semmilyen mellékhatást az eljárásból, már gondoltam, hogy minden hiábavaló, de egy hónappal később elhaladtam a teszteken és a PCR-t nem észleltem, egy hónapos kezelés után nem találtam. Kardinálisan javult a hangulat, ismét volt vágy élni és élvezni az életet! Három hónapig vittem a gyógyszert, és ennek eredményeképpen a vírus eltűnt. Próbáld ki, és ha érdekel, akkor az alábbi link egy cikk.

Különösen előkészíteni a beteget a vizsgálat nem szükséges. Javasoljuk, hogy ne dohányozzon a vizsgálat napján. Vizsgálati anyagként véna vért használnak.

A mennyiségi PCR elvégzése után meg kell határozni a kapott eredményeket. A "norma" fogalma ilyen esetekben nem létezik. A dekódoláshoz egy speciálisan kifejlesztett mutatószámot használunk:

  • Eredmények: nem mutatható ki - RNS a hepatitis C a páciens vénás vér nem azonosított (negatív eredmény), vagy tartalmaz egy nagyon kis mennyiségű nem teszi lehetővé a módszer annak azonosítására (5 NE / ml - pozitív teszt ilyen vírusterhelés nagyban. Ez jelzi a terápia hatékonyságát és a betegség sikeres lefolyását;
  • a vizsgálat eredménye:> 8 * 10 5 ME / ml - pozitív vizsgálati eredmény. A rakodási szint nagyon magas. A betegség lefolyásának gyenge prognózisa és az alkalmazott gyógyszerek kijavítása vagy helyettesítése.

Fontos megjegyezni, hogy a kapott vírusterhelés nem tükrözi a patológia folyamata súlyosságát és a máj megsemmisülésének mértékét. Ehhez más biokémiai kutatások is léteznek. A kezelési módszerek megfelelő kiválasztásához ismerni kell a hepatitis C vírus genotípusát.

Mit mutat a vírus terhelés?

  1. A vírusrészecskék magas koncentrációja a biológiai folyadékokban és különösen a vérben a vírus szexuális viszonylatban vagy terhesség alatt az anyától a magzatig terjedő nagy kockázatával jár együtt.
  2. A vírusrészecskék száma tükrözi az alkalmazott gyógyszerek hatékonyságát, és lehetővé teszi a felhasznált kábítószerek és dózisok ésszerű kiválasztását.

Ultraszűrő PCR diagnosztikai módszer

Napjainkig a hepatitis C vírus meghatározására az úgynevezett ultra PCR-t végigmegyünk, ezt a módszert teljes egészében valós idejű hibridizációs-fluoreszcens vizsgálattal PCR-nek nevezzük.

Ha ultra-PCR látható:

  1. A vírusos hepatitis C gyanúja esetén a betegség rejtett formáival.
  2. Abban az esetben, ha a páciens a hepatitis C vírus ellenes, de PCR-diagnosztikával nem igazolható.
  3. A kezelés hatékonyságának felmérése és a helyreállítás tényének megerősítése.
  4. A betegség korai kimutatásának szűrő technikája a lakosságban.

A páciens vénás vérét általában a kutatáshoz használják. Az ultra-módszer érzékenysége kevesebb, mint 10 IU / l, ami többszöröse a PCR-diagnosztika standard kvantitatív és kvalitatív változatainak. Az ultra PCR kinevezését egy fertőző betegségű orvos vagy egy hepatológ végzi.

A kezelés diagnózisának és értékelésének döntő stádiuma az ultra PCR módszerrel kapott eredmények helyes értelmezése. Érdemes mindig emlékezni, hogy kevés esély van hamis negatív és hamis pozitív eredményekre.

Az ilyen helyzetek kiküszöbölése érdekében ki kell zárni a vérminták és laboratóriumi anyagok szennyeződését. Az ultra-PCR alkalmazásával elkerülhetők olyan helyzetek, amelyek hamis negatív eredményhez vezetnek, és így bonyolítják a diagnózist.


Következő Cikk

Paraziták a májban

Kapcsolódó Cikkek Hepatitis