Hagy egy válasz

A polimeráz láncreakció kvalitatív elemzése - a hepatitis C-re vonatkozó PCR meghatározza a HCV jelenlétét vagy hiányát a szervezetben. A laboratóriumban megvizsgálják az RNS szerkezetét, amelyben a vírus található. Ha a C-vírus kimutatható, szükségessé válik a kezelés folyamata, mivel az elhanyagolt májbetegség komoly következményekkel jár. A kinyerés után kvalitatív PCR-t végzünk, hogy megerősítsük az antitestek hiányát. Kinevezett és megelőző vizsgálat. A vér kórokozója alacsony koncentrációban a PCR (kvalitatív) nem képes észlelni semmit, mert a diagnosztikai rendszernek érzékenységi küszöbe van. A betegség kezdeti szakaszában vagy enyhe formában a PCR-t végül ultrahangos berendezéssel diagnosztizálják.

Mi az RNS vírus?

A hepatitis C vírus (vagy a hepatitis C vírus RNS) RNS-ről nevezik magát májbetegségnek. A C vírus egy egészséges sejthez kötődik, és behatol. Idővel elterjedt az egész testben, csak a vérbe jut. Ennek eredményeképpen a kórokozó behatol a májba, megolvasztja sejtjeit és keményen dolgozik. A májsejtek (hepatociták) a hatása alatt, változásokon át, és ebből a veszteségből dolgoznak. Minél hosszabb a C vírus a májban, annál több sejt hal meg. Idővel veszélyes betegségek alakulnak ki, amelyek rosszindulatú degenerációhoz és halálhoz vezetnek.

A máj fertőzése ilyen típusú vírussal semmilyen módon nem nyilvánulhat meg külsőleg. Sok éven át vagy több tucat évig a fertőzött személy egészségesnek érzi magát, és csak egy véletlen vizsgálat leggyakrabban patológiát tár fel. A hepatitis vérének adományozásakor az emberi gén (DNS) részét képező RNS (ribonukleinsav) lánc egy részét vizsgáljuk. A laboratóriumi kutatások eredményeit nem szabad az öngyógyításra használni, mert ez csak indikátor. Az orvos meghatározza a pontos képet és további diagnózist.

Ha kész: a tanulmány tanúsága

A HCV megerősítésére PCR-analízist (polimeráz láncreakció) rendelünk. A PCR vizsgálatok segítenek megtalálni a kórokozó anyagot az RNS szerkezetében, és hatékony terápiát írnak le. A következő esetekben kinevezett:

• a májgyulladás jeleinek azonosítása;
• megelőző szűrővizsgálatok;
• kapcsolattartó személyek vizsgálata;
• a vegyes eredetű hepatitis diagnózisa (a fő kórokozó meghatározása);
• A vírus szaporodásának aktivitási szintjének meghatározása krónikus formában;
• a máj cirrhosis;
• hogy meghatározzák az előírt kezelés hatékonyságát.

A PCR-vizsgálatokat orvos határozza meg a hepatitis kezelésének hatékonyságának meghatározására.

A PCR minőségi és mennyiségi analízise is van. A kvantitatív PCR mutatja az RNS százalékát a vírus hordozóival a vérben, és a minőségi PCR vírus jelenlétét vagy hiányát jelzi. A minőségi pozitív mutató (a hepatitis C RNS jelenléte) szintén kvantitatív vizsgálatot igényel. A hepatitis C kórokozójának magas koncentrációja az átvitel kockázatával jár együtt, azaz mások fertőzésével. Az alacsony mennyiségeket jobban kezelik. A vérben található RNS vírusok mennyisége nem kapcsolódik a betegség intenzitásához. A PCR-analízist az interferon terápia esetében is végezzük, annak érdekében, hogy meghatározzuk a kezelés folyamatának időtartamát és összetettségét.

A hepatitis C minőségi PCR analízisének jellemzői

A polimeráz-láncreakció-indexhez kvalitatív analízist rendelünk minden olyan beteghez, akik vércukorszint-ellenes antitesttel rendelkeznek, és akik visszanyerték és gyógyultak, újra kell vizsgálni. Javasoljuk, hogy a vizsgálatot elvégezni a hepatitis B és, majd abban az esetben pozitív következtetés, és a hepatitis D. minőségileg is analizáltuk reakatsiya kell elvégezni együtt más vérvizsgálat. Az elemzések teljes képet adnak a vírus terjedésének.

A vizsgálati eredmények közül csak pozitív, hepatitis C vagy negatív teszt, azaz a vírus jelenléte vagy hiánya látható. Ha a következtetést "észlelik", akkor a vírus aktívan cselekszik és folytatja tevékenységét. A "nem található" megnevezés azt jelzi, hogy nincs vírus vagy kis mennyisége. Ezzel a mutatóval figyelembe kell venni azt a tényt, hogy a diagnosztikai rendszerek analitikai érzékenysége eltérő, és az RNS hepatitis C még mindig a vérben maradhat, de nem mutatható ki az elemzésben.

A PCR ultra-hepatitis C különösen érzékeny módszere még kis mennyiségben is feltárul. Egy hibridizációs-fluoreszcens vizsgálatot alkalmaznak, amely sokszor magasabb, mint a standard PCR rendszerek. A módszert több esetben használják:

• a hepatitis C gyanús rejtett formái;
• A PCR diagnózisát a kórokozó nem igazolta, de vannak antitestek;
• visszanyerés esetén;
• hogy azonosítsa a fertőzés korai szakaszát.

Vissza a tartalomhoz

Az elemzés magyarázata

A diagnózis végső döntését a HCV PCR dekódolásának hatása befolyásolja, különösen az ultramethod módszerrel. Ennek a kutatásnak a fő hátránya a minta és az anyagok steril körülmények közötti szigorú betartása. A kis eltérés néha az elemző pontatlan következtetéseit mutatja, bonyolítja a diagnózist és a későbbi kezelést. A PCR analízise a hepatitis vírus RNS meghatározására nem mindig mutatja a betegség képét bizalommal, néha pontatlanságok is be vannak engedve, mindkét irányban.

A hepatitisz-vírus diagnosztizálására ajánlott átfogó vizsgálatot alkalmazni.

A mutatók normája

A vírusos hepatitis C-ben található RNS-sel szembeni JgM antitestek hiányát a polimeráz láncreakció analízisének tekintik. Ugyanakkor a szerológiai analízis eredményei azt mutatják, hogy a C-vírus antitestjei jelen vannak, és ez a norma határain belül is fennáll. A minőségi meghatározás nem mutatja a betegség intenzitását, csak a hepatitis C okozó ágensét mutatja az RNS-ben. Az ilyen elemzést a kezelés után meg kell ismételni a tényleges gyógyulás megerősítése érdekében.

eltérések

Ha a HCV RNS-nek megfelelő JgM ellenanyagok vannak jelen, ez egy fejlődő fertőzésre utal. A betegség akut vagy krónikus, különböző szakaszokban manifesztálódik. Ha az antitestek számának csökkenését rögzítik, az elemzés a kezelés során elért eredmények elérését jelzi. Rendkívül ritkán előfordulnak a hamis pozitív eredmények a diagnózisban. A nőknél a terhesség alatt és más fertőző betegségekben szenvedőknél fordulnak elő.

PCR diagnosztika használata

A polimeráz láncreakciót (PCR) a molekuláris biológiában a víruskeresés kísérleti módszerének nevezik. Lehetővé teszi a nukleinsav (DNS) bizonyos fragmenseinek koncentrációjának jelentős növelését a biológiai anyag mintáiban, ami lehetővé teszi számukra a felismerés és számlálást.

Az elemzés az alábbiak szerint történik. A genetikai anyagot (vérmintát), amely potenciálisan tartalmazhatja a kívánt gént, egy kémcsőbe kerül. Ezenkívül a primereket a kémiai úton szintetizáltuk a kívánt gén kis hosszán.

A DNS-hez vagy RNS-polimerázt is hozzáadják az edényhez, képes egy olyan nukleinsavláncot létrehozni, amely teljesen azonos az eredetivel. A kapott kompozícióba négy szabad nukleotidot, egy RNS-hez vagy DNS-hez speciális építőanyagot helyezünk, amelyek közül az egyik a foszfor radioaktív részecskéit tartalmazza.

A kapott elegyet 95-96 ° C-ra melegítjük, aminek következtében a szokásos állapotban összefonódott két DNS-helikát feloldjuk. Ezután a készítményt lehűtjük, ebben az időben a primerek a vírusgenom kívánt régiójához kötődnek anélkül, hogy az RNS (vagy DNS) kettős hélixet állítana elő ismét.

Hűtés közben a polimeráz egy nukleotidok szabad láncolatát keresi. Ennek az enzimnek a működéséhez egyetlen lánc nukleotidra van szükség. Mivel a polimeráz a DNS-szalag mentén csúszik (mint egy gyűrű egy kötélen), nem működhet kettős spirállal.

Ezután ismétlődő ciklusú melegítést végzünk, ami miatt a nukleotidláncokat elválasztjuk. Mindegyik PCR ciklus esetében a mintában lévő kívánt hepatitis gén mennyisége növekszik a geometriai progresszióban, és a genetikai anyag többi része lineárisan keletkezik.

A nukleotidmaradékok oldatának tisztítása és a DNS-szálak elektroforézissel történő molekulasúly-paraméterével történő elválasztása után könnyen meghatározható, hogy a kívánt gén létezik-e a vizsgálati mintában, vagy sem.

A PCR előnyei

A PCR módszerrel végzett laboratóriumi vizsgálat lehetővé teszi, hogy még több információt szerezzen, mint az RNS vírus jelenlétét. A radioaktív sugárzás szintjének meghatározásakor meghatározható, hogy a vizsgált mintában mely genetikai anyagot kezdetben tartalmaznak. Hepatitis esetén határozza meg a vírusterhelés szintjét.

Ennek a módszernek egy másik előnye a CR reakció nagyon nagy érzékenysége. Sokkal magasabb, mint a vírusok észlelésének klasszikus módszerei. Ideális esetben a kívánt gén azonosítása céljából csak egy mintában lévő vírus elegendő a PCR-hez.

Emellett a PCR teljesen specifikus. A primereket olyan módon hozták létre, hogy teljesen megfeleljenek a kívánt gének egyedülálló részeinek, amelyeknek nincs más szekvenciája. Mindkét ujjlenyomat egyedülálló, és minden génben egyedi nukleotidszekvenciák vannak.

Minõségi PCR analízis

A kvalitatív analízis csak a vírus jelenlétét mutatja a vérben. Ezt a vizsgálatot minden olyan betegnél el kell végezni, akikről kimutatták, hogy vérükben a hepatitis C elleni antitestek eredményei csak két érték közül választhatnak: "észleltek" vagy "nem észleltek". Egészséges ember esetében a normát (referenciaérték) "nem szabad észlelni".

Az elvégzett kvalitatív kutatás ilyen eredményeinek speciális értelmezése is van:

• Az eredmény "felfedezett". Ez azt jelenti, hogy a mintában a biológiai anyagot hozott találtak egy olyan RNS-fragmens, amely specifikus a hepatitis C-vírus Következésképpen, ott van a tény, a beteg hepatitis B vírus fertőzés C. Ha az eredmény a kvalitatív PCR „felfedezte”, ez azt jelzi, hogy a vírus ismétlésben és ebben az időben új májsejteket fertőz meg a szervezetben.
• Az eredmény "nem észlelhető". Az ilyen döntés azt jelzi, hogy a mintában a biológiai anyag kapott RNS-fragmentum nem mutatható ki a laboratóriumban, amely specifikus vagy HCV RNS azonos koncentrációban a patogén fertőzés a mintában határ alatt volt az a teszt érzékenységét.

A hepatitis C vírus RNS akut fázisában a PCR technikát alkalmazó kvalitatív vizsgálatok 1-2 hét után azonnal felfedezhetik a szervezet fertőzését, vagyis röviddel a hepatitis elleni antitestek megjelenését megelőzően.

Az ilyen vizsgálatok analízisének megbízhatatlan eredményei a következőkkel érhetők el:

• szennyezett biomassza;
• heparin jelenléte a beteg vérében;
• a mintában lévő vegyi vagy fehérjeanyagok (inhibitorok) jelenléte, amelyek befolyásolják a PCR különböző komponenseit.

A PCR minőségi analíziséhez nem szükséges a beteg speciális preparálása a vizsgálat elvégzéséhez. A vénás vért anyagként használják.

Az eredmények értékelése

A kvalitatív PCR-tesztek bizonyos fokú érzékenységgel rendelkeznek, és a laboratóriumi pontosságtól és a laboratóriumi felszerelés mértékétől függően 10 és 500 NE / ml között változhatnak.

Ez azt jelenti, hogy ha a vírus a vérmintában nagyon alacsony koncentrációban van jelen (kevesebb, mint az adott laboratórium érzékenységi küszöbe), akkor a beteg páciensét "nem detektálják". Ennek következtében, ha minőségi PCR-elemzést végeznek alacsony vírusszinttel (vírus alacsony koncentrációja), például antivirális terápiában részesülő betegeknél, nagyon fontos tudni a diagnosztikai rendszer érzékenységi küszöbét.

Diagnosztikai rendszerek változatai

A virológiai válasz szabályozására ajánlott az antivirális kezelés legalább 50 NE / ml érzékenységi küszöbértékű diagnosztikai rendszerek alkalmazása. Ezek a kritériumok teljesülnek, például: Cobas Ampicolor VGS-teszt elemzők (50 IU / ml pontossággal), valamint RealBest HCV RNS (15 IU / ml érzékenységgel).

A WHO szerint ajánlásokat létrehozó végleges diagnózist a hepatitis C, meg kell kizárólag alapján hármas kimutatására RNS-vírus szérummintákon szenvedő beteg nincs más hepatitis marker faj.

A PCR-eljárások mellett TMA-vizsgálatot (transzkripciós amplifikációs módszert) is alkalmaznak HCV RNS kimutatására betegekben. A legjobb érzékenység küszöbérték (5-10 NE / ml), de hazánkban ez a tesztelési módszer még nem túl gyakori.

A vírusok észlelt módosításainak hatóköre

Ez a kvalitatív meghatározás a hepatitis C vírus RNS jelenlétében szérumban lehetővé teszi számos vírus genotípusának meghatározását. Jelenleg a tudomány több mint hat genotípust ismeri a vírusról, valamint a betegség mintegy 10 altípusairól.

Az 1, 2, 3 genotípusú vírusok gyakoriak országunkban. Laboratories képes észlelni a következő genotípusok: 1a, 1b, 2a, 2b és 2c és 3, 4, 5a és 6. függetlenül altípus. Minden vírusmódosítás esetében a detektálás sajátossága 100%.

PCR mennyiségi elemzése

Kvantitatív PCR-teszt segítségével megállapítják a vérminták hepatitis vírusának koncentrációját (vírus terhelés). Ez a viremia-teszt (a vírus koncentrációja) lehetővé teszi egy meghatározott genetikai anyag (a leginkább vírusos RNS) egységek számának meghatározását, amelyet egy bizonyos mennyiségben észlelnek. Ebben az esetben határozza meg a koncentrációját 1 ml-ben, ami megfelel 1 cu. cm.

Az analízis mennyiségi paramétereit számokban fejezzük ki, ezt a mérést nemzetközi egységegységként (IU) milliliterenként (ml), ME / ml-ként jelöljük. Néhány laboratóriumban a vírus mennyisége más egységekben is meghatározható: a példányok számát ml-enként, másolatként / ml-nek.

• Időzítés A hepatitis C esetében a PCR ilyen kvantitatív analízise a terápia megkezdése előtt történik. Aztán az 1., 4., 12. és 24. hetet. A 12. héten végzett értékelés indikatív, lehetővé teszi a terápia hatékonyságának meghatározását.
• Elemzés előkészítése. A PCR mennyiségi elemzéséhez nem szükséges a beteg speciális felkészítése a vizsgálathoz. A mintavétel előtt fél órával nem szabad dohányozni. Vénás vért használnak laboratóriumi anyagként.

Az eredmények értékelése

Különböző laboratóriumi vizsgálati rendszerek esetében ez a mutató különböző konverziós tényezőket mutat be IU / ml-ben. Átlagosan egy konverziós paramétert alkalmaznak, amelyben 4 kópia / ml = 1 NE / ml. Ez például, ha a laboratórium 2,4 * 10 6 kópia / ml PCR-analízist eredményez, akkor ezt a paramétert 4-gyel kell osztani, és 6 * 10 5 NE / ml-t kapunk.

A 800 000 NE / ml magas terhelési szint magasnak tekinthető, ami megközelítőleg 3 000 000 példány / ml index. Az alacsony viremia egyes szerzők szerint a kvantitatív PCR 400 000 NE / ml alatti paramétereinek felel meg.

A kvantitatív teszt eredményeként a végeredmény nem digitális érték formájában jeleníthető meg, hanem: "a mérési tartomány alatt" vagy "nem detektálható".

• Értékelés: "a mérési tartomány alatt". Ez azt jelzi, hogy a mennyiségi vizsgálat nem tudta kimutatni a hepatitis C virális RNS-t, de maga a vírus igen kis koncentrációban jelen van a szervezetben. Ezt egy további kvalitatív vizsgálat is jelzi, amely igazolja a vírus jelenlétének tényét.
• Értékelés: "nem észlelt". Ez az eredmény azt jelzi, hogy a mennyiségi vizsgálat nem észlelt vírust az RNS mintában.

A vírusterhelés paramétere elsősorban a betegség fertőzőképességének mértékét, a beteg fertőzőképességének mértékét határozza meg. Minél magasabb a páciens koncentrációja a vírusnak, annál nagyobb a valószínűsége annak, hogy más emberekre átruházzák. Például, amikor szexuális kapcsolatban áll egy beteg vagy egy függőleges út. Az ilyen mennyiségi mutató segít a páciens kezelésének hatékonyságának meghatározásában.

A PCC mennyiségi elemzésének elvégzése fontos az antivirális terápiához, értékeli sikerét és ütemezi a tanfolyam időtartamát. Tehát a test gyors reakciója a kezelés és alacsony mértékű viremia esetén a terápia időtartama csökkenthető.

A mennyiségi PCR paraméter lassú csökkenésével az antivirális terápiát ki kell terjeszteni vagy módosítani. Ha a vírusterhelés szintje alacsony, akkor ez a terápia kedvező tényezője, ha magas, akkor az alkalmazott kezelési módszer hatástalan, és a gyógyszereknek vagy azok használatának módszereit módosítani kell.

A hepatitis C-vel végzett PCR diagnosztizálása

Nem mindenki tudja, hogy mi a hepatitis C PCR diagnosztikai módszere. A betegségek egyik legelterjedtebb csoportja a gyomor-bél traktus fertőző betegsége. Leggyakrabban gyomor (fekélyek), belek (colitis, enteritis) és máj (hepatitis) szenvednek.

A fent említett szervek között a májra a legnagyobb terhet rendelik. A szervezetben a máj szerepe rendkívül fontos:

1. Szinte minden metabolikus reakció a májban fordul elő (itt minden olyan létfontosságú komponens, amely lehetővé teszi a test működését).
2. A máj a fő szerv, amely elvégzi a méregtelenítő funkciót. Segítségével (különösen epével) számos szubsztrátot eltávolítanak, ami mérgezést okozhat, és súlyos következményekhez vezethet.

Sajnos sokan nem követik az egészségüket, mert a máj szenved. Általában különböző etiológiájú hepatitis alakul ki (vírusos, mérgező).

A hepatitis meghatározása

A vírusos hepatitis fontos helyet foglal el a májbetegségek között. A betegség lefolyásának súlyossága, a kezelés bonyolultsága miatt ezek az elsőek a szerv másik természetének kórtörténetében.

Minden hepatitis akut és krónikus. Akut hordozó A és B hepatitis. A krónikus az első helyen a hepatitis C.

Ezt a betegséget a hepatitisz C vírus okozza, amely jellemzője, hogy a betegség hosszú távon kóros klinikai tünetek nélkül is fennállhat.

Főleg a vér által közvetített. A véráramlással a vírus belép a májba, ahol a sejtjeiben szaporodni kezd. A virionok felhalmozódása következtében a fertőzött hepatocita elpusztul. Válaszul az antitestek kezdődnek, amelyek megtámadják a hepatocyták maradványait. Emiatt idővel egy medence épül a májsejtek ellen, ami súlyosbítja a betegség lefolyását.

Mivel a betegség tünetmentes vagy tünetmentes, és a klinikai tünetek csak a sejtek jelentős károsodásával járnak, ez a betegség diagnosztikai módszerek létrehozását igényli a jelenlétének azonosítása és a megfelelő intézkedések megtétele érdekében.

A hepatitis C diagnózisa: kvalitatív és kvantitatív elemzések

Jelenleg olyan módszereket alkalmaznak, mint a máj biopszia, immunogram a hepatitis C diagnosztizálására.

Lehetővé teszik az érintett májsejtek (májbiopsziás vizsgálat) vagy a fertőzött sejtekkel szembeni specifikus antitestek (immunogram) közvetlen meghatározását. Van azonban egy olyan módszer, amely megbízhatóan meghatározza a vírus jelenlétét. Ez a PCR egy polimeráz láncreakció.

Ennek a módszernek az a lényege, hogy bizonyos körülmények között az RNS láncok kialakulása bekövetkezik. Ez annak a ténynek tudható be, hogy a vírusrészecskék fragmentumai vannak a vérben vagy a biopsziás mintában. Ha a táptalajban egyes molekulákkal kombinálódnak, a vírus RNS-szel komplementer láncok szintézise megtörténik. A hepatitis C vírus ismert nukleotidszekvenciájával végzett későbbi elemzésük és összehasonlításuk alapján megállapítható, hogy van-e vírus a szervezetben és van-e májkárosodás.

A PCR-t a vér hepatitis vírusával szembeni specifikus antitestek detektálása után végezzük. A teszt után az eredmény megjelenik - RNS "észlelt" vagy "nem észlelt". Esetenként azt mondja, hogy "nem elég anyag" - ebben az esetben a hepatitis C ismételt elemzésére.

Ha a vírusrészecskék száma kevesebb, mint a szükséges minimális összeget, akkor beszélhetünk az a tény, hogy a hepatitis B nincs jelen, és a minimális mennyiségű genetikai anyag lehet „zavaros”, mert a mimikri a genetikai anyag, vagy bizonyos szekvenciák nukleotidok az esély egybeeshetne, hogy a vírus.

1. PCR-negatív eredményt adhat, ha valójában van vírusrészecskék a vérben, de ezek olyan kicsi (fertőzés történt a közelmúltban, vagy az elemzés előzte meg hosszú és intenzív antivirális terápia), hogy a vizsgálati rendszer egyszerűen nem volt képes megfelelően meghatározni azok koncentrációjától. RNS - "nem észlelt".
2. Ha a PCR-nek pozitív eredménye van, akkor a vérben olyan sok vírusrészecske van, hogy számuk meghaladja a tesztrendszer érzékenységének alacsonyabb küszöbét. Ebben az esetben a fertőző folyamat kialakulásának kockázata magas (vagy már eléggé elhanyagolt állapotban van). Általában a vírus nagy mennyisége már jelzi a kezelést és a későbbi májtranszplantációt.

Néha a teszt hamis-pozitív vagy hamis-negatív lehet.

A hepatitis PCR hamis negatív eredményét akkor lehet megfigyelni, ha a reakcióközegben olyan komponensek vannak, amelyek gátolják a vírusrészecskék másolatainak képződését. Emiatt nem lehet valós képet kapni a vér állapotáról, ami hozzájárul a vírus átadásához és a betegség progressziójához. A reakciót befolyásolhatja a heparin jelenléte a vérben (a vér relatív viszkozitásának csökkenése miatt). Az analízis téves értelmezése akkor is lehetséges, ha a vizsgálati anyag szállításának és tárolásának feltételei nem teljesülnek.

Hamis pozitív eredmények, amikor a hepatitis C-t diagnosztizálják, a PCR-t leggyakrabban akkor adják meg, amikor a kémcső vagy a munkaközeg szennyezett. Emellett pozitív eredmények figyelhetők meg a többi csoport hepatitisz jelenlétében és vírusainál (keresztreakció miatt).

A PCR kimutatása a hepatitis C kimutatására

A nagyszámú krioglobulin vérben való jelenléte szintén közvetlenül befolyásolja a PCR viselkedését. Emiatt a vizsgálat előtt a hepatitis C szükség, hogy meghatározzuk azok koncentrációja a vérben kimutatására torzítása az eredményt előre, és megakadályozzák azt.

A meghatározott vizsgálatok elvégzése után világossá válik, hogy van-e vérvírus-részecskék. Amikor meghatározásra kerülnek, azonnal ajánlott azonnali vírusellenes terápiát kezdeni a folyamat progressziójának lassítása érdekében. A hepatitis B-vel ellentétben a hepatitis C-re nincs komplett gyógymód; a betegség csak látens szakaszba kerül, és lassabban indul. A máj veresége elkerülhetetlen. A folyamat utolsó szakaszában, amikor a máj már nem képes megbirkózni a funkciójával, szükség lehet átültetésre.

A kezelést elsősorban két gyógyszerrel - interferonnal és ribavirinnel végzik.

Hatékonyságuk a májsejtek elváltozásainak lelassításában bizonyított. Időközben infúziós terápiát kell alkalmazni a máj munkájának megkönnyítése érdekében.

Minden olyan beteg, aki a vérben lévő vírusrészecskék számának növekedését látta, feltétlenül a hepatológus számláján van. Évente több alkalommal ajánlott megelőző vizsgálatot végezni a folyamat előrehaladásának és a transzplantációra utaló jelek időben történő kimutatásának meghatározására. Ezen kívül használhatsz és májvédőket is, bár az orvosok véleménye némiképp eltér. Egyesek úgy vélik, hogy ezek a gyógyszerek leállíthatják a folyamatot, és megóvhatják a nem gyógyult májsejteket; Mások meg vannak győződve arról, hogy nincs értelme elfogadni őket, és hogy intenzív antivirális terápiát kell végrehajtani.

Így a hepatitis C a betegségek kategóriájába tartozik, amelynek észlelése nehézségeket okoz. A diagnosztikai módszerek javítása, valamint az időben történő megelőző vizsgálatok csökkenti a betegség előfordulását. Fontos a betegség megelőzése is. Óvatosan kerülni kell a vérrel való érintkezést, és meg kell tagadni a kábítószert, csak akkor, ha ez a betegség megszűnik. A megelőzésben és a kezelésben a páciens tudatos hozzáállása az egészségéhez.

Ptsr nem észlelt hepatitiset

A hepatitis C-re vonatkozó PCR analízise intravénás vérmintavétel a hepatitis RNS vírus genetikai szinten történő meghatározása céljából. A neve a kutatási módszerből származott.

A PCR egy polimeráz láncreakció, amelynek segítségével meghatározzuk a hepatitis C jelenlétét a vérszérumban, és az eredmény pozitív és negatív lehet.

A PCR módszer előnyei

Ez a diagnosztikai módszer a következő előnyökkel jár:

1. A PCR módszer lehetővé teszi a következő eredmények meghatározását:
   • RNS vírus jelenléte;
   • a radioaktív sugárzás mértékét;
   • kezdeti genetikai információ;
   • a genetikai adatok egyediségét és egyediségét.
2. Bármely szükséges klinikai anyag használható:
   • vér;
   • plazma;
   • vizelet;
   • biológiai folyadékok és váladék;
   • váladék és mások.
3. Lehetővé teszi a vérben egynél több mikroorganizmus meghatározását, más mintákkal ellentétben.
4. Az eredmény 24 órán belül.
5. Az analízis tárolásának és továbbításának egyszerűsített módszereit, a kórokozókat még halott környezetben is meghatározzák.
6. A PCR egyedülállósága lehetővé teszi olyan mikroorganizmusok kimutatását, amelyek nem engednek más mintának.
7. A reagensek nagyfokú érzékenysége, a teszt a legpontosabb a maga nemében.

A PCR minőségi analízisének jellemzői

Minőségi vizsgálatot végeznek a vírus vérben való jelenlétének megállapítására és negatív vagy pozitív eredmény elérésére.

Az ilyen típusú diagnózisra utaló jel a hepatitis C elleni antitestek kimutatása a páciens testében.

Lehetséges kimenetelek:

• észlelt (pozitív);
• nem észlelt (negatív).

A kvalitatív vizsgálat nem alkalmas olyan betegeknél, akiknél a vírus nagyon alacsony a vérben, ezért bizonyos érzékenységgel rendelkezik.

A hepatitis C vírus kimutatására néhány héttel a szervezet fertőzését követően, még akkor is, ha nincsenek ilyen kórokozó elleni antitestek. Ez az eredmény azt jelzi, hogy a hepatitis C-re jellemző RNS fragmentum jelen van a szervezetben és egy vérmintát.

A páciens az adott vírussal fertőzöttnek tekintendő, és a kórokozó sejtek további terjedése a szervezetben történik.

Az eredmény "nem található"

Ez a változat azt jelzi, hogy a hepatitis C-re specifikus RNS-fragmentumok nem állnak rendelkezésre a biológiai anyag mintájában, ez negatív eredmény.

A teszt érzékenysége nem teszi lehetővé az RNS-fragmensek alacsony tartalmának feltárását, így az "nem detektált" eredmény nem mindig elfogadható.

Az eredmények értelmezésének jellemzői

Az eredmények értelmezésének fő jellemzője a PCR módszer érzékenységi küszöbe.

Az alábbi mutatóktól függ:

• a vizsgálat pontossága;
• a használt berendezés típusát és minőségét.

Megjegyezzük, hogy az érzékenység 10-500 NE / ml-en belül változhat. Ebből következik, hogy ha a vírus a vizsgált beteg testében 10 NE / ml-nél kisebb koncentrációban van jelen, a teszt az "nem detektált" eredményt jeleníti meg. De ez nem jelenti azt, hogy a kórokozó teljesen hiányzik.

Diagnosztikai rendszerek változatai

Jelenleg különböznek a diagnosztikai rendszerek következő verziói:

1. Ha a vértestvérrel végzett vérmintát veszik a páciensből, a diagnosztikai rendszereket legalább 50 NE / ml érzékenységgel kell alkalmazni. Ebből a célból a következő elemzőket használják:
   • Cobas Ampicolor HCV-teszt;
   • A HCV RealBest RNS-je.
2. A "hepatitis C" végleges diagnózisának feltárásához az RNS-vírust fel kell ismerni a biológiai anyag három különböző kerítésében. Ezeket az ajánlásokat az Egészségügyi Világszervezet fejlesztette ki. Ha a teljes háromszoros negatív, akkor a diagnózist nem erősítették meg.
3. Jelen pillanatban a PCR módszer mellett pontosabb teszt is létezik, amelyet TMA-nak neveznek (transzkripciós amplifikációs módszer). Az érzékenység küszöbértéke sokkal magasabb, mint más diagnosztikai módszereknél.

A vírusok észlelt módosításainak hatóköre

A genetika fejlődésének ezen szakaszában a vírusok módosításának számos típusa és változata ismeretes.

A hazai laboratóriumi diagnosztika 100% -os pontossággal meghatározhatja a következő genotípusokat:

A PCR kvantitatív analízisének jellemzői

A mennyiségi elemzés a hepatitis C vírus emberi testben történő meghatározását jelenti. A vizsgálat során az RNS-t és a kiindulási anyag vírusterhelését PCR-vel határozzuk meg. Egyébként elmondható, hogy a teszt lehetővé teszi számunkra, hogy meghatározzuk, hány virális sejt van a biológiai folyadékban. Ehhez a vizsgálathoz csak vénás vért alkalmaznak. A teszthez nincs külön előkészület.

A mennyiségi elemzés lehetővé teszi, hogy figyelemmel kísérje a már megkezdett kezelést, és értékelje annak hatékonyságát. Az értékeléshez vegye be a vizsgálati adatokat a terápia előtt és alatt. A kapott eredmények segítségével meg lehet állapítani a betegség lefolyását.

Ha a kiválasztott kezelés módja 3 hónap után sikeres, az RNS mennyiségének többszörösére kell csökkennie. Az ajánlások szerint a mennyiségi elemzést egy, majd három és hat hónappal később hajtják végre. A sikeres kezelés utolsó eredményének negatívnak kell lennie.

Kvantitatív PCR-vizsgálat eredményeinek értékelése

Hazánkban két lehetőség van a kvantitatív PCR-vizsgálat eredményének értékelésére:

• a biológiai folyadék milliliterenként másolatok száma;
• a nemzetközi egységek száma milliliterenként.

A nemzetközi egységek beszerzéséhez a másolatok számát négyszer osztja el.

2 stressz vagy viremia van:

• magas, 800 000 NE / ml feletti PCR-rel;
• alacsony, 400 000 NE / ml alatti PCR-rel.

A kvantitatív teszt eredménye két lehetőséget kínál:

• "A mérési tartomány alatt";
• "Nem észlelt" (negatív).

Pontszám: "a mérési tartomány alatt"

Ez a következtetés akkor jön létre, amikor a kvantitatív RNS-teszt nem érzékeli a hepatitis C okozó ágens sejtjeit a forrásanyagban, de a vírus még mindig jelen van a vérben. A vizsgálat megbízhatóságát kvalitatív módszerrel igazolják, mivel a mennyiségi teszt érzékenységi küszöbe nem képes kimutatni a kórokozó kicsi értékeit és koncentrációját.

Értékelés: "nem található"

Ezt a következtetést akkor kell megtenni, amikor a diagnózis során a kiindulási anyagban nem észleltek HCV RNS-vírusokat, ez negatív eredmény.

A kvantitatív PCR-vizsgálat eredményeinek értelmezése

A vírus terhelésindikátor segítségével meghatározhatja:

• a betegség elhanyagolásának mértéke;
• mennyire fertőző a beteg;
• az antivirális terápia hatékonyságát.

Minél magasabb a hepatitis C vírus indexe a szervezetben, annál veszélyesebb a beteg a környező emberek számára, és annál fokozatosabb a betegsége.

A hepatitis C-re vonatkozó PCR a diagnózis fontos módszere, különösen a terápiás folyamatban. A kapott negatív vagy pozitív eredményeknek köszönhetően lehetőség van hatékonyságuk értékelésére, a beteg teljes gyógyítására vagy a kezelés időtartamának lerövidítésére.

szerző: Petrunina Svetlana Sergeevna,
nővér intenzív osztály,
specializáció-akut mérgezés, újraélesztés,
különösen a moizhivot.ru

Hasznos videó a polimeráz láncreakcióról

Gasztroenterológusok a városban

Város kiválasztása:

A polimeráz láncreakció kvalitatív elemzése - a hepatitis C-re vonatkozó PCR meghatározza a HCV jelenlétét vagy hiányát a szervezetben. A laboratóriumban megvizsgálják az RNS szerkezetét, amelyben a vírus található. Ha a C-vírus kimutatható, szükségessé válik a kezelés folyamata, mivel az elhanyagolt májbetegség komoly következményekkel jár. A kinyerés után kvalitatív PCR-t végzünk, hogy megerősítsük az antitestek hiányát. Kinevezett és megelőző vizsgálat. A vér kórokozója alacsony koncentrációban a PCR (kvalitatív) nem képes észlelni semmit, mert a diagnosztikai rendszernek érzékenységi küszöbe van. A betegség kezdeti szakaszában vagy enyhe formában a PCR-t végül ultrahangos berendezéssel diagnosztizálják.

Mi az RNS vírus?

A hepatitis C vírus (vagy a hepatitis C vírus RNS) RNS-ről nevezik magát májbetegségnek. A C vírus egy egészséges sejthez kötődik, és behatol. Idővel elterjedt az egész testben, csak a vérbe jut. Ennek eredményeképpen a kórokozó behatol a májba, megolvasztja sejtjeit és keményen dolgozik. A májsejtek (hepatociták) a hatása alatt, változásokon át, és ebből a veszteségből dolgoznak. Minél hosszabb a C vírus a májban, annál több sejt hal meg. Idővel veszélyes betegségek alakulnak ki, amelyek rosszindulatú degenerációhoz és halálhoz vezetnek.

A máj fertőzése ilyen típusú vírussal semmilyen módon nem nyilvánulhat meg külsőleg. Sok éven át vagy több tucat évig a fertőzött személy egészségesnek érzi magát, és csak egy véletlen vizsgálat leggyakrabban patológiát tár fel. A hepatitis vérének adományozásakor az emberi gén (DNS) részét képező RNS (ribonukleinsav) lánc egy részét vizsgáljuk. A laboratóriumi kutatások eredményeit nem szabad az öngyógyításra használni, mert ez csak indikátor. Az orvos meghatározza a pontos képet és további diagnózist.

Ha kész: a tanulmány tanúsága

A HCV megerősítésére PCR-analízist (polimeráz láncreakció) rendelünk. A PCR vizsgálatok segítenek megtalálni a kórokozó anyagot az RNS szerkezetében, és hatékony terápiát írnak le. A következő esetekben kinevezett:

• a májgyulladás jeleinek azonosítása;
• megelőző szűrővizsgálatok;
• kapcsolattartó személyek vizsgálata;
• a vegyes eredetű hepatitis diagnózisa (a fő kórokozó meghatározása);
• A vírus szaporodásának aktivitási szintjének meghatározása krónikus formában;
• a máj cirrhosis;
• hogy meghatározzák az előírt kezelés hatékonyságát.

A PCR-vizsgálatokat orvos határozza meg a hepatitis kezelésének hatékonyságának meghatározására.

A PCR minőségi és mennyiségi analízise is van. A kvantitatív PCR mutatja az RNS százalékát a vírus hordozóival a vérben, és a minőségi PCR vírus jelenlétét vagy hiányát jelzi. A minőségi pozitív mutató (a hepatitis C RNS jelenléte) szintén kvantitatív vizsgálatot igényel. A hepatitis C kórokozójának magas koncentrációja az átvitel kockázatával jár együtt, azaz mások fertőzésével. Az alacsony mennyiségeket jobban kezelik. A vérben található RNS vírusok mennyisége nem kapcsolódik a betegség intenzitásához. A PCR-analízist az interferon terápia esetében is végezzük, annak érdekében, hogy meghatározzuk a kezelés folyamatának időtartamát és összetettségét.

A hepatitis C minőségi PCR analízisének jellemzői

A polimeráz-láncreakció-indexhez kvalitatív analízist rendelünk minden olyan beteghez, akik vércukorszint-ellenes antitesttel rendelkeznek, és akik visszanyerték és gyógyultak, újra kell vizsgálni. Javasoljuk, hogy a vizsgálatot elvégezni a hepatitis B és, majd abban az esetben pozitív következtetés, és a hepatitis D. minőségileg is analizáltuk reakatsiya kell elvégezni együtt más vérvizsgálat. Az elemzések teljes képet adnak a vírus terjedésének.

A vizsgálati eredmények közül csak pozitív, hepatitis C vagy negatív teszt, azaz a vírus jelenléte vagy hiánya látható. Ha a következtetést "észlelik", akkor a vírus aktívan cselekszik és folytatja tevékenységét. A "nem található" megnevezés azt jelzi, hogy nincs vírus vagy kis mennyisége. Ezzel a mutatóval figyelembe kell venni azt a tényt, hogy a diagnosztikai rendszerek analitikai érzékenysége eltérő, és az RNS hepatitis C még mindig a vérben maradhat, de nem mutatható ki az elemzésben.

A PCR ultra-hepatitis C különösen érzékeny módszere még kis mennyiségben is feltárul. Egy hibridizációs-fluoreszcens vizsgálatot alkalmaznak, amely sokszor magasabb, mint a standard PCR rendszerek. A módszert több esetben használják:

• a hepatitis C gyanús rejtett formái;
• A PCR diagnózisát a kórokozó nem igazolta, de vannak antitestek;
• visszanyerés esetén;
• hogy azonosítsa a fertőzés korai szakaszát.

Az elemzés magyarázata

A hepatitis C vírus RNS meghatározása polimeráz láncreakcióval.

A diagnózis végső döntését a HCV PCR dekódolásának hatása befolyásolja, különösen az ultramethod módszerrel. Ennek a kutatásnak a fő hátránya a minta és az anyagok steril körülmények közötti szigorú betartása. A kis eltérés néha az elemző pontatlan következtetéseit mutatja, bonyolítja a diagnózist és a későbbi kezelést. A PCR analízise a hepatitis vírus RNS meghatározására nem mindig mutatja a betegség képét bizalommal, néha pontatlanságok is be vannak engedve, mindkét irányban.

A hepatitisz-vírus diagnosztizálására ajánlott átfogó vizsgálatot alkalmazni.

A mutatók normája

A vírusos hepatitis C-ben található RNS-sel szembeni JgM antitestek hiányát a polimeráz láncreakció analízisének tekintik. Ugyanakkor a szerológiai analízis eredményei azt mutatják, hogy a C-vírus antitestjei jelen vannak, és ez a norma határain belül is fennáll. A minőségi meghatározás nem mutatja a betegség intenzitását, csak a hepatitis C okozó ágensét mutatja az RNS-ben. Az ilyen elemzést a kezelés után meg kell ismételni a tényleges gyógyulás megerősítése érdekében.

eltérések

Ha a HCV RNS-nek megfelelő JgM ellenanyagok vannak jelen, ez egy fejlődő fertőzésre utal. A betegség akut vagy krónikus, különböző szakaszokban manifesztálódik. Ha az antitestek számának csökkenését rögzítik, az elemzés a kezelés során elért eredmények elérését jelzi. Rendkívül ritkán előfordulnak a hamis pozitív eredmények a diagnózisban. A nőknél a terhesség alatt és más fertőző betegségekben szenvedőknél fordulnak elő.

PCR-vizsgálat a hepatitis C-re: típusok, indikációk, átirat

A vírusos hepatitis C súlyos betegség, amely májkárosodással jár. A betegek nyolcvan százalékában krónikus formában jár. A vírus szaporodik a májsejtekben - májsejtekben - és halálát okozza. A halott szövetet kötőszöveti foci váltja fel, a fibrózis kialakul.

A fejlesztés a máj fibrózis képtelen ellátni a funkcióját, kezdődik cirrhosis, ami veszélyes szövődményei: egyre nagyobb nyomás nehezedik a kapuvénában, gyomor-bélrendszeri vérzés, károsodott véralvadás mentális változások miatt kárt agyi magok mérgező termékeket.

A betegség oka a Flaviviridae családból származó vírusfertőzés, amely RNS-vírus egy típusa. Ez azt jelenti, hogy a genetikai anyag, amellyel a patogén fehérjéit szintetizálják, egy ribonukleinsav molekulában kódoljuk. A fertőzés a vérben, szexuális úton történik, és terhes nőtől a magzatig. Sajnos a fertőzés és az antitestek termelésének kezdete meglehetősen nagy mennyiségű időtartamot eredményezhet - két hétről hat hónapra. Ez nem teszi lehetővé a fertőzés meghatározását az enzim immunvizsgálat módszerével és a kezdeti kezelést a korai stádiumban.

Mi a PCR elemzés?

A PCR molekuláris analízis olyan módszere, amely lehetővé teszi a kórokozó genetikai anyagának kimutatását a fertőzés utáni első héten polimeráz láncreakcióval. A tanulmány nagyfokú specifitást, pontosságot és nem csak a vírus jelenlétének vagy hiányának meghatározását, hanem koncentrációját és genotípusát is meghatározza.

A vizsgálat elvégzéséhez vegye be a páciens vérét, amelyben potenciálisan megtalálható a vírus RNS-je. A vérben a primereket hozzáadjuk mesterségesen szintetizált részecskékhez, a kívánt gén kis hossza, és az RNS polimeráz egy speciális enzim, amely sokszorozza a kórokozó genetikai anyagának mennyiségét. Egy speciális berendezés segítségével több fűtési és hűtési ciklust hajtanak végre. Az anyagot ezután elemezzük és összehasonlítjuk az ismert vírusgénekkel, amelyek alapján következtetés születik a fertőzés jelenlétéről vagy hiányáról.

A hepatitis C PCR analízis típusai

A PCR-elemzés három típusa létezik:

1. Minõségi PCR analízis. A tanulmány első szakasza. Lehetővé teszi a vírus genetikai anyagának azonosítását a vérben.

PCR mennyiségi elemzése. Lehetővé teszi a vírus terhelésének meghatározását - a patogén genetikai anyagának koncentrációját egy milliliter vérben. Ezt a vizsgálatot a terápia megkezdése előtt végezzük, majd az első, negyedik, tizenkettedik és (ha a tanfolyam hosszú) a kezelés huszonnegyedik hete annak hatékonyságának értékelésére.

genotipizáláshoz. A hepatitis C kórokozója gyakran és gyorsan mutál. A bolygón a vírus genotípusának hét variánsát találtam. Oroszországban az első, a második és a harmadik típus gyakori. A genotípusok mindegyike eltérő terápiás ellenállással rendelkezik, például az első típusú kezelés hatékonysága hatvan százalék, a második és a harmadik pedig nyolcvanöt. Ezért megfelelő gyógyszerek kiválasztása és megfelelő időtartamú kezelési eljárás meghatározása érdekében pontosan meg kell határozni, hogy a beteg milyen típusú vírussal fertőzött.

Javallatok a hepatitis C PCR analízishez

PCR-vizsgálatot írnak elő a következő esetekben:

• érintkezés egy beteg emberrel, ami fertőzéshez vezethet;
• pozitív enzimkapcsolt immunvizsgálat;
• a májcirrózis jelei: a májméret megváltozása, a megnagyobbodott lép, a szubkután vénás plexus megjelenése a hasra;
• a májkárosodás tüneteinek megjelenése: fájdalom a hasüreg jobb oldalán, a bőr sárgulása;
• az ALT és az AST fokozott aktivitása a biokémiai vérvizsgálatban;
• a kezelés megkezdése előtt a vírusterhelés meghatározására;
• az antivirális terápia hatékonyságának monitorozása;
• a kezelés befejezése után a relapszus nyomon követése;
• a diagnosztizált hepatitisz B jelenlétében, kizárva a vegyes májkárosodást.

A hepatitis C PCR-vizsgálat dekódolása

A hepatitis C-re vonatkozó PCR-analízis és enzim immunvizsgálat dekódolását egy hepatológus vagy fertőző betegség szakembernek kell foglalkoznia. A PCR eredményeinek elemzése biokémiai vérvizsgálattal, biopsziával és ultrahanggal kombinálva szükséges. Csak szakképzett orvos képes lesz elemezni a vizsgálatok eredményeit, és ezek alapján meghatározza a megfelelő kezelést.

Minőségi elemzés dekódolása.

A kórokozó genetikai anyagát az elemzett biológiai anyag tartalmazza. A fertőzés megerősítést nyert.

Nincs fertőzés, vagy a patogén RNS mennyisége az érzékenységi határ alatt van.

Kvantitatív elemzés dekódolása.

Egészséges emberek számára normális szám. Ez azt jelenti, hogy nincs a hepatitis C RNS a vizsgálati anyagban, vagy koncentrációja a vizsgálat érzékenységi küszöb alatt van.

Az RNS koncentrációja a mennyiségi tartomány alatt van. Az ilyen eredményeket nagyon óvatosan értelmezik, korrelálják más tanulmányok adataival, gyakran végeznek egy második vizsgálatot.

A vírusterhelés szintje egy adott koncentrációban alacsony. Általában a vírus mennyiségének csökkenése azt jelenti, hogy a kezelés sikeres.

Több mint 8 * 10 ^ 5 NE / ml

A vírusterhelés szintje egy adott koncentrációban magasnak tekinthető.

Több mint 2,4 * 10 ^ 7 NE / ml

Az RNS mennyisége meghaladja a számszerűsítés tartományának felső határát. Lehetséges következtetéseket levonni a vírusterhelés mértéke miatt. Általában ilyen esetekben a tesztet megismétlik a vérminta hígításával.

A genotipizálás dekódolása.

Egy adott genotípus RNS-ét detektáltuk

A biomateriában a hepatitisz C vírust kimutatják egy adott genotípus és altípus. Az eredmény latin számokkal és latin betűkkel van kódolva, például - 1a, 2b. Jelenleg hét genotípus és hatvanhét altípus van, de Oroszországban csak három első típus van.

Hepatitis C vírus RNS-t detektáltunk

A vérben az RNS egy ritka genotípust talál Oroszország számára, amely nem tulajdonítható az első, második vagy harmadik típusnak. Több kutatásra van szükség.

Ez az eredmény azt jelzi, hogy a beteg egészséges vagy a kórokozó RNS szintje túl kicsi.

Lehetséges a helyzet, ha a hepatitis C PCR-analízise negatív, és az enzim immunvizsgálat kimutatja a vírus ellenes antitesteket. Ez azt jelenti, hogy a beteg acut formában hepatitis C-t kapott és meggyógyult. Körülbelül húsz fertőzés esedékessé teszi a spontán gyógyulást, ha a páciens testének elegendő rezisztenciája van a fertőzésre.

Annak ellenére, hogy a PCR nagyon pontos elemzés, annak eredménye az alábbi esetekben torzulhat:

• a vért nem megfelelő körülmények között a laboratóriumba szállították, a hőmérsékleti rendszert megsértették;
• a bioméret mintája szennyezett;
• a vérben maradt nyomokban a heparin és más antikoagulánsok;
• A vizsgált anyagban gátlók voltak - olyan anyagok, amelyek lassítják vagy leállítják a polimeráz láncreakciót.

A PCR előnyei más módszerekkel szemben

1. Diagnózis a korai szakaszban. A PCR detektálja a betegség kórokozójának genetikai anyagát. Az immunfluoreszcencia analízis segítségével csak immunglobulinokat lehet meghatározni, amelyeket a szervezet a fertőzésre adott válaszként termel. Hepatitis C fertőzés esetén a fertőzés és az immunválasz kialakulása között eltelt idő több hét és hónap lehet, mely időpontban az ELISA hatástalanná válik. A PCR már a fertőzés utáni első héten ad választ.

Alacsony hibalehetőség. A vizsgált anyagban meghatározzuk a genetikai anyagot, amely csak egyfajta kórokozóra jellemző. Ez lehetővé teszi a hamis eredmények kizárását. Az ELISA-val hibák léphetnek fel, mivel ugyanazok az antitestek felszabadulhatnak különböző vírusok ellen - ilyen antitesteket keresztreaktivitásnak neveznek.

Nagy érzékenység. A PCR a minimális mennyiségben is képes kimutatni a patogén RNS-ét. Ez lehetővé teszi a rejtett fertőzések azonosítását.

Hogyan készítsünk elő vérrátadást PCR kutatásra

PCR analízis esetén a vénás vért gyűjtjük a hepatitis C-re. Általában két adag vért veszünk egyszerre a páciens vénájából: az első PCR-hez, a második az ELISA-hoz. Ez azért van így, hogy pontosabban felmérjük, mennyire rossz a páciensnek a vírussal fertőzött, és hogyan védekezik az immunitás.

Általában az alábbi szabályok szükségesek a beteg számára:

• reggel vérvizsgálatot végeznek;
• az utolsó étkezés és a vérszállítás közötti szünetnek nyolc-tíz óra;
• két vagy három nappal az elemzés előtt meg kell adni sült és zsíros ételeket, valamint alkoholt;
• az elemzést megelőzően huszonnégy órával a betegnek kerülnie kell a fizikai erőfeszítést: ne hordjon súlyokat, ne vegyen részt edzőteremben vagy medencében.

Ptsr nem észlelt hepatitiset

"A hepatitis C vírus (HVC) génjének kimutatása a páciens vérében a fertőző betegség laboratóriumi diagnosztikájának második szakasza. Az olyan ágens kimutatására, amely nem rendelkezik sejtmembránnal és ennek megfelelően felületi antigénekkel, a polimeráz láncreakciós eljárást alkalmazzuk. Ezzel a módszerrel közvetlenül a molekula, amelyben az összes genetikai információ kódolt - RNS.

RNS - Ribonukleinsav, valamint a DNS együttes része az összes élő szervezet sejtjeinek. A hepatitis C vírus RNS-molekulát tartalmaz és képes mutálni.

A HVC genom jelenlétére vonatkozó vizsgálatot rendszerint egy általános, biokémiai vérvizsgálat elvégzése után adják be, és pozitív antitestválasz (anti-HVC) áll rendelkezésre.

Mit jelent ez?

A HVC-ellenes antitestek vizsgálata a szűrés, vagyis az emberek nagy populációinak (orvosok, terhes nők, kórházi betegek, donorok, intravénás kábítószer-használók és HIV-fertőzött emberek) vizsgálatára alkalmazható. Az anti-HVC laboratóriumi analízisének negatív eredménye azt sugallja, hogy a víruson nem volt immunválasz a beteg vérében. Ilyen esetekben negatív eredményt lehet elérni:

Ha egy személy soha nem fertőzött hepatitis C-vel.

Ha a laboratóriumi vizsgálati rendszer érzékenysége kisebb, mint az anti-HVC koncentráció.

Ha a fertőzés kevesebb mint 2 hónappal ezelőtt történt, és a vérben található anti-HVC még mindig nem elég ahhoz, hogy meghatározza. Hamis negatív válasz esetén az emberi tényezőnek köszönhetően.

Ha az eredmény azt eredményezi, hogy megtalálható a HVC ellenanyaga a páciensben, akkor azt jelenti, hogy a hepatitisz C vírus a vizsgálat idején a beteg testében volt, vagy valamikor a vérben volt. Az anti-HVC pozitív eredményével további laboratóriumi vizsgálatokra van szükség, amelyek felismerik a kórokozó genetikai anyagát, meghatározzák génjeinek koncentrációját (vírusterhelés, viremia) és meghatározzák a genotípust.

A hepatitis C vírus RNS analízise

A laboratóriumban a HVC genom többféle vizsgálattal kimutatható:

elágazó DNS (p-DNS);

transzkripciós amplifikáció (TMA);

polimeráz láncreakció (PCR).

A p-DNS módszer egy olcsó és egyszerű módszer a vírus genom kimutatására számos megkérdezett embernél. Fő hátránya az alacsony érzékenység: a HVC-t csak 500 NE / ml feletti koncentrációban detektálja.

A transzkripciós amplifikációs eljárás felismeri a vírus nukleinsavat a vérszérumban. Az elemzésnek nagy érzékenysége van (5-10 NE / ml), de még nem került kielégítően a mindenütt jelen lévő laboratóriumi gyakorlatba.

Az oroszországi PCR módszer a leggyakoribb és megfizethető laboratóriumi vizsgálat nagy érzékenységgel (50-60 NE / ml).

A PCR-tesztet minden olyan klinikai laboratóriumban elvégzik, amely megfelelő akkreditációval rendelkezik. Az analízis eredményét befolyásoló diagnosztikai módszer nagyon fontos dolog a laboratóriumi vizsgálati rendszer érzékenysége. Például a 60 IU / ml diagnosztikai érzékenység, mint az Invitro laboratóriumok, lehetővé teszi a vírus RNS kimutatását a fertőzés után 3 hónappal. A tesztrendszer alacsony érzékenységével a kórokozó génjei még a fertőzés után 4 hónappal sem mutathatók ki.

A hepatitis C vírus RNS-je: PCR módszer

A PCR módszer számos előnnyel rendelkezik a HVC gének kimutatására szolgáló egyéb laboratóriumi vizsgálatokkal szemben:

nagy érzékenység. A módszer lehetővé teszi a kórokozó genetikai anyagának meghatározását még a minta minimális koncentrációjánál is;

nagyobb specifitás. Egy adott genotípus vírusának génjeit azonosítja számos más kórokozó DNS és RNS-e között, ami lehetővé teszi a kórokozó genotipizálását;

sebességet. A kórokozó hosszú termelési folyamatának hiánya csökkenti az eredmény elérésének időtartamát néhány óráig; az elemzés egyetemessége.

A vizsgálat univerzális eljárása lehetővé teszi egy emberi vérmintának egyidejű használatát a különböző kórokozók genetikai anyagának kimutatására. Ezek az előnyök lehetővé teszik, hogy a PCR-t a vírusos hepatitis C laboratóriumi diagnosztikájának "arany standardjaként" vegyék figyelembe, valamint anti-HVC enzim immunvizsgálattal.

A PCR olyan vizsgálat, amelyet a vizsgált személy vérében lévő HVC gének meghatározására használnak. A tanulmány több szakaszból áll:

A bioméret mintavétele.

A kiválasztott mintában megnöveljük az RNS másolatainak koncentrációját.

A genetikai anyagok kimutatása speciális tesztrendszerek segítségével.

Vénás vérvétel után a beteg mesterségesen megkezdi a HVC gének többszörös replikációjának folyamatát (amplifikáció, másolás).

Ebből a célból a kémcső belsejében lévő hőmérséklet a biométernél bizonyos mértékben változik. Ha a csőben található RNS másolatok száma eléri a kívánt értéket, akkor a kórokozót speciális vizsgálati diagnosztikai módszerekkel detektáljuk.

minőségi (észleli a vírus jelenlétét),

kvantitatív (meghatározza a vírusgének koncentrációját egységnyi térfogatban)

genotipikus (létrehozza a kórokozó genotípusát).

A hepatitis C RNS-je: minőségi analízis

A kvalitatív PCR feladata a bemutatott bioanyagok HVC jelenlétének meghatározása. Ezt a vizsgálatot általában a betegség diagnózisának vagy a hordozó azonosításának vizsgálatára végzik. Adja hozzá, miután az anti-HVC által ELISA-val észlelték.

A hepatitis C diagnosztizálására elegendő a HCV genetikai anyag minőségi felismerése, azaz koncentrációja a vérben. A minőségi PCR eredménye lehet: "RNS detektált" vagy "RNS nem detektálható".

A módszer pontossága 95% -os. Ugyanakkor a vizsgálati diagnosztikumok pontossága eléri a 100% -ot, és 5% az emberi tényező, amely mindig jelen van a laboratóriumi vizsgálatokban. A hamis negatív elemzés elkerülése érdekében, különösen az alacsony viremia esetében, a vizsgálatban alkalmazott diagnosztikai rendszer magas érzékenysége szükséges. A vizsgálati rendszer érzékenysége nem lehet kevesebb, mint 60 NE / ml.

Hepatitis C RNS: kvantitatív analízis

Kvantitatív elemzést írnak elő, amikor szükséges az emberi testben tapasztalható viremia szint ismerete. A vizsgálat indikációi:

a minőségi PCR pozitív eredménye, feltéve, hogy a vírus ellenanyagai kimutathatók;

a kórtörténet kialakítása;

a vírusterhelés meghatározása a májgyulladásban;

vírusölő gyógyszerek kombinációjának kiválasztása;

A folyamatos vírusellenes terápiára adott vírusválasz monitoringja;

az akut hepatitis C krónikus átmenetének valószínűségének értékelése.

Az analízis eredményét IU / ml (nemzetközi egység 1 ml szérumban) vagy másolatokban / ml-ben (a vírusgének másolatait 1 ml szérumban) fejezzük ki. A kvantitatív PCR-nek nincs normája: általában a humán vérben lévő HVC gént nem szabad kimutatni. A felmérés eredményeit összehasonlítjuk a vírusterhelés adott referenciaértékével.

Tehát a mutatók (IU / ml):

a 4 × 10 * 5 alatt alacsony viremia;

4 × 10 * 5 - 8 × 10 * 5 - közepes;

több mint 8 × 10 * 5 - magas.

A vírus RNS több példánya a vérben, annál agresszívebb a betegség, és annál nagyobb a vírus másoknak való átvitelének kockázata. De a vírusterhelés szintje nem az egyetlen olyan mutató, amely befolyásolja a patológia lefolyásának súlyosságát és a beteg további prognózisát: a kórokozó genotípusa szintén fontos.

A helyes kezelés érdekében egy genotípus létrehozása szükséges. Azt is meghatározza a beteg egészségének és életének prognózisa. Például a genotípus 3 vírusa gyakran a máj fibrosishoz vagy cirrhosisához vezet, összehasonlítva a genotípust hordozó betegekkel.

Hepatitis C: analízis és értelmezés

RNS A hepatitis C diagnózisát nem lehet csak kvalitatív és / vagy kvantitatív PCR alapján elvégezni: a HVC meghatározása és a vírusterhelés szintje nem elegendő ahhoz, hogy megfelelő vírusellenes terápiát írjon elő. A potenciális betegeket átfogóan (klinikailag, laboratóriumi, instrumentálisan) kell vizsgálni annak érdekében, hogy objektív képet kapjunk a patológiáról. Pontosan kijelölni egy komplex vizsgálatokat megállapítani a diagnózis a hepatitis C, majd helyesen megfejteni az eredményeket csak orvos.