Hepatitis C PCR

Share Tweet Pin it

Szólj hozzá! 15,344

A hepatitis C a vírusos betegségek egyik legveszélyesebb és legnehezebb diagnosztizálása. Annak meghatározására, a betegség PCR hepatitis C. Ez a módszer egy új high-tech technika, amely lehetővé teszi az egyik, hogy tanulmányozza a genetikai anyag a létezését élet a legkisebb részecskék (molekulák), és a legkisebb mennyiségben. A hepatitis vírus nagyon ellenálló, képes hosszú ideig élni a környezetben és tökéletesen illeszkedik az emberi testbe.

Mi a PCR?

Ma sok a betegség. És nem kevésbé a módszerek meghatározására. Mivel a fertõzõ szerek megtanulják könnyedén megszokni a környezetet és fejlõdni, a legújabb technológiákat diagnosztizálják. A polimeráz láncreakció (PCR) egy gyorsabb és pontosabb módszer, amelynek célja a betegség kórokozójának megtalálása, lényegesen növelve a hepatitis vírus DNS-arányát a mintában. Gyakran írták: keresnek egy tűt egy szénakazalban, majd építeni egy köteg tűket.

A PCR módszer típusai

Ki kell emelni a hepatitis minőségi és mennyiségi elemzését. Annak megállapításához, hogy a vírus a szervezetben van-e, és azok, akik a hepatitis C ellenanyagokat találták, minőségi tesztelést végeznek. Az elemzés elemzése eredményt ad: "pozitív"; „Negatív”. A negatív jelentés azt jelenti: vagy az ember egészséges vagy a vérben lévő szerek nem elégek és nem találhatók. Érdemes tehát egy idő után egy második vizsgálatot folytatni.

A pozitív eredmény a fertőzés fennállását jelzi. Ez szinte mindig pontos érték. A hibás eredmények általában az emberi tényezőtől függenek (helytelen tárolás vagy az eljárás szabályainak be nem tartása). Amikor a norma, az eredmény negatív. A vizsgálat előtt nincsenek különleges szabályok, csak vért veszünk a vénából.

Ha megtalálható, végezzen kvantitatív elemzést (vírus terhelés) - számszerű értékeket ad: mennyi a hepatitis vírus RNS-je van jelenleg a vizsgálati anyag előírt térfogatában. A fertőzés aktív kifejlődésével a fertőzött személy 1-2 héten keresztül megtalálható. A vért rendszerint azért is megvizsgálják, mert a hatóanyagok szabadon keringenek.

A kvantitatív PCR analízis jellemzői

A kvantitatív elemzés különbsége, hogy nem mindegyik áthalad. Minőségi - meghatározza a jelenlétét és mennyiségi - segít a "hepatitis vírus" következtetés megerősítésében, a betegség lefolyásának prognózisában és a kezelés folyamatának meghatározásában. Mennyire hatékony a terápia, nézzük meg az RNS számát a kezelés előtt és alatt. Továbbá a gyógyszeradag meghatározására is használják.

bizonyság

Rendszerint a helyreállítás kezdete előtt állítják elő. A fő jelzések lehetnek:

  • a vírusterhelés meghatározása és az antivirális terápia szabályozása;
  • kvalitatív PCR-k találtak hepatitis C ellenanyagokat;
  • akut és krónikus hepatitis C megtalálása;
  • vegyes hepatitis létezését;
  • a kezelés tervezésekor;
  • ha egy kvalitatív vizsgálat még mindig a betegség jelenlétét mutatja a kezelés tizenkettedik hete után.

Tekintse meg, hogy milyen típusú vírus terhelés a hepatitis esetében: az alacsony terápia sikeres; emelkedett - a kezelés nem hatékony, és meg kell változtatni.

Mi történik a betegség különböző szakaszaiban?

A betegség különböző fázisaiban a vizsgálatot a kezelés előnyeinek áttekintése és a későbbi végrehajtásának időtartamának tervezése céljából végzik. A terápiára adott jó válaszokkal rövidítve. Ellenkező esetben a vírus lassú visszavonásával a kezelés időtartama meghosszabbodik. A hepatitis PCR-je a terápia 1,4, 12, 24 hetes korában történik. Amikor a mutatók nem csökkennek 12 hét elteltével, arra a következtetésre jutnak, hogy a terápia nem alkalmas erre a szervezetre. Ez az elemzés annak megállapítására szolgál, hogy mennyire aktív a fertőzés, és mennyire valószínű, hogy át kell adni. Például terhesség alatt fennáll a veszélye annak, hogy megfertőzik a baba. A terápia után a relapszus kockázata azonosítható.

másolat

A vizsgálat után az elemzés nem számokkal, hanem a "mérési tartomány alatt" és a "nem észlelhető" szavakkal olvasható ki. A kvantitatív PCR érzékenyebb a minőségre. A "nem található" következtetés azt mondhatja, hogy a fertőzés nem található. "A mérési tartomány alatt" - a tesztet a vírus nem észlelte, de kis mennyiségben. Ebben a helyzetben készítsen egy második vizsgálatot.

Vírus terhelés - a fertőzött RNS számának meghatározása a megállapított vérmennyiségben (kvantitatívan 1 ml = 1 köbcentiméter). Nemzetközi mérésekben ME / ml-ben van megfogalmazva. Az egyes laboratóriumok példányokat jelölnek / ml. Határozza meg az összetevők nemzetközi értékekbe történő fordítását, a különböző tesztrendszerek saját módján tudnak. 1. táblázat A vírus RNS mennyiségi elemzésének dekódolása

A hepatitis C mennyiségi elemzésének normája

Amikor egy személy egészséges, a norma - "nem található". Az érintett személyek norma csökken az adagolás vírus eredményez logaritmikus egység, amely megnyilvánul csökkenti a nullák száma az elemzés egy (például 1 * 106 IU / ml és 1 * 105 NE / ml). A vírus koncentrációtartományának kerete, amely meghatározza a termocikleret, 1,8 * 102 - 2,4 * 107 NE / ml határokon belül van. Az eredmény értelmezése:

  • alacsony koncentráció - 600 NE / ml-ről 3 * 104 NE / ml-re;
  • átlagosan - 3 * 104 NE / ml-ről 8 * 105 NE / ml-re;
  • Magas - 8 * 105 NE / ml felett.
Vissza a tartalomhoz

eltérések

Ha az elemzések eredményei a normán kívül változtak, ez a betegség visszaszolgáltatását és a vírus reprodukcióját jelezheti. Bizonyos tényezők befolyásolhatják a megbízhatatlan eredményt, például a minták szennyeződését; a heparin vérben való jelenléte és a PCR-összetevők működését lassító anyagok; laboratóriumi hibák; a vizsgálat nem teljesítése.

Továbbá számos laboratórium eredményei változhatnak, talán más kutatási módszertan is létezett. Annak tudatában, hogy mennyire érintett a máj és a betegség veszélye, nem elég a hepatitis PCR számszerűsítése. Ezenkívül biokémiai eljárásokat és biopsziát végzünk.

A kezelés megtervezésekor a vírus genotípusú. Mivel a hepatitis C képes megváltozni, több csoport is létezik. A különböző típusú kezelések eltérőek lehetnek. Vannak olyan helyzetek, ahol több faj van, de az elemzés megtalálja az egyiket, amelyik érvényesül. Ezután a teszt újra megismétlődik.

A módszer előnyei

A PCR technika lehetővé teszi a véleménynyilvánítás és a helyes kezelés előírását. A módszertan előnyei:

  • Az eredmények sebessége nem igényli a kórokozó fajának megkülönböztetését és termesztését. A folyamat automatizálása lehetővé teszi az anyag feldolgozását és tanulmányozását 4-5 órán keresztül.
  • A kórokozó meghatározásának közvetlen - a DNS egy speciális részének megtalálása közvetlenül jelzi a betegség jelenlétét. Például az ELISA - megtalálja a fehérje markert (a baktériumok életének termékeit), ami nem biztosítja a betegség jelenlétének pontos igazolását.
  • Specifikusság - egy adott kórokozóra specifikus anyagot vizsgálunk, amely kizárja a hamis reaktív szerekkel szembeni reakciót.
  • Érzékenység - érzékeli a legkisebb vírusszámot.
  • Az univerzalitás - azon alapul, hogy a specifikus organizmusok DNS-jének vagy RNS-jének fragmentumait találják. Ez lehetővé teszi diagnosztika elvégzését bármely biomérnök bármely ágenséhez, ha más módszerek tehetetlenek.
  • Nemcsak nyilvánvaló, hanem rejtett fertőzésekre is rámutat - hatékonyan tanulmányozza a nehezen művelt, nem művelt, tartósan ható szereket.
  • https://www.youtube.com/watch?v=lBi-d6jAKxQ

Ezzel a kutatással minden beteg diagnosztizálható a betegség hiánya miatt. De megbízható tényekhez kövesse az utasításokat. A PCR-t különböző ágazatokban használják: kriminalisztika, apasági vizsgálat, különféle vírusok diagnosztizálására, allergia kimutatására, gén klónozásra, mutagenezisre, DNS-szekvenálásra.

A hepatitis C markerei és a HCV RNS mennyiségi elemzésének eredményei

Nemrégiben az internetes források keresőprogramjaiban egyre inkább megjelenik a lekérdezés "mennyiségi analízis a hepatitisz dekódolásával".

Valójában a hepatitisz vírus gyakori és veszélyes, a betegség a májra hat. A neve származik a lat. hepatitis - májgyulladás. A fertőzés a vérből vagy szexuális érintkezésből következik be, a felnőttek 25 és 50 év közötti korú betegségben szenvednek.

A betegségnek számos típusa van. A hepatitis C nem rendelkezik élénk kifejeződéssel, de az esetek 40-70% -ában krónikus formában jár, májzsugorodást és rákot okozhat. Ez a betegség megköveteli a kapott adatok pontos diagnózisát és értelmezését, amelyekre a módszerek kidolgozása történik. Az egyik a PCR RNA-analízise a HCV RNS-nek.

A HCV RNS RNS-analízise PCR-rel

Az RNS (ribonukleinsav) egyfajta makromolekula, egy élő sejt egyik összetevője. Az RNS felelős a genetikai információ kódolásáért. A hepatitis C vírus RNS-molekulát tartalmaz, és a mutáció szokása szerint. Hat altípusa van, valamint számos altípus van.

A krónikus betegségben bekövetkező betegség a májfibrózishoz vezet - a kötőszövetek növekednek, a szerv struktúrája fokozatosan megszakad. A fibrosis megfelelő időben történő kezelésre alkalmas, mivel a máj még nem romboló folyamatokon ment keresztül. A cirrhosistól eltérően súlyos, visszafordíthatatlan májbetegség, amelynél a fibrosis kialakulhat anélkül, hogy időben meghozná a szükséges intézkedéseket.

Az a személy, aki gyanúja van a hepatitis vírusnak, meghatározza az ellenanyagokat. Ha nincsenek jelen - a betegség kizárt, jelenlétükben PTSR (polimeraznoj láncreakció) módszerhez folyamodik. A molekuláris biológiában kísérleti jellegű, de vezető szerepet tölt be a fertőző betegségek diagnosztizálására szolgáló módszerek között. Ennek segítségével jelentősen növelhető a minta molekulaszemek koncentrációja. A fertőzés után 10 nappal az RNS már kimutatható a vérben.

Ez a módszer az egyetlen, amely lehetővé teszi a betegség azonosítását a korai szakaszban. Más módon (pl. Biokémiai vérvizsgálat) ezt nem lehet elvégezni, mivel a máj még nem érintett.

Ezt a módszert 1993-ban a biokémikus Carrie Mullis fedezte fel, amelyért Nobel-díjat kapott. A PCR áttörést jelentett az orvostudományban és a tudományban, mivel lehetővé tette a betegek vérének és más biológiai anyagainak fertőzésének gyors és pontos azonosítását. Más szóval, a módszer felgyorsította a fertőző betegségek diagnózisának fejlődését.

A HCV RNS PCR RNS-analízise a következő okok miatt hatásos:

  • Jó érzékenységgel rendelkezik - még a vírus kis mennyiségét is észleli a vérben;
  • maga a vírus határozza meg, és nem az általa létrehozott melléktermékeket;
  • meghatározza a kórokozó típusát.

A HCV RNS mennyiségi elemzésének különbségei minőségi szempontból

A PCR módszer két alapvető módszert tartalmaz a biológiai anyag tanulmányozására a hepatitis C vírus megkereséséhez:

Ezek a tanulmányok különböző feladatokat látnak el.

A hepatitisz dekódolással végzett kvalitatív analízise megerősíti a vírus jelenlétét, miután a betegségben lévő antitestek már a vérben megtalálhatók. Ha a vizsgálat pozitív eredményt adott, akkor a betegséget találta. Más szóval, egy személy fertőzött. Ha negatív eredményt kap, ez azt jelenti, hogy az illető nem fertőzött, vagy túl kevés a vírus koncentrációja. Ezt a koncentrációt ilyen módon nem detektáljuk.

Ezenkívül a betegség klinikai képe a hepatitis C markerekre és az analízis értelmezésére alapul. A fő markerek az M és G. immunglobulinok (ellenanyagok). A páciens vérében való jelenlétük egy egészséges szervezetre jellemző karaktert nem mutat. Ezen antitestek jelenlétére alapozva a beteget rendszerint diagnosztizálják.

Kvantitatív elemzést írnak elő az antitestek kezdeti kimutatására és szükség esetén a kezelésre.

A vegyes hepatitis (több vírusfertőzés) kimutatására a hepatitisz C mennyiségi elemzését is előírják.

A dekódolással végzett kvantitatív elemzés célja:

  • a végleges diagnózis tisztázása;
  • a betegség lefolyásának és kezelésének előrejelzéseinek összehangolása - a kezelés meghosszabbítása, csökkentése vagy a taktika megváltozása;
  • a terápia monitorozása.

Annak érdekében, hogy az eredmények helyesek legyenek, a vér adományozása előtt kövesse az előírt rendszert:

  • jöjjön el a laboratóriumba egy üres gyomorban, az utolsó alkalommal, amikor az ételt el lehet vinni 8 órával az eljárás előtt;
  • a vizsgálat előtt két nappal tilos alkohol, zsíros és sült ételek;
  • ultrahang, masszázs, fizioterápia a vizsgálat elvégzése előtt;
  • napközben tilos a gyógyszerek fogadására, ha az egyes gyógyszerek fogadását nem lehet lemondani, ezt a vérmintavétel előtt jelentik;
  • az eljárás előtt ajánlott a fizikai és az idegi terhelés lehető legnagyobb mértékű csökkentése.

Ezeknek a követelményeknek a teljesítése kulcsfontosságú lesz a hepatitis C mennyiségi elemzésének helyes eredményeinek megszerzéséhez.

Kvantitatív elemzés dekódolása

A kvantitatív elemzés indikátorainak befogadása után meg kell határozni a hepatitis C-tesztek eredményeit. Az eredményeket mind ME / ml-ben, mind ml / ml-ben számoljuk. A másolatban feltüntetett eredmények megszerzéséhez számos módszert alkalmazunk.

  • HCV Monitor (konverziós tényező ME-2,7);
  • LCX HCV RNS (az ME konverziós tényezője 3,8).

Táblázat. A HCV RNS mennyiségi elemzésének PCR dekódolása.

A hepatitis C PCR mennyiségi elemzése

A HCV számos altípusa létezik, ezért nem mindig lehetséges hatékony vírusellenes hatóanyagok kiválasztása és a kívánt eredmény elérése a kezelésben. A kórokozók sokféleségének köszönhető, hogy képesek megváltoztatni szerkezetüket, azaz mutálni. Ennek eredményeképpen az immunitásnak nincs ideje arra, hogy hatékony reagálást alakítson ki egy patogén szerrel szemben, és a gyógyszerek hatástalanok.

Gyakran a hepatitist diagnosztizálják a cirrhosisban, ami a klinikai tünetek hiánya miatt később felderíti a betegséget. Csak a laboratóriumi vizsgálaton keresztül lehet HCV-t kimutatni az inkubációs időszakban.

A hepatitis C mennyiségi elemzése lehetővé teszi nemcsak a kórokozó jelenlétének megállapítását a vérben, hanem a koncentráció kiszámítását is.

Ajánlások az elemzésre való felkészüléshez

A laboratóriumi diagnózisra külön előkészítésre nincs szükség. Elég, hogy tartsuk be az alábbi ajánlásokat:

  1. a mennyiségi elemzést üres gyomorra végezzük, az utolsó étellel - 8 órával a vérminta előtt;
  2. két napra el kell hagyni az alkoholt és a "nehéz" ételeket;
  3. Különös fontosságúak a gyógyszerek, amelyeket a beteg veszi. Ezek befolyásolhatják a vizsgálat eredményét, ezért az orvosnak tudnia kell róluk.

A vérminták előestéjén a nehéz fizikai terhelés és fizioterápiás eljárások sem kívánatosak. A hepatitis C mennyiségi elemzésének megfejtéséhez kiderült, hogy megbízhatónak kell lennie, ne hagyja figyelmen kívül a fenti ajánlásokat.

Gyakran előfordul, hogy a beteg az elemzés eredményét naponta megkapja. A kórokozó vérben való koncentrációjának meghatározására szolgáló vizsgálat ára a laboratóriumtól és a reagensek minőségétől függ, és elérheti a 4000 rubelt.

A hepatitis C laboratóriumi diagnózisa

Az elsődleges diagnosztikai módszerek közé tartozik az ELISA, vagy más módon enzimkapcsolt immunoszorbens vizsgálat. A HCV specifikus antitestek kimutatására van kijelölve. Hatékonysága eléri a 95% -ot. Ha a tanulmány átiratai pozitív eredményt adnak, akkor érdemes feltételezni, hogy egy anyag jelen van a vérben.

Meg kell jegyezni, hogy a "+" teszttel vizsgált alanyok fele a további diagnózis során nem észlel vírusos anyagot a vérben. Ebben az esetben az ELISA azt jelzi, hogy a múltban előzőleg HCV volt a kapcsolata, amelyet keringő antitestek igazolnak.

Pontosabb vizsgálat egy polimeráz láncreakció, vagy PCR. Lehetővé teszi a patogén RNS-koncentrációjának meghatározását a vérben. Miután felfedezte a vírus genetikai készletét biológiai anyagokban, az orvos megerősíti a hepatitis C-t.

PCR-t rendelnek a beteghez a diagnózis ellenőrzéséhez. Lehetővé teszi az RNS azonosítását olyan szakaszban, ahol az antitestek még nem állnak rendelkezésre. Számos genetikai vizsgálat létezik:

  1. a hepatitis C-re vonatkozó PCR mennyiségi elemzése, amely nemcsak a kórokozó jelenlétét hozza létre a vérben, hanem tájékoztatást nyújt a koncentrációjáról;
  2. minőség - megerősíti a fertőzést;
  3. genotipizálás - lehetővé teszi a patogén szer genotípusának meghatározását és a leghatékonyabb gyógyszerek kiválasztását.

Polimeráz láncreakció

Mint már említettük, számos laboratóriumi kutatás létezik:

  • minőségi analízis - a patogén szer jelenlétét jelzi a vérben. Az ilyen típusú diagnózisnak van egy bizonyos "válaszszintje", ezért nem mindig megbízható. Az eredmények helyes megfejtése és valódi indikátorok elérése érdekében javasolt legalább 50 NE / ml érzékenységű vizsgálati rendszert használni. Az analízis normája "negatív válasz" vagy "a vírus nem észlelhető". Ez azt jelzi, hogy nincs kórokozó-genetikai készlet a vizsgálati anyagban. Ha az eredmény pozitív, a beteg további vizsgálata szükséges;
  • A hepatitis C PCR mennyiségi analízise meghatározza a vírusterhelést, vagyis a patogén szer koncentrációját a vérben. A vizsgálat eredménye mutatja a RNS egységek számát a biológiai folyadék meghatározott térfogatában;

A vírus terhelés a fertőző RNS számát jelenti a kutató egy milliliterében. A mérési egységek ME / ml, de egyes laboratóriumok meghatározzák a "másolatok / ml" értéket, miközben az analízis standard üresét jelölik az összehasonlításhoz és az eredmények értékeléséhez.

  • genotipizáláshoz. Mivel a kórokozó képes megváltoztatni a hatékony antivirális gyógyszerek kiválasztását a terápiára, annak genotípusán kell alapulnia. Nem csak az eredményről, hanem a kezelés időtartamáról is függ. Tehát a HCV 1 hepatitis egy évig gyógyszert igényel, de az esetek 60% -a pozitív dinamikát mutat. Ami a második és a harmadik genotípust illeti, kevésbé ellenállnak az antivirális szerek hatásának, ezért a terápia hatékonysága meghaladja a 85% -ot. Ha a kutatás ilyen eredményét - "a vírust nem írják", akkor érdemes gyanítani egy olyan ügynök jelenlétét, amelyet a standard tesztrendszerek nem ismertek el.

Javallatok az analízishez

A hepatitis C mennyiségi elemzésének értelmezése a következő célokra szolgál:

  1. a beteg további vizsgálata, amikor a HCV ellenanyagokat ELISA-val detektálták;
  2. a diagnózis megerősítése;
  3. vírus terhelés megállapítása vegyes fertőzés esetén, amikor egy személy többféle kórokozóval fertőzött;
  4. a kezelési taktika meghatározása (vírusellenes gyógyszerek kiválasztása, terápia cseréje vagy befejezése);
  5. felmérni a betegség progressziójának dinamikáját, valamint a gyógyszerek hatékonyságát;
  6. a patológia (akut, krónikus) állapotának meghatározása.

A PCR a következő előnyökkel rendelkezik:

  1. jó érzékenység, melynek köszönhetően még csak kis mennyiségű vírust is lehet számolni;
  2. maga a kórokozó (RNS) meghatározása, nem antigének;
  3. a technika specifikussága - egy specifikus típusú patogén ágens létrehozása;
  4. az eredmények megszerzésének sebessége, mivel az elemzéshez nem szükséges növényi kultúrák termesztése tápközegben. A válasz készen áll 5 óra alatt;
  5. egyetemesség - lehetővé teszi a különböző kórokozók genetikai csoportjának azonosítását, mind RNS-t, mind DNS-tartalmú (hepatitis B);
  6. látens fertőzés kimutatása.

A laboratóriumi vizsgálat segít a diagnózis megerősítésében, és szerves részét képezi az átfogó vizsgálatnak (a klinikai tünetek elemzése, az ELISA és a biokémia eredményei).

Ezenkívül a PCR-t széles körben használják az allergológia, a genetika területén, valamint az apaság tényének megállapítására.

A hepatitis C vírus mennyiségi elemzésének dekódolása

A laboratóriumi diagnosztika eredményeinek értékelését egy orvos végzi, a kapott adatok összehasonlításával.

PCR diagnosztika használata

A polimeráz láncreakciót (PCR) a molekuláris biológiában a víruskeresés kísérleti módszerének nevezik. Lehetővé teszi a nukleinsav (DNS) bizonyos fragmenseinek koncentrációjának jelentős növelését a biológiai anyag mintáiban, ami lehetővé teszi számukra a felismerés és számlálást.

Az elemzés az alábbiak szerint történik. A genetikai anyagot (vérmintát), amely potenciálisan tartalmazhatja a kívánt gént, egy kémcsőbe kerül. Ezenkívül a primereket a kémiai úton szintetizáltuk a kívánt gén kis hosszán.

A DNS-hez vagy RNS-polimerázt is hozzáadják az edényhez, képes egy olyan nukleinsavláncot létrehozni, amely teljesen azonos az eredetivel. A kapott kompozícióba négy szabad nukleotidot, egy RNS-hez vagy DNS-hez speciális építőanyagot helyezünk, amelyek közül az egyik a foszfor radioaktív részecskéit tartalmazza.

A kapott elegyet 95-96 ° C-ra melegítjük, aminek következtében a szokásos állapotban összefonódott két DNS-helikát feloldjuk. Ezután a készítményt lehűtjük, ebben az időben a primerek a vírusgenom kívánt régiójához kötődnek anélkül, hogy az RNS (vagy DNS) kettős hélixet állítana elő ismét.

Hűtés közben a polimeráz egy nukleotidok szabad láncolatát keresi. Ennek az enzimnek a működéséhez egyetlen lánc nukleotidra van szükség. Mivel a polimeráz a DNS-szalag mentén csúszik (mint egy gyűrű egy kötélen), nem működhet kettős spirállal.

Ezután ismétlődő ciklusú melegítést végzünk, ami miatt a nukleotidláncokat elválasztjuk. Mindegyik PCR ciklus esetében a mintában lévő kívánt hepatitis gén mennyisége növekszik a geometriai progresszióban, és a genetikai anyag többi része lineárisan keletkezik.

A nukleotidmaradékok oldatának tisztítása és a DNS-szálak elektroforézissel történő molekulasúly-paraméterével történő elválasztása után könnyen meghatározható, hogy a kívánt gén létezik-e a vizsgálati mintában, vagy sem.

A PCR előnyei

A PCR módszerrel végzett laboratóriumi vizsgálat lehetővé teszi, hogy még több információt szerezzen, mint az RNS vírus jelenlétét. A radioaktív sugárzás szintjének meghatározásakor meghatározható, hogy a vizsgált mintában mely genetikai anyagot kezdetben tartalmaznak. Hepatitis esetén határozza meg a vírusterhelés szintjét.

Ennek a módszernek egy másik előnye a CR reakció nagyon nagy érzékenysége. Sokkal magasabb, mint a vírusok észlelésének klasszikus módszerei. Ideális esetben a kívánt gén azonosítása céljából csak egy mintában lévő vírus elegendő a PCR-hez.

Emellett a PCR teljesen specifikus. A primereket olyan módon hozták létre, hogy teljesen megfeleljenek a kívánt gének egyedülálló részeinek, amelyeknek nincs más szekvenciája. Mindkét ujjlenyomat egyedülálló, és minden génben egyedi nukleotidszekvenciák vannak.

Minõségi PCR analízis

A kvalitatív analízis csak a vírus jelenlétét mutatja a vérben. Ezt a vizsgálatot minden olyan betegnél el kell végezni, akikről kimutatták, hogy vérükben a hepatitis C elleni antitestek eredményei csak két érték közül választhatnak: "észleltek" vagy "nem észleltek". Egészséges ember esetében a normát (referenciaérték) "nem szabad észlelni".

Az elvégzett kvalitatív kutatás ilyen eredményeinek speciális értelmezése is van:

  • Az eredmény "felfedezett". Ez azt jelenti, hogy a mintában a biológiai anyagot hozott találtak egy olyan RNS-fragmens, amely specifikus a hepatitis C-vírus Következésképpen, ott van a tény, a beteg hepatitis B vírus fertőzés C. Ha az eredmény a kvalitatív PCR „felfedezte”, ez azt jelzi, hogy a vírus ismétlésben és ebben az időben új májsejteket fertőz meg a szervezetben.
  • Az eredmény "nem észlelhető". Az ilyen döntés azt jelzi, hogy a mintában a biológiai anyag kapott RNS-fragmentum nem mutatható ki a laboratóriumban, amely specifikus vagy HCV RNS azonos koncentrációban a patogén fertőzés a mintában határ alatt volt az a teszt érzékenységét.

A hepatitis C vírus RNS akut fázisában a PCR technikát alkalmazó kvalitatív vizsgálatok 1-2 hét után azonnal felfedezhetik a szervezet fertőzését, vagyis röviddel a hepatitis elleni antitestek megjelenését megelőzően.

Az ilyen vizsgálatok analízisének megbízhatatlan eredményei a következőkkel érhetők el:

  • szennyezett biomassza;
  • heparin jelenléte a beteg vérében;
  • a mintában lévő vegyi vagy fehérjeanyagok (inhibitorok) jelenléte, amelyek befolyásolják a PCR különböző komponenseit.

A PCR minőségi analíziséhez nem szükséges a beteg speciális preparálása a vizsgálat elvégzéséhez. A vénás vért anyagként használják.

Az eredmények értékelése

A kvalitatív PCR-tesztek bizonyos fokú érzékenységgel rendelkeznek, és a laboratóriumi pontosságtól és a laboratóriumi felszerelés mértékétől függően 10 és 500 NE / ml között változhatnak.

Ez azt jelenti, hogy ha a vírus a vérmintában nagyon alacsony koncentrációban van jelen (kevesebb, mint az adott laboratórium érzékenységi küszöbe), akkor a beteg páciensét "nem detektálják". Ennek következtében, ha minőségi PCR-elemzést végeznek alacsony vírusszinttel (vírus alacsony koncentrációja), például antivirális terápiában részesülő betegeknél, nagyon fontos tudni a diagnosztikai rendszer érzékenységi küszöbét.

Diagnosztikai rendszerek változatai

A virológiai válasz szabályozására ajánlott az antivirális kezelés legalább 50 NE / ml érzékenységi küszöbértékű diagnosztikai rendszerek alkalmazása. Ezek a kritériumok teljesülnek, például: Cobas Ampicolor VGS-teszt elemzők (50 IU / ml pontossággal), valamint RealBest HCV RNS (15 IU / ml érzékenységgel).

A WHO szerint ajánlásokat létrehozó végleges diagnózist a hepatitis C, meg kell kizárólag alapján hármas kimutatására RNS-vírus szérummintákon szenvedő beteg nincs más hepatitis marker faj.

A PCR-eljárások mellett TMA-vizsgálatot (transzkripciós amplifikációs módszert) is alkalmaznak HCV RNS kimutatására betegekben. A legjobb érzékenység küszöbérték (5-10 NE / ml), de hazánkban ez a tesztelési módszer még nem túl gyakori.

A vírusok észlelt módosításainak hatóköre

Ez a kvalitatív meghatározás a hepatitis C vírus RNS jelenlétében szérumban lehetővé teszi számos vírus genotípusának meghatározását. Jelenleg a tudomány több mint hat genotípust ismeri a vírusról, valamint a betegség mintegy 10 altípusairól.

Az 1, 2, 3 genotípusú vírusok gyakoriak országunkban. Laboratories képes észlelni a következő genotípusok: 1a, 1b, 2a, 2b és 2c és 3, 4, 5a és 6. függetlenül altípus. Minden vírusmódosítás esetében a detektálás sajátossága 100%.

PCR mennyiségi elemzése

Kvantitatív PCR-teszt segítségével megállapítják a vérminták hepatitis vírusának koncentrációját (vírus terhelés). Ez a viremia-teszt (a vírus koncentrációja) lehetővé teszi egy meghatározott genetikai anyag (a leginkább vírusos RNS) egységek számának meghatározását, amelyet egy bizonyos mennyiségben észlelnek. Ebben az esetben határozza meg a koncentrációját 1 ml-ben, ami megfelel 1 cu. cm.

Az analízis mennyiségi paramétereit számokban fejezzük ki, ezt a mérést nemzetközi egységegységként (IU) milliliterenként (ml), ME / ml-ként jelöljük. Néhány laboratóriumban a vírus mennyisége más egységekben is meghatározható: a példányok számát ml-enként, másolatként / ml-nek.

  • Időzítés A hepatitis C esetében a PCR ilyen kvantitatív analízise a terápia megkezdése előtt történik. Aztán az 1., 4., 12. és 24. hetet. A 12. héten végzett értékelés indikatív, lehetővé teszi a terápia hatékonyságának meghatározását.
  • Elemzés előkészítése. A PCR mennyiségi elemzéséhez nem szükséges a beteg speciális felkészítése a vizsgálathoz. A mintavétel előtt fél órával nem szabad dohányozni. Vénás vért használnak laboratóriumi anyagként.

Az eredmények értékelése

Különböző laboratóriumi vizsgálati rendszerek esetében ez a mutató különböző konverziós tényezőket mutat be IU / ml-ben. Átlagosan egy konverziós paramétert alkalmaznak, amelyben 4 kópia / ml = 1 NE / ml. Ez például, ha a laboratórium 2,4 * 10 6 kópia / ml PCR-analízist eredményez, akkor ezt a paramétert 4-gyel kell osztani, és 6 * 10 5 NE / ml-t kapunk.

A 800 000 NE / ml magas terhelési szint magasnak tekinthető, ami megközelítőleg 3 000 000 példány / ml index. Az alacsony viremia egyes szerzők szerint a kvantitatív PCR 400 000 NE / ml alatti paramétereinek felel meg.

A kvantitatív teszt eredményeként a végeredmény nem digitális érték formájában jeleníthető meg, hanem: "a mérési tartomány alatt" vagy "nem detektálható".

  • Értékelés: "a mérési tartomány alatt". Ez azt jelzi, hogy a mennyiségi vizsgálat nem tudta kimutatni a hepatitis C virális RNS-t, de maga a vírus igen kis koncentrációban jelen van a szervezetben. Ezt egy további kvalitatív vizsgálat is jelzi, amely igazolja a vírus jelenlétének tényét.
  • Értékelés: "nem észlelt". Ez az eredmény azt jelzi, hogy a mennyiségi vizsgálat nem észlelt vírust az RNS mintában.

A vírusterhelés paramétere elsősorban a betegség fertőzőképességének mértékét, a beteg fertőzőképességének mértékét határozza meg. Minél magasabb a páciens koncentrációja a vírusnak, annál nagyobb a valószínűsége annak, hogy más emberekre átruházzák. Például, amikor szexuális kapcsolatban áll egy beteg vagy egy függőleges út. Az ilyen mennyiségi mutató segít a páciens kezelésének hatékonyságának meghatározásában.

A PCC mennyiségi elemzésének elvégzése fontos az antivirális terápiához, értékeli sikerét és ütemezi a tanfolyam időtartamát. Tehát a test gyors reakciója a kezelés és alacsony mértékű viremia esetén a terápia időtartama csökkenthető.

A mennyiségi PCR paraméter lassú csökkenésével az antivirális terápiát ki kell terjeszteni vagy módosítani. Ha a vírusterhelés szintje alacsony, akkor ez a terápia kedvező tényezője, ha magas, akkor az alkalmazott kezelési módszer hatástalan, és a gyógyszereknek vagy azok használatának módszereit módosítani kell.

A hepatitisz C-re vonatkozó PCR elemzése

A hepatitis diagnosztizálása magában foglal egy egész vizsgálati komplexet, amely meghatározza a vírus jelenlétét a vérben. A betegség kimutatásának egyik módja a hepatitis C-hez hasonló PCR-módszer alkalmazása. Mi ez az oka, miért fontos a hepatitis PCR-elemzése, hogyan történik és dekódolja?

Mi ez?

A polimeráz láncreakciót vagy a PCR-t gyomorfekély, vastagbélgyulladás, bélgyulladás diagnosztizálására használják. De a fő előnye, hogy segít a szervezetnek, hogy észleli a vírus maga a C hepatitis, és antitesteket is, amelyek képesek nem okoz reakciót az immunrendszer azon képessége miatt, hogy mutálódik.

A vizsgálat és annak lényege, hogy bizonyos feltételeket teremt, amelyek során a hepatitis RNS láncreakció lép fel. Ha a hepatitis C vírus nukleotidszekvenciájához viszonyítva véletlen egybeesést észlel, ez azt jelzi, hogy vannak vírusos részecskék a vérben, és a bomlás a májban történik. Ha a vírus mennyisége egy bizonyos szint alá esik, negatív diagnózis történik, ha magasabb - pozitív.

A hepatitis PCR-módszerrel kétféle vérvizsgálat létezik: mennyiségi elemzés és minőségi elemzés.

A mennyiségi PCR, ahogy fent említettük, meghatározza a hepatitis vírus RNS-koncentrációját. Ezenkívül képes információt szolgáltatni arról, hogy milyen intenzitású a patológia és az előírt kezelés hatékonysága. A hepatitis C mennyiségi elemzése rendkívül fontos, mivel ellenáll az antivirális hatóanyagok hatásának, és lehetővé teszi a terápia módosítását.

Miután a páciens egy kezelésen átment, a PCR segít meghatározni a receptek további sorrendjét. Bizonyos esetekben további felmérésekre van szükség. Például, ha a szint az ALP emelkedett (de nem több, mint 2-szer hat hónapon belül), és elemzése transzkriptum kifejezés egy vírusterhelés feletti 105 NE / ml, a beteg van rendelve biopszia. Ha a PCR mennyiségi analízise erős gyulladást és fibrózist mutat, akkor a pácienst vírusellenes gyógyszerek kezelésére írják fel.

Olyan esetekben, amikor nagyszámú vírusrészecskét kombinálnak magas ALT-értékkel, a beteget azonnal további diagnosztikai intézkedések nélkül kell kezelni.

Vegye ezt a tesztet, és megtudja, ha májproblémái vannak.

A hepatitis vérének mennyiségi elemzésére szolgáló mutatók minőségi értelmezése csak képzett és tapasztalt szakember lehet, és a modern technológia segít a vírus alacsony koncentrációjában a vérben.

A kvalitatív PCR-analízis célja a vírus tényleges jelenlétének meghatározása és megerősítése a szervezetben. Ez a vér hepatitis elleni antitestek kimutatásával történik. Ez egy minőségi teszt hepatitis garantálja a pontosságát az eredmény 100% -kal, és lehetővé teszi, hogy diagnosztizálni a korai szakaszában a betegség, ami lehetővé teszi, hogy a harcot a hepatitis B az első héttel a fertőzés után, és növeli annak az esélyét, teljes gyógyulás (abban az esetben, B típusú betegség).

A PCR előnyei

A PCR-módszer vizsgálata és a hepatitis vérvizsgálatának megfejtése érdekében lehetőség van a betegség kórokozójának genotípusának meghatározására is. A vírus 6 genotípusa és számos altípusa létezik, de a régióban az 1, 2 és 3 genotípus eloszlása.

Az ilyen típusú diagnózis további előnyei:

  • A vett indikátorok nagy pontossága és alacsony a hibák valószínűsége;
  • magas a vírus részecskékre való érzékenysége a vérben;
  • több kórokozó kimutatásának lehetősége;
  • a magas antigén variabilitású patogén intracelluláris mikroorganizmusok diagnosztikája;
  • a hepatitisz analízisének dekódolásával végzett munka lehetővé teszi a látens áramfertőzések felfedezését.

Kinek nevezzen

A hepatitiszre vonatkozó PCR-vizsgálat szükségszerűen a következő embercsoportokat veszi figyelembe:

  • terhes nők;
  • az egészségügyi intézmények alkalmazottai;
  • a vér és a szervek lehetséges adományozói;
  • azok, akiknek a betegség jellegzetes jelei vannak;
  • HIV-fertőzöttek;
  • drogfüggők;
  • a szexuális életet átélt személyek.

Hogyan történik az elemzés és a képzés szükséges?

Vérvételezést végzünk a vénából. Jellemző, hogy ez előtti reggel előfordul, mielőtt az ember evett, mert az étkezés után legalább 8 órát kell eltelnie. Szélsőséges esetekben nap vagy esti vérvizsgálat végezhető, de az analízis és az élelmiszerfelvétel között eltelt idő legalább 5 óra.

Az emberi tényezõ mennyiségi hatást fejthet ki az eredményekben: pontosságuk egyes esetekben 100% -ról 95% -ra csökken, ezért elõkészíteni kell a vér elõállítását. Az analitikai bioméret minősége megfelelő, ha a beteg az alábbi szabályokat követi:

  • Mielőtt vért adna, csak tiszta vizet inni;
  • két nappal a vizsgálat előtt el kell utasítani a sült és zsíros élelmiszerek bevitelét, valamint az alkoholtartalmú italokat;
  • egy nappal a laboratóriumi látogatás előtt hagyja abba a gyógyszeres kezelést. Abban az esetben, ha ez nem lehetséges, feltétlenül figyelmeztetni kell a laboratóriumi asszisztenst és a kezelőorvost;
  • a stresszes helyzetek és a fizikai erőfeszítések előestéjén;
  • Ne végezzünk ultrahangot, radiológiát és instrumentális vizsgálatokat röviddel a véradás előtt;
  • egy órával az elemzés előtt tartózkodnia kell a dohányzástól;
  • 20 perccel a vér szállítása előtt meg kell zavarni, nyugtatni és még lélegezni.

Ha a vizsgálatot egy 5 évesnél fiatalabb gyermek végzi, a szülőknek gondoskodniuk kell arról, hogy a bioméret mintavétele előtt fél órával 10 percenként inni is forralt vizet.

A kapott adatok magyarázata

Az elemzés szöveges formában (kvalitatív kutatás esetén), például "nem található" vagy "a változtatások alatti" lehet. Az első esetben ez azt jelzi, hogy a fertőzést nem észlelték. A második -, hogy a vírus jelen van, de kis mennyiségben. Ez a helyzet újbóli vizsgálatot igényel.

A vírusterhelést a fertőző RNS mennyisége határozza meg, és ME / ml-nek vagy másolatoknak felel meg.

A hepatitis C mennyiségi analízisének normál indikátora (normája) a 1,8x102 és 2,4x107 NE / ml tartományba esik.

A vírus koncentrációja a vérben lehet:

  • alacsony: 600 NE / ml-ről 3x104 / ml-re;
  • átlag: 3 óra 4 NE / ml-től 8 óráig 5 NE / ml;
  • magas: több mint 8 óra 10 NE / ml.

A hepatitis PCR mennyiségi és minőségi elemzése lehetővé teszi a vírus jelenlétének meghatározását a testben és koncentrációjának szintjét. A polidizált láncreakció korai stádiumban képes diagnosztizálni a betegséget, de ehhez szükség van arra, hogy a betegek a lehető leghamarabb forduljanak orvoshoz segítségért és szigorúan kövessék a kezelőorvos ajánlásait.

PCR-vizsgálat a hepatitis C-re: típusok, indikációk, átirat

A vírusos hepatitis C súlyos betegség, amely májkárosodással jár. A betegek nyolcvan százalékában krónikus formában jár. A vírus szaporodik a májsejtekben - májsejtekben - és halálát okozza. A halott szövetet kötőszöveti foci váltja fel, a fibrózis kialakul.

A fejlesztés a máj fibrózis képtelen ellátni a funkcióját, kezdődik cirrhosis, ami veszélyes szövődményei: egyre nagyobb nyomás nehezedik a kapuvénában, gyomor-bélrendszeri vérzés, károsodott véralvadás mentális változások miatt kárt agyi magok mérgező termékeket.

A betegség oka a Flaviviridae családból származó vírusfertőzés, amely RNS-vírus egy típusa. Ez azt jelenti, hogy a genetikai anyag, amellyel a patogén fehérjéit szintetizálják, egy ribonukleinsav molekulában kódoljuk. A fertőzés a vérben, szexuális úton történik, és terhes nőtől a magzatig. Sajnos a fertőzés és az antitestek termelésének kezdete meglehetősen nagy mennyiségű időtartamot eredményezhet - két hétről hat hónapra. Ez nem teszi lehetővé a fertőzés meghatározását az enzim immunvizsgálat módszerével és a kezdeti kezelést a korai stádiumban.

Mi a PCR elemzés?

A PCR molekuláris analízis olyan módszere, amely lehetővé teszi a kórokozó genetikai anyagának kimutatását a fertőzés utáni első héten polimeráz láncreakcióval. A tanulmány nagyfokú specifitást, pontosságot és nem csak a vírus jelenlétének vagy hiányának meghatározását, hanem koncentrációját és genotípusát is meghatározza.

A vizsgálat elvégzéséhez vegye be a páciens vérét, amelyben potenciálisan megtalálható a vírus RNS-je. A vérben a primereket hozzáadjuk mesterségesen szintetizált részecskékhez, a kívánt gén kis hossza, és az RNS polimeráz egy speciális enzim, amely sokszorozza a kórokozó genetikai anyagának mennyiségét. Egy speciális berendezés segítségével több fűtési és hűtési ciklust hajtanak végre. Az anyagot ezután elemezzük és összehasonlítjuk az ismert vírusgénekkel, amelyek alapján következtetés születik a fertőzés jelenlétéről vagy hiányáról.

A hepatitis C PCR analízis típusai

A PCR-elemzés három típusa létezik:

  1. Minõségi PCR analízis. A tanulmány első szakasza. Lehetővé teszi a vírus genetikai anyagának azonosítását a vérben.

  • PCR mennyiségi elemzése. Lehetővé teszi a vírus terhelésének meghatározását - a patogén genetikai anyagának koncentrációját egy milliliter vérben. Ezt a vizsgálatot a terápia megkezdése előtt végezzük, majd az első, negyedik, tizenkettedik és (ha a tanfolyam hosszú) a kezelés huszonnegyedik hete annak hatékonyságának értékelésére.

  • genotipizáláshoz. A hepatitis C kórokozója gyakran és gyorsan mutál. A bolygón a vírus genotípusának hét variánsát találtam. Oroszországban az első, a második és a harmadik típus gyakori. A genotípusok mindegyike eltérő terápiás ellenállással rendelkezik, például az első típusú kezelés hatékonysága hatvan százalék, a második és a harmadik pedig nyolcvanöt. Ezért megfelelő gyógyszerek kiválasztása és megfelelő időtartamú kezelési eljárás meghatározása érdekében pontosan meg kell határozni, hogy a beteg milyen típusú vírussal fertőzött.
  • Javallatok a hepatitis C PCR analízishez

    PCR-vizsgálatot írnak elő a következő esetekben:

    • érintkezés egy beteg emberrel, ami fertőzéshez vezethet;
    • pozitív enzimkapcsolt immunvizsgálat;
    • a májcirrózis jelei: a májméret megváltozása, a megnagyobbodott lép, a szubkután vénás plexus megjelenése a hasra;
    • a májkárosodás tüneteinek megjelenése: fájdalom a hasüreg jobb oldalán, a bőr sárgulása;
    • az ALT és az AST fokozott aktivitása a biokémiai vérvizsgálatban;
    • a kezelés megkezdése előtt a vírusterhelés meghatározására;
    • az antivirális terápia hatékonyságának monitorozása;
    • a kezelés befejezése után a relapszus nyomon követése;
    • a diagnosztizált hepatitisz B jelenlétében, kizárva a vegyes májkárosodást.

    A hepatitis C PCR-vizsgálat dekódolása

    A hepatitis C-re vonatkozó PCR-analízis és enzim immunvizsgálat dekódolását egy hepatológus vagy fertőző betegség szakembernek kell foglalkoznia. A PCR eredményeinek elemzése biokémiai vérvizsgálattal, biopsziával és ultrahanggal kombinálva szükséges. Csak szakképzett orvos képes lesz elemezni a vizsgálatok eredményeit, és ezek alapján meghatározza a megfelelő kezelést.

    Minőségi elemzés dekódolása.

    A kórokozó genetikai anyagát az elemzett biológiai anyag tartalmazza. A fertőzés megerősítést nyert.

    Nincs fertőzés, vagy a patogén RNS mennyisége az érzékenységi határ alatt van.

    Kvantitatív elemzés dekódolása.

    Egészséges emberek számára normális szám. Ez azt jelenti, hogy nincs a hepatitis C RNS a vizsgálati anyagban, vagy koncentrációja a vizsgálat érzékenységi küszöb alatt van.

    Az RNS koncentrációja a mennyiségi tartomány alatt van. Az ilyen eredményeket nagyon óvatosan értelmezik, korrelálják más tanulmányok adataival, gyakran végeznek egy második vizsgálatot.

    A vírusterhelés szintje egy adott koncentrációban alacsony. Általában a vírus mennyiségének csökkenése azt jelenti, hogy a kezelés sikeres.

    Több mint 8 * 10 ^ 5 NE / ml

    A vírusterhelés szintje egy adott koncentrációban magasnak tekinthető.

    Több mint 2,4 * 10 ^ 7 NE / ml

    Az RNS mennyisége meghaladja a számszerűsítés tartományának felső határát. Lehetséges következtetéseket levonni a vírusterhelés mértéke miatt. Általában ilyen esetekben a tesztet megismétlik a vérminta hígításával.

    A genotipizálás dekódolása.

    Egy adott genotípus RNS-ét detektáltuk

    A biomateriában a hepatitisz C vírust kimutatják egy adott genotípus és altípus. Az eredmény latin számokkal és latin betűkkel van kódolva, például - 1a, 2b. Jelenleg hét genotípus és hatvanhét altípus van, de Oroszországban csak három első típus van.

    Hepatitis C vírus RNS-t detektáltunk

    A vérben az RNS egy ritka genotípust talál Oroszország számára, amely nem tulajdonítható az első, második vagy harmadik típusnak. Több kutatásra van szükség.

    Ez az eredmény azt jelzi, hogy a beteg egészséges vagy a kórokozó RNS szintje túl kicsi.

    Lehetséges a helyzet, ha a hepatitis C PCR-analízise negatív, és az enzim immunvizsgálat kimutatja a vírus ellenes antitesteket. Ez azt jelenti, hogy a beteg acut formában hepatitis C-t kapott és meggyógyult. Körülbelül húsz fertőzés esedékessé teszi a spontán gyógyulást, ha a páciens testének elegendő rezisztenciája van a fertőzésre.

    Annak ellenére, hogy a PCR nagyon pontos elemzés, annak eredménye az alábbi esetekben torzulhat:

    • a vért nem megfelelő körülmények között a laboratóriumba szállították, a hőmérsékleti rendszert megsértették;
    • a bioméret mintája szennyezett;
    • a vérben maradt nyomokban a heparin és más antikoagulánsok;
    • A vizsgált anyagban gátlók voltak - olyan anyagok, amelyek lassítják vagy leállítják a polimeráz láncreakciót.

    A PCR előnyei más módszerekkel szemben

    1. Diagnózis a korai szakaszban. A PCR detektálja a betegség kórokozójának genetikai anyagát. Az immunfluoreszcencia analízis segítségével csak immunglobulinokat lehet meghatározni, amelyeket a szervezet a fertőzésre adott válaszként termel. Hepatitis C fertőzés esetén a fertőzés és az immunválasz kialakulása között eltelt idő több hét és hónap lehet, mely időpontban az ELISA hatástalanná válik. A PCR már a fertőzés utáni első héten ad választ.

  • Alacsony hibalehetőség. A vizsgált anyagban meghatározzuk a genetikai anyagot, amely csak egyfajta kórokozóra jellemző. Ez lehetővé teszi a hamis eredmények kizárását. Az ELISA-val hibák léphetnek fel, mivel ugyanazok az antitestek felszabadulhatnak különböző vírusok ellen - ilyen antitesteket keresztreaktivitásnak neveznek.

  • Nagy érzékenység. A PCR a minimális mennyiségben is képes kimutatni a patogén RNS-ét. Ez lehetővé teszi a rejtett fertőzések azonosítását.
  • Hogyan készítsünk elő vérrátadást PCR kutatásra

    PCR analízis esetén a vénás vért gyűjtjük a hepatitis C-re. Általában két adag vért veszünk egyszerre a páciens vénájából: az első PCR-hez, a második az ELISA-hoz. Ez azért van így, hogy pontosabban felmérjük, mennyire rossz a páciensnek a vírussal fertőzött, és hogyan védekezik az immunitás.

    Általában az alábbi szabályok szükségesek a beteg számára:

    • reggel vérvizsgálatot végeznek;
    • az utolsó étkezés és a vérszállítás közötti szünetnek nyolc-tíz óra;
    • két vagy három nappal az elemzés előtt meg kell adni sült és zsíros ételeket, valamint alkoholt;
    • az elemzést megelőzően huszonnégy órával a betegnek kerülnie kell a fizikai erőfeszítést: ne hordjon súlyokat, ne vegyen részt edzőteremben vagy medencében.

    Mik a normák a hepatitis C mennyiségi elemzésében?

    A hepatitis C vírus képes reprodukálni a vérsejtekben és lymphoproliferatív betegségeket okozni. Több mutációnak köszönhetően a szervezet immunvédelme gyengül, a genotípusok és a vírus altípusai jelennek meg. Egy adott típus helyes és pontos azonosítása az antivirális terápia hatékonyságától függ. A fertőzés veszélye, hogy a betegség tünetmentes. Összesen 15% -a 100 hányingert és hányást, fogyást és lázot tapasztalhat.

    A hepatitis C vírus meghatározása

    A hepatitis C standard normája a 40-60 nm-es méretű, a lipidek többségénél a májkárosodás az akut vagy krónikus betegség következtében következik be. A Hepatitis C, nevezetesen a Togaviridae család RNS vírusa rendkívül tartós, vérátömlesztéssel vagy nem steril tételekkel, a fürdőszobai kiegészítők nem megfelelő higiéniájával, A kvantitatív elemzés lehetővé teszi a vér vizsgálatát és a fertőzött vírus genetikai szerkezetének azonosítását.

    A hepatitis C és annak genotípusai meghatározásához kvantitatív elemzést kell végezni. Az analizátortól függően az RNS vírus előfordulási gyakoriságának három szintje határozható meg.

    Az altípusok különböző módosításokat eredményezhetnek, ezért az analizátor sajátossága és érzékenysége száz százalék. A páciens betegségének felderítése mellett meg kell határozni a súlyosság mértékét. Egyes laboratóriumok nem rendelkeznek az RNS vírus definícióival kapcsolatos összes adatról, hamis pozitív válasz lehetséges.

    A hepatitis C vizsgálata pontosabb lesz az ilyen mutatók tanulmányozása során:

    Figyelembe véve ezen mutatók eredményeit és a szervezet általános állapotát, megjelenik egy eredmény, amely a fertőzés mértékét, a formáját és a hepatitis C sejtek számát mutatja a vérben. Ez hozzájárul a gyógyuláshoz és a vírusellenes terápia hatékonyságához.

    A hepatitis C elemzés típusai

    A polidizált láncreakció (PCR) a DNS-részecskék mennyiségét mutatja be a páciens elemzésében, és helyesen azonosítja a fertőzés kórokozóját.

    A fertőző ágensek megnyilvánulhatnak. Az ilyen fertőző májbetegség, mint a hepatitis C, manapság, gyógyítható, ha időben észlelhető. Ha vírus gyanúja merül fel, PCR elemzést végeznek.

    Míg a vírus tünetei hosszú ideig maszkolhatók, a beteg nem érezheti a betegség lefolyását. De az esetek 60-70% -ában történő alapos vizsgálata során a hepatitis C-t detektálják, amely elsődleges elemzés az ELISA, majd a PCR diagnózis. Az elemzést bizonyos időszakokban végezzük, hogy meghatározzuk a betegség állapotát és előírjuk a megfelelő kezelést. Ne tegye nélkül, anélkül, hogy ezeket az eljárásokat, akkor lehet, oltás a hepatitis.

    Minőségi és mennyiségi elemzés

    Vannak minőségi és kvantitatív elemzések. Az első lényege, hogy meghatározza a fertőzés jelenlétét a vérben. És ez azt jelenti, hogy a vírus egészséges májsejtekre hat. Ha a betegnek a hepatitis C elleni antitestjei vannak, azonnal minőségi vizsgálatot végeznek. Az eredmény, amelyet az eredménynek kell előállítania, "nem észlelhető a vérben". A vírus koncentrációjának meghatározásakor szükség van a diagnosztikai rendszer érzékenységének ismeretére, mivel az elemzést antivirális terápiában részesülő személyek végezhetik. Az analizátor érzékenysége nem lehet kisebb, mint 50 NE / ml.

    Vírus kimutatásakor kvantitatív elemzést végzünk, vagyis egy vírus terhelést, amely meghatározza a vírus koncentrációját a vérben és a betegség súlyosságát.

    A vírusos RNS, amely bizonyos mennyiségű vérben van, az 1 ml köbméterenkénti 1 ml-es normává. A vírusterhelés számszerűsítése után meg lehet ítélni a fertőzött környezet fertőzésének mértékét. Amint a hepatitis C koncentrációja emelkedik a vérben, a környezetet el kell különíteni.

    Fontos, hogy az első szakaszokban a hepatitisz-koncentráció mértékét felismerjék a rehabilitáció ütemének meghatározása érdekében. Ha a Hepatitis C arányt meghaladja több mint 800 ezer IU / ml, akkor túl magasnak tekintjük, és ez egy milliós növekedésnek felel meg. Ha a mennyiségi tartomány kevesebb, mint 400 ezer IU / ml, akkor úgy tekintjük, hogy a többi szennyeződés kevésbé valószínű. Ez a szám világossá teszi, hogy a hepatitis C a szervezetben nagyon kis dózisokban van jelen. Az elemzés nem tudta meghatározni a vírusrészecskék RNS mennyiségének értékét, ezért a diagnózis pontosságát többször is átrendezte.

    A kvantitatív elemzés eredményei

    A vírusterhelés mennyiségének meghatározása a páciens vérében a fertőzés mértékének meghatározása mások számára.

    PCR-elemzés eredményei:

    1. A pozitív válasz azt jelenti, hogy fertőzés van a biológiai anyagban. Elemzéssel meghatározhatja a fertőzött sejtek pontos számát.
    2. A negatív válasz a fertőzés hiányát jelzi, amelyet alaposan átkutattak a szervezetben.

    A hepatitis C mennyiségi módszere pontos és informatív, magas érzékenységű berendezéseken. Az elemzés eredményeinek megfejtése lehetővé teszi, hogy megtudja, van-e fertőzés és annak specifikussága, hogy a fertőzött sejtek legkisebb számát a nagy érzékenységű analizátorokon látják.

    Az elemzés hamis pozitív vagy ellentétes eredményei ritkán adódnak, gyakrabban történik immunoassay vizsgálatokban.


    Kapcsolódó Cikkek Hepatitis