Minőségi analízis a hepatitis C esetében

Share Tweet Pin it

Hagy egy válasz

A polimeráz láncreakció kvalitatív elemzése - a hepatitis C-re vonatkozó PCR meghatározza a HCV jelenlétét vagy hiányát a szervezetben. A laboratóriumban megvizsgálják az RNS szerkezetét, amelyben a vírus található. Ha a C-vírus kimutatható, szükségessé válik a kezelés folyamata, mivel az elhanyagolt májbetegség komoly következményekkel jár. A kinyerés után kvalitatív PCR-t végzünk, hogy megerősítsük az antitestek hiányát. Kinevezett és megelőző vizsgálat. A vér kórokozója alacsony koncentrációban a PCR (kvalitatív) nem képes észlelni semmit, mert a diagnosztikai rendszernek érzékenységi küszöbe van. A betegség kezdeti szakaszában vagy enyhe formában a PCR-t végül ultrahangos berendezéssel diagnosztizálják.

Mi az RNS vírus?

A hepatitis C vírus (vagy a hepatitis C vírus RNS) RNS-ről nevezik magát májbetegségnek. A C vírus egy egészséges sejthez kötődik, és behatol. Idővel elterjedt az egész testben, csak a vérbe jut. Ennek eredményeképpen a kórokozó behatol a májba, megolvasztja sejtjeit és keményen dolgozik. A májsejtek (hepatociták) a hatása alatt, változásokon át, és ebből a veszteségből dolgoznak. Minél hosszabb a C vírus a májban, annál több sejt hal meg. Idővel veszélyes betegségek alakulnak ki, amelyek rosszindulatú degenerációhoz és halálhoz vezetnek.

A máj fertőzése ilyen típusú vírussal semmilyen módon nem nyilvánulhat meg külsőleg. Sok éven át vagy több tucat évig a fertőzött személy egészségesnek érzi magát, és csak egy véletlen vizsgálat leggyakrabban patológiát tár fel. A hepatitis vérének adományozásakor az emberi gén (DNS) részét képező RNS (ribonukleinsav) lánc egy részét vizsgáljuk. A laboratóriumi kutatások eredményeit nem szabad az öngyógyításra használni, mert ez csak indikátor. Az orvos meghatározza a pontos képet és további diagnózist.

Ha kész: a tanulmány tanúsága

A HCV megerősítésére PCR-analízist (polimeráz láncreakció) rendelünk. A PCR vizsgálatok segítenek megtalálni a kórokozó anyagot az RNS szerkezetében, és hatékony terápiát írnak le. A következő esetekben kinevezett:

  • a májgyulladás jeleinek azonosítása;
  • megelőző szűrővizsgálatok;
  • kapcsolattartó személyek vizsgálata;
  • a vegyes eredetű hepatitis diagnózisa (a fő kórokozó meghatározása);
  • A vírus szaporodásának aktivitási szintjének meghatározása krónikus formában;
  • a máj cirrhosis;
  • hogy meghatározzák az előírt kezelés hatékonyságát.
A PCR-vizsgálatokat orvos határozza meg a hepatitis kezelésének hatékonyságának meghatározására.

A PCR minőségi és mennyiségi analízise is van. A kvantitatív PCR mutatja az RNS százalékát a vírus hordozóival a vérben, és a minőségi PCR vírus jelenlétét vagy hiányát jelzi. A minőségi pozitív mutató (a hepatitis C RNS jelenléte) szintén kvantitatív vizsgálatot igényel. A hepatitis C kórokozójának magas koncentrációja az átvitel kockázatával jár együtt, azaz mások fertőzésével. Az alacsony mennyiségeket jobban kezelik. A vérben található RNS vírusok mennyisége nem kapcsolódik a betegség intenzitásához. A PCR-analízist az interferon terápia esetében is végezzük, annak érdekében, hogy meghatározzuk a kezelés folyamatának időtartamát és összetettségét.

A hepatitis C minőségi PCR analízisének jellemzői

A polimeráz-láncreakció-indexhez kvalitatív analízist rendelünk minden olyan beteghez, akik vércukorszint-ellenes antitesttel rendelkeznek, és akik visszanyerték és gyógyultak, újra kell vizsgálni. Javasoljuk, hogy a vizsgálatot elvégezni a hepatitis B és, majd abban az esetben pozitív következtetés, és a hepatitis D. minőségileg is analizáltuk reakatsiya kell elvégezni együtt más vérvizsgálat. Az elemzések teljes képet adnak a vírus terjedésének.

A vizsgálati eredmények közül csak pozitív, hepatitis C vagy negatív teszt, azaz a vírus jelenléte vagy hiánya látható. Ha a következtetést "észlelik", akkor a vírus aktívan cselekszik és folytatja tevékenységét. A "nem található" megnevezés azt jelzi, hogy nincs vírus vagy kis mennyisége. Ezzel a mutatóval figyelembe kell venni azt a tényt, hogy a diagnosztikai rendszerek analitikai érzékenysége eltérő, és az RNS hepatitis C még mindig a vérben maradhat, de nem mutatható ki az elemzésben.

A PCR ultra-hepatitis C különösen érzékeny módszere még kis mennyiségben is feltárul. Egy hibridizációs-fluoreszcens vizsgálatot alkalmaznak, amely sokszor magasabb, mint a standard PCR rendszerek. A módszert több esetben használják:

  • a hepatitis C gyanús rejtett formái;
  • A PCR diagnózisát a kórokozó nem igazolta, de vannak antitestek;
  • visszanyerés esetén;
  • hogy azonosítsa a fertőzés korai szakaszát.
Vissza a tartalomhoz

Az elemzés magyarázata

A diagnózis végső döntését a HCV PCR dekódolásának hatása befolyásolja, különösen az ultramethod módszerrel. Ennek a kutatásnak a fő hátránya a minta és az anyagok steril körülmények közötti szigorú betartása. A kis eltérés néha az elemző pontatlan következtetéseit mutatja, bonyolítja a diagnózist és a későbbi kezelést. A PCR analízise a hepatitis vírus RNS meghatározására nem mindig mutatja a betegség képét bizalommal, néha pontatlanságok is be vannak engedve, mindkét irányban.

A hepatitisz-vírus diagnosztizálására ajánlott átfogó vizsgálatot alkalmazni.

A mutatók normája

A vírusos hepatitis C-ben található RNS-sel szembeni JgM antitestek hiányát a polimeráz láncreakció analízisének tekintik. Ugyanakkor a szerológiai analízis eredményei azt mutatják, hogy a C-vírus antitestjei jelen vannak, és ez a norma határain belül is fennáll. A minőségi meghatározás nem mutatja a betegség intenzitását, csak a hepatitis C okozó ágensét mutatja az RNS-ben. Az ilyen elemzést a kezelés után meg kell ismételni a tényleges gyógyulás megerősítése érdekében.

eltérések

Ha a HCV RNS-nek megfelelő JgM ellenanyagok vannak jelen, ez egy fejlődő fertőzésre utal. A betegség akut vagy krónikus, különböző szakaszokban manifesztálódik. Ha az antitestek számának csökkenését rögzítik, az elemzés a kezelés során elért eredmények elérését jelzi. Rendkívül ritkán előfordulnak a hamis pozitív eredmények a diagnózisban. A nőknél a terhesség alatt és más fertőző betegségekben szenvedőknél fordulnak elő.

Mi a hepatitis C vírus RNS?

A hepatitis C vírus RNS-vizsgálata a legfontosabb eljárás, amely lehetővé teszi a betegek kezelésének időtartamát és módszereit nagy pontossággal. A betegség diagnosztizálása több különböző vérvizsgálatból áll, mint például:

  • a hepatitis C markerek (anti-HCV);
  • hepatitis C vírus RNS kimutatására (HCV RNS).

Az első vizsgálat a hepatitis első gyanúja. A második lehetőség a legfontosabb a HCV RNS kezelésében, ezért részletesebben megfontoljuk.

Mi a vírusos hepatitis C?

A vírusos hepatitis C vagy a HCV fertőző betegség, amely a májra hat. A vírussal fertőződik a vérben. Ha fertőzést szenved, vérátömlesztést végez, amikor az orvosi eszközök sterilizálására vonatkozó szabályokat nem tartják tiszteletben. Kevesebb olyan eset van, amikor a betegséget szexuális úton vagy terhes anyától a magzatig kapják. A hepatitis C 2 típusból áll.

A krónikus hepatitis C a legveszélyesebb. Ez egy olyan betegségforma, amely egész életen át tarthat. Komoly problémákba ütközik a máj működésében, például cirrózisban vagy rákban. A fertőzött emberek 70-90% -ában a betegség krónikus állapotba kerül.

A hepatitis C legfontosabb veszélye az, hogy titokban, icterikus jelek nélkül halad. Ebben az esetben leggyakrabban panaszkodnak láz, hányinger és hányás, fizikai gyengeség, fokozott fáradtság, étvágycsökkenés és súlycsökkenés. Ebben az esetben a májszövetek kis tömörödésének hátterében gyakran előfordul rosszindulatú degenerációja. Ezért a vírusos hepatitis C-t gyakran "időbombaként" vagy "gyengéd gyilkosnak" nevezik.

A betegség másik különlegessége nagyon lassú fejlődés, amely több tucat évre becsülhető.

Rendszerint a fertőzöttek nem éreznek semmilyen tüneteket, és nem gyanítják valódi állapotukat. Gyakran előfordul, hogy a betegség csak akkor azonosítható, ha másik orvosra utal.

A kockázati csoport a következőket tartalmazza:

  • olyan gyermekek, akik az anyáknál hepatitis C vírust kaptak;
  • drogfüggők;
  • emberek, akik átszúrtak testrészeket vagy tetováltak nem steril eszközöket;
  • adományozó vért vagy szerveket (1992-ig, amikor hemodialízist nem végeztek);
  • a HIV fertőzöttek;
  • A fertőzött betegekkel érintkező orvosi dolgozók.

A hepatitis C RNS meghatározása

Meghatározása a hepatitis C vírus RNS-t, más néven a hepatitis C PCR, ez a tanulmány a biológiai anyagok (vér), amellyel azonosítani tudja a szervezetben az azonnali elérhetőségét genomateriala hepatitis B vírus (bármely adott vírus egy egyetlen részecske RNS).

A fő vizsgálati módszer a PCR vagy a polimeráz láncreakció.

A HCV RNS meghatározására kétféle vérvizsgálat létezik:

Minőségi teszt

A kvalitatív elemzés elvégzése lehetővé teszi annak megállapítását, hogy a vírus a vérben van-e. Minden olyan betegnek, aki C-hepatitis antitestet kapott, ezt a vizsgálatot meg kell vizsgálnia. Eredményeivel 2 válasz érhető el: "jelen van" vagy "hiányzik" a vírus. A pozitív vizsgálati eredmény (talált) alapján meg lehet ítélni egy olyan vírus aktív multiplikációját, amely az egészséges sejteket a májban fertőzi.

A kiváló minõségû PCR-hez végzett tesztet specifikus érzékenységre hangolták, 10-500 NE / ml¹et. Ha a hepatitis vírus 10 μU / ml-nél kisebb koncentrációjú vérben található, akkor a vírus kimutatása lehetetlenné válik. A vírus specifikus tartalma nagyon alacsony értéket mutat azokon a betegeken, akiknél az antivirális terápiát írják elő. Ezért fontos, hogy az orvosi rendszer érzékenysége magas szintű legyen a polimeráz láncreakció minőségének megállapításához és meghatározásához.

Gyakran előfordul, hogy a C-hepatitisz polimeráz láncreakcióját azonnal a megfelelő antitestek megtalálása után végezzük. A vírusellenes terápiás kezelést követő vizsgálatok a 4., 12. és 24. hetet tekintik meg. És egy másik elemzést a PVT befejezése után 24 hét után végzünk. Ezután - évente egyszer.

Kvantitatív teszt

A PCR RNS kvantitatív analízise, ​​amelyet néha vírus terhelésnek is neveznek, meghatározza a vírus koncentrációját (specifikus tartalma) a vérben. Más szóval, a vírusterhelés értetődik egy bizonyos mennyiségű virális RNS, amely jelen lehet egy adott mennyiségű vért (hozott kezelhető 1 ml 1 cm kocka). A vizsgálati eredmények egységei nemzetközi (standard) egységek, osztva egy milliliterrel (IU / ml). A vírus tartalma néha eltérőnek tűnik, attól függ, hogy a laboratórium melyik kutatást végzi. A hepatitis C esetében a mennyiségi meghatározás néha olyan értékeket használ, mint a másolatok / ml.

Meg kell érteni, hogy nincs specifikus függőség a C-hepatitisz súlyosságától a törzs koncentrációjában a vérben.

A "vírus terhelés" ellenőrzése lehetővé teszi a betegség fertőzőképességének meghatározását. Tehát a vírus egy másik vírusának megterhelésének kockázata nő a hepatitisz koncentrációjának növekedésében a vérben. Ezenkívül a vírus magas tartalma csökkenti a kezelés hatását. Ezért a kis vírusterhelés nagyon kedvező tényező a sikeres kezeléshez.

Ezenkívül a hepatitis C teszt és a PCR általi meghatározása nagy szerepet játszik a betegség elleni kezelésben és a kezelés sikerességének meghatározásában. A vizsgálati eredmények alapján tervezik a rehabilitációs tanfolyamot. Például a hepatitis vírus specifikus koncentrációjának lassú csökkenése esetén az antivirális terápia meghosszabbodik, és fordítva.

A modern orvostudományban úgy vélik, hogy a terhelés több mint 800000 ME / ml magas. A 10000000 ME / ml feletti terhelés kritikusnak tekintendő. De a különböző országok szakértői és a mai napig nem ugyanazon a véleményen voltak a vírusterhelés korlátai.

A mennyiségi teszt gyakorisága

Általában a hepatitis mennyiségi elemzését az antivirális terápia előtt és a kezelés befejezése után 3 hónappal a terápia minőségének meghatározása végett végezzük.

Ennek eredményeképpen a mennyiségi vizsgálatot a fent leírt minta eredményeinek mennyiségi értékelésének kell tekinteni. Ennek következtében a "mért tartomány alatt" vagy "a vérben nem észlelhető" megállapítás fog megjelenni.

A kvalitatív vizsgálat érzékenységi paramétere általában alacsonyabb, mint a kvantitatív elemzés érzékenysége. A "hiányzó" átirat jelzi, hogy mindkét fajta elemzés nem találta a vírus RNS-jét. A "mért tartomány alatti" vizsgálattal a kvantitatív elemzés valószínűleg nem találta meg a hepatitis RNS-t, bár ez igazolja egy nagyon kis specifikus vírus jelenlétét.

Hepatitis C és genotípusai

Genotipizálása hepatitis C vírus RNS diagnosztizálni jelenlétében különböző genetikai típusú hepatitis C Science tudja több mint 10 típusú vírus genom, de az orvosi gyakorlatban kellően megkülönböztetni több genotípus, amelyek a legnagyobb részesedése a régióban. Meghatározása genetikai típusa kulcsszerepet játszik kiválasztásában az időzítés a kezelés, ami szükséges, ha figyelembe vesszük, sokféle mellékhatása elleni gyógyszerek hepatitis.

A vírusos hepatitis C kezelésének módszerei

A hepatitisz vírus gyógyítására szolgáló egyetlen hatékony módszer 2 gyógyszer kombinációja: az interferon-alfa és a ribavirin. Különben ezek a gyógyszerek nem annyira hatékonyak. A gyógyszerek ajánlott dózisát és az alkalmazás időzítését csak az orvos írhatja elő, és minden egyes betegnél egyedileg. Ezeknek a gyógyszereknek a kezelése 6-12 hónapig tarthat.

Ma nem találtak olyan gyógyszereket, amelyek garantálják a vírus 100% -os helyreállítását. A megfelelően kiválasztott kezeléssel azonban a betegek gyógyulása elérheti az esetek 90% -át.

A hepatitis C PCR minőségi elemzése

A hepatitis egy súlyos betegség, amelynek számos oka van a kezdetnek. A fejlődés középpontjában a máj közvetlen vagy közvetett károsodása okoz. Tekintve annak fontosságát az egész szervezetre, csak azt lehet kitalálni, milyen rossz a patológia. Ebben a cikkben részletesebben tárgyaljuk a kurzus jellemzőit és a hepatitis C laboratóriumi diagnosztikáját.

A betegség oka egy vírus, amely RNS-tartalmú kórokozókra utal. Megkülönböztető jellemzője - a mutáció képessége, vagyis szerkezetének megváltoztatása. Emiatt a fertőzés elszökik az immunrendszer támadását, és a legtöbb esetben krónikus gyulladást okoz a májban.

Figyelembe véve a vírus különböző altípusainak létezését, a gyógyszerek kiválasztását a genotipizálás eredményeinek figyelembevételével kell elvégezni. Annak ellenére, hogy hosszú ideig tartó vizsgálatot folytattak a betegségről és a HCV felépítésének sajátosságairól, nem volt lehetséges a vakcina elleni vakcina kifejlesztése.

A korai diagnózis nehézségei a májgyulladás tünetmentes lefolyásának következményei, melynek következtében egy személy a cirrhosis szakaszában orvoshoz fordul. A betegség időben történő kimutatásához rendszeres fizikai vizsgálatokra van szükség. Csak a vér laboratóriumi vizsgálata képes azonosítani a HCV-t és megelőzni mások fertőzését. Az a tény, hogy a fertőzés hordozója sokáig nem tudja a patológiát, és tovább továbbítja a vírust az egészséges embereknek.

Átviteli útvonalak

A vírus a legtöbb esetben a véren terjed, mivel a kórokozók legnagyobb koncentrációját tartalmazza. Így a fertőzést továbbítják:

  • hemodialízissel;
  • tűzéssel;
  • a harc során, amikor a bőr sérült, és hemokontakt fordul elő;
  • vérátömlesztéssel (vérátömlesztés).

Az intim intimitás okozta fertőzés valószínűsége jelentéktelen, mivel a sperma és a hüvelyi elváltozás kis számú kórokozót tartalmaz. A fertőzés kockázata jelentősen megnő, ha a genitális nyálkahártya integritása veszélybe kerül. Ezt agresszív és anális szexekkel figyelik meg.

Ami a fertőzés átvitelének vertikális módját illeti, az a munka során történik. A terhesség idejében a kórokozó nem tud átjutni a méhlepénybe az embrióba. Természetes rendellenességek esetén a patogén ágens a bõr traumájába kerül, amikor az anya vérével való érintkezést észlelik.

Miután a kórokozó egészséges szervezetbe került, az ellenanyagok szintézise megkezdődik, amelyek védelmet nyújtanak a fertőzés ellen és az immunrendszerhez tartoznak. Ezek megtalálhatók az ELISA segítségével egy személy kezdeti vizsgálatakor.

A diagnózis megerõsítéséhez a páciens polimeráz láncreakciót végez. Ez egy elemzés egy patogén ágens genetikai anyagának azonosítására és a vírusterhelés meghatározására.

A hepatitis C laboratóriumi diagnózisa

A laboratóriumi diagnosztika enzim immunvizsgálattal kezdődik. Fő feladata a kórokozóval szemben előállított antitestek kimutatása. Hatékonysága majdnem 95%. A preklinikai szakaszban végzett kutatásnak köszönhetően a vírus hordozó azonosítása lehetséges, és további vizsgálat céljából elküldi.

Az ELISA minőségi analízise azt jelzi, hogy az immunglobulinok jelen vannak vagy hiányoznak a páciens vérében. Eredménye lehet "pozitív" vagy "negatív". Miután megkapta a válasz első változatát, a személy eljut a következő vizsgálathoz - PCR. Az ára függ a reagensek és a laboratóriumok minőségétől. A polimeráz láncreakció költsége elérheti a 4000 rubelt.

A PCR jellemzői

A polimeráz láncreakcióval még kis mennyiségű biológiai anyag lehetővé teszi a vírusterhelés becslését a vérben, azaz a kórokozók koncentrációját egy milliliter folyadékban.

A PCR megjelenésével a hepatitis diagnózisa sokkal egyszerűbb volt. Az elemzés lehetővé teszi a HCV RNS azonosítását, a fertőző folyamat színvonalának és a vírus hordozó fertőzőképességének megállapítására.

Számos genetikai diagnózis létezik:

  1. a hepatitis C-re vonatkozó PCR minőségi elemzése - megerősíti a HCV jelenlétét vagy hiányát a vizsgázó vérében:
  2. mennyiségi, amellyel lehetővé válik a vírusok koncentrációjának kiszámítása és a betegség színpadának megállapítása. Az eredményt IU / ml-ben vagy másolatokban / ml-ben adják (a laboratóriumból);
  3. genotipizálás szükséges a HCV genotípusának meghatározásához. Ehhez a kábítószerek pontos kiválasztásához van szükség, amelyek ebben az esetben a leghatékonyabbak. Az elemzés közvetetten jelzi a kóros folyamat súlyosságát a májban. Tehát a kórokozó harmadik genotípusával leggyakrabban megfigyelhető a steatosis, amelynek fejlődése a zsír felhalmozódása a hepatocytákban (sejtjeiben). Ezenkívül a vírus típusa befolyásolja a terápiás kezelés eredményét és időtartamát.

A hepatitis C PCR minőségi elemzése

A laboratórium első lépése a biológiai anyag HCV RNS jelenlétének tanulmányozása. Fontos megjegyezni, hogy a hepatitis C minőségi elemzésének bizonyos szintű érzékenysége van, ezért nem mindig adhatja meg a helyes választ. Ebben az esetben ajánlott ismételt laboratóriumi diagnózist végezni más reagensek alkalmazásával.

A megbízható eredmények eléréséhez legalább 50 IU / ml érzékenységű vizsgálati rendszert kell használni.

A diagnózis eredménye lehet "pozitív" vagy "negatív". Ha a patogén nem található a vérben, a vizsgálat véget ér. Amikor egy patogén ágenst detektálunk a mintában, akkor a vírus terhelés kvantitatív számát végezzük.

A hamis negatív válasz akkor érhető el, amikor a technológiai folyamat megzavarodik, például olyan aktív összetevők, amelyek elnyomják a kórokozó másolatainak kialakítását a környezetbe. Így nem lehet megjeleníteni a vér igaz képet, amely miatt nem diagnosztizálják az emberi fertőzést.

Hamis pozitív eredményt lehet elérni, ha a biológiai anyag gyűjtőcsöve, valamint a vizsgálat környezete szennyezett. Ezen túlmenően, egy ilyen elemzésre adott válasz lehetséges vegyes fertőzéssel, amikor a májat több vírus, például hepatitis C és D is befolyásolja.

A minőségi kutatásra utaló jelek

Az orvos kvalitatív vizsgálatot rendelhet a páciensnek a hepatitis C vírus RNS kimutatásához:

  • amikor az enzim immunoassay pozitív vagy megkérdőjelezhető választ kap;
  • a diagnózis ellenőrzéséhez;
  • a vírusterhelés meghatározása;
  • a betegség színpadának felállítása;
  • vegyes fertőzés diagnózisát. Gyakran előfordul, hogy a hepatitis C a májat a "D" vírussal egyidejűleg érinti;
  • a terápiás taktika meghatározása, figyelembe véve a kórokozó genotípusát;
  • a változások dinamikájának értékelése az antivirális gyógyszerek kezelésének hátterében.

A polimeráz láncreakció előnyei közé tartoznak a következők:

  1. a technika magas érzékenysége, amely lehetővé teszi a fertőzés tényét a preklinikai szakaszban;
  2. a kórokozó genetikai anyagának azonosítása, nem pedig antitestek;
  3. a kórokozó-ágens altípusának létrehozása;
  4. a nagy sebességű diagnosztika, mivel nem szükséges anyagot táplálékközegre vírni, de elegendő egyedi vizsgálati rendszereket használni. Egy személy 5 óra elteltével kap eredményt;
  5. sokoldalúságát. Az elemzés lehetővé teszi bármely genetikai anyag (RNS, DNS) azonosítását. Ennek következtében az orvos megerősítheti a hepatitis C-t és más típusú betegségeket (B);
  6. a látens fertőzés észlelésének a lehetősége.

Kvantitatív kutatás

A polimeráz láncreakcióval végzett vérvizsgálat során kórokozók számát lehet kiszámolni egy fix mennyiségű biológiai anyagban. A mutató IU / ml. Az elemzésnek köszönhetően meg lehet állapítani a beteg fertőzőképességének mértékét, meghatározni a fertőző folyamat stádiumát, valamint értékelni a gyógyszerterápia hatékonyságát.

A PCR alapján a szakértő eldönti, hogy mely gyógyszerek dózisa képes blokkolni a kórokozók terjedését. Ezenkívül meghatározzák az antivirális kezelés időtartamát és az életre vonatkozó prognózist. Fontos megjegyezni, hogy a vizsgálati rendszerek nagyon érzékenyek, ezért a módszer lehetővé teszi az emberi fertőzés megerősítését még a preklinikai szakaszban is.

genotipizáláshoz

Tekintettel arra, hogy a kórokozó képes mutálni, meghatározni a kezelés taktikáját és az antivirális gyógyszerek kiválasztását, genotípusa szükséges. Például a hepatitis HCV 1 kezelése 48 hétig tart, pozitív trendként csak az esetek 60% -ában figyelhető meg. A 2. és 3. genotípus kedvezőbb prognózissal rendelkezik. A vírusellenes szereket 8 hónapig írják fel, és hatékonyságuk elérheti a 85% -ot.

Statisztikai adatok szerint a legtöbb esetben az 1., 2. és 3. HCV az Orosz Föderáció területén található.

Egy laboratóriumi vizsgálat megfejtésekor ilyen válasz jelezhető: "nincs beírva". Ez azt jelenti, hogy egy vírus kering a beteg keringési rendszerében, amelyet a tesztrendszer nem ismeri fel. Az elemzés eredménye ebben az esetben azt jelzi, hogy az atipikus ember fertőzést okoz a kórokozó adott földrajzi területére.

Hogyan lehet megbízható eredményeket elérni?

A PCR-nek a hepatitis C kórokozójának RNS-ének kimutatására szolgáló kvalitatív vizsgálata megfelelő eredményeket mutatott, ezért meg kell felelnie a laboratóriumi diagnosztika előkészítésének követelményeinek:

  1. a vérmintavétel üres gyomorban történik, és az "éhes" rés nem lehet rövidebb 8 óránál;
  2. két nappal a vizsgálat előtt ajánlott az alkoholfogyasztás abbahagyása és az éles, zsíros és füstölt ételek elutasítása;
  3. töröljék el a véralvadásgátló gyógyszereket, például a heparint. Ha ezeket a gyógyszereket életciklus miatt írják fel, erről értesítenie kell az orvost. Ezenkívül a szakorvosnak ismernie kell olyan egyéb gyógyszerek befogadását, amelyek befolyásolhatják a laboratóriumi vizsgálat eredményét;
  4. A biológiai anyaggyűjtés előestéjén a fizioterápiás eljárásokat nem szabad elvégezni, és nehéz fizikai terhelésnek kell alávetni.

Az elemzés eredményeit nem csak a vér adományozója, hanem egyéb tényezők is befolyásolhatják:

  • rossz vérgyűjtés;
  • a biológiai anyagok szállítására vonatkozó ajánlások be nem tartása;
  • a laboratóriumi dolgozók nem megfelelő képzése;
  • a kutatási technikák figyelmen kívül hagyása;
  • a véralvadás előtti antikoagulánsok (heparin) bevezetése. Ez a gyógyszercsoport csökkenti a koagulálhatóságot, ezáltal lelassítja a reagensek munkáját.

A különböző laboratóriumokban a diagnosztikai válasz némileg eltérő lehet, de ezek a hibák nem befolyásolják a vizsgálat végeredményét.

Különös figyelmet fordítanak a laboratóriumi vizsgálati rendszerek típusaira. Gyakran előnyös a nagy érzékenységű reagensek alkalmazása. Ez fontos az alacsony virális terhelésű betegeknél, mivel nehéz észlelni.

Milyen gyakran végez laboratóriumi vizsgálatot?

Elsősorban a polimeráz láncreakciót végezzük olyan személyeknél, akik immunválaszt követően ellenőrizték a hepatitis vírus ellenanyagait. Ebben az esetben kijelölték, hogy megerősítik egy személy fertőzésének tényét és megállapítja a betegség színpadát. Ezenkívül az elemzés lehetővé teszi a vírus altípusának meghatározását, ami különösen fontos a gyógyszerek kiválasztásához.

A kötelező laboratóriumi vizsgálatok következő periódusa a vírusellenes terápia megkezdésétől számított 3 hónap. A diagnózis lehetőséget nyújt a gyógyszerek hatékonyságának értékelésére, az adag módosítására vagy cseréjére.

Az alapvető analízisek mellett PCR is végezhető a kezelés kezdetétől számított 4 és 24 héten belül. A betegség pozitív prognózisát a vírusterhelés 3 hónapos terápiás kezelés utáni csökkenése igazolja. Így például 1 millió NE / ml-ről több százezerre kell csökkennie.

Ha a patogén ágensek koncentrációja a vérben ugyanakkora szinten marad, vagy enyhén emelkedik, ez jelzi a vírusellenes szerek hatástalanságát és helyettesíti őket. A kezelés végén a PCR segítségével megerősíthetjük a beteg helyreállítását.

A laboratóriumi diagnózis eredményeinek helyes értelmezéséhez egy hepatológus vagy fertőző betegség specialistával kell konzultálni. Mivel az ELISA-val kapcsolatos téves válaszok nagy gyakorisággal fordulnak elő, az elemzést kizárólag az elsődleges szűréshez használják. A beteg alaposabb vizsgálatához polimeráz láncreakciót alkalmaznak.

Még mindig úgy gondolja, hogy nehéz gyógyítani a hepatitis C-t?

Az a tény, hogy most olvasod ezeket a sorokat - a győzelem a májbetegség elleni küzdelemben nem az Ön oldalán... És már gondolkozott az interferon terápiáról? Érthető, mert a hepatitis C nagyon súlyos betegség, mert a máj megfelelő működése az egészség és a jó közérzet garanciája. Hányinger és hányás, sárgás vagy szürkés bőrszín, keserű íz a szájban, sötét színű vizelet, hasmenés... Mindezek a tünetek ismerős nem hallomásból. De talán helyesebb, ha nem egy következményt, hanem egy okot kezelünk?

Ma, a modern gyógyszerek és az új generációs sofosbuvir Daklatasvir a 97-100% valószínűséggel örökre fog gyógyítani hepatitis C. A legújabb gyógyszeres kapható orosz a hivatalos képviselője az indiai farmgiganta ZYDUS Heptiza. A megrendelt termékeket a futár a kézhezvételt követő 4 napon belül kézbesíti. Ingyenes konzultáció a modern drogok használatáról, valamint a vásárlás módjáról a Zydus beszállítójának hivatalos honlapján, Oroszországban.

A hepatitis C PCR kvalitatív és kvantitatív elemzése: negatív, pozitív, dekódolás

A hepatitis C a máj vírusos megbetegedése, amelyet a flavonavírus HCV (angol hepatitisz C vírus) okoz, amely ribonukleinsav (RNS) molekulát tartalmaz. Az RNS hordozza a vírus genetikai kódját. Jelenléte lehetővé teszi a hepatitisz C-re vonatkozó PCR-analízist.

Az emberre nézve a HCV veszélye az, hogy az úgynevezett szerológiai ablak (a fertőzés és az immunrendszer reakciója megjelenése közötti időintervallum) nagyon hosszú lehet - több héttől hat hónapig.

Ez nem tárja fel a fertőzést és időben elkezdi a kezelést.

A gazdaszervezet sajátosságaitól függően a HCV akut formában jelenhet meg, és krónikus betegségként is kialakulhat, amely hosszú távú és drága kezelést igényel. A HCV elleni antitestek kimutatásakor számos laboratóriumi vizsgálatot végeznek, beleértve a hepatitisz C-re vonatkozó PCR-t is. Ez a vizsgálat minden olyan személy esetében történik, amelynek vérében a HCV ellenanyagok találhatók.

Mi a PCR elemzés?

PCR hepatitis C laboratóriumi elemzése - biológiai anyag vizsgálata a flavavirus jelenlétének azonosítására.

A polimeráz láncreakció (a rövidítéssel megfejtve) a szervezet vírusos károsodásának mennyiségi értékét, minőségi jellemzőit és az RNS-t tartalmazó vírus genotípusait mutatja.

Alapul véve, valamint további elemzések alapján meghatározták a terápia módját és időtartamát, valamint a járványtani tényezőt (a másik fuvarozó számára történő átvitel kockázata).

Mi az RNS analízis a hepatitis C-re?

A hepatitis C PCR-t RNS-analízisnek is nevezik (HCV RNS), mert nem ismert. A Flavavirus 30-60 nm virion méretű RNS részecskét tartalmaz. Ennek a mikroorganizmusnak az egyik jellemzője a mutációk nagy hajlama.

A vírus minden alfajának (genotípusai) eltérő rezisztenciát mutatnak, ami különböző kezelési módszereket és a beteg további prognózisának jellegét okozza.

Biológiai anyag (vénás vér) foglalkozik éhomi és általában tesztelték Real-Time PCR (nagyon érzékeny valós idejű diagnosztika, hogy meghatározzuk az alsó határ a 15 NE / ml-automatizált zárt rendszer módban).

Vannak más vizsgálatok is, például COBAS AMPLICOR, amelynek érzékenysége 50-100 NE / ml. Bármely laboratóriumi vizsgálat esetében az érzékenységi küszöb fontos, azaz a reagens képes a vírus minimális koncentrációjának kimutatására a biológiai anyagban.

A hepatitis C analízis típusai a PCR módszer alkalmazásával

A hepatitis C PCR-je három fontos elemet tartalmaz:

  • minőségi elemzés;
  • kvantitatív elemzés;
  • genotipizáláshoz.

Ezek a vizsgálatok meghatározhatják a viremia jellegét, valamint a kórokozó genetikai jeleit. A diagnosztikai rendszer érzékenységétől függően a tesztet egyszer elvégzik, és néha egy második vizsgálatot végeznek érzékenyebb reagenssel az eredmények megerősítésére vagy finomítására.

Kiváló minőségű hepatitis C PCR

A hepatitis C-re vonatkozó PCR-analízis a polimeráz-láncreakciós vizsgálat másik gyakori elnevezése. A vizsgálat standard érzékenysége, amely lehetővé teszi a vírusos elváltozás kimutatását, a 10-500 NE / ml tartományban van.

A hepatitis C-re vonatkozó PCR negatív elemzése azt mutatja, hogy a vírus koncentrációja a beteg vérében a diagnosztikai rendszer érzékenységének küszöbértékénél alacsonyabb.

Ha a minőségi PCR "nem észlelt" választ adott, akkor a későbbi kezeléshez fontos tudni a reagens érzékenységi küszöbértékét.

A proteinfrakciók a flavavirushoz sokkal később jelentkeznek.

Quantitative Hepatitis C PCR

A PCR hepatitis C mennyiségi mutatója a vírusterhelés, amely tükrözi a flavavirus RNS koncentrációjának szintjét a szervezetben. Ez egy mutató, amely megmutatja, hogy hány darab vírus RNS-t tartalmaz egy köbcentiméter vér. A hepatitis C PCR RNS eredményeit egy hagyományos rendszerben nemzetközi egységben (IU / ml) nevezik ki, és különböző módokon rögzíthetők, például 1,7 millió vagy 1,7 millió NE / ml.

A hepatitis C mennyiségi PCR-diagnózisát a vírusellenes terápia megkezdése előtt, a kezelés 12. hetében pedig a HCV elleni küzdelem kiválasztott módszerének eredményeinek értékelésére adják. A vírus terhelés lehetővé teszi a betegség három fontos mutatójának azonosítását:

  • fertőzőképesség, azaz a vírus egyik hordozótól a másikig terjedő kockázatának mértéke (minél nagyobb a flavavirus RNS koncentrációja, annál nagyobb a valószínűsége egy másik személy fertőzésére, például szexuális érintkezés esetén);
  • a kezelés módszere és hatékonysága;
  • időtartamát és prognózisát (minél nagyobb a vírusterhelés, annál hosszabb a kezelés).

A hepatitis C mennyiségi PCR-diagnózisa a laboratóriumi vizsgálat típusától és az érzékenység küszöbétől függ. A norma alsó határa rendszerint 600 000 NE / ml, az átlagérték 600.000-700.000 NE / ml. A 800 000 NE / ml és annál magasabb értékeket magas szintű RNS-tartalmú vírusnak tekintik.

genotipizáláshoz

Tekintettel a HCV magas mutációs aktivitására, fontos, hogy a vizsgálati stádiumban meghatározzuk, hogy a vírus genotípusa a beteg vérében van-e. Összesen 11 hepatitis C vírus genotípust jegyeztek fel a bolygón, amely számos alfajot tartalmaz. Az Orosz Föderáció területén 1,2-es és 3-as gyakoriak.

A hepatitis C PCR RNS-je a genotipizálással együtt nagyon fontos eleme az elemzésnek, mert lehetővé teszi az orvos számára a vírus rezisztenciájának (rezisztencia) meghatározását, megfelelő gyógyszerek kiválasztását és a kezelés lefolyását.

A genotipizálás lehetővé teszi a máj állapotának közvetett meghatározását is. Például a HCV 3 genotípusát gyakran steatosis kísérli, amelyben a zsír felhalmozódik a test sejtjeibe.

A PCR-nek a hepatitis C-ben végzett vérvizsgálatának olyan számot kell adnia, amely meghatározza a genotípust. A laboratóriumi válaszokban írható "nem gépelt" - ez azt jelenti, hogy az emberi vérben olyan vírus van, amelyet a tesztrendszer nem határoz meg. Ez azt jelezheti, hogy a genotípus egy adott földrajzi területen nem jellemző. Ebben az esetben szükség van az elemzés újbóli átadására a diagnosztikai rendszer nagyobb érzékenységével.

PCR analízis dekódolása hepatitis C-re

A hepatitis C PCR vizsgálatát a fenti adatok alapján számszerűsíthetjük. A laboratóriumi vizsgálatok eredményeinek átvételekor általában a következő adatokat írják fel:

  • "Found" / "not found" (magas minõségû PCR a hepatitis C esetében);
  • az RNS-t tartalmazó frakciók mennyisége, például 831.680 IU / ml (kvantitatív PCR-vizsgálat);
  • az a szám, amely meghatározza a HCV genotípust, például - 1, 2, 3, 4;
  • a teszt neve leginkább Real-time.

A legfontosabb a hepatitis C PCR-elemzésének megfejtéséhez a második tétel, amely a vírusterhelést mutatja a prognózis, a módszer és a kezelés időtartamának meghatározása céljából.

Ha a hepatitis C-re vonatkozó PCR-analízis negatív, és ELISA pozitív - mit jelent ez?

A laboratóriumi tesztek megfejtéséhez fontos, hogy kapcsolatba lépjen egy hepatológussal vagy fertőző betegséggel foglalkozó szakemberrel, aki megmagyarázza a kapott információkat a diagnosztikai rendszer típusának és az érzékenység küszöbének megfelelően. Az orvosi gyakorlatban sok vérvizsgálati adat van, amelyek az orvosi nevelés nélküli embert zavartsággá teszik.

Például, ha a vizsgálati HCV PCR negatív és pozitív ELISA, azt jelezheti, hogy ebben az időben a beteg vérében nem HCV, de mielőtt szenvedett akut formában a hepatitis C Úgy ​​tekinthető, hogy a pozitív-linked immunosorbent assay (ELISA) azt mutatja, hogy a vérben vannak olyan antitestek, amelyeket a múltban a vírus inváziója után állítottak elő. De a modern orvosi gyakorlatban ELISA elemzés nem eléggé megbízható, és gyakran ad szokatlan eredményeket, így az orvosok használni, mint egy elsődleges szűrés. A betegség diagnosztizálásakor a szakemberek pontosan PCR-tesztek segítségével irányulnak.

Hasznos videó

A következő videóban nagyon részletes és érdekes megmondani, hogy mi a lényege a PCR módszernek, hogyan történik az elemzés:

következtetés

A vénás vér általában a hepatitis C PCR analízisére vonatkozik. Leggyakrabban kettős mintavétel egy biológiai anyagból - ELISA-hoz, és közvetlenül egy PCR-teszthez. A helyes teszteredményekhez a biológiai anyag laboratóriumi mintavételének legfontosabb szabályainak betartása szükséges:

  • a vér az analízishez reggel egy üres gyomorban van;
  • az evés és a vérvétel között legalább 8 óra legyen;
  • A vizsgálat megkezdése előtt kizárnia kell az alkoholt és a sült ételeket is;
  • A vért megelőző napon a fizikai erőfeszítést elkerülni kell.

A vérvizsgálat eredményei általában másnap készen állnak.

PCR diagnosztika használata

A polimeráz láncreakciót (PCR) a molekuláris biológiában a víruskeresés kísérleti módszerének nevezik. Lehetővé teszi a nukleinsav (DNS) bizonyos fragmenseinek koncentrációjának jelentős növelését a biológiai anyag mintáiban, ami lehetővé teszi számukra a felismerés és számlálást.

Az elemzés az alábbiak szerint történik. A genetikai anyagot (vérmintát), amely potenciálisan tartalmazhatja a kívánt gént, egy kémcsőbe kerül. Ezenkívül a primereket a kémiai úton szintetizáltuk a kívánt gén kis hosszán.

A DNS-hez vagy RNS-polimerázt is hozzáadják az edényhez, képes egy olyan nukleinsavláncot létrehozni, amely teljesen azonos az eredetivel. A kapott kompozícióba négy szabad nukleotidot, egy RNS-hez vagy DNS-hez speciális építőanyagot helyezünk, amelyek közül az egyik a foszfor radioaktív részecskéit tartalmazza.

A kapott elegyet 95-96 ° C-ra melegítjük, aminek következtében a szokásos állapotban összefonódott két DNS-helikát feloldjuk. Ezután a készítményt lehűtjük, ebben az időben a primerek a vírusgenom kívánt régiójához kötődnek anélkül, hogy az RNS (vagy DNS) kettős hélixet állítana elő ismét.

Hűtés közben a polimeráz egy nukleotidok szabad láncolatát keresi. Ennek az enzimnek a működéséhez egyetlen lánc nukleotidra van szükség. Mivel a polimeráz a DNS-szalag mentén csúszik (mint egy gyűrű egy kötélen), nem működhet kettős spirállal.

Ezután ismétlődő ciklusú melegítést végzünk, ami miatt a nukleotidláncokat elválasztjuk. Mindegyik PCR ciklus esetében a mintában lévő kívánt hepatitis gén mennyisége növekszik a geometriai progresszióban, és a genetikai anyag többi része lineárisan keletkezik.

A nukleotidmaradékok oldatának tisztítása és a DNS-szálak elektroforézissel történő molekulasúly-paraméterével történő elválasztása után könnyen meghatározható, hogy a kívánt gén létezik-e a vizsgálati mintában, vagy sem.

A PCR előnyei

A PCR módszerrel végzett laboratóriumi vizsgálat lehetővé teszi, hogy még több információt szerezzen, mint az RNS vírus jelenlétét. A radioaktív sugárzás szintjének meghatározásakor meghatározható, hogy a vizsgált mintában mely genetikai anyagot kezdetben tartalmaznak. Hepatitis esetén határozza meg a vírusterhelés szintjét.

Ennek a módszernek egy másik előnye a CR reakció nagyon nagy érzékenysége. Sokkal magasabb, mint a vírusok észlelésének klasszikus módszerei. Ideális esetben a kívánt gén azonosítása céljából csak egy mintában lévő vírus elegendő a PCR-hez.

Emellett a PCR teljesen specifikus. A primereket olyan módon hozták létre, hogy teljesen megfeleljenek a kívánt gének egyedülálló részeinek, amelyeknek nincs más szekvenciája. Mindkét ujjlenyomat egyedülálló, és minden génben egyedi nukleotidszekvenciák vannak.

Minõségi PCR analízis

A kvalitatív analízis csak a vírus jelenlétét mutatja a vérben. Ezt a vizsgálatot minden olyan betegnél el kell végezni, akikről kimutatták, hogy vérükben a hepatitis C elleni antitestek eredményei csak két érték közül választhatnak: "észleltek" vagy "nem észleltek". Egészséges ember esetében a normát (referenciaérték) "nem szabad észlelni".

Az elvégzett kvalitatív kutatás ilyen eredményeinek speciális értelmezése is van:

  • Az eredmény "felfedezett". Ez azt jelenti, hogy a mintában a biológiai anyagot hozott találtak egy olyan RNS-fragmens, amely specifikus a hepatitis C-vírus Következésképpen, ott van a tény, a beteg hepatitis B vírus fertőzés C. Ha az eredmény a kvalitatív PCR „felfedezte”, ez azt jelzi, hogy a vírus ismétlésben és ebben az időben új májsejteket fertőz meg a szervezetben.
  • Az eredmény "nem észlelhető". Az ilyen döntés azt jelzi, hogy a mintában a biológiai anyag kapott RNS-fragmentum nem mutatható ki a laboratóriumban, amely specifikus vagy HCV RNS azonos koncentrációban a patogén fertőzés a mintában határ alatt volt az a teszt érzékenységét.

A hepatitis C vírus RNS akut fázisában a PCR technikát alkalmazó kvalitatív vizsgálatok 1-2 hét után azonnal felfedezhetik a szervezet fertőzését, vagyis röviddel a hepatitis elleni antitestek megjelenését megelőzően.

Az ilyen vizsgálatok analízisének megbízhatatlan eredményei a következőkkel érhetők el:

  • szennyezett biomassza;
  • heparin jelenléte a beteg vérében;
  • a mintában lévő vegyi vagy fehérjeanyagok (inhibitorok) jelenléte, amelyek befolyásolják a PCR különböző komponenseit.

A PCR minőségi analíziséhez nem szükséges a beteg speciális preparálása a vizsgálat elvégzéséhez. A vénás vért anyagként használják.

Az eredmények értékelése

A kvalitatív PCR-tesztek bizonyos fokú érzékenységgel rendelkeznek, és a laboratóriumi pontosságtól és a laboratóriumi felszerelés mértékétől függően 10 és 500 NE / ml között változhatnak.

Ez azt jelenti, hogy ha a vírus a vérmintában nagyon alacsony koncentrációban van jelen (kevesebb, mint az adott laboratórium érzékenységi küszöbe), akkor a beteg páciensét "nem detektálják". Ennek következtében, ha minőségi PCR-elemzést végeznek alacsony vírusszinttel (vírus alacsony koncentrációja), például antivirális terápiában részesülő betegeknél, nagyon fontos tudni a diagnosztikai rendszer érzékenységi küszöbét.

Diagnosztikai rendszerek változatai

A virológiai válasz szabályozására ajánlott az antivirális kezelés legalább 50 NE / ml érzékenységi küszöbértékű diagnosztikai rendszerek alkalmazása. Ezek a kritériumok teljesülnek, például: Cobas Ampicolor VGS-teszt elemzők (50 IU / ml pontossággal), valamint RealBest HCV RNS (15 IU / ml érzékenységgel).

A WHO szerint ajánlásokat létrehozó végleges diagnózist a hepatitis C, meg kell kizárólag alapján hármas kimutatására RNS-vírus szérummintákon szenvedő beteg nincs más hepatitis marker faj.

A PCR-eljárások mellett TMA-vizsgálatot (transzkripciós amplifikációs módszert) is alkalmaznak HCV RNS kimutatására betegekben. A legjobb érzékenység küszöbérték (5-10 NE / ml), de hazánkban ez a tesztelési módszer még nem túl gyakori.

A vírusok észlelt módosításainak hatóköre

Ez a kvalitatív meghatározás a hepatitis C vírus RNS jelenlétében szérumban lehetővé teszi számos vírus genotípusának meghatározását. Jelenleg a tudomány több mint hat genotípust ismeri a vírusról, valamint a betegség mintegy 10 altípusairól.

Az 1, 2, 3 genotípusú vírusok gyakoriak országunkban. Laboratories képes észlelni a következő genotípusok: 1a, 1b, 2a, 2b és 2c és 3, 4, 5a és 6. függetlenül altípus. Minden vírusmódosítás esetében a detektálás sajátossága 100%.

PCR mennyiségi elemzése

Kvantitatív PCR-teszt segítségével megállapítják a vérminták hepatitis vírusának koncentrációját (vírus terhelés). Ez a viremia-teszt (a vírus koncentrációja) lehetővé teszi egy meghatározott genetikai anyag (a leginkább vírusos RNS) egységek számának meghatározását, amelyet egy bizonyos mennyiségben észlelnek. Ebben az esetben határozza meg a koncentrációját 1 ml-ben, ami megfelel 1 cu. cm.

Az analízis mennyiségi paramétereit számokban fejezzük ki, ezt a mérést nemzetközi egységegységként (IU) milliliterenként (ml), ME / ml-ként jelöljük. Néhány laboratóriumban a vírus mennyisége más egységekben is meghatározható: a példányok számát ml-enként, másolatként / ml-nek.

  • Időzítés A hepatitis C esetében a PCR ilyen kvantitatív analízise a terápia megkezdése előtt történik. Aztán az 1., 4., 12. és 24. hetet. A 12. héten végzett értékelés indikatív, lehetővé teszi a terápia hatékonyságának meghatározását.
  • Elemzés előkészítése. A PCR mennyiségi elemzéséhez nem szükséges a beteg speciális felkészítése a vizsgálathoz. A mintavétel előtt fél órával nem szabad dohányozni. Vénás vért használnak laboratóriumi anyagként.

Az eredmények értékelése

Különböző laboratóriumi vizsgálati rendszerek esetében ez a mutató különböző konverziós tényezőket mutat be IU / ml-ben. Átlagosan egy konverziós paramétert alkalmaznak, amelyben 4 kópia / ml = 1 NE / ml. Ez például, ha a laboratórium 2,4 * 10 6 kópia / ml PCR-analízist eredményez, akkor ezt a paramétert 4-gyel kell osztani, és 6 * 10 5 NE / ml-t kapunk.

A 800 000 NE / ml magas terhelési szint magasnak tekinthető, ami megközelítőleg 3 000 000 példány / ml index. Az alacsony viremia egyes szerzők szerint a kvantitatív PCR 400 000 NE / ml alatti paramétereinek felel meg.

A kvantitatív teszt eredményeként a végeredmény nem digitális érték formájában jeleníthető meg, hanem: "a mérési tartomány alatt" vagy "nem detektálható".

  • Értékelés: "a mérési tartomány alatt". Ez azt jelzi, hogy a mennyiségi vizsgálat nem tudta kimutatni a hepatitis C virális RNS-t, de maga a vírus igen kis koncentrációban jelen van a szervezetben. Ezt egy további kvalitatív vizsgálat is jelzi, amely igazolja a vírus jelenlétének tényét.
  • Értékelés: "nem észlelt". Ez az eredmény azt jelzi, hogy a mennyiségi vizsgálat nem észlelt vírust az RNS mintában.

A vírusterhelés paramétere elsősorban a betegség fertőzőképességének mértékét, a beteg fertőzőképességének mértékét határozza meg. Minél magasabb a páciens koncentrációja a vírusnak, annál nagyobb a valószínűsége annak, hogy más emberekre átruházzák. Például, amikor szexuális kapcsolatban áll egy beteg vagy egy függőleges út. Az ilyen mennyiségi mutató segít a páciens kezelésének hatékonyságának meghatározásában.

A PCC mennyiségi elemzésének elvégzése fontos az antivirális terápiához, értékeli sikerét és ütemezi a tanfolyam időtartamát. Tehát a test gyors reakciója a kezelés és alacsony mértékű viremia esetén a terápia időtartama csökkenthető.

A mennyiségi PCR paraméter lassú csökkenésével az antivirális terápiát ki kell terjeszteni vagy módosítani. Ha a vírusterhelés szintje alacsony, akkor ez a terápia kedvező tényezője, ha magas, akkor az alkalmazott kezelési módszer hatástalan, és a gyógyszereknek vagy azok használatának módszereit módosítani kell.

№ 321СВ, a vírus a hepatitis С, meghatározása RNS кач. (Kvalitatív HCV-RNS) szérumban

A HCV RNS szérumban történő meghatározása polimeráz láncreakcióval (PCR) valósidejű detektálással.

Kiválasztott fragmens - specifikus RNS rész kimutatható HCV genotípusok: 1a, 1b, 2a, 2b, 2c, 2i, 3, 4, 5a, 6 függetlenül altípus. A meghatározás sajátossága 100%. A meghatározás érzékenysége 60 NE / ml.

  • A hepatitis klinikai tünetei.
  • Profilaktikus szűrővizsgálatok (hepatitis C vírus RNS - az akut fertőzés legkorábbi markerje).
  • Kapcsolattartók felmérése.
  • A hepatitis vegyes etiológiájának diagnosztizálása - a vezető vírus azonosítása.
  • A vírus krónikus állapotban történő aktív replikációjának stádiuma.
  • A terápia hatékonyságának ellenőrzése.
  • A máj cirrózisa.

A kutatás eredményeinek értelmezése a kezelőorvos számára információkat tartalmaz, és nem diagnózis. Az ebben a szakaszban található információk nem használhatók önellenőrzésre és öngyógyításra. Az orvos pontos diagnózist készít, mind a felmérés eredményeit, mind a más forrásokból származó szükséges információkat felhasználva: anamnézis, más felmérések eredményei stb.

Пцр рнк вгс kvalitatív

"A hepatitis C vírus (HVC) génjének kimutatása a páciens vérében a fertőző betegség laboratóriumi diagnosztikájának második szakasza. Az olyan ágens kimutatására, amely nem rendelkezik sejtmembránnal és ennek megfelelően felületi antigénekkel, a polimeráz láncreakciós eljárást alkalmazzuk. Ezzel a módszerrel közvetlenül a molekula, amelyben az összes genetikai információ kódolt - RNS.

RNS - Ribonukleinsav, valamint a DNS együttes része az összes élő szervezet sejtjeinek. A hepatitis C vírus RNS-molekulát tartalmaz és képes mutálni.

A HVC genom jelenlétére vonatkozó vizsgálatot rendszerint egy általános, biokémiai vérvizsgálat elvégzése után adják be, és pozitív antitestválasz (anti-HVC) áll rendelkezésre.

Mit jelent ez?

A HVC-ellenes antitestek vizsgálata a szűrés, vagyis az emberek nagy populációinak (orvosok, terhes nők, kórházi betegek, donorok, intravénás kábítószer-használók és HIV-fertőzött emberek) vizsgálatára alkalmazható. Az anti-HVC laboratóriumi analízisének negatív eredménye azt sugallja, hogy a víruson nem volt immunválasz a beteg vérében. Ilyen esetekben negatív eredményt lehet elérni:

Ha egy személy soha nem fertőzött hepatitis C-vel.

Ha a laboratóriumi vizsgálati rendszer érzékenysége kisebb, mint az anti-HVC koncentráció.

Ha a fertőzés kevesebb mint 2 hónappal ezelőtt történt, és a vérben található anti-HVC még mindig nem elég ahhoz, hogy meghatározza. Hamis negatív válasz esetén az emberi tényezőnek köszönhetően.

Ha az eredmény azt eredményezi, hogy megtalálható a HVC ellenanyaga a páciensben, akkor azt jelenti, hogy a hepatitisz C vírus a vizsgálat idején a beteg testében volt, vagy valamikor a vérben volt. Az anti-HVC pozitív eredményével további laboratóriumi vizsgálatokra van szükség, amelyek felismerik a kórokozó genetikai anyagát, meghatározzák génjeinek koncentrációját (vírusterhelés, viremia) és meghatározzák a genotípust.

A hepatitis C vírus RNS analízise

A laboratóriumban a HVC genom többféle vizsgálattal kimutatható:

elágazó DNS (p-DNS);

transzkripciós amplifikáció (TMA);

polimeráz láncreakció (PCR).

A p-DNS módszer egy olcsó és egyszerű módszer a vírus genom kimutatására számos megkérdezett embernél. Fő hátránya az alacsony érzékenység: a HVC-t csak 500 NE / ml feletti koncentrációban detektálja.

A transzkripciós amplifikációs eljárás felismeri a vírus nukleinsavat a vérszérumban. Az elemzésnek nagy érzékenysége van (5-10 NE / ml), de még nem került kielégítően a mindenütt jelen lévő laboratóriumi gyakorlatba.

Az oroszországi PCR módszer a leggyakoribb és megfizethető laboratóriumi vizsgálat nagy érzékenységgel (50-60 NE / ml).

A PCR-tesztet minden olyan klinikai laboratóriumban elvégzik, amely megfelelő akkreditációval rendelkezik. Az analízis eredményét befolyásoló diagnosztikai módszer nagyon fontos dolog a laboratóriumi vizsgálati rendszer érzékenysége. Például a 60 IU / ml diagnosztikai érzékenység, mint az Invitro laboratóriumok, lehetővé teszi a vírus RNS kimutatását a fertőzés után 3 hónappal. A tesztrendszer alacsony érzékenységével a kórokozó génjei még a fertőzés után 4 hónappal sem mutathatók ki.

A hepatitis C vírus RNS-je: PCR módszer

A PCR módszer számos előnnyel rendelkezik a HVC gének kimutatására szolgáló egyéb laboratóriumi vizsgálatokkal szemben:

nagy érzékenység. A módszer lehetővé teszi a kórokozó genetikai anyagának meghatározását még a minta minimális koncentrációjánál is;

nagyobb specifitás. Egy adott genotípus vírusának génjeit azonosítja számos más kórokozó DNS és RNS-e között, ami lehetővé teszi a kórokozó genotipizálását;

sebességet. A kórokozó hosszú termelési folyamatának hiánya csökkenti az eredmény elérésének időtartamát néhány óráig; az elemzés egyetemessége.

A vizsgálat univerzális eljárása lehetővé teszi egy emberi vérmintának egyidejű használatát a különböző kórokozók genetikai anyagának kimutatására. Ezek az előnyök lehetővé teszik, hogy a PCR-t a vírusos hepatitis C laboratóriumi diagnosztikájának "arany standardjaként" vegyék figyelembe, valamint anti-HVC enzim immunvizsgálattal.

A PCR olyan vizsgálat, amelyet a vizsgált személy vérében lévő HVC gének meghatározására használnak. A tanulmány több szakaszból áll:

A bioméret mintavétele.

A kiválasztott mintában megnöveljük az RNS másolatainak koncentrációját.

A genetikai anyagok kimutatása speciális tesztrendszerek segítségével.

Vénás vérvétel után a beteg mesterségesen megkezdi a HVC gének többszörös replikációjának folyamatát (amplifikáció, másolás).

Ebből a célból a kémcső belsejében lévő hőmérséklet a biométernél bizonyos mértékben változik. Ha a csőben található RNS másolatok száma eléri a kívánt értéket, akkor a kórokozót speciális vizsgálati diagnosztikai módszerekkel detektáljuk.

minőségi (észleli a vírus jelenlétét),

kvantitatív (meghatározza a vírusgének koncentrációját egységnyi térfogatban)

genotipikus (létrehozza a kórokozó genotípusát).

A hepatitis C RNS-je: minőségi analízis

A kvalitatív PCR feladata a bemutatott bioanyagok HVC jelenlétének meghatározása. Ezt a vizsgálatot általában a betegség diagnózisának vagy a hordozó azonosításának vizsgálatára végzik. Adja hozzá, miután az anti-HVC által ELISA-val észlelték.

A hepatitis C diagnosztizálására elegendő a HCV genetikai anyag minőségi felismerése, azaz koncentrációja a vérben. A minőségi PCR eredménye lehet: "RNS detektált" vagy "RNS nem detektálható".

A módszer pontossága 95% -os. Ugyanakkor a vizsgálati diagnosztikumok pontossága eléri a 100% -ot, és 5% az emberi tényező, amely mindig jelen van a laboratóriumi vizsgálatokban. A hamis negatív elemzés elkerülése érdekében, különösen az alacsony viremia esetében, a vizsgálatban alkalmazott diagnosztikai rendszer magas érzékenysége szükséges. A vizsgálati rendszer érzékenysége nem lehet kevesebb, mint 60 NE / ml.

Hepatitis C RNS: kvantitatív analízis

Kvantitatív elemzést írnak elő, amikor szükséges az emberi testben tapasztalható viremia szint ismerete. A vizsgálat indikációi:

a minőségi PCR pozitív eredménye, feltéve, hogy a vírus ellenanyagai kimutathatók;

a kórtörténet kialakítása;

a vírusterhelés meghatározása a májgyulladásban;

vírusölő gyógyszerek kombinációjának kiválasztása;

A folyamatos vírusellenes terápiára adott vírusválasz monitoringja;

az akut hepatitis C krónikus átmenetének valószínűségének értékelése.

Az analízis eredményét IU / ml (nemzetközi egység 1 ml szérumban) vagy másolatokban / ml-ben (a vírusgének másolatait 1 ml szérumban) fejezzük ki. A kvantitatív PCR-nek nincs normája: általában a humán vérben lévő HVC gént nem szabad kimutatni. A felmérés eredményeit összehasonlítjuk a vírusterhelés adott referenciaértékével.

Tehát a mutatók (IU / ml):

a 4 × 10 * 5 alatt alacsony viremia;

4 × 10 * 5 - 8 × 10 * 5 - közepes;

több mint 8 × 10 * 5 - magas.

A vírus RNS több példánya a vérben, annál agresszívebb a betegség, és annál nagyobb a vírus másoknak való átvitelének kockázata. De a vírusterhelés szintje nem az egyetlen olyan mutató, amely befolyásolja a patológia lefolyásának súlyosságát és a beteg további prognózisát: a kórokozó genotípusa szintén fontos.

A helyes kezelés érdekében egy genotípus létrehozása szükséges. Azt is meghatározza a beteg egészségének és életének prognózisa. Például a genotípus 3 vírusa gyakran a máj fibrosishoz vagy cirrhosisához vezet, összehasonlítva a genotípust hordozó betegekkel.

Hepatitis C: analízis és értelmezés

RNS A hepatitis C diagnózisát nem lehet csak kvalitatív és / vagy kvantitatív PCR alapján elvégezni: a HVC meghatározása és a vírusterhelés szintje nem elegendő ahhoz, hogy megfelelő vírusellenes terápiát írjon elő. A potenciális betegeket átfogóan (klinikailag, laboratóriumi, instrumentálisan) kell vizsgálni annak érdekében, hogy objektív képet kapjunk a patológiáról. Pontosan kijelölni egy komplex vizsgálatokat megállapítani a diagnózis a hepatitis C, majd helyesen megfejteni az eredményeket csak orvos.


Kapcsolódó Cikkek Hepatitis