A hepatitis C vírus diagnózisa

Share Tweet Pin it

A hepatitis C vírus (HCV) egy RNS-tartalmú vírus a Flaviviridae családból. Ez a fertőzés képes reprodukálni a vérsejtekben (monociták, neutrofilek, B-limfociták és makrofágok), valamint magának a máj sejtjeinek - a hepatociták - károsodását. A magas szintű mutációs aktivitás miatt az ilyen típusú hepatitis képes elkerülni az emberi immunrendszer hatását.

Jelenleg 11 genotípus és egy ilyen vírus altípusai vannak, amelyek májkárosodásban különböznek, és befolyásolják a májgyulladás kezelésének időzítését. Az ilyen sokféle hepatitis C különböző vírusellenes terápiás módszereket igényel. Például az első és a negyedik genotípus hepatitisét 48 hétig kell kezelni, és a második és harmadik faj vírusainak kezelésére 24 hétig tarthat.

Miután a hepatitis C gyors tesztje pozitív eredményt hozott, PCR-analízist végeztünk a vírus RNS-jének vérmintákban történő azonosítására.

PCR diagnosztika

A polimeráz láncreakció (PCR) egy kísérleti módszer a vírusok kimutatására. A hepatitis C-re vonatkozó ilyen elemzés lehetővé teszi a DNS vagy az RNS vírus egyes fragmenseinek koncentrációjának jelentős emelkedését a benyújtott mintákban. Ez lehetővé teszi számukra a számok felismerését és számozását.

Ezt a hepatitis C-tesztet a következő eljárás szerint végezzük:

  1. Egy vérmintát (genetikai anyagot), amely képes a kívánt hepatitisz gént tartalmazni, be kell vezetni egy kémcsőbe. Helyére speciális anyagokat - primereket tartalmaznak, a rövid távú részek a kívánt génből, amelyek kémiai úton szintetizálódnak. Ebben a tartályban DNS vagy RNS polimeráz is hozzá van adva, képes nukleinsav láncokat létrehozni, amelyek teljesen azonosak az eredetivel. A kapott kompozícióhoz olyan szabad nukleotidokat állítunk elő, amelyek a DNS és az RNS speciális építőanyaga, amelyek közül az egyik kis radioaktív foszforrészecskéket tartalmaz.
  2. A kapott elegyet először 95 ° C-ra melegítjük, ami miatt normál állapotban átlapoltunk, ezért mindkét DNS-hélix gyengül.
  3. Az elemzés folytatásához a hatóanyag hűl, ezen a ponton a primerek kapcsolódnak a hepatitisz-vírus genoma kívánt régiójához, és nem engedik meg a DNS-t kettős hélix formájában. Amikor az elegy hűl, a polimeráz egyetlen nukleotidszálat keres. Ennek az enzimnek a rögzítése során a DNS-szalag mentén csúszik (mint egy köteg egy kötél), és kettős spirállal nem képes "dolgozni", ebből a célból a keveréket felmelegítik.
  4. Az elemzés meghosszabbítása érdekében újrahevítjük, ami ismét a nukleotidláncok elválasztásához vezet. A mintában lévő ilyen PCR-ciklusok végrehajtása során a hepatitisz gének száma a geometriai arányban nő, és a fennmaradó genetikai anyagokat csak lineáris rendszerességgel állítják elő.
  5. A vizsgálat befejezéséhez az oldatot megmaradt nukleotidrészecskékből tisztítják. Ezek elektroforézissel vannak elválasztva, a molekuláris DNS-láncok molekulasúly paraméterekkel való elválasztásával. A hepatitis PCR segítségével végzett ilyen vizsgálatok lehetővé teszik annak megállapítását, hogy a vírus kívánt génjei vannak-e a vizsgálati mintában, vagy sem.

Ennek a vizsgálatnak az előnye a PCR reakció nagyon nagy érzékenységi küszöbe. Az ilyen technika a diagnosztika elvégzéséhez ideális esetben csak egyetlen genomot igényel a vírus számára a teljes mintához.

Ezenkívül az ilyen PCR teljesen specifikus. Mindegyik génben egyedülálló nukleotidszekvenciát találunk, amely ujjlenyomatokhoz hasonlóan sehol sem megismételhető. Ehhez a hepatitis C analízishez a primereket olyan módon szintetizálják, hogy teljesen megfeleljenek a kívánt gének azon egyedi részének, amelyeknek nincs más szekvenciája.

Ez a technika lehetővé teszi a hepatitis c elemzését és meghatározását is, ami segít meghatározni a végleges diagnózist.

Egy ilyen laboratóriumi analízis lehetővé teszi, hogy a HCV RNS jelenlétét vagy hiányát, illetve vérmintákon kívüli egyéb típusokat ne csak a betegeknél szerezzen be. A radioaktív sugárzás paraméterének meghatározása mellett lehetőség nyílik arra is, hogy feltárják, mennyit talált a vizsgált mintában a kívánt genetikai anyag. Ez lehetővé teszi számunkra, hogy meghatározzuk az úgynevezett vírus terhelés paramétereit - a hepatitis RNS részecskék koncentrációját egy bizonyos térfogatban.

Minõségi PCR analízis

Ez az elemzés lehetővé teszi a hepatitis vírus vérmintákban való jelenlétének meghatározását. Minden embernek meg kell történnie, akiknél kimutatták, hogy ellenanyagok vannak a hepatitis ellen.

Egy ilyen vizsgálat eredményeképpen csak két érték lehet:

  • „Észlelt”. Az ilyen pozitív vizsgálati eredményeket a következőképpen értelmezik: a vizsgált mintában a hepatitis vírus RNS fragmenseit találták biológiai anyagból. Ebből következik, hogy a beteg vírussal fertőződött. Ez azt jelezheti, hogy a hepatitis okozója a szervezetben megszaporodik, és új sejteket fertőz meg, megsemmisítve a májat.
  • "Nem észlelt". Ez az eredmény azt jelzi, hogy a mintában, amelyet laboratóriumban elemzett, találtak töredékei RNS, amely specifikus a hepatitis C-vírus is van lehetőség, hogy az RNS koncentrációját a vírus-kórokozó a mintában olyan kicsi volt, hogy a teszt nem volt képes azonosítani. Ilyen esetekben azt mondják, hogy a koncentrációszint a vizsgálati érzékenységi küszöb alatt van.

Az ilyen vizsgálat lehet hamis-pozitív vagy hamis-negatív is, mivel a bioméret szennyezõdése vagy a vizsgálathoz szükséges kémiai összetevõkkel reagáló speciális anyagok mintáinak jelenléte következik be.

Hangsúlyozni kell, hogy a hepatitis C akut fázisaiban a PCR módszerrel végzett minőségi vizsgálat RNS-t csak 1-2 hét elteltével tudja észlelni a szervezet fertőzésének pillanatától számítva. Ez azt jelenti, hogy a betegség jóval a külső tünetek megjelenése előtt vagy a hepatitis elleni antitest megjelenése előtt azonosítható.

A vérvételt (a vénából) előnyösen üres gyomoron végezzük.

PCR mennyiségi elemzése

Az elemzés segítségével meghatározzuk a hepatitisz-vírus koncentrációjának szintjét a páciensben (vírus terhelés). Az ilyen vizsgálatot be kell nyújtani annak érdekében, hogy becsülhető legyen a vírus RNS-értéke egy bizonyos térfogatban.

A hepatitis c tesztek elemzésének vizsgálata a következő eredményekkel járhat:

  • Kvantitatív mutató (számokban)

A vírus koncentrációját (szám) számszerűen adjuk meg. Ehhez különféle egységeket használunk: vagy ME / ml (nemzetközi egység milliliterenként) vagy másolat / ml (a vírus RNS példányainak száma milliliterben). Átlagosan 1 NE / ml 4 kópia / ml-nek felel meg, mivel a különböző vizsgálati rendszerek eltérő konverziós faktorokkal rendelkeznek az ilyen egységek esetében.

Az alacsony virális terhelés ebben a vizsgálatban kevesebb, mint 400 000 NE / ml, és a magas 8000000 IU / ml.

Ez a mennyiségi értékelés lehetővé teszi a betegség fertőzőképességének ("fertőzőképességének") meghatározását. Minél inkább ez az analízis mutatója, annál nagyobb a kórokozó más emberekkel való átadása (szexuális érintkezéssel vagy függőleges úton).

Ez az ítélet azt jelenti, hogy a mennyiségi módszer nem képes kimutatni a hepatitis RNS-t, de maga a vírus jelen van a szervezetben, csak nagyon alacsony koncentrációban. Ezt megerősítették a PCR további minőségi analízisével, pozitív eredménye pedig a hepatitis jelenlétére utal.

  • Eredmény "Nem észlelt"

    Az elemzés pozitív értelmezése szerint a vérminta mennyiségi vizsgálata nem tudott kimutatni a hepatitis C vírus specifikus RNS részecskéit.

  • Kvantitatív PCR-analízis végzett különböző szakaszaiban az antivirális terápia (1., 4., 12. és 24. hét) jelzi a kezelés hatékonyságát, és hogy a szükséges korrekciókat.

    Az elemzés sajátosságai

    Ezt a vizsgálatot be kell nyújtani a hepatitis C különböző genotípusainak meghatározására. Jelenleg 11 kórokozó genotípusa ismert és számos altípus. Hazánkban az 1., 2. és 3. fajok hepatitis C genotípusai gyakoriak. A laboratóriumokban képes észlelni a különböző altípusok ezen fajok: 1a, 1b, 2a, 2b, vagy 3, 4, 5, 6-genotípusok meghatározására különböző módosításokat altípusok. Mindezen hepatitis esetében a detektálás sajátossága 100%.

    A genotípus módosításának tisztázása lehetővé teszi a megfelelő kezelés kiválasztását. Egy adott típusú genotípus jelenléte a betegben nem jelenti azt, hogy a betegség könnyebbé vagy nehezebbé válik, csak a hepatitis vírus fajtái, és nem többé.

    Azokban az esetekben, amikor a laboratórium nem tudja izolálni a vírus genotípusát, eredményt adhat ki: "Nem írják be. Genotípusokat vizsgáltunk: ilyen és ilyen (például 1a, 2b, 3av). Ez az átirat azt jelzi, hogy ebben a laboratóriumban nem álltak rendelkezésre megfelelő reagensek, amelyek meghatározhatják a hepatitis vírus genotípusát. A vizsgálatban a listában szereplő vírusokat ellenőrizték, de az RNS-mintákkal való megfelelésüket nem észlelték.

    A végleges diagnózis érdekében csak egyfajta elemzés elégtelen. Mindegyik teszt hamis pozitív eredményt adhat. Komplex vizsgálatot végeznek a hepatitis pontos típusának és a fertőzésnek a test fertőzésével való meghatározására. Ugyanakkor a májbiopszia és az enzimek tesztelése készül: ALAT, ASAT, valamint alkalikus foszfatáz és LDH. A bilirubin teszt és protrombin index analízis is elvégezhető.

    Csak a tesztek és a laboratóriumi vizsgálatok egy komplexe, a beteg állapotának általános elemzése segít meghatározni a hepatitis jelenlétét a szervezetben, annak alakját és súlyosságát is. Alapján az orvos meghatározhatja a további kezelést és lehetséges prognózisát a beteg számára.

    A hepatitis C PCR minőségi elemzése

    A hepatitis egy súlyos betegség, amelynek számos oka van a kezdetnek. A fejlődés középpontjában a máj közvetlen vagy közvetett károsodása okoz. Tekintve annak fontosságát az egész szervezetre, csak azt lehet kitalálni, milyen rossz a patológia. Ebben a cikkben részletesebben tárgyaljuk a kurzus jellemzőit és a hepatitis C laboratóriumi diagnosztikáját.

    A betegség oka egy vírus, amely RNS-tartalmú kórokozókra utal. Megkülönböztető jellemzője - a mutáció képessége, vagyis szerkezetének megváltoztatása. Emiatt a fertőzés elszökik az immunrendszer támadását, és a legtöbb esetben krónikus gyulladást okoz a májban.

    Figyelembe véve a vírus különböző altípusainak létezését, a gyógyszerek kiválasztását a genotipizálás eredményeinek figyelembevételével kell elvégezni. Annak ellenére, hogy hosszú ideig tartó vizsgálatot folytattak a betegségről és a HCV felépítésének sajátosságairól, nem volt lehetséges a vakcina elleni vakcina kifejlesztése.

    A korai diagnózis nehézségei a májgyulladás tünetmentes lefolyásának következményei, melynek következtében egy személy a cirrhosis szakaszában orvoshoz fordul. A betegség időben történő kimutatásához rendszeres fizikai vizsgálatokra van szükség. Csak a vér laboratóriumi vizsgálata képes azonosítani a HCV-t és megelőzni mások fertőzését. Az a tény, hogy a fertőzés hordozója sokáig nem tudja a patológiát, és tovább továbbítja a vírust az egészséges embereknek.

    Átviteli útvonalak

    A vírus a legtöbb esetben a véren terjed, mivel a kórokozók legnagyobb koncentrációját tartalmazza. Így a fertőzést továbbítják:

    • hemodialízissel;
    • tűzéssel;
    • a harc során, amikor a bőr sérült, és hemokontakt fordul elő;
    • vérátömlesztéssel (vérátömlesztés).

    Az intim intimitás okozta fertőzés valószínűsége jelentéktelen, mivel a sperma és a hüvelyi elváltozás kis számú kórokozót tartalmaz. A fertőzés kockázata jelentősen megnő, ha a genitális nyálkahártya integritása veszélybe kerül. Ezt agresszív és anális szexekkel figyelik meg.

    Ami a fertőzés átvitelének vertikális módját illeti, az a munka során történik. A terhesség idejében a kórokozó nem tud átjutni a méhlepénybe az embrióba. Természetes rendellenességek esetén a patogén ágens a bõr traumájába kerül, amikor az anya vérével való érintkezést észlelik.

    Miután a kórokozó egészséges szervezetbe került, az ellenanyagok szintézise megkezdődik, amelyek védelmet nyújtanak a fertőzés ellen és az immunrendszerhez tartoznak. Ezek megtalálhatók az ELISA segítségével egy személy kezdeti vizsgálatakor.

    A diagnózis megerõsítéséhez a páciens polimeráz láncreakciót végez. Ez egy elemzés egy patogén ágens genetikai anyagának azonosítására és a vírusterhelés meghatározására.

    A hepatitis C laboratóriumi diagnózisa

    A laboratóriumi diagnosztika enzim immunvizsgálattal kezdődik. Fő feladata a kórokozóval szemben előállított antitestek kimutatása. Hatékonysága majdnem 95%. A preklinikai szakaszban végzett kutatásnak köszönhetően a vírus hordozó azonosítása lehetséges, és további vizsgálat céljából elküldi.

    Az ELISA minőségi analízise azt jelzi, hogy az immunglobulinok jelen vannak vagy hiányoznak a páciens vérében. Eredménye lehet "pozitív" vagy "negatív". Miután megkapta a válasz első változatát, a személy eljut a következő vizsgálathoz - PCR. Az ára függ a reagensek és a laboratóriumok minőségétől. A polimeráz láncreakció költsége elérheti a 4000 rubelt.

    A PCR jellemzői

    A polimeráz láncreakcióval még kis mennyiségű biológiai anyag lehetővé teszi a vírusterhelés becslését a vérben, azaz a kórokozók koncentrációját egy milliliter folyadékban.

    A PCR megjelenésével a hepatitis diagnózisa sokkal egyszerűbb volt. Az elemzés lehetővé teszi a HCV RNS azonosítását, a fertőző folyamat színvonalának és a vírus hordozó fertőzőképességének megállapítására.

    Számos genetikai diagnózis létezik:

    1. a hepatitis C-re vonatkozó PCR minőségi elemzése - megerősíti a HCV jelenlétét vagy hiányát a vizsgázó vérében:
    2. mennyiségi, amellyel lehetővé válik a vírusok koncentrációjának kiszámítása és a betegség színpadának megállapítása. Az eredményt IU / ml-ben vagy másolatokban / ml-ben adják (a laboratóriumból);
    3. genotipizálás szükséges a HCV genotípusának meghatározásához. Ehhez a kábítószerek pontos kiválasztásához van szükség, amelyek ebben az esetben a leghatékonyabbak. Az elemzés közvetetten jelzi a kóros folyamat súlyosságát a májban. Tehát a kórokozó harmadik genotípusával leggyakrabban megfigyelhető a steatosis, amelynek fejlődése a zsír felhalmozódása a hepatocytákban (sejtjeiben). Ezenkívül a vírus típusa befolyásolja a terápiás kezelés eredményét és időtartamát.

    A hepatitis C PCR minőségi elemzése

    A laboratórium első lépése a biológiai anyag HCV RNS jelenlétének tanulmányozása. Fontos megjegyezni, hogy a hepatitis C minőségi elemzésének bizonyos szintű érzékenysége van, ezért nem mindig adhatja meg a helyes választ. Ebben az esetben ajánlott ismételt laboratóriumi diagnózist végezni más reagensek alkalmazásával.

    A megbízható eredmények eléréséhez legalább 50 IU / ml érzékenységű vizsgálati rendszert kell használni.

    A diagnózis eredménye lehet "pozitív" vagy "negatív". Ha a patogén nem található a vérben, a vizsgálat véget ér. Amikor egy patogén ágenst detektálunk a mintában, akkor a vírus terhelés kvantitatív számát végezzük.

    A hamis negatív válasz akkor érhető el, amikor a technológiai folyamat megzavarodik, például olyan aktív összetevők, amelyek elnyomják a kórokozó másolatainak kialakítását a környezetbe. Így nem lehet megjeleníteni a vér igaz képet, amely miatt nem diagnosztizálják az emberi fertőzést.

    Hamis pozitív eredményt lehet elérni, ha a biológiai anyag gyűjtőcsöve, valamint a vizsgálat környezete szennyezett. Ezen túlmenően, egy ilyen elemzésre adott válasz lehetséges vegyes fertőzéssel, amikor a májat több vírus, például hepatitis C és D is befolyásolja.

    A minőségi kutatásra utaló jelek

    Az orvos kvalitatív vizsgálatot rendelhet a páciensnek a hepatitis C vírus RNS kimutatásához:

    • amikor az enzim immunoassay pozitív vagy megkérdőjelezhető választ kap;
    • a diagnózis ellenőrzéséhez;
    • a vírusterhelés meghatározása;
    • a betegség színpadának felállítása;
    • vegyes fertőzés diagnózisát. Gyakran előfordul, hogy a hepatitis C a májat a "D" vírussal egyidejűleg érinti;
    • a terápiás taktika meghatározása, figyelembe véve a kórokozó genotípusát;
    • a változások dinamikájának értékelése az antivirális gyógyszerek kezelésének hátterében.

    A polimeráz láncreakció előnyei közé tartoznak a következők:

    1. a technika magas érzékenysége, amely lehetővé teszi a fertőzés tényét a preklinikai szakaszban;
    2. a kórokozó genetikai anyagának azonosítása, nem pedig antitestek;
    3. a kórokozó-ágens altípusának létrehozása;
    4. a nagy sebességű diagnosztika, mivel nem szükséges anyagot táplálékközegre vírni, de elegendő egyedi vizsgálati rendszereket használni. Egy személy 5 óra elteltével kap eredményt;
    5. sokoldalúságát. Az elemzés lehetővé teszi bármely genetikai anyag (RNS, DNS) azonosítását. Ennek következtében az orvos megerősítheti a hepatitis C-t és más típusú betegségeket (B);
    6. a látens fertőzés észlelésének a lehetősége.

    Kvantitatív kutatás

    A polimeráz láncreakcióval végzett vérvizsgálat során kórokozók számát lehet kiszámolni egy fix mennyiségű biológiai anyagban. A mutató IU / ml. Az elemzésnek köszönhetően meg lehet állapítani a beteg fertőzőképességének mértékét, meghatározni a fertőző folyamat stádiumát, valamint értékelni a gyógyszerterápia hatékonyságát.

    A PCR alapján a szakértő eldönti, hogy mely gyógyszerek dózisa képes blokkolni a kórokozók terjedését. Ezenkívül meghatározzák az antivirális kezelés időtartamát és az életre vonatkozó prognózist. Fontos megjegyezni, hogy a vizsgálati rendszerek nagyon érzékenyek, ezért a módszer lehetővé teszi az emberi fertőzés megerősítését még a preklinikai szakaszban is.

    genotipizáláshoz

    Tekintettel arra, hogy a kórokozó képes mutálni, meghatározni a kezelés taktikáját és az antivirális gyógyszerek kiválasztását, genotípusa szükséges. Például a hepatitis HCV 1 kezelése 48 hétig tart, pozitív trendként csak az esetek 60% -ában figyelhető meg. A 2. és 3. genotípus kedvezőbb prognózissal rendelkezik. A vírusellenes szereket 8 hónapig írják fel, és hatékonyságuk elérheti a 85% -ot.

    Statisztikai adatok szerint a legtöbb esetben az 1., 2. és 3. HCV az Orosz Föderáció területén található.

    Egy laboratóriumi vizsgálat megfejtésekor ilyen válasz jelezhető: "nincs beírva". Ez azt jelenti, hogy egy vírus kering a beteg keringési rendszerében, amelyet a tesztrendszer nem ismeri fel. Az elemzés eredménye ebben az esetben azt jelzi, hogy az atipikus ember fertőzést okoz a kórokozó adott földrajzi területére.

    Hogyan lehet megbízható eredményeket elérni?

    A PCR-nek a hepatitis C kórokozójának RNS-ének kimutatására szolgáló kvalitatív vizsgálata megfelelő eredményeket mutatott, ezért meg kell felelnie a laboratóriumi diagnosztika előkészítésének követelményeinek:

    1. a vérmintavétel üres gyomorban történik, és az "éhes" rés nem lehet rövidebb 8 óránál;
    2. két nappal a vizsgálat előtt ajánlott az alkoholfogyasztás abbahagyása és az éles, zsíros és füstölt ételek elutasítása;
    3. töröljék el a véralvadásgátló gyógyszereket, például a heparint. Ha ezeket a gyógyszereket életciklus miatt írják fel, erről értesítenie kell az orvost. Ezenkívül a szakorvosnak ismernie kell olyan egyéb gyógyszerek befogadását, amelyek befolyásolhatják a laboratóriumi vizsgálat eredményét;
    4. A biológiai anyaggyűjtés előestéjén a fizioterápiás eljárásokat nem szabad elvégezni, és nehéz fizikai terhelésnek kell alávetni.

    Az elemzés eredményeit nem csak a vér adományozója, hanem egyéb tényezők is befolyásolhatják:

    • rossz vérgyűjtés;
    • a biológiai anyagok szállítására vonatkozó ajánlások be nem tartása;
    • a laboratóriumi dolgozók nem megfelelő képzése;
    • a kutatási technikák figyelmen kívül hagyása;
    • a véralvadás előtti antikoagulánsok (heparin) bevezetése. Ez a gyógyszercsoport csökkenti a koagulálhatóságot, ezáltal lelassítja a reagensek munkáját.

    A különböző laboratóriumokban a diagnosztikai válasz némileg eltérő lehet, de ezek a hibák nem befolyásolják a vizsgálat végeredményét.

    Különös figyelmet fordítanak a laboratóriumi vizsgálati rendszerek típusaira. Gyakran előnyös a nagy érzékenységű reagensek alkalmazása. Ez fontos az alacsony virális terhelésű betegeknél, mivel nehéz észlelni.

    Milyen gyakran végez laboratóriumi vizsgálatot?

    Elsősorban a polimeráz láncreakciót végezzük olyan személyeknél, akik immunválaszt követően ellenőrizték a hepatitis vírus ellenanyagait. Ebben az esetben kijelölték, hogy megerősítik egy személy fertőzésének tényét és megállapítja a betegség színpadát. Ezenkívül az elemzés lehetővé teszi a vírus altípusának meghatározását, ami különösen fontos a gyógyszerek kiválasztásához.

    A kötelező laboratóriumi vizsgálatok következő periódusa a vírusellenes terápia megkezdésétől számított 3 hónap. A diagnózis lehetőséget nyújt a gyógyszerek hatékonyságának értékelésére, az adag módosítására vagy cseréjére.

    Az alapvető analízisek mellett PCR is végezhető a kezelés kezdetétől számított 4 és 24 héten belül. A betegség pozitív prognózisát a vírusterhelés 3 hónapos terápiás kezelés utáni csökkenése igazolja. Így például 1 millió NE / ml-ről több százezerre kell csökkennie.

    Ha a patogén ágensek koncentrációja a vérben ugyanakkora szinten marad, vagy enyhén emelkedik, ez jelzi a vírusellenes szerek hatástalanságát és helyettesíti őket. A kezelés végén a PCR segítségével megerősíthetjük a beteg helyreállítását.

    A laboratóriumi diagnózis eredményeinek helyes értelmezéséhez egy hepatológus vagy fertőző betegség specialistával kell konzultálni. Mivel az ELISA-val kapcsolatos téves válaszok nagy gyakorisággal fordulnak elő, az elemzést kizárólag az elsődleges szűréshez használják. A beteg alaposabb vizsgálatához polimeráz láncreakciót alkalmaznak.

    Meg lehet gyógyítani a hepatitis C-t mellékhatások nélkül?

    Ma, a modern gyógyszerek és az új generációs sofosbuvir Daklatasvir a 97-100% valószínűséggel örökre fog gyógyítani hepatitis C. A legújabb gyógyszeres kapható orosz a hivatalos képviselője az indiai farmgiganta ZYDUS Heptiza. A megrendelt termékeket a futár a kézhezvételt követő 4 napon belül kézbesíti. Ingyenes konzultáció a modern drogok használatáról, valamint a vásárlás módjáról a Zydus beszállítójának hivatalos honlapján, Oroszországban.

    Mi a hepatitis C vírus RNS?

    A hepatitis C vírus RNS-vizsgálata a legfontosabb eljárás, amely lehetővé teszi a betegek kezelésének időtartamát és módszereit nagy pontossággal. A betegség diagnosztizálása több különböző vérvizsgálatból áll, mint például:

    • a hepatitis C markerek (anti-HCV);
    • hepatitis C vírus RNS kimutatására (HCV RNS).

    Az első vizsgálat a hepatitis első gyanúja. A második lehetőség a legfontosabb a HCV RNS kezelésében, ezért részletesebben megfontoljuk.

    Mi a vírusos hepatitis C?

    A vírusos hepatitis C vagy a HCV fertőző betegség, amely a májra hat. A vírussal fertőződik a vérben. Ha fertőzést szenved, vérátömlesztést végez, amikor az orvosi eszközök sterilizálására vonatkozó szabályokat nem tartják tiszteletben. Kevesebb olyan eset van, amikor a betegséget szexuális úton vagy terhes anyától a magzatig kapják. A hepatitis C 2 típusból áll.

    A krónikus hepatitis C a legveszélyesebb. Ez egy olyan betegségforma, amely egész életen át tarthat. Komoly problémákba ütközik a máj működésében, például cirrózisban vagy rákban. A fertőzött emberek 70-90% -ában a betegség krónikus állapotba kerül.

    A hepatitis C legfontosabb veszélye az, hogy titokban, icterikus jelek nélkül halad. Ebben az esetben leggyakrabban panaszkodnak láz, hányinger és hányás, fizikai gyengeség, fokozott fáradtság, étvágycsökkenés és súlycsökkenés. Ebben az esetben a májszövetek kis tömörödésének hátterében gyakran előfordul rosszindulatú degenerációja. Ezért a vírusos hepatitis C-t gyakran "időbombaként" vagy "gyengéd gyilkosnak" nevezik.

    A betegség másik különlegessége nagyon lassú fejlődés, amely több tucat évre becsülhető.

    Rendszerint a fertőzöttek nem éreznek semmilyen tüneteket, és nem gyanítják valódi állapotukat. Gyakran előfordul, hogy a betegség csak akkor azonosítható, ha másik orvosra utal.

    A kockázati csoport a következőket tartalmazza:

    • olyan gyermekek, akik az anyáknál hepatitis C vírust kaptak;
    • drogfüggők;
    • emberek, akik átszúrtak testrészeket vagy tetováltak nem steril eszközöket;
    • adományozó vért vagy szerveket (1992-ig, amikor hemodialízist nem végeztek);
    • a HIV fertőzöttek;
    • A fertőzött betegekkel érintkező orvosi dolgozók.

    A hepatitis C RNS meghatározása

    Meghatározása a hepatitis C vírus RNS-t, más néven a hepatitis C PCR, ez a tanulmány a biológiai anyagok (vér), amellyel azonosítani tudja a szervezetben az azonnali elérhetőségét genomateriala hepatitis B vírus (bármely adott vírus egy egyetlen részecske RNS).

    A fő vizsgálati módszer a PCR vagy a polimeráz láncreakció.

    A HCV RNS meghatározására kétféle vérvizsgálat létezik:

    Minőségi teszt

    A kvalitatív elemzés elvégzése lehetővé teszi annak megállapítását, hogy a vírus a vérben van-e. Minden olyan betegnek, aki C-hepatitis antitestet kapott, ezt a vizsgálatot meg kell vizsgálnia. Eredményeivel 2 válasz érhető el: "jelen van" vagy "hiányzik" a vírus. A pozitív vizsgálati eredmény (talált) alapján meg lehet ítélni egy olyan vírus aktív multiplikációját, amely az egészséges sejteket a májban fertőzi.

    A kiváló minõségû PCR-hez végzett tesztet specifikus érzékenységre hangolták, 10-500 NE / ml¹et. Ha a hepatitis vírus 10 μU / ml-nél kisebb koncentrációjú vérben található, akkor a vírus kimutatása lehetetlenné válik. A vírus specifikus tartalma nagyon alacsony értéket mutat azokon a betegeken, akiknél az antivirális terápiát írják elő. Ezért fontos, hogy az orvosi rendszer érzékenysége magas szintű legyen a polimeráz láncreakció minőségének megállapításához és meghatározásához.

    Gyakran előfordul, hogy a C-hepatitisz polimeráz láncreakcióját azonnal a megfelelő antitestek megtalálása után végezzük. A vírusellenes terápiás kezelést követő vizsgálatok a 4., 12. és 24. hetet tekintik meg. És egy másik elemzést a PVT befejezése után 24 hét után végzünk. Ezután - évente egyszer.

    Kvantitatív teszt

    A PCR RNS kvantitatív analízise, ​​amelyet néha vírus terhelésnek is neveznek, meghatározza a vírus koncentrációját (specifikus tartalma) a vérben. Más szóval, a vírusterhelés értetődik egy bizonyos mennyiségű virális RNS, amely jelen lehet egy adott mennyiségű vért (hozott kezelhető 1 ml 1 cm kocka). A vizsgálati eredmények egységei nemzetközi (standard) egységek, osztva egy milliliterrel (IU / ml). A vírus tartalma néha eltérőnek tűnik, attól függ, hogy a laboratórium melyik kutatást végzi. A hepatitis C esetében a mennyiségi meghatározás néha olyan értékeket használ, mint a másolatok / ml.

    Meg kell érteni, hogy nincs specifikus függőség a C-hepatitisz súlyosságától a törzs koncentrációjában a vérben.

    A "vírus terhelés" ellenőrzése lehetővé teszi a betegség fertőzőképességének meghatározását. Tehát a vírus egy másik vírusának megterhelésének kockázata nő a hepatitisz koncentrációjának növekedésében a vérben. Ezenkívül a vírus magas tartalma csökkenti a kezelés hatását. Ezért a kis vírusterhelés nagyon kedvező tényező a sikeres kezeléshez.

    Ezenkívül a hepatitis C teszt és a PCR általi meghatározása nagy szerepet játszik a betegség elleni kezelésben és a kezelés sikerességének meghatározásában. A vizsgálati eredmények alapján tervezik a rehabilitációs tanfolyamot. Például a hepatitis vírus specifikus koncentrációjának lassú csökkenése esetén az antivirális terápia meghosszabbodik, és fordítva.

    A modern orvostudományban úgy vélik, hogy a terhelés több mint 800000 ME / ml magas. A 10000000 ME / ml feletti terhelés kritikusnak tekintendő. De a különböző országok szakértői és a mai napig nem ugyanazon a véleményen voltak a vírusterhelés korlátai.

    A mennyiségi teszt gyakorisága

    Általában a hepatitis mennyiségi elemzését az antivirális terápia előtt és a kezelés befejezése után 3 hónappal a terápia minőségének meghatározása végett végezzük.

    Ennek eredményeképpen a mennyiségi vizsgálatot a fent leírt minta eredményeinek mennyiségi értékelésének kell tekinteni. Ennek következtében a "mért tartomány alatt" vagy "a vérben nem észlelhető" megállapítás fog megjelenni.

    A kvalitatív vizsgálat érzékenységi paramétere általában alacsonyabb, mint a kvantitatív elemzés érzékenysége. A "hiányzó" átirat jelzi, hogy mindkét fajta elemzés nem találta a vírus RNS-jét. A "mért tartomány alatti" vizsgálattal a kvantitatív elemzés valószínűleg nem találta meg a hepatitis RNS-t, bár ez igazolja egy nagyon kis specifikus vírus jelenlétét.

    Hepatitis C és genotípusai

    Genotipizálása hepatitis C vírus RNS diagnosztizálni jelenlétében különböző genetikai típusú hepatitis C Science tudja több mint 10 típusú vírus genom, de az orvosi gyakorlatban kellően megkülönböztetni több genotípus, amelyek a legnagyobb részesedése a régióban. Meghatározása genetikai típusa kulcsszerepet játszik kiválasztásában az időzítés a kezelés, ami szükséges, ha figyelembe vesszük, sokféle mellékhatása elleni gyógyszerek hepatitis.

    A vírusos hepatitis C kezelésének módszerei

    A hepatitisz vírus gyógyítására szolgáló egyetlen hatékony módszer 2 gyógyszer kombinációja: az interferon-alfa és a ribavirin. Különben ezek a gyógyszerek nem annyira hatékonyak. A gyógyszerek ajánlott dózisát és az alkalmazás időzítését csak az orvos írhatja elő, és minden egyes betegnél egyedileg. Ezeknek a gyógyszereknek a kezelése 6-12 hónapig tarthat.

    Ma nem találtak olyan gyógyszereket, amelyek garantálják a vírus 100% -os helyreállítását. A megfelelően kiválasztott kezeléssel azonban a betegek gyógyulása elérheti az esetek 90% -át.

    № 321СВ, a vírus a hepatitis С, meghatározása RNS кач. (Kvalitatív HCV-RNS) szérumban

    A HCV RNS szérumban történő meghatározása polimeráz láncreakcióval (PCR) valósidejű detektálással.

    Kiválasztott fragmens - specifikus RNS rész kimutatható HCV genotípusok: 1a, 1b, 2a, 2b, 2c, 2i, 3, 4, 5a, 6 függetlenül altípus. A meghatározás sajátossága 100%. A meghatározás érzékenysége 60 NE / ml.

    • A hepatitis klinikai tünetei.
    • Profilaktikus szűrővizsgálatok (hepatitis C vírus RNS - az akut fertőzés legkorábbi markerje).
    • Kapcsolattartók felmérése.
    • A hepatitis vegyes etiológiájának diagnosztizálása - a vezető vírus azonosítása.
    • A vírus krónikus állapotban történő aktív replikációjának stádiuma.
    • A terápia hatékonyságának ellenőrzése.
    • A máj cirrózisa.

    A kutatás eredményeinek értelmezése a kezelőorvos számára információkat tartalmaz, és nem diagnózis. Az ebben a szakaszban található információk nem használhatók önellenőrzésre és öngyógyításra. Az orvos pontos diagnózist készít, mind a felmérés eredményeit, mind a más forrásokból származó szükséges információkat felhasználva: anamnézis, más felmérések eredményei stb.

    HCV, RNS mennyiségileg [real-time PCR]

    Tanulmány azonosítani a kórokozó ágens a hepatitis C (HCV), amelyben a módszer a valós idejű polimeráz láncreakció (RT-PCR) határozzuk meg a jelenléte a genetikai anyag (RNS) vírus és annak térfogatát (a vírusterhelés) a vérmintában.

    A HCV RNS a koncentráció lineáris tartományának alsó határánál kisebb koncentrációban detektálható. A lineáris koncentrációtartomány olyan tartomány, amelyben a kórokozó példányainak számát pontosan kiszámíthatjuk. Ehhez az elemzéshez a detektálási erősítő által meghatározott HCV DNS-koncentrációk lineáris tartományát 7,5 × 10 2 - 1,0 × 10 8 kópia / ml minta.

    Orosz szinonimák

    Hepatitis C vírus (HCV), az RNS mennyiségi meghatározása.

    Szinonimák angol

    Hepatitis C vírus RNS, mennyiségi, valós idejű PCR, vér, HCV vírus terhelés, Hepatitis C vírus RNS Quant.

    A kutatás módszere

    Polimeráz láncreakció reverz transzkripcióval valós időben.

    Milyen bioméreteket lehet felhasználni a kutatáshoz?

    Hogyan kell megfelelően felkészülni a tanulmányra?

    Ne dohányozzon 30 percig, mielőtt vért ad.

    Általános információ a tanulmányról

    A hepatitis C vírus (HCV) az Flaviviridae családból származó RNS-tartalmú vírus, amely hatással van a májra. Ez képes szaporodni a vérsejtek (neutrofilek, monociták és makrofágok, B-limfociták) és indukálják krioglobulinémia, Sjögren-féle betegség, és a B-sejt limfoproliferatív betegség. A HCV a magas mutációs aktivitás miatt képes elkerülni az immunrendszer védőmechanizmusainak hatásait. A vírus 6 genotípusa és számos altípusa van, amelyek különböző értékeket mutatnak a betegség kialakulásának prognózisa és az antivirális terápia hatékonysága szempontjából.

    A fertőzés átvitelének fő módja a vér (vér és plazma elemek, donor szervek, nem steril fecskendők, tűk, tetováló eszközök, piercingek) transzfúziójára való készítmények. Valószínűleg fertőzés a szexuális együttélés és a gyermek az anyától a szülés alatt, de ez ritkán történik.

    Az akut vírusos hepatitiset általában tünetmentes tünetek jellemzik, és a legtöbb esetben nem diagnosztizálják. A fertőzöttek mindössze 15% -a akut betegségben van - émelygés, testhervadás, étvágytalanság és fogyás (ritkán kísérteties sárgaság). A 60-85% -a fertőzött alakul ki krónikus fertőzés, amely 15-szer magasabb, mint a frekvencia a krónikus hepatitis B Krónikus hepatitis C előfordul a megfigyelt máj enzimek és gyenge megnyilvánulása a tünetek. 20-30% -ánál a betegség vezet a májzsugorodás, növelve a májelégtelenség és a hepatocellularis carcinoma.

    A HCV RNS kimutatása a vírus proliferációját jelzi a testben, és a betegség diagnosztizálására szolgáló módszer. A genetikai anyag a vírus kimutatható PCR-rel 10-12 nappal a fertőzés után - ebben az időszakban, a specifikus antitestekkel, amelyek előállítása több hónappal a fertőzés után, és nem májfunkció belül referencia tartomány.

    PCR-rel a vírus RNS minőségi vagy mennyiségi mutatója. A minőségi módszer miatt megerősítették a hepatitis C vírus jelenlétét és aktív reprodukcióját. A vírusterhelés mennyiségi meghatározása a HCV genotípus figyelembevételével lehetővé teszi a jelenlegi terápia szabályozását és a betegség lefolyásának előrejelzését.

    A kezelés hatékonyságát az RNS mennyiségének becslése jelenti a kezelés előtt és alatt. A vér vírusterhelése általában a sikeres kezelés első három hónapjában többször csökken. Hatékony terápiával a viremia az első 4-12 hetes kezelés során két nagyságrenddel csökken, és a terápia befejezése után a vírus genetikai anyagát a vérben nem észlelik. A viremia csökkenésének hiánya a kezelés kezdetétől számított 12 héttel azt jelzi, hogy nem hatékony. Ajánlatos az elemzést a terápia megkezdése előtt elvégezni, a kezelés 4., 12. és 24. hetében, valamint a tanfolyam vége után 24 héttel. A terápia időtartama és a hepatitis C vírus RNS mennyiségi meghatározásának gyakorisága függ a vírus genotípusától és a májkárosodás mértékétől.

    Mi a felhasznált kutatás?

    • A "vírusos hepatitis C" diagnosztizálására.
    • A vírusos hepatitis C folyamatának előrejelzése.
    • A vírusellenes terápia nyomon követése és a további kezelési taktika kérdése.

    Mikor rendelik a tanulmányt?

    • A hepatitis C vírus RNS kimutatásával.
    • Akut és krónikus vírusos hepatitis C-ben.
    • Vegyes hepatitis.
    • A vírusellenes terápia megtervezésekor, alatt és után.

    Mit jelentenek az eredmények?

    • Nem találtuk - hepatitis C vírus RNS-t nem detektáltunk, vagy az érték a módszer érzékenységi határánál (200 kópia / ml = 400 NE / ml).
    • másolat / ml (IU / ml) - hepatitis C vírus RNS detektálódott. Alacsony viremia (a betegség lefolyásának legkedvezőbb prognózisa és a terápia hatékonysága).
    • > 2 * 10 ^ 6 kópia / ml (> 4 * 10 ^ 6 NE / ml) - A hepatitis C vírus RNS-je kimutatható. Magas viremia.
    • > 1,0 * 10 ^ 8 kópia / ml (> 2 * 10 ^ 8 IU / ml) - Hepatitis C vírus RNS-t detektáltunk a lineáris koncentrációtartomány feletti koncentrációkban.

    Lineáris tartomány HCV RNS koncentráció C határozzuk kimutatására thermocycler, 7,5 × 10 2 - 1,0 x 10 8 kópia / ml (1,5 x 10 ~ 3 - 2 db 10 8 NE / ml).

    Mi befolyásolja az eredményt?

    Nem megbízható eredmény érhető el a következőkkel:

    • bioméret szennyezése;
    • jelenléte az inhibitorok mintájában - a PCR különböző összetevőire ható kémiai és fehérjeanyagok;
    • jelenlétét a heparin vérében.

    Fontos megjegyzések

    • A vírusterhelés szintje nem jelzi a májkárosodás mértékét és a betegség súlyosságát. Az értékeléshez biokémiai mutatókat és biopsziás anyagokat kell vizsgálni.
    • A kezelés megtervezése során nagyon fontos meghatározni a hepatitis C vírus genotípusát.

    Ajánlott

    Ki jelölte ki a tanulmányt?

    irodalom

    • Vozianova Zh.I. Fertőző és parazita betegségek: 3 t-ben - K.: Health, 2000. - T.1.: 600-690.
    • Kishkun AA A klinikai gyakorlatban alkalmazott immunológiai és szerológiai vizsgálatok. - M.: MIA LLC, 2006. - 471-476. O.
    • Harrison a belgyógyászat alapelvei. 16. kiadás NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
    • Lerat H, Rumin S, Habersetzer F és mások. In vivo tropizmus a hepatitis C vírus genom szekvenciáiban hematopoetikus sejtekben: a vírusterhelés, a virális genotípus és a sejtfenotípus hatása. Blood. 1998. május 15., 91 (10): 3841-9. PID: 9573022.
    • Revie D, Salahuddin SZ. A hepatitis C vírus replikáció szempontjából fontos emberi sejtek in vivo és in vitro: régi állítások és aktuális bizonyítékok. Virol J. 2011, 11. július; 8: 346. doi: 10.1186 / 1743-422X-8-346. PMID: 21745397.

    A hepatitis C PCR kvalitatív és kvantitatív elemzése: negatív, pozitív, dekódolás

    A hepatitis C a máj vírusos megbetegedése, amelyet a flavonavírus HCV (angol hepatitisz C vírus) okoz, amely ribonukleinsav (RNS) molekulát tartalmaz. Az RNS hordozza a vírus genetikai kódját. Jelenléte lehetővé teszi a hepatitisz C-re vonatkozó PCR-analízist.

    Az emberre nézve a HCV veszélye az, hogy az úgynevezett szerológiai ablak (a fertőzés és az immunrendszer reakciója megjelenése közötti időintervallum) nagyon hosszú lehet - több héttől hat hónapig.

    Ez nem tárja fel a fertőzést és időben elkezdi a kezelést.

    A gazdaszervezet sajátosságaitól függően a HCV akut formában jelenhet meg, és krónikus betegségként is kialakulhat, amely hosszú távú és drága kezelést igényel. A HCV elleni antitestek kimutatásakor számos laboratóriumi vizsgálatot végeznek, beleértve a hepatitisz C-re vonatkozó PCR-t is. Ez a vizsgálat minden olyan személy esetében történik, amelynek vérében a HCV ellenanyagok találhatók.

    Mi a PCR elemzés?

    PCR hepatitis C laboratóriumi elemzése - biológiai anyag vizsgálata a flavavirus jelenlétének azonosítására.

    A polimeráz láncreakció (a rövidítéssel megfejtve) a szervezet vírusos károsodásának mennyiségi értékét, minőségi jellemzőit és az RNS-t tartalmazó vírus genotípusait mutatja.

    Alapul véve, valamint további elemzések alapján meghatározták a terápia módját és időtartamát, valamint a járványtani tényezőt (a másik fuvarozó számára történő átvitel kockázata).

    Mi az RNS analízis a hepatitis C-re?

    A hepatitis C PCR-t RNS-analízisnek is nevezik (HCV RNS), mert nem ismert. A Flavavirus 30-60 nm virion méretű RNS részecskét tartalmaz. Ennek a mikroorganizmusnak az egyik jellemzője a mutációk nagy hajlama.

    A vírus minden alfajának (genotípusai) eltérő rezisztenciát mutatnak, ami különböző kezelési módszereket és a beteg további prognózisának jellegét okozza.

    Biológiai anyag (vénás vér) foglalkozik éhomi és általában tesztelték Real-Time PCR (nagyon érzékeny valós idejű diagnosztika, hogy meghatározzuk az alsó határ a 15 NE / ml-automatizált zárt rendszer módban).

    Vannak más vizsgálatok is, például COBAS AMPLICOR, amelynek érzékenysége 50-100 NE / ml. Bármely laboratóriumi vizsgálat esetében az érzékenységi küszöb fontos, azaz a reagens képes a vírus minimális koncentrációjának kimutatására a biológiai anyagban.

    A hepatitis C analízis típusai a PCR módszer alkalmazásával

    A hepatitis C PCR-je három fontos elemet tartalmaz:

    • minőségi elemzés;
    • kvantitatív elemzés;
    • genotipizáláshoz.

    Ezek a vizsgálatok meghatározhatják a viremia jellegét, valamint a kórokozó genetikai jeleit. A diagnosztikai rendszer érzékenységétől függően a tesztet egyszer elvégzik, és néha egy második vizsgálatot végeznek érzékenyebb reagenssel az eredmények megerősítésére vagy finomítására.

    Kiváló minőségű hepatitis C PCR

    A hepatitis C-re vonatkozó PCR-analízis a polimeráz-láncreakciós vizsgálat másik gyakori elnevezése. A vizsgálat standard érzékenysége, amely lehetővé teszi a vírusos elváltozás kimutatását, a 10-500 NE / ml tartományban van.

    A hepatitis C-re vonatkozó PCR negatív elemzése azt mutatja, hogy a vírus koncentrációja a beteg vérében a diagnosztikai rendszer érzékenységének küszöbértékénél alacsonyabb.

    Ha a minőségi PCR "nem észlelt" választ adott, akkor a későbbi kezeléshez fontos tudni a reagens érzékenységi küszöbértékét.

    A proteinfrakciók a flavavirushoz sokkal később jelentkeznek.

    Quantitative Hepatitis C PCR

    A PCR hepatitis C mennyiségi mutatója a vírusterhelés, amely tükrözi a flavavirus RNS koncentrációjának szintjét a szervezetben. Ez egy mutató, amely megmutatja, hogy hány darab vírus RNS-t tartalmaz egy köbcentiméter vér. A hepatitis C PCR RNS eredményeit egy hagyományos rendszerben nemzetközi egységben (IU / ml) nevezik ki, és különböző módokon rögzíthetők, például 1,7 millió vagy 1,7 millió NE / ml.

    A hepatitis C mennyiségi PCR-diagnózisát a vírusellenes terápia megkezdése előtt, a kezelés 12. hetében pedig a HCV elleni küzdelem kiválasztott módszerének eredményeinek értékelésére adják. A vírus terhelés lehetővé teszi a betegség három fontos mutatójának azonosítását:

    • fertőzőképesség, azaz a vírus egyik hordozótól a másikig terjedő kockázatának mértéke (minél nagyobb a flavavirus RNS koncentrációja, annál nagyobb a valószínűsége egy másik személy fertőzésére, például szexuális érintkezés esetén);
    • a kezelés módszere és hatékonysága;
    • időtartamát és prognózisát (minél nagyobb a vírusterhelés, annál hosszabb a kezelés).

    A hepatitis C mennyiségi PCR-diagnózisa a laboratóriumi vizsgálat típusától és az érzékenység küszöbétől függ. A norma alsó határa rendszerint 600 000 NE / ml, az átlagérték 600.000-700.000 NE / ml. A 800 000 NE / ml és annál magasabb értékeket magas szintű RNS-tartalmú vírusnak tekintik.

    genotipizáláshoz

    Tekintettel a HCV magas mutációs aktivitására, fontos, hogy a vizsgálati stádiumban meghatározzuk, hogy a vírus genotípusa a beteg vérében van-e. Összesen 11 hepatitis C vírus genotípust jegyeztek fel a bolygón, amely számos alfajot tartalmaz. Az Orosz Föderáció területén 1,2-es és 3-as gyakoriak.

    A hepatitis C PCR RNS-je a genotipizálással együtt nagyon fontos eleme az elemzésnek, mert lehetővé teszi az orvos számára a vírus rezisztenciájának (rezisztencia) meghatározását, megfelelő gyógyszerek kiválasztását és a kezelés lefolyását.

    A genotipizálás lehetővé teszi a máj állapotának közvetett meghatározását is. Például a HCV 3 genotípusát gyakran steatosis kísérli, amelyben a zsír felhalmozódik a test sejtjeibe.

    A PCR-nek a hepatitis C-ben végzett vérvizsgálatának olyan számot kell adnia, amely meghatározza a genotípust. A laboratóriumi válaszokban írható "nem gépelt" - ez azt jelenti, hogy az emberi vérben olyan vírus van, amelyet a tesztrendszer nem határoz meg. Ez azt jelezheti, hogy a genotípus egy adott földrajzi területen nem jellemző. Ebben az esetben szükség van az elemzés újbóli átadására a diagnosztikai rendszer nagyobb érzékenységével.

    PCR analízis dekódolása hepatitis C-re

    A hepatitis C PCR vizsgálatát a fenti adatok alapján számszerűsíthetjük. A laboratóriumi vizsgálatok eredményeinek átvételekor általában a következő adatokat írják fel:

    • "Found" / "not found" (magas minõségû PCR a hepatitis C esetében);
    • az RNS-t tartalmazó frakciók mennyisége, például 831.680 IU / ml (kvantitatív PCR-vizsgálat);
    • az a szám, amely meghatározza a HCV genotípust, például - 1, 2, 3, 4;
    • a teszt neve leginkább Real-time.

    A legfontosabb a hepatitis C PCR-elemzésének megfejtéséhez a második tétel, amely a vírusterhelést mutatja a prognózis, a módszer és a kezelés időtartamának meghatározása céljából.

    Ha a hepatitis C-re vonatkozó PCR-analízis negatív, és ELISA pozitív - mit jelent ez?

    A laboratóriumi tesztek megfejtéséhez fontos, hogy kapcsolatba lépjen egy hepatológussal vagy fertőző betegséggel foglalkozó szakemberrel, aki megmagyarázza a kapott információkat a diagnosztikai rendszer típusának és az érzékenység küszöbének megfelelően. Az orvosi gyakorlatban sok vérvizsgálati adat van, amelyek az orvosi nevelés nélküli embert zavartsággá teszik.

    Például, ha a vizsgálati HCV PCR negatív és pozitív ELISA, azt jelezheti, hogy ebben az időben a beteg vérében nem HCV, de mielőtt szenvedett akut formában a hepatitis C Úgy ​​tekinthető, hogy a pozitív-linked immunosorbent assay (ELISA) azt mutatja, hogy a vérben vannak olyan antitestek, amelyeket a múltban a vírus inváziója után állítottak elő. De a modern orvosi gyakorlatban ELISA elemzés nem eléggé megbízható, és gyakran ad szokatlan eredményeket, így az orvosok használni, mint egy elsődleges szűrés. A betegség diagnosztizálásakor a szakemberek pontosan PCR-tesztek segítségével irányulnak.

    Hasznos videó

    A következő videóban nagyon részletes és érdekes megmondani, hogy mi a lényege a PCR módszernek, hogyan történik az elemzés:

    következtetés

    A vénás vér általában a hepatitis C PCR analízisére vonatkozik. Leggyakrabban kettős mintavétel egy biológiai anyagból - ELISA-hoz, és közvetlenül egy PCR-teszthez. A helyes teszteredményekhez a biológiai anyag laboratóriumi mintavételének legfontosabb szabályainak betartása szükséges:

    • a vér az analízishez reggel egy üres gyomorban van;
    • az evés és a vérvétel között legalább 8 óra legyen;
    • A vizsgálat megkezdése előtt kizárnia kell az alkoholt és a sült ételeket is;
    • A vért megelőző napon a fizikai erőfeszítést elkerülni kell.

    A vérvizsgálat eredményei általában másnap készen állnak.

    Rnc hcv minőségi szempontból

    "A hepatitis C vírus (HVC) génjének kimutatása a páciens vérében a fertőző betegség laboratóriumi diagnosztikájának második szakasza. Az olyan ágens kimutatására, amely nem rendelkezik sejtmembránnal és ennek megfelelően felületi antigénekkel, a polimeráz láncreakciós eljárást alkalmazzuk. Ezzel a módszerrel közvetlenül a molekula, amelyben az összes genetikai információ kódolt - RNS.

    RNS - Ribonukleinsav, valamint a DNS együttes része az összes élő szervezet sejtjeinek. A hepatitis C vírus RNS-molekulát tartalmaz és képes mutálni.

    A HVC genom jelenlétére vonatkozó vizsgálatot rendszerint egy általános, biokémiai vérvizsgálat elvégzése után adják be, és pozitív antitestválasz (anti-HVC) áll rendelkezésre.

    Mit jelent ez?

    A HVC-ellenes antitestek vizsgálata a szűrés, vagyis az emberek nagy populációinak (orvosok, terhes nők, kórházi betegek, donorok, intravénás kábítószer-használók és HIV-fertőzött emberek) vizsgálatára alkalmazható. Az anti-HVC laboratóriumi analízisének negatív eredménye azt sugallja, hogy a víruson nem volt immunválasz a beteg vérében. Ilyen esetekben negatív eredményt lehet elérni:

    Ha egy személy soha nem fertőzött hepatitis C-vel.

    Ha a laboratóriumi vizsgálati rendszer érzékenysége kisebb, mint az anti-HVC koncentráció.

    Ha a fertőzés kevesebb mint 2 hónappal ezelőtt történt, és a vérben található anti-HVC még mindig nem elég ahhoz, hogy meghatározza. Hamis negatív válasz esetén az emberi tényezőnek köszönhetően.

    Ha az eredmény azt eredményezi, hogy megtalálható a HVC ellenanyaga a páciensben, akkor azt jelenti, hogy a hepatitisz C vírus a vizsgálat idején a beteg testében volt, vagy valamikor a vérben volt. Az anti-HVC pozitív eredményével további laboratóriumi vizsgálatokra van szükség, amelyek felismerik a kórokozó genetikai anyagát, meghatározzák génjeinek koncentrációját (vírusterhelés, viremia) és meghatározzák a genotípust.

    A hepatitis C vírus RNS analízise

    A laboratóriumban a HVC genom többféle vizsgálattal kimutatható:

    elágazó DNS (p-DNS);

    transzkripciós amplifikáció (TMA);

    polimeráz láncreakció (PCR).

    A p-DNS módszer egy olcsó és egyszerű módszer a vírus genom kimutatására számos megkérdezett embernél. Fő hátránya az alacsony érzékenység: a HVC-t csak 500 NE / ml feletti koncentrációban detektálja.

    A transzkripciós amplifikációs eljárás felismeri a vírus nukleinsavat a vérszérumban. Az elemzésnek nagy érzékenysége van (5-10 NE / ml), de még nem került kielégítően a mindenütt jelen lévő laboratóriumi gyakorlatba.

    Az oroszországi PCR módszer a leggyakoribb és megfizethető laboratóriumi vizsgálat nagy érzékenységgel (50-60 NE / ml).

    A PCR-tesztet minden olyan klinikai laboratóriumban elvégzik, amely megfelelő akkreditációval rendelkezik. Az analízis eredményét befolyásoló diagnosztikai módszer nagyon fontos dolog a laboratóriumi vizsgálati rendszer érzékenysége. Például a 60 IU / ml diagnosztikai érzékenység, mint az Invitro laboratóriumok, lehetővé teszi a vírus RNS kimutatását a fertőzés után 3 hónappal. A tesztrendszer alacsony érzékenységével a kórokozó génjei még a fertőzés után 4 hónappal sem mutathatók ki.

    A hepatitis C vírus RNS-je: PCR módszer

    A PCR módszer számos előnnyel rendelkezik a HVC gének kimutatására szolgáló egyéb laboratóriumi vizsgálatokkal szemben:

    nagy érzékenység. A módszer lehetővé teszi a kórokozó genetikai anyagának meghatározását még a minta minimális koncentrációjánál is;

    nagyobb specifitás. Egy adott genotípus vírusának génjeit azonosítja számos más kórokozó DNS és RNS-e között, ami lehetővé teszi a kórokozó genotipizálását;

    sebességet. A kórokozó hosszú termelési folyamatának hiánya csökkenti az eredmény elérésének időtartamát néhány óráig; az elemzés egyetemessége.

    A vizsgálat univerzális eljárása lehetővé teszi egy emberi vérmintának egyidejű használatát a különböző kórokozók genetikai anyagának kimutatására. Ezek az előnyök lehetővé teszik, hogy a PCR-t a vírusos hepatitis C laboratóriumi diagnosztikájának "arany standardjaként" vegyék figyelembe, valamint anti-HVC enzim immunvizsgálattal.

    A PCR olyan vizsgálat, amelyet a vizsgált személy vérében lévő HVC gének meghatározására használnak. A tanulmány több szakaszból áll:

    A bioméret mintavétele.

    A kiválasztott mintában megnöveljük az RNS másolatainak koncentrációját.

    A genetikai anyagok kimutatása speciális tesztrendszerek segítségével.

    Vénás vérvétel után a beteg mesterségesen megkezdi a HVC gének többszörös replikációjának folyamatát (amplifikáció, másolás).

    Ebből a célból a kémcső belsejében lévő hőmérséklet a biométernél bizonyos mértékben változik. Ha a csőben található RNS másolatok száma eléri a kívánt értéket, akkor a kórokozót speciális vizsgálati diagnosztikai módszerekkel detektáljuk.

    minőségi (észleli a vírus jelenlétét),

    kvantitatív (meghatározza a vírusgének koncentrációját egységnyi térfogatban)

    genotipikus (létrehozza a kórokozó genotípusát).

    A hepatitis C RNS-je: minőségi analízis

    A kvalitatív PCR feladata a bemutatott bioanyagok HVC jelenlétének meghatározása. Ezt a vizsgálatot általában a betegség diagnózisának vagy a hordozó azonosításának vizsgálatára végzik. Adja hozzá, miután az anti-HVC által ELISA-val észlelték.

    A hepatitis C diagnosztizálására elegendő a HCV genetikai anyag minőségi felismerése, azaz koncentrációja a vérben. A minőségi PCR eredménye lehet: "RNS detektált" vagy "RNS nem detektálható".

    A módszer pontossága 95% -os. Ugyanakkor a vizsgálati diagnosztikumok pontossága eléri a 100% -ot, és 5% az emberi tényező, amely mindig jelen van a laboratóriumi vizsgálatokban. A hamis negatív elemzés elkerülése érdekében, különösen az alacsony viremia esetében, a vizsgálatban alkalmazott diagnosztikai rendszer magas érzékenysége szükséges. A vizsgálati rendszer érzékenysége nem lehet kevesebb, mint 60 NE / ml.

    Hepatitis C RNS: kvantitatív analízis

    Kvantitatív elemzést írnak elő, amikor szükséges az emberi testben tapasztalható viremia szint ismerete. A vizsgálat indikációi:

    a minőségi PCR pozitív eredménye, feltéve, hogy a vírus ellenanyagai kimutathatók;

    a kórtörténet kialakítása;

    a vírusterhelés meghatározása a májgyulladásban;

    vírusölő gyógyszerek kombinációjának kiválasztása;

    A folyamatos vírusellenes terápiára adott vírusválasz monitoringja;

    az akut hepatitis C krónikus átmenetének valószínűségének értékelése.

    Az analízis eredményét IU / ml (nemzetközi egység 1 ml szérumban) vagy másolatokban / ml-ben (a vírusgének másolatait 1 ml szérumban) fejezzük ki. A kvantitatív PCR-nek nincs normája: általában a humán vérben lévő HVC gént nem szabad kimutatni. A felmérés eredményeit összehasonlítjuk a vírusterhelés adott referenciaértékével.

    Tehát a mutatók (IU / ml):

    a 4 × 10 * 5 alatt alacsony viremia;

    4 × 10 * 5 - 8 × 10 * 5 - közepes;

    több mint 8 × 10 * 5 - magas.

    A vírus RNS több példánya a vérben, annál agresszívebb a betegség, és annál nagyobb a vírus másoknak való átvitelének kockázata. De a vírusterhelés szintje nem az egyetlen olyan mutató, amely befolyásolja a patológia lefolyásának súlyosságát és a beteg további prognózisát: a kórokozó genotípusa szintén fontos.

    A helyes kezelés érdekében egy genotípus létrehozása szükséges. Azt is meghatározza a beteg egészségének és életének prognózisa. Például a genotípus 3 vírusa gyakran a máj fibrosishoz vagy cirrhosisához vezet, összehasonlítva a genotípust hordozó betegekkel.

    Hepatitis C: analízis és értelmezés

    RNS A hepatitis C diagnózisát nem lehet csak kvalitatív és / vagy kvantitatív PCR alapján elvégezni: a HVC meghatározása és a vírusterhelés szintje nem elegendő ahhoz, hogy megfelelő vírusellenes terápiát írjon elő. A potenciális betegeket átfogóan (klinikailag, laboratóriumi, instrumentálisan) kell vizsgálni annak érdekében, hogy objektív képet kapjunk a patológiáról. Pontosan kijelölni egy komplex vizsgálatokat megállapítani a diagnózis a hepatitis C, majd helyesen megfejteni az eredményeket csak orvos.


    Kapcsolódó Cikkek Hepatitis