PCR-vizsgálatok fajtái és szükségessége

Share Tweet Pin it

A hepatitis C vírus olyan vírus, amely RNS molekulát tartalmaz. Képes elkerülni a szervezet immunválaszát a magas mutációs képességek miatt. A vírus hat fő genotípusa és számos altípusa van. A régióban elsősorban az 1., 2. és 3. genotípusok gyakoriak.

A 75-80% a betegség krónikussá válik, ami a máj fibrózis - olyan állapot, amelyben a máj szöveteiben helyébe kötőszövet. A fibrosis viszont rákhoz vagy cirrhosishoz vezet. A betegség átvitelének fő módja a véren keresztül történik. Ha egy személynek van jelzése a hepatitis C-tesztre, akkor két alapvető vizsgálatot kell végezni. Határozza meg a vírus ellenanyagait, és távollétében úgy vélik, hogy nincs hepatitis. Ha a hepatitis vírus ellenes antitestek jelenlétét észlelik a vérben, a PCR-elemzést végezzük.

RNS Ezt a módszert a fertőzés után 10-12 nappal a vérben határozzuk meg, és azt jelzi, hogy a vírus aktívan szaporodik a szervezetben. Ebben az időszakban egyszerűen lehetetlen kimutatni a vírust más módon, mivel még nem termel specifikus antitesteket és a májkárosodások még mindig láthatatlanok a biokémiai analízisekben és biopsziákban.

A PCR módszerrel végzett kutatások fajtái

A polimeráz láncreakcióval végzett elemzésnek számos előnye van:

  1. Egy ilyen vizsgálattal maga a vírus határozza meg, nem pedig a létfontosságú tevékenységének termékeit. Ebben az esetben lehetséges meghatározni a kórokozó típusát.
  2. A technika nagyfokú specifikusságot mutat, mivel csak egy bizonyos DNS-területet vizsgálunk, a hibás eredmények elérésének valószínűsége csökken.
  3. Nagyon nagy érzékenységgel rendelkezik, még a vírus minimális mennyiségét is észleli a vérben.

A hepatitis C PCR-vel végzett vérvizsgálat két fő módszere: kvalitatív és kvantitatív PCR analízis. A vírus jelenlétének meghatározására kvalitatív módszert alkalmaznak. Mindazok számára, akik vércukorszint-ellenes antitesttel rendelkeztek, elemzés készül. Az eredmény csak kétféle lehet: "észlelt" és "nem észlelt", az utolsó érték a norma.

A pozitív vizsgálati eredmény azt jelenti, hogy a vírus RNS fragmensei megtalálhatók a mintában, ami viszont azt jelzi, hogy a beteg hepatitis fertőzött volt. Negatív eredmény esetén két lehetőség lehetséges: nincs fertőzés vagy koncentrációja olyan alacsony, hogy ezt a technikát nem észleli.

A mennyiségi módszer alapvetően különbözik a vizsgálatban a feladatai és a jelzések szerint. Nem minden hepatitisben szenvedő beteg van ilyen elemzésen. Ő, mint bárki másnak, konkrét célokkal rendelkezik. A vírus terhelésének vagy a PCR-nek a vírus RNS-ére vonatkozó mennyiségi elemzését alkalmazzák:

  • a vírus RNS-jének meghatározása a vérben és a "vírusos hepatitis" diagnosztizálása;
  • a krónikus májgyulladás és a betegség lefolyásának előrejelzése;
  • a vírusellenes kezelés nyomon követésére és annak eldöntésére, hogy meghosszabbítja-e, csökkenti vagy megváltoztatja-e a kezelés taktikáját.

A vizsgálatot akkor folytatják le, ha vannak ilyen jelzések:

  • a hepatitis C-t kvalitatív kutatások során észlelték, és a vérben megtalálhatók antitestek;
  • vegyes hepatitis;
  • ha vírusellenes terápiát terveznek;
  • a hepatitis C kezelés alatt és után;
  • krónikus és heveny hepatitis C jelenlétében.

A vizsgálatot a vírus egységek számának becslésére végzik egy adott térfogatban 1 cm3 vagy 1 ml vérmintán. Az eredményeket ábrákon adjuk meg. Az indexeket használjuk: IU / ml, ami azt jelenti, hogy a nemzetközi egység milliliterenként és ml / ml-enként, az 1 ml-es mintában lévő RNS-másolatok számát. Minél magasabb az elemzés mennyiségi mutatója, annál nagyobb a vírus más személyre való átvitelének valószínűsége.

A P-DNS egy elágazó DNS-eljárás. Egyszerűbb és olcsóbb módszer. Több minta esetében alacsony érzékenységgel rendelkezik, 500 NE / ml-től. Ilyen érzékenység esetén lehetséges, hogy nem érzékeli a vírust, még akkor sem, ha jelen van a vérben.

A TMA a transzkripciós amplifikáció módszere. Ez a technika nukleinsavakat tár fel a vérben. Alacsony költségű és ugyanakkor nagy érzékenységű, 5-10 NE / ml. Viszonylag új technika, amely lehetővé teszi a tesztelés költségeinek felgyorsítását és csökkentését.

A laboratórium által bemutatott, a vírus RNS meghatározásának kvantitatív elemzésének eredményeit a következőképpen értelmezik:

Mi a hepatitis C vírus RNS?

A hepatitis C vírus RNS-vizsgálata a legfontosabb eljárás, amely lehetővé teszi a betegek kezelésének időtartamát és módszereit nagy pontossággal. A betegség diagnosztizálása több különböző vérvizsgálatból áll, mint például:

  • a hepatitis C markerek (anti-HCV);
  • hepatitis C vírus RNS kimutatására (HCV RNS).

Az első vizsgálat a hepatitis első gyanúja. A második lehetőség a legfontosabb a HCV RNS kezelésében, ezért részletesebben megfontoljuk.

Mi a vírusos hepatitis C?

A vírusos hepatitis C vagy a HCV fertőző betegség, amely a májra hat. A vírussal fertőződik a vérben. Ha fertőzést szenved, vérátömlesztést végez, amikor az orvosi eszközök sterilizálására vonatkozó szabályokat nem tartják tiszteletben. Kevesebb olyan eset van, amikor a betegséget szexuális úton vagy terhes anyától a magzatig kapják. A hepatitis C 2 típusból áll.

A krónikus hepatitis C a legveszélyesebb. Ez egy olyan betegségforma, amely egész életen át tarthat. Komoly problémákba ütközik a máj működésében, például cirrózisban vagy rákban. A fertőzött emberek 70-90% -ában a betegség krónikus állapotba kerül.

A hepatitis C legfontosabb veszélye az, hogy titokban, icterikus jelek nélkül halad. Ebben az esetben leggyakrabban panaszkodnak láz, hányinger és hányás, fizikai gyengeség, fokozott fáradtság, étvágycsökkenés és súlycsökkenés. Ebben az esetben a májszövetek kis tömörödésének hátterében gyakran előfordul rosszindulatú degenerációja. Ezért a vírusos hepatitis C-t gyakran "időbombaként" vagy "gyengéd gyilkosnak" nevezik.

A betegség másik különlegessége nagyon lassú fejlődés, amely több tucat évre becsülhető.

Rendszerint a fertőzöttek nem éreznek semmilyen tüneteket, és nem gyanítják valódi állapotukat. Gyakran előfordul, hogy a betegség csak akkor azonosítható, ha másik orvosra utal.

A kockázati csoport a következőket tartalmazza:

  • olyan gyermekek, akik az anyáknál hepatitis C vírust kaptak;
  • drogfüggők;
  • emberek, akik átszúrtak testrészeket vagy tetováltak nem steril eszközöket;
  • adományozó vért vagy szerveket (1992-ig, amikor hemodialízist nem végeztek);
  • a HIV fertőzöttek;
  • A fertőzött betegekkel érintkező orvosi dolgozók.

A hepatitis C RNS meghatározása

Meghatározása a hepatitis C vírus RNS-t, más néven a hepatitis C PCR, ez a tanulmány a biológiai anyagok (vér), amellyel azonosítani tudja a szervezetben az azonnali elérhetőségét genomateriala hepatitis B vírus (bármely adott vírus egy egyetlen részecske RNS).

A fő vizsgálati módszer a PCR vagy a polimeráz láncreakció.

A HCV RNS meghatározására kétféle vérvizsgálat létezik:

Minőségi teszt

A kvalitatív elemzés elvégzése lehetővé teszi annak megállapítását, hogy a vírus a vérben van-e. Minden olyan betegnek, aki C-hepatitis antitestet kapott, ezt a vizsgálatot meg kell vizsgálnia. Eredményeivel 2 válasz érhető el: "jelen van" vagy "hiányzik" a vírus. A pozitív vizsgálati eredmény (talált) alapján meg lehet ítélni egy olyan vírus aktív multiplikációját, amely az egészséges sejteket a májban fertőzi.

A kiváló minõségû PCR-hez végzett tesztet specifikus érzékenységre hangolták, 10-500 NE / ml¹et. Ha a hepatitis vírus 10 μU / ml-nél kisebb koncentrációjú vérben található, akkor a vírus kimutatása lehetetlenné válik. A vírus specifikus tartalma nagyon alacsony értéket mutat azokon a betegeken, akiknél az antivirális terápiát írják elő. Ezért fontos, hogy az orvosi rendszer érzékenysége magas szintű legyen a polimeráz láncreakció minőségének megállapításához és meghatározásához.

Gyakran előfordul, hogy a C-hepatitisz polimeráz láncreakcióját azonnal a megfelelő antitestek megtalálása után végezzük. A vírusellenes terápiás kezelést követő vizsgálatok a 4., 12. és 24. hetet tekintik meg. És egy másik elemzést a PVT befejezése után 24 hét után végzünk. Ezután - évente egyszer.

Kvantitatív teszt

A PCR RNS kvantitatív analízise, ​​amelyet néha vírus terhelésnek is neveznek, meghatározza a vírus koncentrációját (specifikus tartalma) a vérben. Más szóval, a vírusterhelés értetődik egy bizonyos mennyiségű virális RNS, amely jelen lehet egy adott mennyiségű vért (hozott kezelhető 1 ml 1 cm kocka). A vizsgálati eredmények egységei nemzetközi (standard) egységek, osztva egy milliliterrel (IU / ml). A vírus tartalma néha eltérőnek tűnik, attól függ, hogy a laboratórium melyik kutatást végzi. A hepatitis C esetében a mennyiségi meghatározás néha olyan értékeket használ, mint a másolatok / ml.

Meg kell érteni, hogy nincs specifikus függőség a C-hepatitisz súlyosságától a törzs koncentrációjában a vérben.

A "vírus terhelés" ellenőrzése lehetővé teszi a betegség fertőzőképességének meghatározását. Tehát a vírus egy másik vírusának megterhelésének kockázata nő a hepatitisz koncentrációjának növekedésében a vérben. Ezenkívül a vírus magas tartalma csökkenti a kezelés hatását. Ezért a kis vírusterhelés nagyon kedvező tényező a sikeres kezeléshez.

Ezenkívül a hepatitis C teszt és a PCR általi meghatározása nagy szerepet játszik a betegség elleni kezelésben és a kezelés sikerességének meghatározásában. A vizsgálati eredmények alapján tervezik a rehabilitációs tanfolyamot. Például a hepatitis vírus specifikus koncentrációjának lassú csökkenése esetén az antivirális terápia meghosszabbodik, és fordítva.

A modern orvostudományban úgy vélik, hogy a terhelés több mint 800000 ME / ml magas. A 10000000 ME / ml feletti terhelés kritikusnak tekintendő. De a különböző országok szakértői és a mai napig nem ugyanazon a véleményen voltak a vírusterhelés korlátai.

A mennyiségi teszt gyakorisága

Általában a hepatitis mennyiségi elemzését az antivirális terápia előtt és a kezelés befejezése után 3 hónappal a terápia minőségének meghatározása végett végezzük.

Ennek eredményeképpen a mennyiségi vizsgálatot a fent leírt minta eredményeinek mennyiségi értékelésének kell tekinteni. Ennek következtében a "mért tartomány alatt" vagy "a vérben nem észlelhető" megállapítás fog megjelenni.

A kvalitatív vizsgálat érzékenységi paramétere általában alacsonyabb, mint a kvantitatív elemzés érzékenysége. A "hiányzó" átirat jelzi, hogy mindkét fajta elemzés nem találta a vírus RNS-jét. A "mért tartomány alatti" vizsgálattal a kvantitatív elemzés valószínűleg nem találta meg a hepatitis RNS-t, bár ez igazolja egy nagyon kis specifikus vírus jelenlétét.

Hepatitis C és genotípusai

Genotipizálása hepatitis C vírus RNS diagnosztizálni jelenlétében különböző genetikai típusú hepatitis C Science tudja több mint 10 típusú vírus genom, de az orvosi gyakorlatban kellően megkülönböztetni több genotípus, amelyek a legnagyobb részesedése a régióban. Meghatározása genetikai típusa kulcsszerepet játszik kiválasztásában az időzítés a kezelés, ami szükséges, ha figyelembe vesszük, sokféle mellékhatása elleni gyógyszerek hepatitis.

A vírusos hepatitis C kezelésének módszerei

A hepatitisz vírus gyógyítására szolgáló egyetlen hatékony módszer 2 gyógyszer kombinációja: az interferon-alfa és a ribavirin. Különben ezek a gyógyszerek nem annyira hatékonyak. A gyógyszerek ajánlott dózisát és az alkalmazás időzítését csak az orvos írhatja elő, és minden egyes betegnél egyedileg. Ezeknek a gyógyszereknek a kezelése 6-12 hónapig tarthat.

Ma nem találtak olyan gyógyszereket, amelyek garantálják a vírus 100% -os helyreállítását. A megfelelően kiválasztott kezeléssel azonban a betegek gyógyulása elérheti az esetek 90% -át.

RNS hepatitis kvantitatív normával

A hepatitis C vírus képes reprodukálni a vérsejtekben és lymphoproliferatív betegségeket okozni. Több mutációnak köszönhetően a szervezet immunvédelme gyengül, a genotípusok és a vírus altípusai jelennek meg. Egy adott típus helyes és pontos azonosítása az antivirális terápia hatékonyságától függ. A fertőzés veszélye, hogy a betegség tünetmentes. Összesen 15% -a 100 hányingert és hányást, fogyást és lázot tapasztalhat.

A hepatitis C vírus meghatározása

A hepatitis C standard normája a 40-60 nm-es méretű, a lipidek többségénél a májkárosodás az akut vagy krónikus betegség következtében következik be. A Hepatitis C, nevezetesen a Togaviridae család RNS vírusa rendkívül tartós, vérátömlesztéssel vagy nem steril tételekkel, a fürdőszobai kiegészítők nem megfelelő higiéniájával, A kvantitatív elemzés lehetővé teszi a vér vizsgálatát és a fertőzött vírus genetikai szerkezetének azonosítását.

A hepatitis C és annak genotípusai meghatározásához kvantitatív elemzést kell végezni. Az analizátortól függően az RNS vírus előfordulási gyakoriságának három szintje határozható meg.

Az altípusok különböző módosításokat eredményezhetnek, ezért az analizátor sajátossága és érzékenysége száz százalék. A páciens betegségének felderítése mellett meg kell határozni a súlyosság mértékét. Egyes laboratóriumok nem rendelkeznek az RNS vírus definícióival kapcsolatos összes adatról, hamis pozitív válasz lehetséges.

A hepatitis C vizsgálata pontosabb lesz az ilyen mutatók tanulmányozása során:

ALAT, ASAT; alkalikus foszfatáz; LDH.

Figyelembe véve ezen mutatók eredményeit és a szervezet általános állapotát, megjelenik egy eredmény, amely a fertőzés mértékét, a formáját és a hepatitis C sejtek számát mutatja a vérben. Ez hozzájárul a gyógyuláshoz és a vírusellenes terápia hatékonyságához.

A hepatitis C elemzés típusai

A polidizált láncreakció (PCR) a DNS-részecskék mennyiségét mutatja be a páciens elemzésében, és helyesen azonosítja a fertőzés kórokozóját.

A fertőző ágensek megnyilvánulhatnak. Az ilyen fertőző májbetegség, mint a hepatitis C, manapság, gyógyítható, ha időben észlelhető. Ha vírus gyanúja merül fel, PCR elemzést végeznek.

Míg a vírus tünetei hosszú ideig maszkolhatók, a beteg nem érezheti a betegség lefolyását. De az esetek 60-70% -ában történő alapos vizsgálata során a hepatitis C-t detektálják, amely elsődleges elemzés az ELISA, majd a PCR diagnózis. Az elemzést bizonyos időszakokban végezzük, hogy meghatározzuk a betegség állapotát és előírjuk a megfelelő kezelést. Ne tegye nélkül, anélkül, hogy ezeket az eljárásokat, akkor lehet, oltás a hepatitis.

Az elemzés, beleértve a PCR-diagnosztikát, bemutatja a betegség képét, mennyire aktív a vírus a különböző fejlődési időszakokban.

Először minőségi elemzést kapunk, amely csak megerősíti a fertőzésre vonatkozó hipotézist, majd mennyiségi meghatározza a máj terhelését. Az ideális lehetőség a hepatitis C negatív eredménye a beteg genetikai anyagában.

Minőségi és mennyiségi elemzés

Vannak minőségi és kvantitatív elemzések. Az első lényege, hogy meghatározza a fertőzés jelenlétét a vérben. És ez azt jelenti, hogy a vírus egészséges májsejtekre hat. Ha a betegnek a hepatitis C elleni antitestjei vannak, azonnal minőségi vizsgálatot végeznek. Az eredmény, amelyet az eredménynek kell előállítania, "nem észlelhető a vérben". A vírus koncentrációjának meghatározásakor szükség van a diagnosztikai rendszer érzékenységének ismeretére, mivel az elemzést antivirális terápiában részesülő személyek végezhetik. Az analizátor érzékenysége nem lehet kisebb, mint 50 NE / ml.

Vírus kimutatásakor kvantitatív elemzést végzünk, vagyis egy vírus terhelést, amely meghatározza a vírus koncentrációját a vérben és a betegség súlyosságát.

A vírusos RNS, amely bizonyos mennyiségű vérben van, az 1 ml köbméterenkénti 1 ml-es normává. A vírusterhelés számszerűsítése után meg lehet ítélni a fertőzött környezet fertőzésének mértékét. Amint a hepatitis C koncentrációja emelkedik a vérben, a környezetet el kell különíteni.

Fontos, hogy az első szakaszokban a hepatitisz-koncentráció mértékét felismerjék a rehabilitáció ütemének meghatározása érdekében. Ha a Hepatitis C arányt meghaladja több mint 800 ezer IU / ml, akkor túl magasnak tekintjük, és ez egy milliós növekedésnek felel meg. Ha a mennyiségi tartomány kevesebb, mint 400 ezer IU / ml, akkor úgy tekintjük, hogy a többi szennyeződés kevésbé valószínű. Ez a szám világossá teszi, hogy a hepatitis C a szervezetben nagyon kis dózisokban van jelen. Az elemzés nem tudta meghatározni a vírusrészecskék RNS mennyiségének értékét, ezért a diagnózis pontosságát többször is átrendezte.

A kvantitatív elemzés eredményei

A vírusterhelés mennyiségének meghatározása a páciens vérében a fertőzés mértékének meghatározása mások számára.

Elemzés hepatitis C-re

lehetővé teszi az antivirális terápia hatékonyságának, a fertőzőképesség szintjének és a fertőzött szövetek számának értékelését.

Fontos, hogy ne engedjük meg a betegség progresszióját, időben meghozzuk a megelőző intézkedéseket, és előírjuk a PCR diagnosztikán alapuló megfelelő kezelést. Ha az eredmények szerint a vírusterhelés szintje kevesebb, mint 400 ezer IU / ml, akkor a koncentráció minimális lehet, ami a lehetséges teljes helyreállítást jelzi. A pozitív eredmény normája a fertőzés hiánya.

PCR-elemzés eredményei:

A pozitív válasz azt jelenti, hogy fertőzés van a biológiai anyagban. Elemzéssel meghatározhatja a fertőzött sejtek pontos számát. A negatív válasz a fertőzés hiányát jelzi, amelyet alaposan átkutattak a szervezetben.

A hepatitis C mennyiségi módszere pontos és informatív, magas érzékenységű berendezéseken. Az elemzés eredményeinek megfejtése lehetővé teszi, hogy megtudja, van-e fertőzés és annak specifikussága, hogy a fertőzött sejtek legkisebb számát a nagy érzékenységű analizátorokon látják.

Az elemzés hamis pozitív vagy ellentétes eredményei ritkán adódnak, gyakrabban történik immunoassay vizsgálatokban.

Nemrégiben az internetes források keresőprogramjaiban egyre inkább megjelenik a lekérdezés "mennyiségi analízis a hepatitisz dekódolásával".

Valójában a hepatitisz vírus gyakori és veszélyes, a betegség a májra hat. A neve származik a lat. hepatitis - májgyulladás. A fertőzés a vérből vagy szexuális érintkezésből következik be, a felnőttek 25 és 50 év közötti korú betegségben szenvednek.

A betegségnek számos típusa van. A hepatitis C nem rendelkezik élénk kifejeződéssel, de az esetek 40-70% -ában krónikus formában jár, májzsugorodást és rákot okozhat. Ez a betegség megköveteli a kapott adatok pontos diagnózisát és értelmezését, amelyekre a módszerek kidolgozása történik. Az egyik a PCR RNA-analízise a HCV RNS-nek.

A HCV RNS RNS-analízise PCR-rel

Az RNS (ribonukleinsav) egyfajta makromolekula, egy élő sejt egyik összetevője. Az RNS felelős a genetikai információ kódolásáért. A hepatitis C vírus RNS-molekulát tartalmaz, és a mutáció szokása szerint. Hat altípusa van, valamint számos altípus van.

A krónikus betegségben bekövetkező betegség a májfibrózishoz vezet - a kötőszövetek növekednek, a szerv struktúrája fokozatosan megszakad. A fibrosis megfelelő időben történő kezelésre alkalmas, mivel a máj még nem romboló folyamatokon ment keresztül. A cirrhosistól eltérően súlyos, visszafordíthatatlan májbetegség, amelynél a fibrosis kialakulhat anélkül, hogy időben meghozná a szükséges intézkedéseket.

Az a személy, aki gyanúja van a hepatitis vírusnak, meghatározza az ellenanyagokat. Ha nincsenek jelen - a betegség kizárt, jelenlétükben PTSR (polimeraznoj láncreakció) módszerhez folyamodik. A molekuláris biológiában kísérleti jellegű, de vezető szerepet tölt be a fertőző betegségek diagnosztizálására szolgáló módszerek között. Ennek segítségével jelentősen növelhető a minta molekulaszemek koncentrációja. A fertőzés után 10 nappal az RNS már kimutatható a vérben.

Ez a módszer az egyetlen, amely lehetővé teszi a betegség azonosítását a korai szakaszban. Más módon (pl. Biokémiai vérvizsgálat) ezt nem lehet elvégezni, mivel a máj még nem érintett.

A hepatitisz C dekódolással (PCR) végzett analízis megbízható mutatója a vírus jelenlétének egy személy vérében.

Ezt a módszert 1993-ban a biokémikus Carrie Mullis fedezte fel, amelyért Nobel-díjat kapott. A PCR áttörést jelentett az orvostudományban és a tudományban, mivel lehetővé tette a betegek vérének és más biológiai anyagainak fertőzésének gyors és pontos azonosítását. Más szóval, a módszer felgyorsította a fertőző betegségek diagnózisának fejlődését.

A HCV RNS PCR RNS-analízise a következő okok miatt hatásos:

Jó érzékenységgel rendelkezik - még a vírus kis mennyiségét is észleli a vérben; maga a vírus határozza meg, és nem az általa létrehozott melléktermékeket; meghatározza a kórokozó típusát.

A HCV RNS mennyiségi elemzésének különbségei minőségi szempontból

A PCR módszer két alapvető módszert tartalmaz a biológiai anyag tanulmányozására a hepatitis C vírus megkereséséhez:

Ezek a tanulmányok különböző feladatokat látnak el.

A hepatitisz dekódolással végzett kvalitatív analízise megerősíti a vírus jelenlétét, miután a betegségben lévő antitestek már a vérben megtalálhatók. Ha a vizsgálat pozitív eredményt adott, akkor a betegséget találta. Más szóval, egy személy fertőzött. Ha negatív eredményt kap, ez azt jelenti, hogy az illető nem fertőzött, vagy túl kevés a vírus koncentrációja. Ezt a koncentrációt ilyen módon nem detektáljuk.

Ezenkívül a betegség klinikai képe a hepatitis C markerekre és az analízis értelmezésére alapul. A fő markerek az M és G. immunglobulinok (ellenanyagok). A páciens vérében való jelenlétük egy egészséges szervezetre jellemző karaktert nem mutat. Ezen antitestek jelenlétére alapozva a beteget rendszerint diagnosztizálják.

Kvantitatív elemzést írnak elő az antitestek kezdeti kimutatására és szükség esetén a kezelésre.

A vegyes hepatitis (több vírusfertőzés) kimutatására a hepatitisz C mennyiségi elemzését is előírják.

A dekódolással végzett kvantitatív elemzés célja:

a végleges diagnózis tisztázása; a betegség lefolyásának és kezelésének előrejelzéseinek összehangolása - a kezelés meghosszabbítása, csökkentése vagy a taktika megváltozása; a terápia monitorozása.

A nemzetközi ME / ml azt mutatja, hogy az RNS mennyiségét 1 ml vérben vizsgálják. A magas kvantitatív mutató egy másik személy fertőzésének megnövekedett valószínűségét jelzi.

Annak érdekében, hogy az eredmények helyesek legyenek, a vér adományozása előtt kövesse az előírt rendszert:

jöjjön el a laboratóriumba egy üres gyomorban, az utolsó alkalommal, amikor az ételt el lehet vinni 8 órával az eljárás előtt; a vizsgálat előtt két nappal tilos alkohol, zsíros és sült ételek; ultrahang, masszázs, fizioterápia a vizsgálat elvégzése előtt; napközben tilos a gyógyszerek fogadására, ha az egyes gyógyszerek fogadását nem lehet lemondani, ezt a vérmintavétel előtt jelentik; az eljárás előtt ajánlott a fizikai és az idegi terhelés lehető legnagyobb mértékű csökkentése.

Ezeknek a követelményeknek a teljesítése kulcsfontosságú lesz a hepatitis C mennyiségi elemzésének helyes eredményeinek megszerzéséhez.

Kvantitatív elemzés dekódolása

A kvantitatív elemzés indikátorainak befogadása után meg kell határozni a hepatitis C-tesztek eredményeit. Az eredményeket mind ME / ml-ben, mind ml / ml-ben számoljuk. A másolatban feltüntetett eredmények megszerzéséhez számos módszert alkalmazunk.

HCV Monitor (konverziós tényező ME-2,7); LCX HCV RNS (az ME konverziós tényezője 3,8).

Táblázat. A HCV RNS mennyiségi elemzésének PCR dekódolása.

A hepatitis C markerei és a HCV RNS mennyiségi elemzésének eredményei

Nemrégiben az internetes források keresőprogramjaiban egyre inkább megjelenik a lekérdezés "mennyiségi analízis a hepatitisz dekódolásával".

Valójában a hepatitisz vírus gyakori és veszélyes, a betegség a májra hat. A neve származik a lat. hepatitis - májgyulladás. A fertőzés a vérből vagy szexuális érintkezésből következik be, a felnőttek 25 és 50 év közötti korú betegségben szenvednek.

A betegségnek számos típusa van. A hepatitis C nem rendelkezik élénk kifejeződéssel, de az esetek 40-70% -ában krónikus formában jár, májzsugorodást és rákot okozhat. Ez a betegség megköveteli a kapott adatok pontos diagnózisát és értelmezését, amelyekre a módszerek kidolgozása történik. Az egyik a PCR RNA-analízise a HCV RNS-nek.

A HCV RNS RNS-analízise PCR-rel

Az RNS (ribonukleinsav) egyfajta makromolekula, egy élő sejt egyik összetevője. Az RNS felelős a genetikai információ kódolásáért. A hepatitis C vírus RNS-molekulát tartalmaz, és a mutáció szokása szerint. Hat altípusa van, valamint számos altípus van.

A krónikus betegségben bekövetkező betegség a májfibrózishoz vezet - a kötőszövetek növekednek, a szerv struktúrája fokozatosan megszakad. A fibrosis megfelelő időben történő kezelésre alkalmas, mivel a máj még nem romboló folyamatokon ment keresztül. A cirrhosistól eltérően súlyos, visszafordíthatatlan májbetegség, amelynél a fibrosis kialakulhat anélkül, hogy időben meghozná a szükséges intézkedéseket.

Az a személy, aki gyanúja van a hepatitis vírusnak, meghatározza az ellenanyagokat. Ha nincsenek jelen - a betegség kizárt, jelenlétükben PTSR (polimeraznoj láncreakció) módszerhez folyamodik. A molekuláris biológiában kísérleti jellegű, de vezető szerepet tölt be a fertőző betegségek diagnosztizálására szolgáló módszerek között. Ennek segítségével jelentősen növelhető a minta molekulaszemek koncentrációja. A fertőzés után 10 nappal az RNS már kimutatható a vérben.

Ez a módszer az egyetlen, amely lehetővé teszi a betegség azonosítását a korai szakaszban. Más módon (pl. Biokémiai vérvizsgálat) ezt nem lehet elvégezni, mivel a máj még nem érintett.

Ezt a módszert 1993-ban a biokémikus Carrie Mullis fedezte fel, amelyért Nobel-díjat kapott. A PCR áttörést jelentett az orvostudományban és a tudományban, mivel lehetővé tette a betegek vérének és más biológiai anyagainak fertőzésének gyors és pontos azonosítását. Más szóval, a módszer felgyorsította a fertőző betegségek diagnózisának fejlődését.

A HCV RNS PCR RNS-analízise a következő okok miatt hatásos:

  • Jó érzékenységgel rendelkezik - még a vírus kis mennyiségét is észleli a vérben;
  • maga a vírus határozza meg, és nem az általa létrehozott melléktermékeket;
  • meghatározza a kórokozó típusát.

A HCV RNS mennyiségi elemzésének különbségei minőségi szempontból

A PCR módszer két alapvető módszert tartalmaz a biológiai anyag tanulmányozására a hepatitis C vírus megkereséséhez:

Ezek a tanulmányok különböző feladatokat látnak el.

A hepatitisz dekódolással végzett kvalitatív analízise megerősíti a vírus jelenlétét, miután a betegségben lévő antitestek már a vérben megtalálhatók. Ha a vizsgálat pozitív eredményt adott, akkor a betegséget találta. Más szóval, egy személy fertőzött. Ha negatív eredményt kap, ez azt jelenti, hogy az illető nem fertőzött, vagy túl kevés a vírus koncentrációja. Ezt a koncentrációt ilyen módon nem detektáljuk.

Ezenkívül a betegség klinikai képe a hepatitis C markerekre és az analízis értelmezésére alapul. A fő markerek az M és G. immunglobulinok (ellenanyagok). A páciens vérében való jelenlétük egy egészséges szervezetre jellemző karaktert nem mutat. Ezen antitestek jelenlétére alapozva a beteget rendszerint diagnosztizálják.

Kvantitatív elemzést írnak elő az antitestek kezdeti kimutatására és szükség esetén a kezelésre.

A vegyes hepatitis (több vírusfertőzés) kimutatására a hepatitisz C mennyiségi elemzését is előírják.

A dekódolással végzett kvantitatív elemzés célja:

  • a végleges diagnózis tisztázása;
  • a betegség lefolyásának és kezelésének előrejelzéseinek összehangolása - a kezelés meghosszabbítása, csökkentése vagy a taktika megváltozása;
  • a terápia monitorozása.

Annak érdekében, hogy az eredmények helyesek legyenek, a vér adományozása előtt kövesse az előírt rendszert:

  • jöjjön el a laboratóriumba egy üres gyomorban, az utolsó alkalommal, amikor az ételt el lehet vinni 8 órával az eljárás előtt;
  • a vizsgálat előtt két nappal tilos alkohol, zsíros és sült ételek;
  • ultrahang, masszázs, fizioterápia a vizsgálat elvégzése előtt;
  • napközben tilos a gyógyszerek fogadására, ha az egyes gyógyszerek fogadását nem lehet lemondani, ezt a vérmintavétel előtt jelentik;
  • az eljárás előtt ajánlott a fizikai és az idegi terhelés lehető legnagyobb mértékű csökkentése.

Ezeknek a követelményeknek a teljesítése kulcsfontosságú lesz a hepatitis C mennyiségi elemzésének helyes eredményeinek megszerzéséhez.

Kvantitatív elemzés dekódolása

A kvantitatív elemzés indikátorainak befogadása után meg kell határozni a hepatitis C-tesztek eredményeit. Az eredményeket mind ME / ml-ben, mind ml / ml-ben számoljuk. A másolatban feltüntetett eredmények megszerzéséhez számos módszert alkalmazunk.

  • HCV Monitor (konverziós tényező ME-2,7);
  • LCX HCV RNS (az ME konverziós tényezője 3,8).

Táblázat. A HCV RNS mennyiségi elemzésének PCR dekódolása.

Medinfo.club

Portál a májról

A HCV mennyiségi elemzése és értelmezése

A hepatitis C olyan betegség, amely egészséges májsejtekben reprodukálható és proliferatív betegségeket vált ki. A modern világban, amikor a hepatitis vírus egy bizonyos mutáción ment keresztül, az emberi immunrendszer veszélyben van, a fertőzéshez képest elhanyagolható. Érdemes megjegyezni, hogy nem minden beteg lesz a betegség első jele, különösen a korai szakaszban.

A hepatitis C vírus RNS analízise kvantitatív vizsgálat, amelynek normája mérsékelt mennyiségű vírussejt jelenléte a páciens vérében. A statisztikák szerint a betegek mintegy 31% -a teljesen meggyógyul e betegségtől, ha ez a kezdeti szakaszban van.

Az orvosi gyakorlatban, az orvosok azt mondják, hogy a 4 millió fertőzött tünetek és az első jelei nem jelennek meg, bár a fejlettebb formáit hepatitis vezethet cirrhosis vagy rák.

Jelenleg a "vértranszfúzió" eljárás alatt ezt a vért ellenőrizni kell a hepatitis C vírus jelenlétére, mivel ez a betegség donorvérrel történik.

A mai napig a világ már közel 100% -os hatékonysággal fejlesztette ki a hepatitis C gyógyszereit, a modern gyógyszeripar olyan gyógyszereket hozott létre, amelyeknek gyakorlatilag nincs mellékhatása. Sok beteg kapja meg az első eredményeket a tünetek enyhítésében és a vírusterhelés csökkentésében egy héten át tartó bevétel után. További információ az indiai gyártásból származó hepatitis készítményekről külön cikkünkben.

A cégeknek a hepatitis C indiai orvosi gyógyszer szállításához "Sofosbuvir Express" bizonyult. Ez a cég sikeresen segíti az embereket abban, hogy több mint 2 éven át gyógyuljanak a betegségből. Az elégedett páciensek megjegyzései és videói itt láthatók. Több mint 4000 embert jelentenek, akik a vásárolt gyógyszerek miatt gyógyultak. Ne hosszabbítsa meg egészségét egy hosszú dobozban, menjen a www.sofosbuvir-express.com oldalra, vagy hívja fel a számot 8-800-200-59-21

A PCR-vizsgálatok típusai

A PCR (polimeráz láncreakció) a legmodernebb és leghatékonyabb módszer a vírus génjének és képességének tanulmányozására. Az ilyen diagnosztika számos betegséget hozhat létre, és meghatározhatja további mutációját a beteg testében.

Az elemzést vért veszik, amelyet speciális reagensekbe helyeznek, amelyben a sejtek klónozása megtörténik.

Két sejtet állítunk elő egy sejtből, és így tovább. Ennek eredményeképpen több száz DNS jelenik meg, amely lehetővé teszi a kórokozó diagnosztizálását és a vírus korai szakaszában történő azonosítását.

Ezért a PCR többféleképpen oszlik meg:

  • minőségi elemzés - felismeri a fertőzés génjeit a vérben. Ha egy beteg minőségi elemzésre került megerősítésre, kvantitatív elemzést kell végezni a fertőzés mértékének megállapítása érdekében. Ennek a diagnosztikanak köszönhetően a szakemberek "észleltek / nem észleltek". "Felfedezve" - ​​azt jelzi, hogy a betegség jelen van a szervezetben, és az RNS már kimutatható. "Nem észlelt" azt jelzi, hogy nincs a vírusgén a mintában, azaz nincs hepatitis RNS. Az orvosok azonban 10 nap múlva egy második vizsgálatot javasolnak.
  • mennyiségi elemzés - meghatározza a fertőzés genetikai anyagának mennyiségét a vérben. Az ilyen diagnosztika segít a betegség súlyosságának és az egész klinikai előzménynek a megállapításában. Az ilyen elemzés eredményeképpen csak "Pozitív / Negatív / Érvénytelen" írható. "Pozitív" - ábrázolja a fertőző terhelést. Orvos eljárás a betegség diagnosztizálására kijelölt, hogy meghatározzuk a kezelés hatékonyságát a 4, 12, 16 és 24 hetes bolezni.Esli vírus komponens tartományban 8h10t NE / ml, a kezelés hatékony, ha a fenti paraméterek - nincs. "Negatív" - a fertőzés génje nem található. "Érvénytelen" - ez akkor történik, ha a vírus génje minőségi, de nem mutatható ki mennyiségi elemzésben. Hasonló is van, ha a fertőzés a szint alatt van.

A kvalitatív és kvantitatív elemzések különbségei

A hepatitis C vírust - elsősorban kvantitatív elemzéssel diagnosztizálják, amelynek dekódolása a betegség helyes értelmezéséhez szükséges. De ennek ellenére, a minőségi és mennyiségi diagnosztikai eljárás megvan a különbség, mint a szerepe és feladatai a kutatás - kvalitatív - megerősíti a fertőzések felfedezése után a vírus antitestek és mennyiségi - másodlagos eljárás cáfoló vagy megerősítő betegség annak érdekében, hogy a helyes, és csak diagnózis.

A kvantitatív kutatás magyarázata

A diagnózis után csak az orvosok képesek értelmezni az eredményt, mivel az ábrázolás nem számokban, hanem szavakban történik. A statisztikák szerint a kvantitatív PCR a legérzékenyebb elemzés. Ahhoz, hogy megértsük, van-e vírus a szervezetben, meg kell érteni és tudni kell, hogy a hepatitis C mennyiségi elemzését a fertőzés digitális jelzésével megfejtik:

HCV, RNS mennyiségileg [real-time PCR]

Tanulmány azonosítani a kórokozó ágens a hepatitis C (HCV), amelyben a módszer a valós idejű polimeráz láncreakció (RT-PCR) határozzuk meg a jelenléte a genetikai anyag (RNS) vírus és annak térfogatát (a vírusterhelés) a vérmintában.

A HCV RNS a koncentráció lineáris tartományának alsó határánál kisebb koncentrációban detektálható. A lineáris koncentrációtartomány olyan tartomány, amelyben a kórokozó példányainak számát pontosan kiszámíthatjuk. Ehhez az elemzéshez a detektálási erősítő által meghatározott HCV DNS-koncentrációk lineáris tartományát 7,5 × 10 2 - 1,0 × 10 8 kópia / ml minta.

Orosz szinonimák

Hepatitis C vírus (HCV), az RNS mennyiségi meghatározása.

Szinonimák angol

Hepatitis C vírus RNS, mennyiségi, valós idejű PCR, vér, HCV vírus terhelés, Hepatitis C vírus RNS Quant.

A kutatás módszere

Polimeráz láncreakció reverz transzkripcióval valós időben.

Milyen bioméreteket lehet felhasználni a kutatáshoz?

Hogyan kell megfelelően felkészülni a tanulmányra?

Ne dohányozzon 30 percig, mielőtt vért ad.

Általános információ a tanulmányról

A hepatitis C vírus (HCV) az Flaviviridae családból származó RNS-tartalmú vírus, amely hatással van a májra. Ez képes szaporodni a vérsejtek (neutrofilek, monociták és makrofágok, B-limfociták) és indukálják krioglobulinémia, Sjögren-féle betegség, és a B-sejt limfoproliferatív betegség. A HCV a magas mutációs aktivitás miatt képes elkerülni az immunrendszer védőmechanizmusainak hatásait. A vírus 6 genotípusa és számos altípusa van, amelyek különböző értékeket mutatnak a betegség kialakulásának prognózisa és az antivirális terápia hatékonysága szempontjából.

A fertőzés átvitelének fő módja a vér (vér és plazma elemek, donor szervek, nem steril fecskendők, tűk, tetováló eszközök, piercingek) transzfúziójára való készítmények. Valószínűleg fertőzés a szexuális együttélés és a gyermek az anyától a szülés alatt, de ez ritkán történik.

Az akut vírusos hepatitiset általában tünetmentes tünetek jellemzik, és a legtöbb esetben nem diagnosztizálják. A fertőzöttek mindössze 15% -a akut betegségben van - émelygés, testhervadás, étvágytalanság és fogyás (ritkán kísérteties sárgaság). A 60-85% -a fertőzött alakul ki krónikus fertőzés, amely 15-szer magasabb, mint a frekvencia a krónikus hepatitis B Krónikus hepatitis C előfordul a megfigyelt máj enzimek és gyenge megnyilvánulása a tünetek. 20-30% -ánál a betegség vezet a májzsugorodás, növelve a májelégtelenség és a hepatocellularis carcinoma.

A HCV RNS kimutatása a vírus proliferációját jelzi a testben, és a betegség diagnosztizálására szolgáló módszer. A genetikai anyag a vírus kimutatható PCR-rel 10-12 nappal a fertőzés után - ebben az időszakban, a specifikus antitestekkel, amelyek előállítása több hónappal a fertőzés után, és nem májfunkció belül referencia tartomány.

PCR-rel a vírus RNS minőségi vagy mennyiségi mutatója. A minőségi módszer miatt megerősítették a hepatitis C vírus jelenlétét és aktív reprodukcióját. A vírusterhelés mennyiségi meghatározása a HCV genotípus figyelembevételével lehetővé teszi a jelenlegi terápia szabályozását és a betegség lefolyásának előrejelzését.

A kezelés hatékonyságát az RNS mennyiségének becslése jelenti a kezelés előtt és alatt. A vér vírusterhelése általában a sikeres kezelés első három hónapjában többször csökken. Hatékony terápiával a viremia az első 4-12 hetes kezelés során két nagyságrenddel csökken, és a terápia befejezése után a vírus genetikai anyagát a vérben nem észlelik. A viremia csökkenésének hiánya a kezelés kezdetétől számított 12 héttel azt jelzi, hogy nem hatékony. Ajánlatos az elemzést a terápia megkezdése előtt elvégezni, a kezelés 4., 12. és 24. hetében, valamint a tanfolyam vége után 24 héttel. A terápia időtartama és a hepatitis C vírus RNS mennyiségi meghatározásának gyakorisága függ a vírus genotípusától és a májkárosodás mértékétől.

Mi a felhasznált kutatás?

  • A "vírusos hepatitis C" diagnosztizálására.
  • A vírusos hepatitis C folyamatának előrejelzése.
  • A vírusellenes terápia nyomon követése és a további kezelési taktika kérdése.

Mikor rendelik a tanulmányt?

  • A hepatitis C vírus RNS kimutatásával.
  • Akut és krónikus vírusos hepatitis C-ben.
  • Vegyes hepatitis.
  • A vírusellenes terápia megtervezésekor, alatt és után.

Mit jelentenek az eredmények?

  • Nem találtuk - hepatitis C vírus RNS-t nem detektáltunk, vagy az érték a módszer érzékenységi határánál (200 kópia / ml = 400 NE / ml).
  • másolat / ml (IU / ml) - hepatitis C vírus RNS detektálódott. Alacsony viremia (a betegség lefolyásának legkedvezőbb prognózisa és a terápia hatékonysága).
  • > 2 * 10 ^ 6 kópia / ml (> 4 * 10 ^ 6 NE / ml) - A hepatitis C vírus RNS-je kimutatható. Magas viremia.
  • > 1,0 * 10 ^ 8 kópia / ml (> 2 * 10 ^ 8 IU / ml) - Hepatitis C vírus RNS-t detektáltunk a lineáris koncentrációtartomány feletti koncentrációkban.

Lineáris tartomány HCV RNS koncentráció C határozzuk kimutatására thermocycler, 7,5 × 10 2 - 1,0 x 10 8 kópia / ml (1,5 x 10 ~ 3 - 2 db 10 8 NE / ml).

Mi befolyásolja az eredményt?

Nem megbízható eredmény érhető el a következőkkel:

  • bioméret szennyezése;
  • jelenléte az inhibitorok mintájában - a PCR különböző összetevőire ható kémiai és fehérjeanyagok;
  • jelenlétét a heparin vérében.

Fontos megjegyzések

  • A vírusterhelés szintje nem jelzi a májkárosodás mértékét és a betegség súlyosságát. Az értékeléshez biokémiai mutatókat és biopsziás anyagokat kell vizsgálni.
  • A kezelés megtervezése során nagyon fontos meghatározni a hepatitis C vírus genotípusát.

Ajánlott

Ki jelölte ki a tanulmányt?

irodalom

  • Vozianova Zh.I. Fertőző és parazita betegségek: 3 t-ben - K.: Health, 2000. - T.1.: 600-690.
  • Kishkun AA A klinikai gyakorlatban alkalmazott immunológiai és szerológiai vizsgálatok. - M.: MIA LLC, 2006. - 471-476. O.
  • Harrison a belgyógyászat alapelvei. 16. kiadás NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
  • Lerat H, Rumin S, Habersetzer F és mások. In vivo tropizmus a hepatitis C vírus genom szekvenciáiban hematopoetikus sejtekben: a vírusterhelés, a virális genotípus és a sejtfenotípus hatása. Blood. 1998. május 15., 91 (10): 3841-9. PID: 9573022.
  • Revie D, Salahuddin SZ. A hepatitis C vírus replikáció szempontjából fontos emberi sejtek in vivo és in vitro: régi állítások és aktuális bizonyítékok. Virol J. 2011, 11. július; 8: 346. doi: 10.1186 / 1743-422X-8-346. PMID: 21745397.

Hepatitis C vírus (hepatitis C vírus), RNS mennyiségi meghatározása (ultrahangos módszer)

Legalább 3 órával az utolsó étkezés után. Gáz nélkül iszolhat vizet.

A hepatitis C-t RNS-tartalmú vírus okozza. A fertőzés főleg akkor fordul elő, amikor a vírus közvetlenül belép a vérbe (orvosi és nem orvosi manipulációk). A fertőzés egyik fő kockázati tényezője a kábítószer-használat. Az inkubációs idő átlagosan 6-8 hét. Az akut periódus a legtöbb esetben tünetmentes. A krónikus hepatitis C legsúlyosabb kimenetele a májcirrhosis és a májsejtes karcinóma.

A vírus RNS-ét a vérplazmában átlagosan a fertőzést követő 10. napon észlelték, és az akut hepatitis C első diagnosztikus markere.

030.211 új szolgáltatás - egy egyedülálló kutatási magas analitikai érzékenysége (10 NE / ml) a meghatározása HCV RNS kvantitatív formában. A tanulmány a terápia hatékonyságának monitorozására szolgál. A módszer nagyfokú érzékenysége a maximális automatizált kutatásnak köszönhető.

  • Összhangban a szövetségi törvény 21.11.2011 számú 323-FZ „alapján a közegészség védelme az Orosz Föderáció” PCR vizsgálat egyik módszer az átfogó vizsgálat a beteg alapján, amely az orvos megállapítja a diagnózist, és meghatározza a beteg kezelése.
  • HCV RNS mennyiségi ultraszenzitív elvégzett vizsgálat során a 1 ml vérplazmát készletek segítségével "AmpliSens® HCV-monitor-FL" és "AmpliSens® HCV / HBV / HIV-FL". Analitikai érzékenység: 10 NE / ml, lineáris mérési tartomány: 30-1 * 10 ^ 8. A vírus koncentrációját a válasz eredményeképpen 30 IU / ml vagy annál magasabb értéken jelezzük.

Felhívjuk figyelmét, hogy az értelmezése a kutatási eredmények, a létesítmény a diagnózis és a kezelés előírása szerint a szövetségi törvény a szövetségi törvény № 323 „A védelem a polgárok egészségének alapjait az Orosz Föderáció” kell tenni egy orvos.

A vizsgálat céljára felhasznált javallatok:

  • a vírusellenes terápia hatékonyságának monitorozása.

A hepatitis C vírus diagnózisa

A hepatitis C vírus (HCV) egy RNS-tartalmú vírus a Flaviviridae családból. Ez a fertőzés képes reprodukálni a vérsejtekben (monociták, neutrofilek, B-limfociták és makrofágok), valamint magának a máj sejtjeinek - a hepatociták - károsodását. A magas szintű mutációs aktivitás miatt az ilyen típusú hepatitis képes elkerülni az emberi immunrendszer hatását.

Jelenleg 11 genotípus és egy ilyen vírus altípusai vannak, amelyek májkárosodásban különböznek, és befolyásolják a májgyulladás kezelésének időzítését. Az ilyen sokféle hepatitis C különböző vírusellenes terápiás módszereket igényel. Például az első és a negyedik genotípus hepatitisét 48 hétig kell kezelni, és a második és harmadik faj vírusainak kezelésére 24 hétig tarthat.

Miután a hepatitis C gyors tesztje pozitív eredményt hozott, PCR-analízist végeztünk a vírus RNS-jének vérmintákban történő azonosítására.

PCR diagnosztika

A polimeráz láncreakció (PCR) egy kísérleti módszer a vírusok kimutatására. A hepatitis C-re vonatkozó ilyen elemzés lehetővé teszi a DNS vagy az RNS vírus egyes fragmenseinek koncentrációjának jelentős emelkedését a benyújtott mintákban. Ez lehetővé teszi számukra a számok felismerését és számozását.

Ezt a hepatitis C-tesztet a következő eljárás szerint végezzük:

  1. Egy vérmintát (genetikai anyagot), amely képes a kívánt hepatitisz gént tartalmazni, be kell vezetni egy kémcsőbe. Helyére speciális anyagokat - primereket tartalmaznak, a rövid távú részek a kívánt génből, amelyek kémiai úton szintetizálódnak. Ebben a tartályban DNS vagy RNS polimeráz is hozzá van adva, képes nukleinsav láncokat létrehozni, amelyek teljesen azonosak az eredetivel. A kapott kompozícióhoz olyan szabad nukleotidokat állítunk elő, amelyek a DNS és az RNS speciális építőanyaga, amelyek közül az egyik kis radioaktív foszforrészecskéket tartalmaz.
  2. A kapott elegyet először 95 ° C-ra melegítjük, ami miatt normál állapotban átlapoltunk, ezért mindkét DNS-hélix gyengül.
  3. Az elemzés folytatásához a hatóanyag hűl, ezen a ponton a primerek kapcsolódnak a hepatitisz-vírus genoma kívánt régiójához, és nem engedik meg a DNS-t kettős hélix formájában. Amikor az elegy hűl, a polimeráz egyetlen nukleotidszálat keres. Ennek az enzimnek a rögzítése során a DNS-szalag mentén csúszik (mint egy köteg egy kötél), és kettős spirállal nem képes "dolgozni", ebből a célból a keveréket felmelegítik.
  4. Az elemzés meghosszabbítása érdekében újrahevítjük, ami ismét a nukleotidláncok elválasztásához vezet. A mintában lévő ilyen PCR-ciklusok végrehajtása során a hepatitisz gének száma a geometriai arányban nő, és a fennmaradó genetikai anyagokat csak lineáris rendszerességgel állítják elő.
  5. A vizsgálat befejezéséhez az oldatot megmaradt nukleotidrészecskékből tisztítják. Ezek elektroforézissel vannak elválasztva, a molekuláris DNS-láncok molekulasúly paraméterekkel való elválasztásával. A hepatitis PCR segítségével végzett ilyen vizsgálatok lehetővé teszik annak megállapítását, hogy a vírus kívánt génjei vannak-e a vizsgálati mintában, vagy sem.

Ennek a vizsgálatnak az előnye a PCR reakció nagyon nagy érzékenységi küszöbe. Az ilyen technika a diagnosztika elvégzéséhez ideális esetben csak egyetlen genomot igényel a vírus számára a teljes mintához.

Ezenkívül az ilyen PCR teljesen specifikus. Mindegyik génben egyedülálló nukleotidszekvenciát találunk, amely ujjlenyomatokhoz hasonlóan sehol sem megismételhető. Ehhez a hepatitis C analízishez a primereket olyan módon szintetizálják, hogy teljesen megfeleljenek a kívánt gének azon egyedi részének, amelyeknek nincs más szekvenciája.

Ez a technika lehetővé teszi a hepatitis c elemzését és meghatározását is, ami segít meghatározni a végleges diagnózist.

Egy ilyen laboratóriumi analízis lehetővé teszi, hogy a HCV RNS jelenlétét vagy hiányát, illetve vérmintákon kívüli egyéb típusokat ne csak a betegeknél szerezzen be. A radioaktív sugárzás paraméterének meghatározása mellett lehetőség nyílik arra is, hogy feltárják, mennyit talált a vizsgált mintában a kívánt genetikai anyag. Ez lehetővé teszi számunkra, hogy meghatározzuk az úgynevezett vírus terhelés paramétereit - a hepatitis RNS részecskék koncentrációját egy bizonyos térfogatban.

Minõségi PCR analízis

Ez az elemzés lehetővé teszi a hepatitis vírus vérmintákban való jelenlétének meghatározását. Minden embernek meg kell történnie, akiknél kimutatták, hogy ellenanyagok vannak a hepatitis ellen.

Egy ilyen vizsgálat eredményeképpen csak két érték lehet:

  • „Észlelt”. Az ilyen pozitív vizsgálati eredményeket a következőképpen értelmezik: a vizsgált mintában a hepatitis vírus RNS fragmenseit találták biológiai anyagból. Ebből következik, hogy a beteg vírussal fertőződött. Ez azt jelezheti, hogy a hepatitis okozója a szervezetben megszaporodik, és új sejteket fertőz meg, megsemmisítve a májat.
  • "Nem észlelt". Ez az eredmény azt jelzi, hogy a mintában, amelyet laboratóriumban elemzett, találtak töredékei RNS, amely specifikus a hepatitis C-vírus is van lehetőség, hogy az RNS koncentrációját a vírus-kórokozó a mintában olyan kicsi volt, hogy a teszt nem volt képes azonosítani. Ilyen esetekben azt mondják, hogy a koncentrációszint a vizsgálati érzékenységi küszöb alatt van.

Az ilyen vizsgálat lehet hamis-pozitív vagy hamis-negatív is, mivel a bioméret szennyezõdése vagy a vizsgálathoz szükséges kémiai összetevõkkel reagáló speciális anyagok mintáinak jelenléte következik be.

Hangsúlyozni kell, hogy a hepatitis C akut fázisaiban a PCR módszerrel végzett minőségi vizsgálat RNS-t csak 1-2 hét elteltével tudja észlelni a szervezet fertőzésének pillanatától számítva. Ez azt jelenti, hogy a betegség jóval a külső tünetek megjelenése előtt vagy a hepatitis elleni antitest megjelenése előtt azonosítható.

A vérvételt (a vénából) előnyösen üres gyomoron végezzük.

PCR mennyiségi elemzése

Az elemzés segítségével meghatározzuk a hepatitisz-vírus koncentrációjának szintjét a páciensben (vírus terhelés). Az ilyen vizsgálatot be kell nyújtani annak érdekében, hogy becsülhető legyen a vírus RNS-értéke egy bizonyos térfogatban.

A hepatitis c tesztek elemzésének vizsgálata a következő eredményekkel járhat:

  • Kvantitatív mutató (számokban)

A vírus koncentrációját (szám) számszerűen adjuk meg. Ehhez különféle egységeket használunk: vagy ME / ml (nemzetközi egység milliliterenként) vagy másolat / ml (a vírus RNS példányainak száma milliliterben). Átlagosan 1 NE / ml 4 kópia / ml-nek felel meg, mivel a különböző vizsgálati rendszerek eltérő konverziós faktorokkal rendelkeznek az ilyen egységek esetében.

Az alacsony virális terhelés ebben a vizsgálatban kevesebb, mint 400 000 NE / ml, és a magas 8000000 IU / ml.

Ez a mennyiségi értékelés lehetővé teszi a betegség fertőzőképességének ("fertőzőképességének") meghatározását. Minél inkább ez az analízis mutatója, annál nagyobb a kórokozó más emberekkel való átadása (szexuális érintkezéssel vagy függőleges úton).

Ez az ítélet azt jelenti, hogy a mennyiségi módszer nem képes kimutatni a hepatitis RNS-t, de maga a vírus jelen van a szervezetben, csak nagyon alacsony koncentrációban. Ezt megerősítették a PCR további minőségi analízisével, pozitív eredménye pedig a hepatitis jelenlétére utal.

  • Eredmény "Nem észlelt"

    Az elemzés pozitív értelmezése szerint a vérminta mennyiségi vizsgálata nem tudott kimutatni a hepatitis C vírus specifikus RNS részecskéit.

  • Kvantitatív PCR-analízis végzett különböző szakaszaiban az antivirális terápia (1., 4., 12. és 24. hét) jelzi a kezelés hatékonyságát, és hogy a szükséges korrekciókat.

    Az elemzés sajátosságai

    Ezt a vizsgálatot be kell nyújtani a hepatitis C különböző genotípusainak meghatározására. Jelenleg 11 kórokozó genotípusa ismert és számos altípus. Hazánkban az 1., 2. és 3. fajok hepatitis C genotípusai gyakoriak. A laboratóriumokban képes észlelni a különböző altípusok ezen fajok: 1a, 1b, 2a, 2b, vagy 3, 4, 5, 6-genotípusok meghatározására különböző módosításokat altípusok. Mindezen hepatitis esetében a detektálás sajátossága 100%.

    A genotípus módosításának tisztázása lehetővé teszi a megfelelő kezelés kiválasztását. Egy adott típusú genotípus jelenléte a betegben nem jelenti azt, hogy a betegség könnyebbé vagy nehezebbé válik, csak a hepatitis vírus fajtái, és nem többé.

    Azokban az esetekben, amikor a laboratórium nem tudja izolálni a vírus genotípusát, eredményt adhat ki: "Nem írják be. Genotípusokat vizsgáltunk: ilyen és ilyen (például 1a, 2b, 3av). Ez az átirat azt jelzi, hogy ebben a laboratóriumban nem álltak rendelkezésre megfelelő reagensek, amelyek meghatározhatják a hepatitis vírus genotípusát. A vizsgálatban a listában szereplő vírusokat ellenőrizték, de az RNS-mintákkal való megfelelésüket nem észlelték.

    A végleges diagnózis érdekében csak egyfajta elemzés elégtelen. Mindegyik teszt hamis pozitív eredményt adhat. Komplex vizsgálatot végeznek a hepatitis pontos típusának és a fertőzésnek a test fertőzésével való meghatározására. Ugyanakkor a májbiopszia és az enzimek tesztelése készül: ALAT, ASAT, valamint alkalikus foszfatáz és LDH. A bilirubin teszt és protrombin index analízis is elvégezhető.

    Csak a tesztek és a laboratóriumi vizsgálatok egy komplexe, a beteg állapotának általános elemzése segít meghatározni a hepatitis jelenlétét a szervezetben, annak alakját és súlyosságát is. Alapján az orvos meghatározhatja a további kezelést és lehetséges prognózisát a beteg számára.


    Kapcsolódó Cikkek Hepatitis